高二生物選修3 動(dòng)物細(xì)胞工程

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1、2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程單克隆抗體等等 動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞核移植動(dòng)物細(xì)胞融合是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?1.1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?培養(yǎng)時(shí)又需要提供哪些必要條件呢？2.2.12.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)和核移植技術(shù) 從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。1.1概念概念1.2 1.2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程過(guò)程 胚

2、胎或幼齡動(dòng)物的組織器官胚胎或幼齡動(dòng)物的組織器官細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液10代細(xì)胞代細(xì)胞50代細(xì)胞代細(xì)胞剪碎胰蛋白酶洗滌、稀釋、分離原代培養(yǎng)用用胰蛋白酶胰蛋白酶分散分散細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。動(dòng)物細(xì)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)適宜的胞培養(yǎng)適宜的PH為為7.27.4，此環(huán)境下胃蛋白此環(huán)境下胃蛋白酶（酶（2.0）沒(méi)有）沒(méi)有活性，而胰蛋白活性，而胰蛋白酶酶(7.2-8.4)的活的活性較高。性較高。比老比老齡動(dòng)齡動(dòng)物的組織物的組織細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，能力強(qiáng)，有絲有絲分裂分裂旺盛旺盛。分分化程度化程度越越低，低，增殖增殖能力越強(qiáng)，能力越強(qiáng)，越越容易培容易培養(yǎng)。養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)

3、物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體成生物體細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖緩慢，核緩慢，核型可能變型可能變化化動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性胞網(wǎng)絡(luò)起來(lái)形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。和韌性的組織和器官。貼壁生長(zhǎng)接觸抑制10代以內(nèi)，保持正常二倍體核型代以內(nèi)，保持正常二倍體核型傳代培養(yǎng) 多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問(wèn)題：根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問(wèn)題：1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)？體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪

4、些物質(zhì)？2.體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件？討討 論論葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子和葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子和動(dòng)物血清等。動(dòng)物血清等。適宜溫度、適宜溫度、PH和氣體環(huán)境；無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境和氣體環(huán)境；無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)品新的個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品新的個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果或細(xì)胞產(chǎn)物或細(xì)胞產(chǎn)物快速繁殖、培育快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等無(wú)病毒植株等培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清葡萄糖、動(dòng)物血清促促生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培

5、養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原原 理理動(dòng)物細(xì)胞培動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 大規(guī)模的生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品大規(guī)模的生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體為基因工程技術(shù)提供受體細(xì)胞為基因工程技術(shù)提供受體細(xì)胞 培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植有毒物質(zhì)的檢測(cè)有毒物質(zhì)的檢測(cè)細(xì)胞的生理、藥理、病理研究細(xì)胞的生理、藥理、病理研究 如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥及

6、其他疾病提供依據(jù)防癌癥及其他疾病提供依據(jù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用2.2.動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎，的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體（克隆動(dòng)物）動(dòng)物個(gè)體（克隆動(dòng)物）分分類類胚胎細(xì)胞核移植：胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性容易 細(xì)胞分化程度細(xì)胞分化程度高高，恢復(fù)全能性，恢復(fù)全能性不不容易

7、容易2.1 動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞核移植概念：核移植概念：2.2體細(xì)胞核移植的過(guò)程：體細(xì)胞核移植的過(guò)程：請(qǐng)看教材請(qǐng)看教材P48圖圖2-21思考：思考：1.核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？核移植的受體細(xì)胞是什么？處在什么時(shí)期？2.通過(guò)什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？通過(guò)什么手段激活受體細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎？M中期卵母細(xì)胞中期卵母細(xì)胞誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，完成誘導(dǎo)方法：物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用用 途途物理、化學(xué)方法物理、化學(xué)方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒

8、物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)方法使細(xì)胞分散后誘使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合導(dǎo)細(xì)胞融合去除細(xì)胞壁后誘去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合導(dǎo)原生質(zhì)體融合細(xì)胞融合的方法細(xì)胞融合的方法細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性原原 理理動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較較討論：討論：1.在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前，為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核？前，為什么必須先去掉受體卵母

9、細(xì)胞的核？為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)為使核移植的胚胎或動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞，在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前，必須將受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐?。胞的遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐?。培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至1050代代左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其左右時(shí)，部分細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生突變，而10代以代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此

