《坐骨神經(jīng)干》PPT課件
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1、 Properties of Compound Action Potentials on Toad Sciatic Nerve Trunk陸 源浙 江 大 學(xué) 醫(yī) 學(xué) 院 目 的 (Objectives ): 1.應(yīng) 用 微 機(jī) 生 物 信 號(hào) 采 集 處 理 系 統(tǒng) 測 定 蟾 蜍 坐骨 神 經(jīng) 干 復(fù) 合 動(dòng) 作 電 位 參 數(shù) 、 刺 激 強(qiáng) 度 與 動(dòng)作 電 位 振 幅 和 動(dòng) 作 電 位 的 傳 導(dǎo) 速 度 2.觀 察 神 經(jīng) 損 傷 、 藥 物 對 神 經(jīng) 興 奮 傳 導(dǎo) 的 影 響 3.探 討 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 干 的 生 理 特 性 及 復(fù) 合 動(dòng) 作電 位 形 成 的
2、機(jī) 制 。 動(dòng) 作 電 位 的 產(chǎn) 生 原 理Mechanism of Action Potential Genesis 單 相 動(dòng) 作 電 位 (Monophasic Action Potential)損 傷 區(qū)興 奮 區(qū)細(xì) 胞 外 引 導(dǎo) 電 極 檢 流 計(jì) 雙 相 動(dòng) 作 電 位 (Biphasic Action Potential)興 奮 區(qū)細(xì) 胞 外 引 導(dǎo) 電 極 檢 流 計(jì)( 引 導(dǎo) 電 極 距 離 大 于 動(dòng) 作 電 位 波 長 ) 雙 相 動(dòng) 作 電 位 ( Biphasic Action Potential)興 奮 區(qū) 細(xì) 胞 外 引 導(dǎo) 電 極檢 流 計(jì)( 引 導(dǎo) 電 極
3、 距 離 小 于 動(dòng) 作 電 位 波 長 ) 動(dòng) 作 電 位 的 傳 導(dǎo) Conduction of AP 動(dòng) 作 電 位 以 局 部 電 流 的 形 式 傳 導(dǎo) 局 部 電 流 動(dòng) 作 電 位 傳 導(dǎo) 速 度 的 測 定 (Measurement of Conduction Velocity of AP)+ S t 傳 導(dǎo) 速 度 測 定 = SACt刺 激 器 輸 入 通 道R1- Rr1+ R2- R2+ 刺 激 偽 跡 (Stimulus artifact)刺 激 偽 跡 AP刺 激 器 放 大 器+ 地刺 激 電 流 i- i+ R+R-地刺 激 偽 跡 是 刺 激 電 流 通 過
4、導(dǎo) 電 介 質(zhì) 擴(kuò) 散 至 兩 引 導(dǎo) 電 極 而 形成 的 電 位 差 信 號(hào) 。 影 響 神 經(jīng) 纖 維 興 奮 性 的 因 素(Factors Effecting Nerve Fibers Excitability) 神 經(jīng) 纖 維 的 直 徑 有 無 髓 鞘 物 種 溫 度 藥 物 ( 如 普 魯 卡 因 ) 、 離 子 ( K ) 等 的 影 響 影 響 神 經(jīng) 纖 維 興 奮 性 的 因 素Factors Effecting Nerve Fibers Excitability纖 維 分 類 A類 (有 髓 ) B類 (有 髓 ) C類 (無 髓 )A A A A sC drC來 源
