《實驗實訓(xùn)指導(dǎo)書》

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1、實驗一 藥理學(xué)實驗基本知識和技術(shù)實驗?zāi)康模?1、掌握基本操作，鍛煉動手、動腦能力；2、更好地掌握藥理學(xué)基本理論知識；3、培養(yǎng)科學(xué)思維。實驗內(nèi)容： 一、藥理實驗的基本目的與要求二、實驗動物：1、動物的選擇；2、動物的標(biāo)記與捉拿、固定方法；3、動物的取血方法（尾尖、眼眶靜脈叢、摘眼球、斷頭）；4、動物的給藥方法（灌胃、腹腔、皮下、尾靜脈）；5、動物的麻醉方法；6、動物的處死方法。三、實驗設(shè)計基本原則。實驗步驟：一、藥理學(xué)實驗的基本目的與要求藥理學(xué)實驗課在藥理學(xué)教學(xué)中占有非常重要的地位。 藥理學(xué)實驗課的目的在于通過 實驗驗證藥理學(xué) 的基本理論，加深理解與掌握藥理學(xué)的基本知識和規(guī)律；也是了解獲得藥 理

2、學(xué)知識的科學(xué)途徑。同時，培養(yǎng)學(xué)生獨立思考，獨立工作，科學(xué)思維的能力；培養(yǎng)學(xué)生 動手操作、分析問題和解決問題的能力；還應(yīng)培養(yǎng)學(xué)生對科學(xué)工作的嚴(yán)肅的態(tài)度、嚴(yán)格的 要求、嚴(yán)密的工作方法及實事求是的工作作風(fēng)。為了達(dá)到上述目的，要求做到下列事項：1. 實驗前：預(yù)習(xí)實驗內(nèi)容并復(fù)習(xí)相關(guān)理論知識；2. 實驗時：（1）實驗分小組進(jìn)行，實驗前分工明確，實驗時密切配合；（2）確定實驗儀器、藥品、動物與實驗指導(dǎo)相符時，將實驗器材妥善安排，正確裝 置、保管；（3）實驗操作按步驟進(jìn)行，仔細(xì)觀察實驗中出現(xiàn)的現(xiàn)象，實事求是地做好記錄；（4）注意愛護(hù)動物、節(jié)約實驗藥品；（5）實驗過程中保持 實驗室肅靜、清潔。3. 實驗后： 各

3、組同學(xué)將實驗動物處死，實驗臺擦干凈，將實驗方盤送回準(zhǔn)備室； 值日生搞好實驗室衛(wèi)生，將死亡動物送至指定場所； 整理實驗結(jié)果，經(jīng)分析思考作出結(jié)論，按要求寫出實驗報告，按時交給指導(dǎo)老師。實驗報告的書寫1. 題目2. 目的3. 原理4. 材料：實驗動物，器材，藥品5. 方法：用自己的語言簡單扼要描述出來；6. 結(jié)果：要求真實、清楚；7. 討論：將實驗結(jié)果進(jìn)行比較、分析；實驗中有哪些不足之處；結(jié)果異?；蚴?敗的原因；8. 結(jié)論：將實驗結(jié)果進(jìn)行歸納總結(jié)，應(yīng)帶有提示性質(zhì)。二、實驗動物1、動物的選擇： 藥理學(xué)實驗中常用的動物有青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、貓、狗、猴等。動 物對藥物的反應(yīng)具有種屬差異性，

4、可根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵筮x用不同的實驗動物。例如：（ 1） 小白鼠：適用于需大量動物的實驗，如某些藥物的篩選，半數(shù)致死量的測定。也較 適用于避孕藥實驗、抗炎鎮(zhèn)痛藥實驗、中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥實驗、抗腫瘤藥及抗衰老藥實驗等。（2）大白鼠：比較適用于抗炎藥物實驗，血壓測定、利膽、利尿藥實驗，也可用于進(jìn)行亞 急性和慢性毒性實驗。（3）豚鼠：因其對組胺敏感，并易于致敏，故常被選用于抗過敏藥、平喘藥和抗組胺藥的 實驗。 也常用于離體心臟、 心房、腸管實驗。 又因它對結(jié)核敏感， 常用于抗結(jié)核病藥的實驗。（4）家兔：常用于觀察研究腦電生理作用，藥物對小腸的作用。由于家兔體溫變化敏感， 也常用于體溫實驗，用于熱原檢查。（