10、，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)代以內(nèi)的細(xì)胞。的細(xì)胞。2.用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？3.你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？的復(fù)制嗎？為什么？絕大部分絕大部分DNA來(lái)自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少來(lái)自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的量的DNA，即線粒體

11、中的，即線粒體中的DNA是來(lái)自于受體卵母是來(lái)自于受體卵母細(xì)胞。細(xì)胞。此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的的復(fù)制。復(fù)制。2.3體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用

12、前景：1、在畜牧業(yè)中可以加、在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程速家畜遺傳改良的進(jìn)程2、保護(hù)瀕危物種、保護(hù)瀕危物種3、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植的移植4、了解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程；追、了解胚胎發(fā)育和衰老過(guò)程；追蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病蹤研究疾病的發(fā)展過(guò)程和治療疾病 1、成功率比較低2、大多存在健康問(wèn)題3、克隆動(dòng)物食品安全問(wèn)題2.4體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題：思考與探究思考與探究2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程嗎？為什么？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程嗎？為什么？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高度分化動(dòng)物

13、細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程。因高度分化的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)的動(dòng)物細(xì)胞發(fā)育潛能變窄，失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒(méi)有類似植物組體的能力，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒(méi)有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想使培養(yǎng)的織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過(guò)程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化，通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)動(dòng)物細(xì)胞定向分化，通常采用定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞，使其分化成所需要的組織或器官。胞，使其分化成所需要的組織或器官。3.1997年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（年，美國(guó)威斯康星州的一個(gè)奶牛場(chǎng)有一頭名叫盧辛達(dá)（Lucinda）的奶牛，年產(chǎn)奶量為的奶牛，年產(chǎn)奶量

14、為30.8 t，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世，創(chuàng)造了世界奶牛產(chǎn)奶量最高新紀(jì)錄。目前世界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量界各國(guó)高產(chǎn)奶牛場(chǎng)奶牛，年平均產(chǎn)奶量一般為十幾噸，而我國(guó)奶牛產(chǎn)奶量年平均水平僅為年平均水平僅為34 t。（1）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說(shuō)明理由。）能利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)嗎？請(qǐng)說(shuō)明理由?？梢浴１R辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高，有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，可以。盧辛達(dá)的產(chǎn)奶量很高，有高產(chǎn)奶的遺傳基礎(chǔ)，利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上利用盧辛達(dá)的體細(xì)胞克隆的奶牛其遺傳物質(zhì)基本上全部來(lái)自該奶牛，其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基

15、礎(chǔ)，全部來(lái)自該奶牛，其克隆牛具有高產(chǎn)的遺傳基礎(chǔ)，如果精心培育和飼養(yǎng)，有可能在世界范圍內(nèi)推廣，如果精心培育和飼養(yǎng)，有可能在世界范圍內(nèi)推廣，克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)克隆牛再與高產(chǎn)的公牛自然繁殖，可得到很多高產(chǎn)的后代，從而加快奶牛改良進(jìn)程。的后代，從而加快奶牛改良進(jìn)程。該克隆牛不能無(wú)限制地推廣，其數(shù)量不宜過(guò)多，尤該克隆牛不能無(wú)限制地推廣，其數(shù)量不宜過(guò)多，尤其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖，以避免奶牛群出其是在小范圍內(nèi)不能無(wú)限的繁殖，以避免奶牛群出現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。現(xiàn)近親繁殖而引起種質(zhì)衰退。（2）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給你，你將如何）如果將克隆高產(chǎn)奶牛盧辛達(dá)的任務(wù)交給

16、你，你將如何對(duì)它進(jìn)行克隆？對(duì)它進(jìn)行克??？從盧辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體從盧辛達(dá)耳朵（也可用別的組織、器官，耳朵在活體上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組上容易?。┥霞羧∫恍K組織，在體外培養(yǎng)獲得該組織（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，織（如軟骨組織）的細(xì)胞。從屠宰場(chǎng)取廢棄的牛卵巢，抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞抽取卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟。用顯微針去除卵母細(xì)胞的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵的核，再將耳細(xì)胞注入卵母細(xì)胞，用電刺激方法使卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母母細(xì)胞與體細(xì)胞融合，這時(shí)供體核就進(jìn)入了受體卵母細(xì)胞

