2019-2020學(xué)年高中生物 第一部分 微生物的利用 實(shí)驗(yàn)2 分離以尿素為氮源的微生物知能演練輕巧奪冠 浙科版選修1

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1、實(shí)驗(yàn)2 分離以尿素為氮源的微生物 一、選擇題 土壤中有些微生物能利用尿素是因?yàn)?　　) A．其體內(nèi)含有脲酶 B．其體內(nèi)含有氨(NH3)酶 C．它能將CO2合成為有機(jī)物 D．它們不需要氮源 解析：選A。能利用尿素的微生物就是因?yàn)轶w內(nèi)含有脲酶，可降解尿素為其生長(zhǎng)繁殖提供氮源。 從土壤中分離以尿素為氮源的微生物時(shí)，所用的LB培養(yǎng)基由以下哪一組成分構(gòu)成(　　) A．蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂 B．蛋白胨、NaCl、水、瓊脂糖 C．蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂糖 D．葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂 解析：選C。LB培養(yǎng)基必須含五大營(yíng)養(yǎng)元素：碳源

2、、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子。由于是固體培養(yǎng)基還必須有凝固劑，為與尿素培養(yǎng)基作對(duì)比，所用凝固劑不能帶來(lái)氮源干擾，因此只能選擇相對(duì)更為純凈的瓊脂糖了。 用10－4稀釋度的細(xì)菌懸液分別涂布于LB、尿素培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后的結(jié)果，以下敘述正確的是(　　) A．LB培養(yǎng)基上未出現(xiàn)任何菌落 B．尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都多于LB培養(yǎng)基上的 C．尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都少于LB培養(yǎng)基上的 D．尿素培養(yǎng)基上是不可能出現(xiàn)菌落的 解析：選C。LB培養(yǎng)基為完全培養(yǎng)基，會(huì)出現(xiàn)大量菌落。尿素培養(yǎng)基上只有能以尿素做氮源的微生物能存活，因此其上的菌落數(shù)量和種類都將會(huì)減少。尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落就

3、是能利用尿素的那些微生物菌落。 在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有(　　) ①由于土樣不同　②由于培養(yǎng)基污染?、塾捎诓僮魇д`　④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照 A．①②③　　　　　 B．②③④ C．①③④ D．①②④ 解析：選A。該同學(xué)可能取的土樣不同，可取其他同學(xué)的土樣進(jìn)行培養(yǎng)，同時(shí)將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng)，如果結(jié)果不是大約50個(gè)菌落，可能是培養(yǎng)基污染或操作有誤；如果結(jié)果和其他同學(xué)數(shù)據(jù)相同，且未接種的培養(yǎng)基沒(méi)有菌落生成，說(shuō)明是土樣不同。 能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分別是(　

4、　) A．二氧化碳和氮?dú)?B．葡萄糖和氨 C．二氧化碳和尿素 D．葡萄糖和尿素 解析：選D。能合成脲酶的微生物主要是分解尿素的細(xì)菌，其碳源為葡萄糖，氮源為尿素。 某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測(cè)得平板上菌落數(shù)的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1 mL)(　　) A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.4 解析：選B。每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M＝(234÷0.1)×106＝2.34×109。 可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是(　　) A．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 B．以尿素為唯一氮

5、源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑 C．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑 D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑 解析：選A。酚紅指示劑是靈敏性高的堿性指示劑，分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，使pH升高，使酚紅指示劑變紅。 進(jìn)行系列稀釋時(shí)，按怎樣的順序進(jìn)行(　　) A．稀釋倍數(shù)遞增 B．稀釋倍數(shù)遞減 C．不論稀釋度大小 D．A、B兩者都可 解析：選A。將菌液進(jìn)行系列梯度稀釋，在稀釋倍數(shù)足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。 有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是(　　) A．將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上 B．使打開(kāi)的錐形

6、瓶瓶口迅速通過(guò)火焰 C．將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上 D．等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置 解析：選C。在倒平板時(shí)，左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，不能將培養(yǎng)皿完全打開(kāi)，以免雜菌污染。 將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是(　　) A．對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用 B．對(duì)比分析培養(yǎng)基上是否生有雜菌 C．沒(méi)必要放入未接種的培養(yǎng)基 D．為了下次接種時(shí)再使用 解析：選B。將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37 ℃恒溫箱的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基是否被雜菌污染，即制備是否合格。 如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正

