氨基乙酰丙酸在祛痘美容方面的應用2

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1、,#,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,5-,氨基乙酰丙酸,(5-aminolevulinic acid,,簡稱,ALA),,是具有多種生物功能的生物活性劑,在醫(yī)藥上它屬第二代光敏劑,可治療多種不同病因的疾?。辉谵r牧業(yè)上它有多種不同的用處,它的應用范圍越來越多,倍受人們的重視?,F作如下介紹,:,ALA,在醫(yī)藥上用作光敏劑,通過光動力療法(,PDT,)來治療多種不同病因的疾病。光動力療法,(Photodynamic Therapy,,,PDT),是人們在醫(yī)療實踐中發(fā)現的一種新的治療方法,它是通過某些光敏物質,-,通稱光敏劑,在進入機體后,光敏劑在

2、生長旺盛、分裂速度快的異常組織細胞及某些病菌內的聚積濃度遠大于正常組織細胞,具有明顯的靶向性。當用一定波長的光進行照射時,光敏劑會在生物組織內發(fā)生光化學反應,產生具有細胞毒性的單態(tài)氧和其他自由基,從而引起細胞膜、細胞核和線粒體的損傷,使細胞壞死、凋亡,而達到治療疾病的目的。,這種治療方法有兩大特點,:,一是在正確的使用方法下,能把病變細胞和致病菌殺死,而正常組織細胞幾乎不受損傷,對皮膚和粘膜部位的疾病在治愈后不留下疤痕;它的另一特點是同一個藥物能治療多種不同病因的疾病,如,5,氨基乙酰丙酸,外用它能夠治療多種皮膚癌、痤瘡、扁平疣、鮮紅斑痣、銀屑病、尖銳濕疣、老年性黃斑變性、痔瘡、膀胱癌、子宮內

3、膜移位、宮頸糜爛、口腔粘膜疣狀增生及某些難以治療的皮膚病毒感染等;在美容方面可用于光子嫩膚、光子美白和祛皺祛斑;口服可治療乳腺癌、上消化道癌、直腸癌、腦膠質瘤、類風濕性關節(jié)炎以及防止血管形成術后的再度狹窄。,一,.ALA,生物功能及特性,:ALA,是一個具有多種生物活性功能的物質,它在人、植物、動物和微生物等多種生物體的生命活動中所不可缺少的物質。,ALA,在上述生物體內所起的作用,可以通過下圖來表達:,在正常情況下,,ALA,是由生物體自行合成的一個體內固有的物質,在人及動物體內是由甘氨酸、琥珀酸和輔酶,A,在,ALA,合成酶的促使下而合成的。在一系列酶促反應下,,ALA,代謝途徑是:,AL

4、A,膽色素原尿卟啉原,(六氫尿卟啉)糞卟啉原原卟啉原,原卟啉,血紅素。在植物體內,沿下述路線運行:谷氨酸,ALA,尿卟啉原原卟啉,葉綠素。,血紅素和葉綠素分別是動植物生命活動的重要物質,都是由,ALA,來合成的,可見,ALA,對生命體的重大意義。在生物合成血紅素和葉綠素的過程中,都必需先經過合成原卟啉,IX,,這是一個光敏物質。在某些微生物(細菌)內除生成原卟啉,IX,外,還生成尿卟啉、糞卟啉,也是屬卟啉類的光敏物質。,在正常情況下,生物體靠自身的反饋機制,自身合成,ALA,的速度,(,即第一限速反應,),跟原卟啉,生成血紅素,(,或葉綠素,),的速度,(,即第二限速反應,),是一致的,不會有

5、多余的原卟啉,有光照也不會產生光化學反應。當有外源性的,ALA,給入時,第一限速反應被沖破,外界擁進來的大量的,ALA,會很快變?yōu)樵策?,在細菌內除原卟啉,外還會產生尿卟啉、糞卟啉等,這時如有適當波長的光照射時,這些光敏物質就會在生物體內發(fā)生光化學反應,釋放出單生態(tài)的氧和一些自由基等細胞毒性物質,而使細胞壞死,凋亡。,利用,ALA,在生物體內的上述代謝特性,給于生物體,(,包括人、動物、植物和微生物,),不同劑量的外源性,ALA,,生物體會產生不同的效果,:,適當的低劑量可促進細胞的代謝功能、增強生物細胞的活力;高劑量并有一定波長的光能激發(fā)時,就會殺死生物細胞。這是,ALA,有著廣泛用途的主

6、要因素。,二,ALA-PDT,治療痤瘡的作用機理,:,1,痤瘡的病因及目前常規(guī)的治療方法,:,痤瘡的病因主要有以下三個方面:,(,1,),皮脂腺功能亢進。皮脂腺的發(fā)育和分泌受雄激素的支配,青春期時雄激素分泌旺盛使皮脂腺增大,引起皮脂分泌增多。另外,飲食不當也可促進皮脂腺異常分泌。,(,2,),毛囊皮脂腺導管角化過度,皮脂分泌排泄不暢。痤瘡患者的毛囊上角化異常,上皮細胞不能正常脫落,使毛囊口變小,皮脂堵塞在毛囊內,淤積在毛囊口,形成粉刺。,(,3,)微生物的異常生長。皮脂分泌旺盛,如果排泄不通暢,造就了病菌生長繁殖環(huán)境,滋生丙酸桿菌屬痤瘡菌(以下簡稱痤瘡桿菌)、葡萄球菌、毛囊蟲(俗稱,“,螨蟲,

