滬科版生命科學(xué)高一上3-3《非細(xì)胞形態(tài)的生物——病毒》課件5
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1、在在食食品品工工業(yè)業(yè)中中,病病毒毒不不象象細(xì)細(xì)菌菌和和真真菌菌那那樣樣有有直直接接的的作作用用。但但是是,在在涉涉及及食食品品衛(wèi)衛(wèi)生生等等方方面面則則顯顯的的十十分分重重要要,例例如如:肝肝炎炎病病毒毒、輪輪狀狀病病毒毒、噬噬菌菌體體和和SARS病病毒毒等等。如如果果說(shuō)說(shuō)肝肝輪輪S三三種種病病毒毒與與食食品品的的安安全全性性有有關(guān)關(guān)的的話話,噬噬菌菌體體的的危危害害則則主主要要是是發(fā)發(fā)生生在在發(fā)發(fā)酵酵工工業(yè)業(yè)當(dāng)當(dāng)中中的的。在在利利用用微微生生物物發(fā)發(fā)酵酵生生產(chǎn)產(chǎn)食食品品的的過(guò)過(guò)程程中中,在在乳乳酸酸發(fā)發(fā)酵酵、醋醋酸酸發(fā)發(fā)酵酵、氨氨基基酸酸發(fā)發(fā)酵酵等等過(guò)過(guò)程程中中,發(fā)發(fā)酵酵菌菌如如果果受受到到相
2、相應(yīng)應(yīng)的的噬噬菌菌體體感感染染時(shí)時(shí),發(fā)發(fā)酵酵作作用用將將會(huì)會(huì)減減慢慢甚甚至至停停止止,不不積積累累代代謝謝產(chǎn)產(chǎn)物物,菌菌體很快消失,整個(gè)發(fā)酵生產(chǎn)受到破壞。體很快消失,整個(gè)發(fā)酵生產(chǎn)受到破壞。在在現(xiàn)現(xiàn)代代科科學(xué)學(xué)研研究究中中,病病毒毒的的作作用用是是顯顯著著的的,在在分分子子生生物物學(xué)學(xué)和和分分子子遺遺傳傳學(xué)學(xué)等等方方面面產(chǎn)產(chǎn)生生了了巨巨大大的的影影響響。在在基基因因工工程程研研究究方方面面,如如果果將將病病毒毒核核酸酸分分子子進(jìn)進(jìn)行行體體外外切切割割,按按照照實(shí)實(shí)際際需需要要進(jìn)進(jìn)行行基基因因重重組組,然然后后再再送送入入體體內(nèi)內(nèi),進(jìn)進(jìn)行行表表達(dá)達(dá),產(chǎn)產(chǎn)生生新新的的理理想想性性物物質(zhì),應(yīng)用于現(xiàn)代醫(yī)
3、學(xué)等方面。質(zhì),應(yīng)用于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)等方面。在在現(xiàn)現(xiàn)代代免免役役食食品品的的研研究究與與開(kāi)開(kāi)發(fā)發(fā)中中也也同同樣樣是大有可為的。是大有可為的。二、病毒的特點(diǎn)二、病毒的特點(diǎn)由由于于病病毒毒是是非非細(xì)細(xì)胞胞生生物物,所所以以它它具具有有細(xì)細(xì)胞胞生生物物所所沒(méi)沒(méi)有有的的突突出出特特點(diǎn)點(diǎn),主主要要表表現(xiàn)現(xiàn)在在以下幾個(gè)方面。以下幾個(gè)方面。1、個(gè)個(gè)體體極極其其微微小?。簜€(gè)個(gè)體體微微小小,在在電電子子顯顯微鏡下才能看見(jiàn)。微鏡下才能看見(jiàn)。2、只只含含一一種種類(lèi)類(lèi)型型核核酸酸:一一種種病病毒毒的的毒毒粒粒內(nèi)只含有一種核酸,內(nèi)只含有一種核酸,DNA或者或者RNA。3、專(zhuān)專(zhuān)性性寄寄生生:嚴(yán)嚴(yán)格格的的活活細(xì)細(xì)胞胞內(nèi)內(nèi)寄寄生生,