7、確的是(　　) A．3號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為103倍 B．4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰好為5號(hào)試管的10倍 C．5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個(gè) D．該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高 答案：C 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法是(　　) ①涂布平板法?、谥亓糠ā、壑苯佑?jì)數(shù)法?、鼙葷岱ā、萆碇笜?biāo)法?、弈み^(guò)濾法 A．①②③⑥ B．③④⑤⑥ C．②③④⑥ D．①③④⑥ 解析：選D。微生物計(jì)數(shù)法主要有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、平板菌落計(jì)數(shù)法、光電比濁法、最大可能數(shù)(MPN)法、膜過(guò)濾法等。 分離以尿素為氮源的細(xì)菌和分離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基

8、，其成分(　　) A．前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖 B．兩者都含有瓊脂 C．前者含有瓊脂糖，后者不含瓊脂糖但含瓊脂 D．兩者都不含瓊脂和瓊脂糖 解析：選C。瓊脂和瓊脂糖都起凝固劑的作用，用于制備固體培養(yǎng)基。但瓊脂為混合物，含少量含氮化合物，瓊脂加以純化，去除含氮化合物就成為瓊脂糖。分離大腸桿菌和含脲酶的細(xì)菌用的都是固體培養(yǎng)基，因此都必須含有凝固劑：瓊脂或瓊脂糖。但是，由于瓊脂為混合物，其中含一定量的含氮化合物，因此不能用于分離以尿素為氮源的細(xì)菌。瓊脂糖為瓊脂的純化物，不含含氮化合物，可用于分離以尿素為氮源的細(xì)菌。 下列說(shuō)法不正確的是(　　) A．科學(xué)家從70～80 ℃熱泉中分

9、離得到耐高溫的TaqDNA聚合酶 B．統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為M1、M2、M3、M4、M5，以M3作為該樣品菌落數(shù)的估計(jì)值 C．設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 D．同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多 解析：選B。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)應(yīng)注意選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，且至少涂布3個(gè)平板作為重復(fù)組，重復(fù)組的結(jié)果不能相差太多，然后取平均值進(jìn)行計(jì)算。 通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入

10、10%的酚類可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出(　　) A．大腸桿菌 B．霉菌 C．放線菌 D．固氮細(xì)菌 解析：選A。缺乏氮源的培養(yǎng)基可以選擇出固氮細(xì)菌；在培養(yǎng)基中加入青霉素，可以選擇出霉菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚類可以選擇出放線菌。 在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開(kāi)，對(duì)培養(yǎng)基的要求是(　　) ①加抗生素?、诓患涌股亍、奂拥亍、懿患拥亍、菁悠咸烟恰、薏患悠咸烟恰、?7 ℃恒溫箱中培養(yǎng)?、?8～30 ℃溫度下培養(yǎng) A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦

11、解析：選C。自生固氮菌生長(zhǎng)繁殖的適宜溫度是28～30 ℃，能夠?qū)o(wú)機(jī)氮源合成有機(jī)氮，不需要加氮源。細(xì)菌對(duì)抗生素敏感。固氮菌是異養(yǎng)生物，需要加葡萄糖。 能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是(　　) A．稀釋涂布平板法 B．直接計(jì)數(shù)法 C．重量法 D．比濁法 解析：選A。利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下將細(xì)菌個(gè)體從固體培養(yǎng)基上分離出來(lái)，并可以繁殖形成菌落，可根據(jù)菌落數(shù)測(cè)定出樣品活菌數(shù)。 在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，甲組實(shí)驗(yàn)用氮源只含尿素的培養(yǎng)基，乙組實(shí)驗(yàn)用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培養(yǎng)基，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)與觀察，則乙組實(shí)驗(yàn)屬于(　　) A．空白對(duì)照

12、B．標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照 C．相互對(duì)照 D．條件對(duì)照 解析：選D。乙組和甲組實(shí)驗(yàn)僅是培養(yǎng)條件不同，所以為條件對(duì)照。 下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是(　　) A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板 B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上 C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 ℃恒溫培養(yǎng)24～48 小時(shí) D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 解析：選D。選擇菌落數(shù)在30～300的一組平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)，所以D不對(duì)。 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀

13、釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，正確的是(　　) A．涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230 B．涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260，取平均值238 C．涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、240和250，取平均值163 D．涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233 解析：選D。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，一定要涂布至少3個(gè)平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，所以A、B不正確。C項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。

14、二、非選擇題 某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉?wèn)題： (1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生__________________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是

15、________________________________________________________________________ (答出兩點(diǎn)即可)。 (2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是________________________________________________________________________ _______________________________________________________________

16、_________。 (3)用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________________________________ (答出兩點(diǎn)即可)。 解析：(1)土壤中的某些細(xì)菌之所以能夠分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物，必須利用現(xiàn)成的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源；葡萄糖通過(guò)呼吸作用被分解時(shí)，能為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，同時(shí)，葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某些氨基酸等物質(zhì)，所以進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機(jī)物的合成提供原料。(2)選擇培