5、 初 級(jí) 肌 梭傳 入 纖 維 、支 配 梭 外肌 的 傳 出纖 維 皮 膚 的 觸 、壓 覺 傳入 纖 維 支 配 梭 內(nèi)肌 的 傳 出 纖 維 皮 膚 痛 、溫 覺 傳 入纖 維 自 主 神經(jīng) 節(jié) 前纖 維 自 主 神經(jīng) 節(jié) 后纖 維 后 根 中傳 導(dǎo) 痛覺 的 傳入 纖 維纖 維 直 徑( m) 13-22 8-13 4-8 1-4 1-3 0.3-1.3 0.4-1.2 傳 導(dǎo) 速 度(m/s) 70-120 30-70 15-30 12-30 3-15 0.7-2.3 0.4-2.0 1.材 料 和 方 法 (materials and methods)1.1實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 蟾 蜍
6、( 中 華 蟾 蜍 指 名 亞 種 , Zhuoshan Toad)目 的 應(yīng) 用 微 機(jī) 生 物 信 號(hào) 采 集 處 理 系 統(tǒng) 記 錄 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 干復(fù) 合 動(dòng) 作 電 位 ( compound action potential, CAP) , 觀 察刺 激 、 神 經(jīng) 損 傷 、 藥 物 對 神 經(jīng) 興 奮 性 、 興 奮 傳 導(dǎo) 的 影 響 并 探 討其 機(jī) 制 。 1.材 料 和 方 法 (materials and methods)1.2藥 品 任 氏 液 、 3 mol 氯 化 鉀1.3 器 材 RM6240微 機(jī) 生 物 信 號(hào) 處 理 系 統(tǒng) ( 成 都 儀 器
7、廠 ) 、 神 經(jīng) 干標(biāo) 本 盒 。1.4 坐 骨 神 經(jīng) 干 制 備 蟾 蜍 毀 腦 脊 髓 , 去 上 肢 和 內(nèi) 臟 , 下 肢 剝 皮 浸 于 任氏 液 中 。 蟾 蜍 下 肢 背 面 向 上 置 于 蛙 板 上 , 剪 去 尾 椎 ; 標(biāo) 本 腹 面 向 上 , 用 玻璃 分 針 分 離 脊 柱 兩 側(cè) 神 經(jīng) 叢 , 用 線 在 近 脊 柱 處 結(jié) 扎 , 剪 斷 神 經(jīng) ; 將 神 經(jīng) 干從 腹 面 移 向 背 面 。 標(biāo) 本 背 面 向 上 固 定 , 從 大 腿 至 跟 腱 分 離 坐 骨 神 經(jīng) 。 坐 骨神 經(jīng) 標(biāo) 本 置 任 氏 液 中 備 用1.5儀 器 連 接 和
8、參 數(shù) 神 經(jīng) 干 標(biāo) 本 盒 兩 對 引 導(dǎo) 電 極 分 別 接 微 機(jī) 生 物 信號(hào) 處 理 系 統(tǒng) 1、 2通 道 。 儀 器 參 數(shù) : 1、 2通 道 時(shí) 間 常 數(shù) 0.02s、 濾 波 頻率 1KHz、 靈 敏 度 5mV, 采 樣 頻 率 : 40KHz, 掃 描 速 度 : 0.5ms/div。單 刺 激 激 方 式 , 刺 激 幅 度 1.2V, 刺 激 波 寬 0.1ms, 延 遲 5ms, 同 步 觸發(fā) 。 1.6 動(dòng) 作 電 位 引 導(dǎo) 神 經(jīng) 干 標(biāo) 本 置 于 標(biāo) 本 盒 的 電 極 上 , 神 經(jīng) 與 電 極 接 觸良 好 , 調(diào) 節(jié) 刺 激 電 壓 , 記 錄
9、 動(dòng) 作 電 位 。 2.觀 察 ( observations)2.1 觀 察 中 樞 端 CAP 用 1.0V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng) 干末 梢 端 , 觀 察 中 樞 端 CAP正 、 負(fù) 向 振 幅 (amplitude, A)和 時(shí) 程 (duration,D)。 2.2 測 定 雙 相 動(dòng) 作 電 位 ( biphasic action potential, BAP) 用 1.0V電 壓 ,波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng) 干 中 樞 端 , 測 定 末 梢 端 BAP正 、 負(fù) 相 振幅 和 時(shí) 程 。 2.3 傳