4、沒(méi)沒(méi)有有自自身身的的核核糖糖體體,沒(méi)沒(méi)有有個(gè)個(gè)體體生生長(zhǎng)長(zhǎng),也也不不進(jìn)進(jìn)行行二二均均分分裂裂,必必須須依依賴(lài)賴(lài)宿宿主主細(xì)細(xì)胞胞進(jìn)進(jìn)行行自身的核酸復(fù)制,形成子代。自身的核酸復(fù)制,形成子代。4、大部分病毒沒(méi)有酶或酶系極不完全,、大部分病毒沒(méi)有酶或酶系極不完全,不含催化能量代謝不含催化能量代謝 的酶,不能進(jìn)行獨(dú)的酶,不能進(jìn)行獨(dú)立的代謝作用立的代謝作用5、對(duì)大多數(shù)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏、對(duì)大多數(shù)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感。感。三、病毒的大小與形態(tài)三、病毒的大小與形態(tài)1、大大小?。簻y(cè)測(cè)量量病病毒毒大大小小的的單單位位是是納納米米(nm)。各種病毒的大小相差很大。)。各種病毒的大小相差很大。小小的的病病
5、毒毒直直徑徑只只有有1020nm左左右右,例例如如:口口蹄蹄疫疫V的的直直徑徑22nm;大大的的病病毒毒直直徑徑可可超超過(guò)過(guò)250nm,例例如如:痘痘病病毒毒的的大大小小約約為為250300nm;大多數(shù)病毒的直徑都在大多數(shù)病毒的直徑都在150nm以下。以下。2、形形態(tài)態(tài):病病毒毒的的形形態(tài)態(tài)有有四四種種,即即:球球形形、桿桿形形、磚磚形形和和蝌蝌蚪蚪形形,細(xì)細(xì)菌菌病病毒毒噬噬菌體即為蝌蚪形。菌體即為蝌蚪形。四、病毒的化學(xué)組成四、病毒的化學(xué)組成絕大多數(shù)病毒主要是由核酸、蛋白質(zhì)組成,只有少數(shù)病毒除上述成分外,還含有脂類(lèi)、多糖等物質(zhì)。病 毒 核 酸 的 分 子 量 大 約 在 210161018(D
6、aldon)之間,Daldon簡(jiǎn)稱(chēng)為DT蛋白質(zhì)也是病毒的主要成分,其分子量在10000150000DT之間。毒粒(化學(xué)組成)(化學(xué)組成)核酸;核酸;蛋白質(zhì);蛋白質(zhì);脂類(lèi);脂類(lèi);碳水化合物;碳水化合物;基本化學(xué)組成基本化學(xué)組成病毒顆粒在化學(xué)上表現(xiàn)為核蛋白病毒顆粒在化學(xué)上表現(xiàn)為核蛋白二、毒粒的化學(xué)組成二、毒粒的化學(xué)組成二、毒粒的化學(xué)組成二、毒粒的化學(xué)組成五、病毒的結(jié)構(gòu)五、病毒的結(jié)構(gòu)病毒的基本結(jié)構(gòu)有三種:病毒的基本結(jié)構(gòu)有三種:螺旋對(duì)稱(chēng)螺旋對(duì)稱(chēng):-煙草花葉病毒(煙草花葉病毒(TMV)多面體對(duì)稱(chēng)多面體對(duì)稱(chēng):二十面體對(duì)稱(chēng)病毒二十面體對(duì)稱(chēng)病毒-腺病毒腺病毒 復(fù)合對(duì)稱(chēng)復(fù)合對(duì)稱(chēng):T4噬菌體噬菌體 病病毒毒子子:
7、一一個(gè)個(gè)結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)齊齊全全,功功能能完完整整,具具有有感感染染性的成熟病毒顆粒。性的成熟病毒顆粒。病毒的種類(lèi):病毒的種類(lèi):1、按照結(jié)構(gòu)分類(lèi):、按照結(jié)構(gòu)分類(lèi):裸露病毒;裸露病毒;囊膜(包膜)病毒;囊膜(包膜)病毒;病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸(核心)構(gòu)成的復(fù)合物,又稱(chēng)病毒的蛋白質(zhì)殼體和病毒核酸(核心)構(gòu)成的復(fù)合物,又稱(chēng)核衣殼。核衣殼。核衣殼(核衣殼(nucleocapsidnucleocapsid):):僅由核衣殼構(gòu)成的病毒顆粒僅由核衣殼構(gòu)成的病毒顆粒裸露毒粒(裸露毒粒(naked virion):):包膜(包膜(envelopeenvelope):):有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜,它是病毒以