17、養(yǎng)基是只允許特定種類的微生物(目的微生物)生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。本實(shí)驗(yàn)的目的菌是可分解尿素的細(xì)菌，因此，配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長(zhǎng)，NH4NO3可以作為所有細(xì)菌的氮源，培養(yǎng)基中如含有NH4NO3，將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細(xì)菌生長(zhǎng)提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO/HPO可以使培養(yǎng)基中pH保持相對(duì)穩(wěn)定。 答案：(1)脲酶　分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物　為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料 (2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不

18、能起到篩選作用 (3)為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定 某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答問(wèn)題： (1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源是來(lái)自培養(yǎng)基中的________，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是________。 (3)培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量_______

19、_的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量________。 (4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)若研究“目的菌”的生長(zhǎng)規(guī)律，將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，可采用________的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以________為縱坐標(biāo)，繪制生長(zhǎng)曲線。 (6)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后，才能倒掉。 解析：加入化合物A的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)目的菌。由于化合物A為有機(jī)物，且要振蕩，說(shuō)明目的菌為異養(yǎng)需氧型?！澳康木鄙L(zhǎng)繁殖過(guò)程中要不斷消耗營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的

20、培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量增加。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用劃線的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。若研究“目的菌”的生長(zhǎng)規(guī)律，將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，可采用定期取樣的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)，繪制生長(zhǎng)曲線應(yīng)以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以免污染環(huán)境。 答案：(1)目的菌　選擇 (2)化合物A　異養(yǎng)需氧型 (3)減少　增加 (4)劃線 (5)定期取樣　細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù) (6)滅菌 土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表所示

21、，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10 g 尿素 1 g 瓊脂糖 15 g 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL (1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選________，這種培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (2)“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的________和________，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是_____________________________________________________。 (3)圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固

22、體培養(yǎng)基上時(shí)，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (4)下列材料或用具：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，②玻棒、試管、錐形瓶和吸管，③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要滅菌的是：________；需要消毒的是：________。(填序號(hào)) 解析：培養(yǎng)基中添加尿素為氮源，目的是篩選分解尿素的微生物，這種培養(yǎng)基從功能上來(lái)說(shuō)，屬于選擇培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基的氮源為尿素，碳源為葡萄糖。培養(yǎng)過(guò)程中震蕩的目的是增加培養(yǎng)液中的氧氣，說(shuō)明尿素分解菌為需氧型微生物；將菌液接種到固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一般要采用稀釋涂布平板法或平板劃線法；培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，玻棒、試管、錐形瓶和吸管

23、要用干熱滅菌，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手用酒精消毒。 答案：(1)目的菌　選擇 (2)尿素　葡萄糖　為目的菌提供氧氣 (3)涂布平板(劃線) (4)①②　③ 幽門(mén)螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下： ―→―→―→―→ 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)________色環(huán)帶。 (2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是________滅菌。 A．高壓蒸汽 B．紫外燈照射 C．70%酒精浸泡

24、 D．過(guò)濾 (3)步驟X表示________。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。 (4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在________________中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致________________。 (5)臨床上用14C呼氣實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的________分解為NH3和14CO2。 解析：(1)幽門(mén)螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅指示

25、劑變成紅色，故菌落周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基―→滅菌、倒平板―→接種―→培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門(mén)螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人體內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的存在。 答案：(1)脲酶　紅 (2)D (3)接種　涂布　單 (4)恒溫培養(yǎng)箱　無(wú)法形成單菌落 (5)尿素 臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)

26、菌耐藥實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。 回答下列問(wèn)題： (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)，鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。 (3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A________；

27、含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B________；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明______________________ ____________________；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。 解析：(1)將細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)由(1)獲取的致病菌單菌落，經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋，用涂布法接種至固體培養(yǎng)基表面進(jìn)一步培養(yǎng)。(3)在檢測(cè)致病菌對(duì)抗生素的敏感性實(shí)驗(yàn)中，若含A種抗生素的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明周?chē)闹虏【劳?，該致病菌?duì)A種抗生素敏感；若含B種抗生素的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈說(shuō)明致病菌對(duì)B種抗生素不敏感；若含C種抗生素的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱；若含D種抗生素的濾紙片周?chē)该魅σ脖群珹的小，說(shuō)明A、B、C、D四種抗生素的殺菌效果最顯著的為A。透明圈中出現(xiàn)的菌落為耐藥菌。(4)根據(jù)(3)中分析，為達(dá)到抗菌目的最好選用抗生素A。 答案：(1)平板劃線　稀釋涂布(或涂布)平板 (2)涂布 (3)敏感　不敏感　該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱　耐藥菌 (4)A 10