5、5）狗：狗是記錄血壓，呼吸最常用的大動物。還可利用狗做成胃瘺、腸瘺，以觀察藥物 對胃腸蠕動和分泌的影響。在進(jìn)行慢性毒性實驗時，也常采用狗。（ 6）猴 是接近于人類的高級動物。神經(jīng)系統(tǒng)比較發(fā)達(dá)，常用于觀察藥物對行為的影響。 獼猴的月經(jīng)周期和人一樣，是研究生殖課題的首選動物。 另外，新藥臨床前毒性評價， 也需 要使用猴。2、動物的標(biāo)記與捉拿、固定方法（ 1）動物的標(biāo)記 狗、兔等較大的動物可用特制的鋁質(zhì)號碼牌固定在頸部或耳上。大鼠、小鼠和家兔多用 染色法，一般用 1的苦味酸溶液（黃色）或 5中性紅溶液（紅色）涂于動物體表不同部 位的皮毛處，代表不同號碼。編號原則是先左后右，自前到后。（2）動物捉拿、

6、固定方法 小白鼠 右手抓住其尾部放在鼠籠蓋鐵紗網(wǎng)上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起頸背部皮 膚，并以左手的小指、無名指固定其尾部，便可將小鼠固定在手上。 大白鼠 用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其頭部，其余三指夾住背腹部即 可固定。 豚鼠 豚鼠性情溫和不咬人，用手握住軀干即可。 家兔可用一手抓住家兔頸背部皮膚， 將兔提起，另一手托其臀部， 使兔呈坐位姿勢。在進(jìn)行仰 位手術(shù)操作時，可用繩帶將其四肢仰位捆綁在兔手術(shù)臺上。頭部用兔頭固定夾固定。3、動物的取血方法（1）小鼠和大鼠 頸靜脈或頸動脈取血：麻醉動物，背部固定，頸部去毛，碘酒消毒，切開皮膚，分離 出動脈或靜脈， 將注射針平行

7、刺入血管， 慢慢回抽針?biāo)纯扇⊙?動脈取血時，亦可將遠(yuǎn)心 端結(jié)扎，用動脈夾夾住近心端，在動脈中央剪一小口，插入聚乙烯管，然后放開動脈夾，血 液可自動流出。兔和豚鼠也常用此方法取血，手術(shù)操作與大鼠相似。 尾尖取血：將鼠固定在鐵絲籠或特別筒內(nèi)，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾（小鼠1mmr2mm大鼠5mmr 10mr），用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即從尾尖流出。小鼠每次 可采血 0.1ml ，大鼠每次可采血 0.5ml 。注意：只剪去尾尖，如剪去過多組織，反而流血少。 下次取血時，只需將尾尖血痂剪掉即可。 眼球取血： 左手持鼠， 使眼球突出， 并使頭向下。 右手持彎曲鑷， 鉗夾一側(cè)眼球根部， 將眼

8、球摘除。血液即可從斷裂的眼眶動物、靜脈涌出，血量約為鼠體重的4%5%,適用于一次性取血。 眼眶后靜脈叢取血： 固定鼠頭部皮膚, 輕輕向后壓迫頸部兩側(cè), 使頭部靜脈回流受阻,眼球充分外突，用內(nèi)徑11.5mm的毛細(xì)血管 朿9入下眼瞼與眼球之間， 輕輕向眼底部方向移 動,血即可流入玻璃管內(nèi),一般兩眼可各取一次。 斷頭取血： 用剪子剪斷鼠頭, 立即將鼠頸部向下, 提起動物, 并對準(zhǔn)已準(zhǔn)備好的容器,可接取所需血液。小鼠可取血約1ml，大鼠可取血約 8ml。（2）家兔 心臟取血：將家兔背位固定，在胸骨左緣3mm第34肋間隙，觸及心跳最明顯部位，以 8 號針頭9入，即可有血流入注射器內(nèi)，亦可抽取，如沒9入心