8、出芽(有些病毒核衣殼包裹著的一層脂蛋白膜,它是病毒以出芽(buddingbudding)方式成熟時(shí),由)方式成熟時(shí),由細(xì)胞膜衍生而來(lái)的。有維系毒細(xì)胞膜衍生而來(lái)的。有維系毒粒結(jié)構(gòu),保護(hù)病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白,粒結(jié)構(gòu),保護(hù)病毒核殼的作用。特別是病毒的包膜糖蛋白,具有多種生物學(xué)活性,是啟動(dòng)病毒感染所必需的。具有多種生物學(xué)活性,是啟動(dòng)病毒感染所必需的。裸病毒和有包膜病毒的基本結(jié)構(gòu)裸病毒和有包膜病毒的基本結(jié)構(gòu)2、按照寄生性分類(lèi):、按照寄生性分類(lèi):動(dòng)物病毒 植物病毒 細(xì)菌病毒(噬菌體)各種動(dòng)物病毒各種植物病毒各種噬菌體3.3.病毒結(jié)構(gòu)示意圖病毒結(jié)構(gòu)示意圖愛(ài)滋病病毒結(jié)構(gòu)圖愛(ài)滋病病毒結(jié)構(gòu)圖六、
9、病毒的增殖及人工培養(yǎng)六、病毒的增殖及人工培養(yǎng)(一)(一)病毒的增殖病毒的增殖1、吸吸附附:第第一一種種途途徑徑是是通通過(guò)過(guò)細(xì)細(xì)胞胞表表面面的的離離子子(Mg+2)進(jìn)進(jìn)行行吸吸附附,是是可可逆逆的的;第第二二種種途途徑徑是是通通過(guò)過(guò)細(xì)細(xì)胞胞膜膜受受體體來(lái)來(lái)完完成成吸吸附附,是不可逆的。是不可逆的。2、侵侵入入:通通過(guò)過(guò)細(xì)細(xì)胞胞膜膜的的胞胞飲飲作作用用進(jìn)進(jìn)行行,在在此此過(guò)過(guò)程程中中,病病毒毒直直接接穿穿過(guò)過(guò)細(xì)細(xì)胞胞膜膜,這這時(shí)時(shí)的的囊囊膜膜(胞胞膜膜)與與細(xì)細(xì)胞胞膜膜融融合合而而芯芯髓髓進(jìn)入細(xì)胞。進(jìn)入細(xì)胞。3、脫脫殼殼:有有的的病病毒毒在在侵侵入入的的過(guò)過(guò)程程中中還還要要脫脫殼殼,如如大大腸腸桿桿
10、菌菌T4噬噬菌菌體體就就是是這這樣樣。病病毒毒進(jìn)進(jìn)入入細(xì)細(xì)胞胞時(shí)時(shí),在在溶溶酶酶體體蛋蛋白白水水解解酶酶的的作作用用下完成脫殼,時(shí)間大約是幾分鐘到幾小時(shí)。下完成脫殼,時(shí)間大約是幾分鐘到幾小時(shí)。4、生生物物合合成成:DNA在在細(xì)細(xì)胞胞核核內(nèi)內(nèi)合合成成,RNA在細(xì)胞漿內(nèi)合成,在細(xì)胞漿內(nèi)合成,Pr在胞漿內(nèi)合成。在胞漿內(nèi)合成。5、裝裝配配和和釋釋放放:在在細(xì)細(xì)胞胞核核或或胞胞漿漿內(nèi)內(nèi)裝裝配配,形形成成核核衣衣殼殼。囊囊膜膜在在核核衣衣殼殼通通過(guò)過(guò)核核膜膜或或細(xì)細(xì)胞胞膜膜的的同同時(shí)時(shí)獲獲得得,病病毒毒顆顆粒粒以以出出芽芽方方式式釋釋放。放。(二)(二)病毒的人工培養(yǎng)病毒的人工培養(yǎng)1、細(xì)細(xì)胞胞培培養(yǎng)養(yǎng)法法