10、 導(dǎo) 速 度 測 定 用 1.0V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng)干 中 樞 端 , 測 定 第 1和 第 2對 引 導(dǎo) 電 極 引 導(dǎo) CAP起 點(diǎn) 的 時(shí) 間 差 t , 根據(jù) S R1- R2- / t 計(jì) 算 出 AP的 傳 導(dǎo) 速 度 。 2.4 測 定 單 相 動(dòng) 作 電 位 ( monophasic action potential, MAP) 用 鑷 子夾 傷 對 1對 引 導(dǎo) 電 極 間 的 神 經(jīng) 干 , 然 后 用 1.0V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方波 激 刺 激 神 經(jīng) 干 中 樞 端 , 測 定 末 梢 端 MAP
11、振 幅 和 時(shí) 程 。2.5 觀 察 刺 激 強(qiáng) 度 ( U) 與 動(dòng) 作 電 位 振 幅 的 關(guān) 系 刺 激 波 寬 0.1ms, 刺激 電 壓 從 0.1V開 始 , 按 步 長 0.05V增 加 , 刺 激 電 壓 每 增 加 一 次 刺 激 神 經(jīng)干 一 次 , 并 記 錄 刺 激 電 壓 和 MAP振 幅 。 2.6 測 定 KCl處 理 前 后 MAP振 幅 刺 激 電 壓 1.0V, 刺 激 波 寬 0.1ms,記 錄 3 mol/L KCl 處 理 前 , 處 理 后 5時(shí) MAP的 振 幅 。 1.材 料 和 方 法 (materials and methods)1.1實(shí) 驗(yàn)
12、 動(dòng) 物 蟾 蜍 ( 中 華 蟾 蜍 指 名 亞 種 , Zhuoshan Toad)目 的 應(yīng) 用 微 機(jī) 生 物 信 號(hào) 采 集 處 理 系 統(tǒng) 記 錄 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 干 復(fù) 合 動(dòng) 作 電 位( compound action potention, CAP) , 觀 察 刺 激 、 神 經(jīng) 損 傷 、 藥 物 對神 經(jīng) 興 奮 性 、 興 奮 傳 導(dǎo) 的 影 響 并 探 討 其 機(jī) 制 。 蟾蜍坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位特性張 某 某( 浙 江 大 學(xué) 遠(yuǎn) 程 學(xué) 院 護(hù) 理 浙 江 杭 州 310031)1.2藥 品 任 氏 液 、 3 mol 氯 化 鉀1.3 器 材 RM62
13、40微 機(jī) 生 物 信 號(hào) 處 理 系 統(tǒng) ( 成 都 儀 器 廠 ) 、 神 經(jīng) 干標(biāo) 本 盒 。1.4 坐 骨 神 經(jīng) 干 制 備 蟾 蜍 毀 腦 脊 髓 , 去 上 肢 和 內(nèi) 臟 , 下 肢 剝 皮 浸于 任 氏 液 中 。 蟾 蜍 下 肢 背 面 向 上 置 于 蛙 板 上 , 剪 去 尾 椎 ; 標(biāo) 本 腹 面向 上 , 用 玻 璃 分 針 分 離 脊 柱 兩 側(cè) 神 經(jīng) 叢 , 用 線 在 近 脊 柱 處 結(jié) 扎 , 剪斷 神 經(jīng) ; 將 神 經(jīng) 干 從 腹 面 移 向 背 面 。 標(biāo) 本 背 面 向 上 固 定 , 從 大 腿 至跟 腱 分 離 坐 骨 神 經(jīng) 。 坐 骨 神
14、經(jīng) 標(biāo) 本 置 任 氏 液 中 備 用 1.5 儀 器 連 接 和 參 數(shù) 神 經(jīng) 干 標(biāo) 本 盒 兩 對 引 導(dǎo) 電 極 分 別 接 微 機(jī) 生 物 信號(hào) 處 理 系 統(tǒng) 1、 2通 道 。 儀 器 參 數(shù) : 1、 2通 道 時(shí) 間 常 數(shù) 0.02s、 濾 波 頻率 1KHz、 靈 敏 度 5mV, 采 樣 頻 率 : 100KHz, 掃 描 速 度 : 0.2ms/div。單 刺 激 激 方 式 , 刺 激 幅 度 1.0V, 刺 激 波 寬 0.1ms, 延 遲 2ms, 同 步 觸發(fā) 。1.6 動(dòng) 作 電 位 引 導(dǎo) 神 經(jīng) 干 標(biāo) 本 置 于 標(biāo) 本 盒 的 電 極 上 , 神