9、臟，一定要將針提到皮下改變方向,再重新9入。 耳緣靜脈取血：將耳根部壓緊，拔去耳緣毛，用酒精涂擦使血管擴(kuò)張明顯，以67號針頭,針尖向離心方向9入,緩慢抽取血液。 股動脈、靜脈取血：將家兔麻醉、背位固定，手術(shù)分離出股動脈或靜脈，插入套管即 可根據(jù)需要量取血。4、動物的給藥方法（1）小鼠 、大鼠 灌胃法 （i.g.） ：以左手固定鼠后, 使其腹部朝上,頸部伸直。右手持配有灌胃針頭的 注射器,自口角插入口腔,再從舌面沿上腭進(jìn)入食道。 腹腔注射 （i.p.） ：以左手固定鼠, 方法同灌胃, 右手持注射器, 取 30 度角將針頭從下 腹部向頭端9入腹腔。進(jìn)針部位不宜過高,9入不宜太深,以免傷及內(nèi)臟。 皮

10、下注射 （s.c.） ：用左手固定鼠后,右手持注射器于拇指和食指捏起的皮膚處進(jìn)針即 可。 靜脈注射 （i.v.） ：將鼠置于特制的固定筒內(nèi)或倒置的大漏斗下,讓其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或?qū)⑹笪苍?0C熱水中浸泡半分鐘使血管擴(kuò)張。左手拉尾端，右手持注射器將針頭9入尾靜脈,推入藥液。（2）家兔 灌胃：需兩人合作進(jìn)行。一人取坐位用兩腿夾持兔身，左手握家兔雙耳，右手抓住兩前肢。另一人將木制開口器橫插家兔口內(nèi), 壓住舌頭并固定之。 取 8號導(dǎo)尿管從開口器中部小 孔插入食道。 插管時如誤入氣管會出現(xiàn)動物的掙扎和呼吸困難。 也可將導(dǎo)尿管的外端浸入水 中,如有氣泡吹出,表示插在氣管內(nèi),此時應(yīng)拔管重插

11、。當(dāng)判明導(dǎo)尿管在食道以內(nèi)后,用注 射器接通導(dǎo)尿管將藥液推入。 皮下、腹腔注射：給藥方法基本上同小鼠,唯針頭可稍大,給藥量可稍多。皮下與肌內(nèi)為 0.5 1.0/mg，腹腔為 1.0 5.0ml/mg。 靜脈注射：將家兔置固定箱內(nèi)，撥去耳殼外緣的毛，選擇一條比較明顯的耳緣靜脈，用酒精棉球涂擦皮膚, 使血管顯露。 用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部, 食指墊在兔耳注射處 的下面,右手持注射器,將針頭從近耳尖處9入,當(dāng)確認(rèn)針頭在血管中后,將藥液推入。5、動物的麻醉方法（1）局部麻醉：常采用 2%普魯卡因做皮下浸潤注射,可用于局部手術(shù)。（2）全身麻醉： 吸入麻醉：可將乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩內(nèi)，利用乙醚揮發(fā)

12、的性質(zhì)，經(jīng)肺泡吸收，作用較快,適用于小鼠、大鼠短時間麻醉。 注射麻醉：常用戌巴比妥鈉和烏拉坦。注意事項：配制注射用麻醉劑，一般用蒸餾水，也可用生理鹽水。靜脈麻醉時，劑量要準(zhǔn)確、濃度要適中，注射速度要緩慢，均勻。冬季作實驗時，應(yīng)將 藥液加溫到動物體溫水平。密切觀察動物眼瞼， 角膜及趾反射，避免麻醉過深引起動死亡。一旦麻醉過量，盡早采 取人工呼吸等措施。6、動物的處死方法（1）小鼠和大鼠常采用頸椎脫臼法，即用左手拇指和食指將其頭部緊按在硬的物體上，右手捏住鼠尾， 用力向后牽拉，使頸椎脫位，鼠可瞬間死亡。大鼠也常用斷頭法處死。（2）家兔空氣栓塞法：用50100ml注射器，往靜脈內(nèi)迅速注入空氣，動物因