7、”,)等痤瘡的病原微生物。毛囊內的微生物及其代謝產物都可引起炎癥反應,導致紅腫化膿等現象。,針對痤瘡的病因,常規(guī)的治療方法是:,(,1,)內服或外用抗生素以殺滅致病菌:如四環(huán)素、美滿霉素、強力霉素、紅霉素等,因痤瘡桿菌對抗生素產生耐藥性,其治療效果越來越不令人滿意。,(,2,)異維,A,酸(,isotretinoin,):異維,A,酸對皮脂腺的分泌和痤瘡桿菌有較強的抑制作用。但服藥后可出現口唇干燥、皮膚脫屑、脫發(fā)、血脂升高等副反應。本藥有致畸作用,不適于育齡期,(,3,)皮質類固醇激素:如曲安西龍混懸液、潑尼龍男女服用。混懸液,也可用長效皮質激素制劑。激素類藥物雖然有很強的抑制炎癥反應的作用,

8、但副作用亦較多。,(,4,)內分泌療法:皮脂腺的發(fā)育受雄激素支配,因此具有拮抗雄性激素作用的藥物對痤瘡具有治療作用。但該療法可引起內分泌的紊亂,因此一般不主張使用。,(,5,)物理治療:液氮冷凍噴霧法或點涂,適用于結節(jié)性或囊腫性痤瘡,但易留下疤痕。,(,6,)中醫(yī)治療:中醫(yī)稱本病為,“,肺風粉刺,”,,治則宜宣肺清熱,可內服枇杷清肺飲(黨參、枇杷葉、黃連、桑白皮、黃柏、甘草),外用顛倒散(大黃、硫磺),但作用緩慢,效果不理想。,2,ALA,PDT,法治療痤瘡的作用機理,國內外學者對,ALA,PDT,法治療尋常痤瘡的作用機理進行了系統(tǒng)深入的研究,針對尋常痤瘡的發(fā)病原因,本療法通過抑制皮脂腺過度分

9、泌、抑制毛囊口上皮角化亢進、打通堵塞的毛囊孔和殺死毛囊內的致病菌等而取得顯著的療效。現綜述如下:,(,1,),ALA,PDT,對毛囊皮脂腺分泌有明顯的抑制作用,另據,Mee Sook Jun,等人報道,,ALA,在人的離體毛囊皮脂腺單位中引起的原卟啉,IX,主要表達在皮脂細胞內。從頭皮移植術病人取得有毛的頭皮部位樣本,顯微解剖后將所有細胞培養(yǎng),各種細胞的,PpIX,含量按每,g,細胞蛋白質中含,PpIX,的量進行計算,用分光光度計測定并與,PpIX,的標準曲線作比較;用,Bio-Rad,蛋白質測定法測定細胞蛋白質含量。結果:所得細胞,PpIX,含量,(Fig.1A),在真皮乳頭細胞、表皮角化細

10、胞、外根鞘細胞、纖維原細胞、皮脂細胞中依次遞增,平均數,標準偏差分別為,21922.6,42288.6,45731.2,57015.8,67929.7(ng/,g,蛋白質,),。在受試細胞中,皮脂細胞中的,PpIX,含量最高,是真皮乳頭細胞的三倍多。但表皮角化細胞和外根鞘毛囊角化細胞之間沒有明顯差別。,Fig.1,人體毛囊皮脂腺細胞中,ALA,引起的細胞,PpIX,含量(,A,)和皮脂細胞中,PpIX,在細胞內的位置(,B-D,),(,A,)全部細胞用,100,g/mlALA,處理,48,小時,細胞,PpIX,含量以,PpIX/,g,細胞蛋白質的,ng,來表示。,Sebocyte,皮脂細胞,;

11、ORS,外根鞘細胞;,DP,真皮乳頭細胞;,EK,表皮角化細胞;,FB,纖維原細胞。(,B-D,),(B),對照皮脂細胞;,(C),用,50,g/mlALA,處理,48,小時的皮脂細胞;,(D),次級培養(yǎng)的皮脂細胞。,低溫切片中,PpIX,的熒光圖象顯示了,PpIX,在離體毛囊皮脂腺單位中的位置,在用,ALA,培養(yǎng),6,小時的毛囊皮脂單位中,只有皮脂腺周圍區(qū)域,PpIX,的表達最明顯,而對照樣品未見,PpIX,(,Fig.2A,和,B,)。在用,ALA,處理,24,小時的單元中(,Fig.2E,),全部毛囊皮脂腺單位,包括皮脂腺,毛囊和表皮,都有明顯的,PpIX,表達。在毛球基質和外根鞘細胞中

