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1、
第四部分 淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù) 實驗12 乳酸脫氫酶同工酶的分離
1電泳后,取出凝膠板,經(jīng)染色后,在37 ℃水浴上保溫20~30 min可觀察到LDH同工酶呈現(xiàn)( )
A.紫紅色區(qū)帶
B.藍紫色區(qū)帶
C.磚紅色區(qū)帶
D.橘紅色區(qū)帶
2下列不屬于LDH的同工酶的是( )
A.H4 B.H3M
C.H2M3 D.HM3
3本實驗所選用的動物血清來自( )
A.牛、羊、馬
B.胎牛、小牛、老牛
C.雌性成年牛、雄性成年牛、幼年牛
D.牛、水稻、人
4LDH同工酶的用途有( )
A.診斷性別
B.判斷個體的代謝旺盛程度
C.輔助診斷疾病
2、
D.用于指導動物飼料的喂養(yǎng)
5本實驗電泳所用的介質(zhì)是( )
A.阿拉伯明膠
B.瓊脂
C.凝膠
D.明膠
6若某同學做完該實驗電泳得到如下結(jié)果,則以下的分析錯誤的是( )
A. 1與1′比較可知,小牛中M4酶的含量較胎牛少,而老牛中該酶缺乏
B.由1′與2′、3′、4′、5′可知,小牛中LDH的5種同工酶都有
C.整個譜帶可知牛在不同的胚胎發(fā)育時期,LDH同工酶的種類、含量都有差異
D.由結(jié)果可知,這5種酶一定是同工酶
7單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術(shù)進行早期診斷。鐮刀型細胞貧血癥是一種在地中海地區(qū)發(fā)病率較高的單基因遺傳病。已知紅細胞正常個體的基因型
3、為BB、Bb,鐮刀型細胞貧血癥患者的基因型為bb。有一對夫婦被檢測出均為該致病基因的攜帶者,為了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都進行產(chǎn)前診斷。下圖為其產(chǎn)前核酸分子雜交診斷和結(jié)果示意圖。
(1)從圖中可見,該基因突變是由于引起的。巧合的是,這個位點的突變使得原來正常基因的限制酶切割位點丟失。正常基因該區(qū)域上有3個酶切位點,突變基因上只有2個酶切位點,經(jīng)限制酶切割后,凝膠電泳分離酶切片段,與探針雜交后可顯示出不同的帶譜,正常基因顯示條,突變基因顯示條。
(2)DNA或RNA分子探針要用等標記。利用核酸分子雜交原理,根據(jù)圖中突變基因的核苷酸序列(—ACGTGTT—),寫出作為探針的核糖核苷酸
4、序列。
(3)根據(jù)凝膠電泳帶譜分析可以確定胎兒是否會患有鐮刀型細胞貧血癥。這對夫婦4次妊娠的胎兒Ⅱ1~Ⅱ4中基因型BB的個體是,Bb的個體是,bb的個體是。
參考答案
1答案:B 解析:染色結(jié)果為藍紫色區(qū)帶。
2答案:C 解析:由于LDH有2種亞基L和M以不同比例組成的四聚體,而C中出現(xiàn)了5聚體,故錯。
3答案:B 解析:由于在動物細胞分化及胚胎發(fā)育過程中,LDH各種同工酶的比例不同,根據(jù)對照實驗的唯一變量原則,確定為同一種動物不同時期的血清,所以選B。
4答案:C 解析:LDH同工酶的分布有明顯的組織特異性,所以根據(jù)其組織特異性診斷疾病。
5答案:C 解析:電泳所用的介質(zhì)有多種
5、,本實驗所用的是凝膠。
6答案:D 解析:這是如何分析同工酶電泳結(jié)果的題目。選項D是錯的,酶的催化功能不能由電泳結(jié)果推知。
7解析:從圖中可見該基因突變是由于堿基A變成T引起的,突變后的基因只有2個酶切位點,而正常基因有3個酶切位點,所以用同一種限制酶切割后,突變基因產(chǎn)生一條目的基因的片段,正?;騽t產(chǎn)生兩條目的基因的片段。用放射性同位素標記的探針(根據(jù)堿基互補配對原則寫出RNA探針的堿基序列)進行雜交,可知正?;驎a(chǎn)生兩條雜交帶,突變基因只產(chǎn)生一條雜交帶。從圖中可看出,Ⅱ1和Ⅱ4含有兩條雜交帶,說明兩者的基因型是BB;Ⅱ2只含有一條雜交帶,說明Ⅱ2的基因型是bb;Ⅱ3含有三條雜交帶,說明Ⅱ3個體既含有B又含有b,其基因型是Bb。
答案:(1)堿基對改變(或A變成T) 2 1
(2)放射性同位素(或熒光分子等) —UGCACAA—
(3)Ⅱ1和Ⅱ4?、? Ⅱ2
6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375