13、血管氣栓致死。家 兔注射空氣量為 1020ml。三、實驗設(shè)計基本原則1、隨機(jī)原則使每一實驗對象都有同等的機(jī)會抽到實驗組或?qū)φ战M中，除處理因素外其他因素盡可 能均衡一致，從而抵消非實驗因素的影響。2、對照原則（1）組間對照：指在實驗中設(shè)立若干平行組，如空白對照（等量的生理鹽水）和標(biāo)準(zhǔn)品 對照（等量典型藥物）。實驗時注意實驗組和對照組例數(shù)相等。（2）自身前后對照：指在同一個體觀察給藥前后某些指標(biāo)的變化，或者兩種藥物一前一后的交叉比較，這樣既可減少個體差異，還節(jié)約了動物（尤其是大動物），兩種藥物交叉比較時，間隔時間應(yīng)參考藥物的半衰期。3、重復(fù)原則即實驗過程需多次重復(fù)進(jìn)行。它包含二個含義，即重復(fù)數(shù)和重

14、現(xiàn)性。重復(fù)數(shù)即動物的個數(shù)， 統(tǒng)計學(xué)上叫“樣本數(shù)”；重現(xiàn)性即在動物、藥品、器材及環(huán)境因素等相同條件下，實驗結(jié)果 可靠穩(wěn)定地重復(fù)出來。實驗提示：學(xué)生通過本次實驗學(xué)習(xí)要求熟悉、掌握藥理學(xué)實驗中動物的選擇、標(biāo)記、捉拿、固定以及常用取血、給藥、麻醉、處死的方法。為后續(xù)的實驗操作打下良好的基礎(chǔ)。實驗思考：如何設(shè)計實驗可以減少實驗誤差。實驗二不同給藥途徑對藥物作用的影響實驗?zāi)康模河^察不同給藥途徑對硫酸鎂作用的影響。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、天平、Iml注射器、小鼠灌胃針頭。藥品：15%硫酸鎂（含水）溶液。 動物：小白鼠2只，體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：取小鼠2只，分別稱重并標(biāo)記

15、。一只小鼠腹腔注射 15%硫酸鎂溶0.1mI/I0g ; 另一只小鼠用同樣劑量的硫酸鎂灌胃。分別將小鼠置小籠中，觀察其在15分鐘內(nèi)表現(xiàn)有何區(qū)別。將結(jié)果填入下表： 不同給藥途徑對硫酸鎂作用的影響鼠號 體重（g） 藥量（ml/10g）給藥途徑給藥前表現(xiàn)給藥后表現(xiàn)【注意事項】1、掌握正確的灌胃操作技術(shù)，不要誤插氣管或插破食管，前者可致窒息，后者可出現(xiàn) 如同腹腔注射時的吸收癥狀，重則死亡。2、注射后作用發(fā)生較快，需留心觀察。實驗提示：不同給藥途徑，吸收速度有差別，藥物反應(yīng)程度亦有差別。通過本實驗使學(xué) 生驗證理論知識。實驗思考：給藥途徑不同時，藥物的作用為什么有的會出現(xiàn)質(zhì)的差異？實驗三藥物劑量對藥物作用

16、的影響實驗?zāi)康模河^察不同劑量戊巴比妥鈉對小鼠作用的差異。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、粗天平、Iml注射器、小鼠灌胃針頭。藥品：0.1%、0.2%、0.4%戊巴比妥鈉溶液。動物：小白鼠3只，體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：取小鼠3只編號并以苦味酸溶液涂毛作不同記號。 分別稱其體重及觀察小鼠正常 活動情況。各鼠經(jīng)腹腔注射不同濃度的戊巴比妥鈉溶液0.2m1/l0 g，分別置于小籠中，密切注意先后出現(xiàn)的反應(yīng)。將實驗結(jié)果記錄于下表：不同劑量戊巴比妥鈉對小鼠作用的差異鼠號 體重（g）劑量（ml/10g） 潛伏期給藥前表現(xiàn)給藥后表現(xiàn)123【注意事項】1、小鼠對戊巴比妥鈉可能出現(xiàn)的反應(yīng)

17、，按由輕到重程度有：活動增加、呼吸抑制、翻 正反射減弱、消失、反射亢進(jìn)、麻醉、死亡等。2、比較各鼠所出現(xiàn)反應(yīng)的嚴(yán)重程度和發(fā)生快慢。實驗提示：同一藥物給藥劑量不同，藥物反應(yīng)程度亦有差別。通過本實驗使學(xué)生驗證理論知 識和培養(yǎng)學(xué)生觀察能力。實驗思考：了解藥物的劑量和作用的關(guān)系對于進(jìn)行藥理試驗和臨床用藥有何重要意義？實驗四 苯巴比妥鈉的抗驚厥作用實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)動物驚厥模型的復(fù)制方法；觀察大劑量尼可剎米的中毒反應(yīng)；掌握苯巴比妥鈉的抗驚厥作用。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、粗天平、Iml注射器3支、小鼠灌胃針頭、大燒杯。藥品：2.5%尼可剎米，0.5%苯巴比妥鈉，生理鹽水。動物：小白鼠4