15、經(jīng) 與 電 極 接觸 良 好 , 調(diào) 節(jié) 刺 激 電 壓 , 記 錄 動(dòng) 作 電 位 。 2.觀 察 ( observations)2.1 觀 察 中 樞 端 CAP 用 1.0V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng) 干末 梢 端 , 觀 察 中 樞 端 CAP正 、 負(fù) 向 振 幅 (amplitude, A)和 時(shí) 程 (duration,D)。 2.2 測 定 雙 相 動(dòng) 作 電 位 ( biphasic action potential, BAP) 用 1.0V電 壓 ,波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng) 干 中 樞 端 , 測 定
16、 末 梢 端 BAP正 、 負(fù) 相 振幅 和 時(shí) 程 。 2.3 傳 導(dǎo) 速 度 測 定 用 1.2V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方 波 激 刺 激 神 經(jīng)干 中 樞 端 , 測 定 第 1和 第 2對 引 導(dǎo) 電 極 引 導(dǎo) CAP起 點(diǎn) 的 時(shí) 間 差 t , 根據(jù) S R1- R2- / t 計(jì) 算 出 AP的 傳 導(dǎo) 速 度 。 2.4 測 定 單 相 動(dòng) 作 電 位 ( monophasic action potential, MAP) 用 鑷 子夾 傷 對 1對 引 導(dǎo) 電 極 間 的 神 經(jīng) 干 , 然 后 用 1.2V電 壓 , 波 寬 0.1ms的 單 個(gè) 方波
17、 激 刺 激 神 經(jīng) 干 中 樞 端 , 測 定 末 梢 端 MAP振 幅 和 時(shí) 程 。2.5 觀 察 刺 激 強(qiáng) 度 ( U) 與 動(dòng) 作 電 位 振 幅 的 關(guān) 系 刺 激 波 寬 0.1ms, 刺激 電 壓 從 0.1V開 始 , 按 步 長 0.05V增 加 , 刺 激 電 壓 每 增 加 一 次 刺 激 神 經(jīng)干 一 次 , 并 記 錄 刺 激 電 壓 和 MAP振 幅 。2.6 測 定 KCl處 理 前 后 MAP振 幅 刺 激 電 壓 1.2V, 刺 激 波 寬 0.1ms,記 錄 3 mol/L KCl 處 理 前 , 處 理 后 5時(shí) MAP的 振 幅 。 3.結(jié) 果 (r
18、esults)3.2 刺 激 電 壓 1.2V, 波 寬 0.1ms時(shí) , 動(dòng) 作 電 位 正 相 振 幅 A p1 s mV大于 負(fù) 相 振 幅 Ap2 s mV, 兩 者 有 顯 著 性 差 異 ( p0.05); 動(dòng) 作 電 位正 相 時(shí) 程 Dp1 s ms顯 著 短 于 負(fù) 相 時(shí) 程 Dp2 s ms, 兩 者 有 顯 著 性 差異 ( p0.05); 單 相 動(dòng) 作時(shí) 程 Dm s ms顯 著 長 于 雙 相 動(dòng) 作 電 位 正 相 D p1 s ms, 兩 者 有 顯 著性 差 異 ( p0.05)。3.4 在 刺 激 電 壓 低 于 Uthreshold時(shí) , 測 不 到 動(dòng)