11、:?jiǎn)螁螌訉蛹?xì)細(xì)胞胞培培養(yǎng)養(yǎng)法法、懸懸浮浮培養(yǎng)法和固定培養(yǎng)法。培養(yǎng)法和固定培養(yǎng)法。2、雞雞胚胚培培養(yǎng)養(yǎng)法法:絨絨毛毛尿尿囊囊膜膜接接種種,用用1012日日齡齡雞雞胚胚進(jìn)進(jìn)行行;卵卵黃黃囊囊接接種種,用用5日齡雞胚。日齡雞胚。3、動(dòng)動(dòng)物物培培養(yǎng)養(yǎng)法法:用用幼幼齡齡無(wú)無(wú)特特定定病病原原的的動(dòng)動(dòng)物物試試驗(yàn)驗(yàn),主主要要用用于于V的的病病原原性性測(cè)測(cè)定定、疫疫苗苗效力的測(cè)定、抗血清的制備等。效力的測(cè)定、抗血清的制備等。第二節(jié)第二節(jié) 噬菌體噬菌體噬噬菌菌體體(Phage)是是一一種種侵侵染染細(xì)細(xì)菌菌的的微微生生物物病病毒毒,廣廣泛泛分分布布于于自自然然界界中中。由由于于噬噬菌菌體體在在發(fā)發(fā)酵酵工工業(yè)業(yè)中中的
12、的危危害害較較為為突突出出而而引起人們的廣泛重視。引起人們的廣泛重視。人人們們對(duì)對(duì)大大腸腸桿桿菌菌T系系噬噬菌菌體體進(jìn)進(jìn)行行了了大大量量的的研研究究,獲獲得得了了有有關(guān)關(guān)病病毒毒的的基基礎(chǔ)礎(chǔ)知知識(shí)識(shí)。因因?yàn)闉樗鞘且灰粋€(gè)個(gè)很很方方便便的的生生物物模模型型和和獨(dú)獨(dú)特特的的研研究究工工具具,因因?yàn)闉樗鞘且灰粋€(gè)個(gè)單單細(xì)細(xì)胞胞的的宿宿主和很簡(jiǎn)單的寄生物。主和很簡(jiǎn)單的寄生物。一、噬菌體的形態(tài)一、噬菌體的形態(tài)同其它病毒一樣,噬菌體由核酸和蛋白質(zhì)組成,核酸的單鏈或雙鏈分子組成環(huán)狀或線狀,病毒的外殼有不同的形狀和大小?;拘螒B(tài)有:蝌蚪形,微球形,線狀。二、噬菌體的生活周期二、噬菌體的生活周期(一)(一)
13、噬菌體生長(zhǎng)的測(cè)定:一步生長(zhǎng)曲線噬菌體生長(zhǎng)的測(cè)定:一步生長(zhǎng)曲線一一步步生生長(zhǎng)長(zhǎng)曲曲線線:少少量量病病毒毒與與敏敏感感細(xì)細(xì)胞胞接接觸觸,病病毒毒吸吸附附后后,高高倍倍稀稀釋釋?zhuān)^繼續(xù)續(xù)培培養(yǎng)養(yǎng),定定時(shí)時(shí)取取樣樣測(cè)測(cè)定定培培養(yǎng)養(yǎng)物物中中的的病病毒毒效效價(jià)價(jià),以以感感染染時(shí)時(shí)間間為為橫橫坐坐標(biāo)標(biāo),病病毒毒效效價(jià)價(jià)為為縱縱坐坐標(biāo)標(biāo),繪繪制制出出病病毒毒特特征征性性的的繁繁殖殖曲線,即一步生長(zhǎng)曲線曲線,即一步生長(zhǎng)曲線 潛伏期:釋放子代病毒粒子所需的最短時(shí)間,(噬菌體以分鐘計(jì),動(dòng)物病毒、植物病毒以小時(shí)或天計(jì)),大腸桿菌約25min 裂解量:每個(gè)受染細(xì)胞所釋放產(chǎn)生的子代病毒數(shù) 目,幾十到萬(wàn)個(gè)。裂解量=平穩(wěn)期的
14、平均噬菌斑數(shù)/潛伏期的平均噬菌斑數(shù) 具體實(shí)驗(yàn)方法:具體實(shí)驗(yàn)方法:對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的敏感菌懸浮液與適量的噬菌體混合,混合比例為101(避免幾個(gè)噬菌侵染一個(gè)菌體))數(shù)分鐘后,加入一定量的噬菌體抗血清,以中和 未被吸收的噬菌體 用培養(yǎng)液高倍稀釋?zhuān)悦獾诙挝剑ǜ腥荆┡囵B(yǎng) 含噬菌體樣品與敏感菌混合 平板培養(yǎng),計(jì)算噬菌斑數(shù)結(jié)果可見(jiàn):結(jié)果可見(jiàn):1、潛潛伏伏期期:吸吸附附后后開(kāi)開(kāi)始始一一段段時(shí)時(shí)間間,約約510min,噬噬菌菌體體的的數(shù)數(shù)量量不不見(jiàn)見(jiàn)增增加加,說(shuō)說(shuō)明明噬噬菌菌體體未完成復(fù)制和組裝。未完成復(fù)制和組裝。2、裂裂解解期期:感感染染后后2030min,平平板板中中噬噬菌菌斑斑數(shù)數(shù)量量突突然然直直線線上上