18、只，體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：1. 取體重相近的小白鼠 4只，稱重，編號，隨機(jī)分組，分為實驗組和對照組。2. 實驗組小鼠腹腔注射 0.5%苯巴比妥鈉0.5mg/10g(0.1ml/10g);對照組腹腔注射等 體積生理鹽水。3.15min后實驗組和對照組分別腹腔注射2.5%尼可剎米溶液0.2 0.3ml/10g，連續(xù)觀察20min，詳細(xì)記錄兩組小鼠的反應(yīng)情況。4.觀察用藥后小鼠的反應(yīng)：有無興奮、驚厥(以后腳伸直為驚厥指標(biāo))和死亡 將實驗結(jié)果填入下表：鼠號體重(g)藥物劑量(ml)給藥途徑中毒量尼可剎米反應(yīng)興奮驚厥死亡1號苯巴比妥鈉ip2號苯巴比妥鈉ip3號生理鹽水ip4號生理鹽水ip【

19、注意事項】1. 注意觀察小鼠給藥后的反應(yīng)，如出現(xiàn)豎尾、洗臉、猛烈地奔跑、撞籠、跳躍等反應(yīng)即 為驚厥前兆。2. 腹腔注射部位要準(zhǔn)確，否則會影響實驗結(jié)果。3. 給藥后應(yīng)保持室內(nèi)安靜，避免刺激實驗動物。實驗提示：尼可剎米為常用的呼吸中樞興奮藥。主要作用是直接興奮延腦呼吸中樞，對大腦皮層、血管運動中樞和脊髓也有興奮作用。過大劑量可引起驚厥，繼而發(fā)生中樞抑制而死亡。苯巴比妥鈉是一種普遍性中樞抑制藥，具有良好的抗驚厥作用。 通過本實驗使學(xué)生驗證理論知識、培養(yǎng)學(xué)生觀察和對實驗基本機(jī)能的掌握程度。實驗思考：簡述苯巴比妥鈉的藥理作用及臨床應(yīng)用。實驗五鎮(zhèn)痛實驗(一)熱板法實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)鎮(zhèn)痛的實驗方法，掌握嗎啡或哌

20、替啶的鎮(zhèn)痛作用。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：智能熱板儀，小動物電子秤，玻璃罩，小鼠鼠籠，Iml注射器，秒表。藥品：0.1%鹽酸嗎啡，生理鹽水。動物：雌性小鼠，1822g。實驗步驟：1 開機(jī)打開智能熱板儀電源開關(guān)，預(yù)熱10分鐘，至恒溫指示燈亮，調(diào)節(jié)熱板溫度至55C 1 Co2 .篩選將小鼠放于熱板儀上，記錄痛閾值。痛閾值大于30秒或小于5秒，淘汰不用。痛閾值以小鼠放于熱板上至出現(xiàn)添后足所需時間為標(biāo)準(zhǔn)。時間單位為秒。 取已篩選的小鼠 8只，隨機(jī)分為對照組和實驗組，每組4只。 按“篩選”所示方法，分別測定、記錄給藥前對照組和實驗組的痛閾值。 對照組ip.生理鹽水0.1ml/10g實驗組

21、 ip. 0.1% 鹽酸嗎啡 0.1ml/10g 測定、記錄給藥后 15 min、30min、45min對照組和實驗組的痛閾值，對于痛閾值大于 60 秒的小鼠，立即取出，以 60 秒計。 計算給藥前后對照組和實驗組的平均痛閾值。注意事項：1 .熱板法個體差異大， 實驗動物應(yīng)預(yù)先篩選， 一般以疼痛反應(yīng)在 30s 內(nèi)者為敏感鼠， 可 供實驗用。2. 小鼠應(yīng)選雌性，因雄性小鼠遇熱時陰囊松弛，易與熱板接觸而影響實驗結(jié)果。3. 用藥后小鼠痛閾值超過 60s 者，應(yīng)立即取出， 防止足部燙傷而影響實驗結(jié)果， 其痛閾 值按 60s 計算。4. 室溫以15 C左右為宜，過低動物反應(yīng)遲鈍，過高則敏感。5. 熱板溫