19、 作 電 位 ; 刺 激 電 壓 從Uthreshold增 加 至 Umaximal, 動(dòng) 作 電 位 振 幅 呈 曲 線 增 長 , 刺 激 電 壓高 于 Umaximal動(dòng) 作 電 位 振 幅 不 再 增 長 , 見 圖 1。A( mV) 圖 1 刺 激 強(qiáng) 度 與 動(dòng) 作 電 位 振 幅 的 關(guān) 系U(V)0.5 1.0 1.52463.5 刺 激 電 壓 1.2V, 3mol KCl處 理 前 , 動(dòng) 作 電 位 振 幅 為 Ac1 s mV , 處 理 后 5min, 動(dòng) 作 電 位 振 幅 為 At1 s mV , 與 處 理 前 比 有顯 著 性 差 異 ( p0.05) , 見
20、 表 2。 表 2 3mol KCl 對 動(dòng) 作 電 位 振 幅 的 影 響3Mol KCl處 理 前 Ac1 (mV) 處 理 后 At1 (mV)123456x s 4. 討 論 (discussion)4.4 在 兩 引 導(dǎo) 電 極 間 夾 傷 神 經(jīng) , 神 經(jīng) 沖 動(dòng) 傳 導(dǎo) 被 阻 斷 , 雙 相 動(dòng) 作 電 位負(fù) 相 波 消 失 , 形 成 一 相 正 波 , 于 此 可 見 , 雙 相 動(dòng) 作 電 位 是 神 經(jīng) 沖 動(dòng)先 后 通 過 兩 個(gè) 引 導(dǎo) 電 極 形 成 的 , 沖 動(dòng) 通 過 第 1個(gè) 電 極 , 形 成 動(dòng) 作 電 位 的 正 相 波 , 沖 動(dòng) 通 過 第 2
21、個(gè) 電 極 , 形 成 動(dòng) 作 電 位 的 負(fù) 相 波 。4.1 刺 激 電 壓 從 Uth增 加 至 Umax, 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 振 幅 隨 刺 激 電 壓 增 加而 增 高 。 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 不 具 有 “ 全 或 無 ” 性 質(zhì) 。 坐 骨 神 經(jīng) 干 為 不 同類 型 的 神 經(jīng) 纖 維 組 成 , 各 個(gè) 類 型 纖 維 的 興 奮 性 水 平 不 同 1, 在 一 個(gè) 有限 的 范 圍 內(nèi) 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 的 大 小 與 刺 激 的 強(qiáng) 度 成 比 例 2 。4.2 蛙 神 經(jīng) 沖 動(dòng) 的 傳 導(dǎo) 速 度 在 20 時(shí) 約 為 每 秒 30米
22、3 , 本 實(shí) 驗(yàn) 所 測 得的 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 的 傳 導(dǎo) 速 度 為 .4.3 刺 激 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 干 中 樞 端 , 可 在 其 末 梢 端 引 導(dǎo) 出 動(dòng) 作 電 位 , 反之 也 然 , 由 此 可 以 證 明 離 體 蟾 蜍 坐 骨 神 經(jīng) 具 有 雙 向 傳 導(dǎo) 興 奮 的 能 力 。 5. 參 考 文 獻(xiàn) (references)1 Mary A.B.勃 雷 茲 爾 .神 經(jīng) 系 統(tǒng) 的 電 活 動(dòng) .1984.第 1.版 .科 學(xué) 出 版 社 .北 京 P452.DJAIDLEY.可 興 奮 細(xì) 胞 的 生 理 . 1983年 09月
23、第 1版 .學(xué) 科 學(xué) 出 版 社 .北 京 P613 Mary A.B.勃 雷 茲 爾 .神 經(jīng) 系 統(tǒng) 的 電 活 動(dòng) .1984.第 1.版 .科 學(xué) 出 版 社 .北 京 P354.5 在 兩 引 導(dǎo) 電 極 間 夾 傷 神 經(jīng) , 神 經(jīng) 沖 動(dòng) 傳 導(dǎo) 被 阻 斷 , 雙 相 動(dòng) 作 電位 負(fù) 相 波 消 失 , 形 成 的 單 相 動(dòng) 作 電 位 時(shí) 程 顯 著 長 于 雙 相 動(dòng) 作 電 位 正 相時(shí) 程 , 單 相 動(dòng) 作 電 位 振 幅 大 于 等 于 雙 相 動(dòng) 作 電 位 正 相 振 幅 。 即 負(fù) 相 波的 存 在 , 使 雙 相 動(dòng) 作 電 位 正 相 波 的 時(shí)