12、都測得強的表達,毛囊皮脂腺單位的真皮乳頭細胞中觀察到的,PpIX,表達較弱。皮膚纖維原細胞沒有表達。綜上結果,,PpIX,表達的位置和密度與每一份毛囊皮脂腺單位中細胞密度及增殖活性有很大關系。見,H&E,染色和,Ki-67,測定(,Fig.2F,和,G,)。,Fig.2 PpIX,在離體人毛囊皮脂單位中的位置。,(,A,)對照樣本;(,B,)用,1mg/mlALA,培養(yǎng),6,小時;(,C,),6,小時,ALA,培養(yǎng)后再在沒有,ALA,的培養(yǎng)基中培養(yǎng),24,小時;(,D,),6,小時,ALA,培養(yǎng)后再在沒有,ALA,的培養(yǎng)基中培養(yǎng),48,小時;(,E,)用,1mg/mlALA,培養(yǎng),24h,(,

13、F,),H&E,染色;(,G,),Ki-67,增殖測定。(,a,,,a-1,)表皮角化細胞;(,b,,,b-1,)皮脂腺;(,c,,,c-1,)毛外根鞘角化細胞;(,d,,,d-1,)在毛球中的真皮乳頭,T,和基質細胞;(,e,)真皮纖維原細胞。在(,G,)上的綠點標記(白色箭頭)表示增生擴散細胞。,本研究證明,人的離體毛囊皮脂腺細胞用,ALA,處理后,產生明顯的原卟啉,IX,,皮脂腺周圍區(qū)域,PpIX,的表達最明顯,親脂性的,PpIX,容易在皮脂腺中油脂充足的環(huán)境中聚積。該實驗證實局部用,ALA,會導致,PpIX,在皮脂腺中優(yōu)先聚積,當光照時就會產生光動力效應損傷皮脂細胞減少皮脂分泌。,(2

14、).,對毛囊皮脂腺過度角質化的作用:,毛囊皮脂腺過度角質化、皮脂分泌旺盛及痤瘡桿菌的侵害是尋常痤瘡的主要發(fā)病機理。我們給家兔耳外涂抹煤焦油,使其毛孔擴張、毛囊口部位角化過度、皮損略突于皮面,似痤瘡樣。病理檢查可見角質層增厚,呈明顯角化過度及角化不全,皮脂腺毛囊口部位有由皮脂、角化細胞及角化不全細胞組成的栓塞物。以此為動物痤瘡模型,進行,ALA-PDT,治療試驗。,由于局部用,ALA,后,皮膚角化細胞及皮脂腺吸收了外源性,ALA,,在體內產生原卟啉,IX,,經波長為,632nm,、劑量為,150J/c,的光照,皮膚角化細胞及皮脂細胞被滅活。病理切片可見,表皮增厚明顯減輕,毛囊口堵塞程度減輕,其內

15、角化物質減少,部分已接近正常組織。按組織學判定級別標準,屬,0-1,級;,ALA-PDT,法優(yōu)于陽性對照藥克林霉素甲硝唑搽劑的療效。與對照組相比,有統(tǒng)計學意義(,P0.01,),(,3,),ALA,PDT,對毛囊內微生物的滅活作用,在,405nm,激發(fā)時卟啉的特征發(fā)射峰為,612nm,。用高效液相分析痤瘡桿菌的卟啉含量,顯示痤瘡桿菌產生的卟啉主要是糞卟啉(見,Fig3,中的上圖)。細菌內產生的卟啉保留時間是,12,分鐘與標準盒中糞卟啉的保留時間一致。加入,100,g/ml ALA,,使糞卟啉在,24,小時培養(yǎng)菌中明顯增加(,Fig3,中的下圖)。兩個案例中的卟啉都是從相同數目的細菌中提取的。,

16、Fig3.,從,P.,痤瘡菌中萃取的卟啉的,HPLC,(上圖),和用含,100g/mlALA,培養(yǎng)的培養(yǎng)物中萃取的卟啉的,HPLC,(下圖)。,生長時間對卟啉量增加的作用如,Fig4,所示。加入,ALA,(,100g/ml,)促進了卟啉的增加。有,ALA,存在時產生的糞卟啉的量明顯提高。試驗開始時從,“,起始平皿,”,中轉移來的肉湯培養(yǎng)基的細胞懸液中測得卟啉量幾乎是零。,Fig4.,不同生長階段的,P.,痤瘡菌的培養(yǎng)物的糞卟啉熒光強度。,在液體培養(yǎng)基中有()或沒有(),ALA,(,100g/ml,)時生長,24,,,48,,,72,,,96,小時。提取每一培養(yǎng)時間的樣品進行,HPLC,分析。記錄相同數量細胞提取物中糞卟啉的熒光強度。,痤瘡桿菌在厭氧性液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),24,小時,(,A),為沒有照射的對照培養(yǎng)菌存活率。,(B),為用,75J/cm,的藍光照射一次,細菌的成活數減少一個或兩個數量級。(,C,)為連續(xù)照射,2,次,每次間隔時間,24,小時(在生長,24,和,48,小時時照射)培養(yǎng)物成活量減少四個數量級。(,D,)為,24,,,48,,,72,小時照三次減少五個數量級。,(E

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