22、度應(yīng)保持在 55 C左右。附：智能熱板儀使用 SOP1 開機(jī) 打開電源開關(guān)，機(jī)器自檢，電源指示燈亮。2設(shè)置溫度 按下“溫度”按鈕，進(jìn)入溫度設(shè)定，此時光標(biāo)移動到設(shè)定溫度值處，系統(tǒng)默認(rèn)目標(biāo)溫度 為55 C。通過 ”按鈕，調(diào)節(jié)升高或降低所需溫度，按確定”鍵確認(rèn)。本實驗 溫度為55 C。3設(shè)置日期按下“日期”按鈕，進(jìn)入日期設(shè)定，通過“ ”按鈕，調(diào)節(jié)日期和時、分、秒。 按“確定”鍵確認(rèn)。4預(yù)熱本儀器需預(yù)熱 10分鐘。5開始實驗放入動物在熱板上的同時，按下外接按鈕或“啟 / ?！卑粹o，系統(tǒng)自動開始計時、編號， 等觀察到動物舔后足后，再次按下外接按鈕或“啟 / 停”按鈕，計時結(jié)束，此時，可從液晶 屏讀取痛閾

23、值。6查詢先停止實驗，再按下“查詢”按鈕，可查詢每個編號動物的痛閾值，用“”按鈕選擇編號。按“確認(rèn)”按鈕，可退出查詢狀態(tài)。實驗提示：將小鼠置于預(yù)先加熱到 55 C的金屬板上，以熱刺激小鼠足部可產(chǎn)生疼痛反 應(yīng)，通過測定小鼠痛閾 （ 以出現(xiàn)舔后爪的時間為指標(biāo) ） ，比較給藥組與對照組小鼠痛閾的 差異，給藥后痛反應(yīng)時間延長 1 倍以上者，視為有鎮(zhèn)痛作用。（二）化學(xué)刺激法 實驗?zāi)康模河^察哌替定與阿司匹林對化學(xué)物質(zhì)刺激致痛的影響。實驗內(nèi)容： 實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：天平，鼠籠， lml 注射器 3 支， 5 號針頭，灌胃器。藥品： 0.7%醋酸溶液， 0.2%哌替定溶液， 0.4 阿司匹林懸液，

24、生理鹽水。動物：小鼠，體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：1. 取體重相近的小鼠 6 只，稱重，編號，隨機(jī)分為甲、乙、丙 3 組。2. 觀察小鼠正?；顒?。3. 給藥：甲組小鼠腹腔注射 0.2%哌替定溶液1ml/10g，乙組0.4 %阿司匹林懸液灌胃 0.15ml/10g、丙組等體積生理鹽水腹腔注射，記錄給藥時間。4. 給藥后30min，各組小鼠均腹腔注射 0.7%醋酸溶液0.1ml/10g，觀察15min內(nèi)各組 出現(xiàn)扭體反應(yīng)的動物數(shù)。將實驗結(jié)果記錄填寫入下表：組別藥物鼠數(shù)扭體反應(yīng)數(shù)無扭體反應(yīng)數(shù)鎮(zhèn)痛百分?jǐn)?shù)（P）甲哌替定乙阿司匹林丙生理鹽水注：藥物鎮(zhèn)痛百分率（P）給藥組無扭體反應(yīng)的動物-生理鹽水組

25、無扭體反應(yīng)的動物數(shù)x 100%P=生理鹽水組扭體反應(yīng)的動物數(shù)注意事項：1. 醋酸應(yīng)在臨用時配制，如放置過久，作用明顯減弱。2. 室溫不能低于10C，否則不易發(fā)生扭體反應(yīng)。3. 給藥組比對照組減少扭體發(fā)生率 50%以上才能認(rèn)為有鎮(zhèn)痛作用。4. 小鼠體重輕，扭體反應(yīng)發(fā)生率低。 實驗提示：某些化學(xué)物質(zhì)（如酒石酸銻鉀溶液、醋酸溶液、緩激肽等）注入小鼠腹腔內(nèi)可刺激腹膜引起深部、大面積且持久的疼痛，致使小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)，表現(xiàn)為腹部內(nèi)凹、軀干與后 肢伸張、臀部高起等。若實驗組與對照組相比，扭體反應(yīng)發(fā)生率減少50%以上者，認(rèn)為該藥物有鎮(zhèn)痛作用。實驗思考：1. 闡述哌替啶鎮(zhèn)痛作用機(jī)制及其臨床應(yīng)用。2. 試述哌替