17、，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的細(xì)胞，再用電刺激或化學(xué)物質(zhì)激活注入了體細(xì)胞核的卵母細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚卵母細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育過(guò)程。核移植胚胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)胎在體外短時(shí)間培養(yǎng)后，挑選正常卵裂的胚胎植入經(jīng)同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。同期發(fā)情處理的受體母牛體內(nèi)。4.體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么體細(xì)胞核移植技術(shù)在研究和應(yīng)用上還存在什么問(wèn)題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。問(wèn)題？請(qǐng)你查閱資料，了解這方面的前沿動(dòng)態(tài)。研究方面研究方面：克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清克隆動(dòng)物基因組重新編程的機(jī)制尚不清楚，克隆技術(shù)效率低

18、，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率楚，克隆技術(shù)效率低，克隆動(dòng)物畸形率高、死亡率高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。高、易出現(xiàn)早衰等問(wèn)題。這些問(wèn)題尚在研究中。應(yīng)用上應(yīng)用上：生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還生產(chǎn)克隆動(dòng)物費(fèi)用昂貴，距大規(guī)模應(yīng)用還有一定距離。有一定距離。一、動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng)兩個(gè)細(xì)胞正在融合兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用受精作用動(dòng)動(dòng)物物細(xì)細(xì)胞胞融融合合細(xì)胞細(xì)胞A細(xì)胞細(xì)胞B雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞滅活的病毒滅活的病毒物理法物理法化學(xué)法化學(xué)法仙臺(tái)病毒仙臺(tái)病毒皰疹病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒新城雞瘟病毒用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程細(xì)胞

19、核細(xì)胞核病毒顆粒病毒顆粒細(xì)胞核細(xì)胞核二、單克隆抗體二、單克隆抗體什么是抗體？什么是抗體？抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。具有免疫功能的球蛋白。B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。B淋巴細(xì)胞與抗體淋巴細(xì)胞與抗體B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以淋巴細(xì)胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。產(chǎn)生抗體。動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)物體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。原具有特異性免疫作用。每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗每一個(gè)淋巴細(xì)

20、胞只能產(chǎn)生一種抗體。體。單克隆抗體單克隆抗體 由單個(gè)由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群，（克?。纬苫蛐拖嗤募?xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。特點(diǎn)：特點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高 如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能利用淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能 利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性利用腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性 利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融利用細(xì)胞融合的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特合獲得具有淋

21、巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞性的雜交瘤細(xì)胞 利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞交瘤細(xì)胞 單克隆抗體制備過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程 注射抗原注射抗原B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合、篩選細(xì)胞融合、篩選雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)篩選，繼續(xù)培養(yǎng)足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔單克隆抗體單克隆抗體思考：思考：1、本過(guò)程利用了哪些原理？、本過(guò)程利用了哪些原理？免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理2、為什么選用小

22、鼠骨髓瘤細(xì)胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合？細(xì)胞融合？這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物這樣融合成的雜交瘤細(xì)胞，繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不僅具有質(zhì)，不僅具有B細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增細(xì)胞分泌抗體的能力，而且還有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。殖的本領(lǐng)，因而可以獲得大量單克隆抗體。單克隆抗體的應(yīng)用單克隆抗體的應(yīng)用與與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，常規(guī)抗體相比，單克隆抗體產(chǎn)量高，特異性強(qiáng)，靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯靈敏度高，優(yōu)越性十分明顯。應(yīng)用主要有：應(yīng)用主要有：1、臨床診斷、臨床診斷2、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成、作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，

23、形成“生物導(dǎo)彈生物導(dǎo)彈”治療腫治療腫瘤瘤資料資料：目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、體。許多缺乏良好診斷手段的傳染病、免疫性疾病、血液病、內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)內(nèi)分泌疾病和遺傳病，用單克隆抗體作為診斷手段，是一個(gè)必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定必然趨勢(shì)。另外，用單克隆抗體做體內(nèi)診斷，借以鑒別和定位體內(nèi)位體內(nèi)“病灶病灶”也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追也引起人們的注意，目前，主要用于腫瘤追蹤及心肌梗塞的診斷。蹤及心肌梗塞的診斷。在動(dòng)物細(xì)胞融合

24、和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）確的是（）A結(jié)果是相同的結(jié)果是相同的B雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同雜種細(xì)胞的形成過(guò)程基本相同C操作過(guò)程中酶的作用相同操作過(guò)程中酶的作用相同D誘導(dǎo)融合的手段相同誘導(dǎo)融合的手段相同.單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和單克隆抗體制備過(guò)程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A BC D C