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1、第二章第二章 克隆技術(shù)克隆技術(shù)1 1、定義：、定義： 生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的體的潛能潛能的特性。的特性。 2 2、原理：、原理： 生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因，從理論上講，生物體所必需的全部基因，從理論上講，生物體的每一個體的每一個活細(xì)胞活細(xì)胞都應(yīng)該具有全能性。都應(yīng)該具有全能性。 3 3、大?。?、大?。?受精卵受精卵生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞體細(xì)胞體細(xì)胞1 1、植物細(xì)胞的全能性、植物細(xì)胞的全能性不同植物或同一植物的不同
2、基因型的個體，不同植物或同一植物的不同基因型的個體，細(xì)胞的全能性表達(dá)程度不同細(xì)胞的全能性表達(dá)程度不同 2 2、植物組織培養(yǎng)的程序、植物組織培養(yǎng)的程序外植體外植體脫分化脫分化再分化再分化胚性細(xì)胞胚性細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而特點(diǎn)：細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大。細(xì)胞核大。切取切取接種接種愈傷組織的形成愈傷組織的形成試管苗的形成試管苗的形成試管苗大規(guī)模培養(yǎng)試管苗大規(guī)模培養(yǎng)移栽至土壤移栽至土壤器官培養(yǎng)器官培養(yǎng)指以植物的根、莖、葉、花、果等器官為外植指以植物的根、莖、葉、花、果等器官為外植體的離體無菌培養(yǎng)。體的離體無菌培養(yǎng)。指以單個游離細(xì)胞為外植體的離體無菌培養(yǎng)。指以單個游離細(xì)胞為外植體的離體無菌培
3、養(yǎng)。 細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)3 3、器官培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng) 無機(jī)營養(yǎng)成分：無機(jī)營養(yǎng)成分：C C、H H、O O大量元素及部分微量元素大量元素及部分微量元素 有機(jī)營養(yǎng)成分有機(jī)營養(yǎng)成分 含含N N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸物質(zhì)：包括維生素和氨基酸 碳源：碳源：2%2%5%5%的蔗糖的蔗糖 瓊脂：起支持作用瓊脂：起支持作用 激素：生長素，細(xì)胞分裂素和赤霉素激素：生長素，細(xì)胞分裂素和赤霉素 PHPH值：值：5.05.06.06.0適量的適量的激動素激動素和和細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素配比，可以誘導(dǎo)配比，可以誘導(dǎo)芽芽的分化。的分化。適量的適量的吲哚乙酸吲哚乙酸及適當(dāng)減除其他激素，則可以誘導(dǎo)生及適當(dāng)減除
4、其他激素，則可以誘導(dǎo)生根根。4 4、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基、植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基5 5、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用、植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用（1 1）試管苗的快速繁殖）試管苗的快速繁殖（2 2）無病毒植物的培育）無病毒植物的培育（3 3）提取原料）提取原料（4 4）人工種子）人工種子（5 5）轉(zhuǎn)基因植物的培育）轉(zhuǎn)基因植物的培育 人工種子解決有些植物結(jié)子困難、發(fā)芽率人工種子解決有些植物結(jié)子困難、發(fā)芽率低、繁殖困難等問題。低、繁殖困難等問題。人工種子人工種子6 6、原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程、原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程白菜白菜紫甘藍(lán)紫甘藍(lán)“ “超級植物超級植物”(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交植
5、物體細(xì)胞雜交植物植物A A細(xì)胞細(xì)胞植物植物B B細(xì)胞細(xì)胞去壁去壁原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體融合融合融合體融合體雜種細(xì)胞雜種細(xì)胞愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株去壁的常用方法：去壁的常用方法：酶解法（纖維素酶、果膠酶等）酶解法（纖維素酶、果膠酶等） 原生質(zhì)體融合方法原生質(zhì)體融合方法：物理法：離心、振動、電刺激等物理法：離心、振動、電刺激等 化學(xué)法：聚乙二醇（化學(xué)法：聚乙二醇（PEGPEG） 再生壁再生壁細(xì)胞細(xì)胞分裂分裂細(xì)胞細(xì)胞分化分化7 7、植物克隆的發(fā)展、植物克隆的發(fā)展1、下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義，正確的是：、下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義，正確的是：A A、每個生
6、物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能、每個生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能B B、生物體內(nèi)的任何一個細(xì)胞可以完成該個體的全部功能、生物體內(nèi)的任何一個細(xì)胞可以完成該個體的全部功能 C C、生物體的每一個活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能、生物體的每一個活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能 D D、生物體的每個細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、生長、衰老、生物體的每個細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、生長、衰老、 死亡的全過程死亡的全過程 2、在生物體內(nèi)，細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化、在生物體內(nèi)，細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化為不同的組織、器官，是因?yàn)椋簽椴煌慕M織、器官，是因?yàn)椋?A A、細(xì)胞喪失了全能性、細(xì)胞喪失了全能性B
7、 B、基因的表達(dá)有選擇性、基因的表達(dá)有選擇性C C、不同的細(xì)胞內(nèi)基因不完全相同、不同的細(xì)胞內(nèi)基因不完全相同 D D、在個體發(fā)育的不同時期，細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化、在個體發(fā)育的不同時期，細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化 CB練習(xí)：練習(xí)：1 1在離體的植物器官、組織或細(xì)胞分化形成愈傷在離體的植物器官、組織或細(xì)胞分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的（組織的過程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的（ ） A A消毒滅菌消毒滅菌 B B適宜的溫度適宜的溫度 C C充足的光照充足的光照 D D適宜的養(yǎng)料和激素適宜的養(yǎng)料和激素2 2下列屬于組織培養(yǎng)的是（下列屬于組織培養(yǎng)的是（ ） A A花粉培養(yǎng)成單倍體植株花粉
8、培養(yǎng)成單倍體植株 B B芽發(fā)育成枝條芽發(fā)育成枝條 C C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū) D D未受精的卵發(fā)育成植株未受精的卵發(fā)育成植株C CA A練習(xí)：練習(xí)：1 1植物體細(xì)胞雜交尚未解決的問題有（植物體細(xì)胞雜交尚未解決的問題有（ ） A A去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體去掉細(xì)胞壁，分離出有活力的原生質(zhì)體 B B將雜種細(xì)胞培育成植株將雜種細(xì)胞培育成植株 C C讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的 優(yōu)良性狀優(yōu)良性狀 D D尚未培育出屬間雜種植物尚未培育出屬間雜種植物2 2甲植物體細(xì)胞的基因型為甲植物體細(xì)胞的基因型為AaAa，乙植物體細(xì)胞的，乙植物體細(xì)胞的 基因型為基因型為BbBb，去壁后用，去壁后用PEGPEG將這兩種植物細(xì)胞融將這兩種植物細(xì)胞融 合，則得到的雜種體細(xì)胞的基因型可能為（合，則得到的雜種體細(xì)胞的基因型可能為（ ） A AAaBbAaBb B BAAaaAAaa C CBBbbBBbb D DAABBAABBA AC C練習(xí)：練習(xí)：
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