26、定和阿司匹林作用的異同點？實驗項六急支糖漿鎮(zhèn)咳實驗實驗?zāi)康模赫莆招∈笠鹊牟±砟Ｐ图版?zhèn)咳作用機(jī)制。學(xué)習(xí)用氨水引咳的方法；觀察急 支糖漿的鎮(zhèn)咳作用。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、天平、棉花、大燒杯、注射器、灌胃器。藥品：急支糖漿、生理鹽水、濃氨水。動物：小鼠，體重 1822g ,雌雄不拘。實驗步驟：取小鼠4只，隨機(jī)分成2組，分別為急支糖漿 0.3ml/10g，以生理鹽水為空白對 照，灌胃給藥后15分鐘，置于充滿氨氣的燒杯中觀察小鼠 15分鐘內(nèi)咳嗽潛伏及咳嗽次數(shù)。觀察并記錄纟 編號1234體重注射藥物咳嗽次數(shù) 咳嗽潛伏期【注意事項】1每只小鼠放入燒杯中時都要換新棉球，而且濃氨水的

27、量要準(zhǔn)確。棉球的大小、松 緊程度要適中，盡量一致。氨水 35滴，不可濃度太高。燒杯不必倒扣。2. 觀察并記錄小鼠咳嗽時，最好要兩個人在不同的角度同時進(jìn)行觀察，并且視線要與小鼠的嘴在同一水平，以免漏記。小鼠咳嗽很難聽到聲音， 因此應(yīng)注意觀察，表現(xiàn)為劇烈 腹肌收縮并張嘴。3. 潛伏期即把棉球放入后至第一次咳嗽的時間；實驗提示：引咳刺激最常用的是化學(xué)物質(zhì)刺激、機(jī)械刺激和電刺激。由于化學(xué)刺激物時作 用于呼吸道的感受器反射地引起咳嗽，凡能抑制咳嗽中樞或降低呼吸感受其敏感性的藥物均能收到鎮(zhèn)咳作用。小鼠吸入氨水后，刺激呼吸道粘膜感受器，反射性地引起咳嗽。實驗思考：咳嗽發(fā)生的原因是什么？除了氨水引咳外，還有什

28、么其他辦法？實驗七耐缺氧實驗實驗?zāi)康模候炞C心得安（普萘洛爾）抗心肌缺氧作用。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、天平、廣口瓶、注射器、灌胃器。藥品：心得安，NaOH, NazCQ動物：小鼠，體重 1822g,雌雄不拘。實驗步驟：1、 分組、稱重、標(biāo)記：取小白鼠4只，分為2組。2、給藥：甲組灌胃心得安 0.2ml/10g，乙組灌胃等量生理鹽水。3、 15分鐘后甲乙兩組小鼠分別取一只放入同一廣口瓶，記錄蓋上蓋子至小鼠呼吸停止時間。4、自己設(shè)計實驗表格記錄實驗結(jié)果。【注意事項】1、小鼠在密閉環(huán)境中表現(xiàn)如嘴唇發(fā)紫，呼吸加促即為缺氧，注意觀察。2、NaOH Na2CO3加入量不可太多，防止

29、NaOH（苛性鈉）燒灼小鼠爪及尾。加入目的是中和 小鼠呼吸過程中產(chǎn)生的 CO2防止小鼠CO2中毒。實驗提示：實驗思考：普萘洛爾有哪些藥理作用？實驗八 藥物對凝血時間的影響實驗?zāi)康模河^察幾種藥物縮短或延長凝血時間的作用；學(xué)習(xí)測定小鼠凝血時間的方法。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：1 ml注射器、5號針頭、毛細(xì)玻管（內(nèi)徑lmm）、載玻片、彎頭眼科鑷子、 秒表、鼠籠、棉球。藥品：25g/l止血敏溶液、100u/ml肝素溶液、生理鹽水。動物：小鼠6只，體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：1. 毛細(xì)玻管法：取小鼠 6只，稱重后隨即分成 3組，做好標(biāo)記。1、2號小鼠腹腔注射止血敏0.5mg/10