24、程 和 振 幅 減 小 , 據(jù) 此 可 以 推 測 ,正 相 波 與 負(fù) 相 波 在 時(shí) 間 軸 上 重 疊 , 正 相 波 和 負(fù) 相 波 疊 加 , 疊 加 發(fā) 生 在正 相 波 去 極 后 期 或 復(fù) 極 早 期 , 負(fù) 相 去 極 波 與 正 相 復(fù) 極 波 疊 加 , 負(fù) 相 波振 幅 減 小 , 正 相 波 時(shí) 程 縮 短 。 因 此 雙 相 動(dòng) 作 電 位 正 相 波 大 于 負(fù) 相 振 幅 ,正 相 時(shí) 程 短 于 負(fù) 相 時(shí) 程 。4.6 3mol KCl 處 理 神 經(jīng) , 動(dòng) 作 電 位 消 失 , 這 表 明 神 經(jīng) 沖 動(dòng) 傳 導(dǎo) 被 阻 斷 。根 據(jù) 離 子 學(xué) 說
25、 , 動(dòng) 作 電 位 是 由 胞 外 鈉 離 子 通 過 鈉 通 道 內(nèi) 流 形 成 的 , 細(xì)胞 外 高 鉀 使 膜 電 位 升 高 , 膜 電 位 高 于 閾 電 位 時(shí) , 鈉 通 道 失 活 , 產(chǎn) 生 去極 化 阻 滯 , 神 經(jīng) 的 興 奮 性 喪 失 。 思 考 題 閾 電 位 引 起 鈉 通 道 大 量 開 放 時(shí) 的 臨 界 膜 電 位 。 閾 刺 激 保 持 刺 激 持 續(xù) 時(shí) 間 和 刺 激 強(qiáng) 度 變 化 率 不 變 , 引 起 機(jī) 體 或 組 織細(xì) 胞 產(chǎn) 生 反 應(yīng) 的 最 小 刺 激 強(qiáng) 度 。 最 大 刺 激 保 持 刺 激 持 續(xù) 時(shí) 間 和 刺 激 強(qiáng) 度
26、變 化 率 不 變 情 況 , 引 起 機(jī) 體 或組 織 細(xì) 胞 產(chǎn) 生 最 大 反 應(yīng) 的 最 小 刺 激 強(qiáng) 度 。 刺 激 偽 跡 : 刺 激 偽 跡 是 否 是 生 物 電 ? 引 導(dǎo) 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 采 用 雙 端 輸 入 方 式 。 引 導(dǎo) 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 采 用 交 流 耦 合 方 式 。 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 是 否 具 有 “ 全 或 無 ” 性 質(zhì) ? 為 什 么 敘 述 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 傳 導(dǎo) 速 度 的 測 定 方 法 。 用 超 過 最 大 刺 激 的 刺 激 強(qiáng) 度 刺 激 神 經(jīng) 干 , 神 經(jīng) 干 動(dòng) 作 電 位 是 否 會(huì) 增 大 ?為 什 么 ? 雙 相 動(dòng) 作 電 位 是 如 何 形 成 的 。 采 用 什 么 實(shí) 驗(yàn) 方 法 可 引 導(dǎo) 出 單 相 動(dòng) 作 電位 。 神 經(jīng) 纖 維 的 動(dòng) 作 電 位 有 何 作 用 ? 高 濃 度 KCl作 用 于 神 經(jīng) 干 對 神 經(jīng) 的 興 奮 傳 導(dǎo) 有 何 影 響 ? 為 什 么 ?
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