15、升升,表表示示噬噬菌菌體體已已從從寄寄主主細(xì)細(xì)胞中裂解釋放了。胞中裂解釋放了。3、裂裂解解量量:每每個(gè)個(gè)被被感感染染的的細(xì)細(xì)菌菌釋釋放放新新的的噬噬菌菌體的平均數(shù)稱(chēng)為裂解量。體的平均數(shù)稱(chēng)為裂解量。如圖所示:如圖所示:裂解期平均噬菌斑數(shù)裂解期平均噬菌斑數(shù)裂解量裂解量=潛伏期平均噬菌斑數(shù)潛伏期平均噬菌斑數(shù)三、毒性噬菌體三、毒性噬菌體通常把毒性噬菌體看作噬菌體的正常表現(xiàn)。大腸桿菌T4噬菌體即為毒性噬菌體。(一)毒性噬菌體侵入宿主細(xì)胞的過(guò)程(一)毒性噬菌體侵入宿主細(xì)胞的過(guò)程:分為五個(gè)階段1、吸吸附附:與細(xì)胞的特異性受體結(jié)合,一種噬菌體吸附后不影響另外一種噬菌體的吸附,例如:大腸桿菌T4噬菌體吸附于細(xì)胞
16、后,并不會(huì)影響到其它種類(lèi)的噬菌體在此細(xì)胞的吸附。2、侵侵入入:吸吸附附后后,噬噬菌菌體體的的核核酸酸部部分分注注入入到到細(xì)細(xì)胞胞中中,蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)殼殼體體留留在在外外面面,從從吸吸附附到到侵侵入入只需幾秒鐘幾分鐘。只需幾秒鐘幾分鐘。3、復(fù)復(fù)制制:噬噬菌菌體體核核酸酸進(jìn)進(jìn)入入宿宿主主細(xì)細(xì)胞胞后后,操操縱縱宿宿主主細(xì)細(xì)胞胞代代謝謝機(jī)機(jī)能能,大大量量復(fù)復(fù)制制噬噬菌菌體體核核酸酸,并并合合成成病病毒毒所所需需的的蛋蛋白白質(zhì)質(zhì),但但不不形形成成帶帶殼殼體體的的粒粒子。子。4、粒粒子子成成熟熟(裝裝配配):寄寄主主細(xì)細(xì)胞胞合合成成噬噬菌菌體體的殼體,并進(jìn)一步組裝成完整的噬菌體粒子。的殼體,并進(jìn)一步組裝成完
17、整的噬菌體粒子。5、寄寄主主細(xì)細(xì)胞胞裂裂解解(釋釋放放):噬噬菌菌體體粒粒子子成成熟熟后后,引引起起寄寄主主細(xì)細(xì)胞胞裂裂解解,釋釋放放出出病病毒毒子子,釋釋放放量量因因噬噬菌菌體體種種類(lèi)類(lèi)而而有有所所不不同同,一一個(gè)個(gè)寄寄主主細(xì)細(xì)胞胞可可釋放釋放1010000個(gè)噬菌體粒子。個(gè)噬菌體粒子。注意:注意:1、在在細(xì)細(xì)菌菌培培養(yǎng)養(yǎng)液液中中,細(xì)細(xì)菌菌被被噬噬菌菌體體感感染染,菌菌體體細(xì)細(xì)胞胞裂裂解解,渾渾濁濁的的菌菌懸懸液液變變成成為為透透明的裂解液。明的裂解液。2、在在雙雙層層平平板板固固體體培培養(yǎng)養(yǎng)基基上上,稀稀釋釋的的噬噬菌菌體體懸懸液液引引起起點(diǎn)點(diǎn)狀狀感感染染,在在感感染染點(diǎn)點(diǎn)上上進(jìn)進(jìn)入入反反復(fù)復(fù)的的侵侵染染過(guò)過(guò)程程,產(chǎn)產(chǎn)生生透透明明的的空空斑斑稱(chēng)稱(chēng)為噬菌斑。為噬菌斑。(二)溫和噬菌體和溶源性(二)溫和噬菌體和溶源性1、溫溫和和噬噬菌菌體體:有些噬菌體侵入宿主細(xì)胞后,并不象上述毒性噬菌體那樣發(fā)展,而是它們的核酸和宿主細(xì)胞同步復(fù)制,寄主細(xì)胞不裂解,這類(lèi)噬菌體稱(chēng)為溫和噬菌體。2、溶溶源源細(xì)細(xì)胞胞:含有溫和噬菌體的宿主細(xì)胞稱(chēng)為溶源細(xì)胞。思考題:1、噬菌體是如何感染宿主細(xì)胞的?簡(jiǎn)述噬菌體的增殖過(guò)程。2、病毒與其他微生物在生物學(xué)特性方面相比,有哪些特點(diǎn)?3、什么叫做溶源性細(xì)菌
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