30、g （按0.2ml/10g給藥）；3、4號小鼠腹腔注射肝素 20u/l0g （按0.2ml/10g給藥）；5、6號小鼠腹腔注射等容量（0.2m1/10g）生理鹽水。30min后，以毛細(xì)玻管作眼眶內(nèi) 毗穿刺，獲取長約 5cm的血柱。然后每隔30s折斷毛細(xì)玻管一小截，觀察有無粘絲狀物（凝血絲）出現(xiàn)。記錄從毛細(xì)玻管采血至出現(xiàn)凝血絲的時間，即為凝血時間。2. 玻片法：作眼眶內(nèi)毗穿刺取血，分別滴兩滴于清潔載玻片的兩端（血滴直徑約5mm左右）。每隔30s用干燥針頭挑動血液一次，有細(xì)絲出現(xiàn)為凝血，記錄凝血時間（以兩滴血的凝血時間均數(shù)計算）。3、綜合全班實驗結(jié)果，分別計算三組小鼠的平均凝血時間，將結(jié)果填人下表

31、。藥物對小鼠凝血時間的影響藥物動物數(shù)（只）凝血時間（min）對凝血時間的影響毛細(xì)玻管法玻片法止血敏肝素 生理鹽水【注意事項】1 本實驗宜在15C 20 C室溫進(jìn)行。溫度過低，凝血時間則延長。2. 如不便進(jìn)行小鼠尾靜脈注射，肝素亦可腹腔注射，但劑量須增加4倍。3. 玻片法因混入的組織液較多，加之每次挑動，凝血時間可縮短，故準(zhǔn)確性較差。 實驗提示：實驗思考：酚磺乙胺和肝素對凝血時間各有何影響？作用機(jī)制如何？有哪些臨床應(yīng)用。實驗九 藥物對腸蠕動的影響實驗?zāi)康模簻y定墨汁在胃腸道內(nèi)的移動速度，觀察藥物對胃腸蠕動功能的影響。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：手術(shù)剪、眼科鑷、直尺、 I ml注射器、

32、小鼠灌胃器、鼠籠。藥品：20%硫酸鎂溶液、0.003%甲基硫酸新斯的明溶液、0.02%硫酸阿托品溶液、生理鹽 水（以上藥物每100m1藥液中加墨汁 2m1）。動物：小鼠4只， 體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：取空腹12h的小鼠4只，稱重、標(biāo)記。分別按下列方法灌胃給藥：1號鼠20%硫酸鎂40mg/10g； 2號鼠0.003%甲基硫酸新斯的明 0.006mg/10g; 3 號鼠0.02%硫酸阿托品 0.04mg/10g ; 4號鼠等容量（0.2m1/10g ）生理鹽水。給藥后 40min將小鼠頸椎脫臼處死， 立即剖腹，將小腸從幽門至回盲部全段剪下，剔除腸系膜，將腸管拉成直線，放于實驗臺上，測量

33、墨汁推進(jìn)距離和小腸總長度。按下列公式計算墨汁推進(jìn)百分率。墨汁推進(jìn)距離（cm）墨汁推進(jìn)百分率 =x 100%小腸總長度（cm）將所測數(shù)據(jù)填人下表：藥物對小鼠腸蠕動的影響鼠號 藥物墨汁推進(jìn)距離（cm）小腸總長度（cm）墨汁推進(jìn)百分率（）1硫酸鎂2新斯的明3阿托品4 生理鹽水【注意事項】1. 給藥量必須準(zhǔn)確。2每鼠灌藥與處死時間必須一致。3. 剪取腸管要避免牽拉，否則會影響測量長度的準(zhǔn)確性。4腸管內(nèi)墨汁推進(jìn)可能有中斷現(xiàn)象，應(yīng)以推進(jìn)最遠(yuǎn)處為測量終點。 實驗提示：實驗思考：聯(lián)系實驗結(jié)果，討論所用藥物對腸道平滑肌的作用及臨床用途。實驗十肝臟功能狀態(tài)對藥物作用的影響實驗?zāi)康模河^察肝功能損害對戊巴比妥鈉作用的

34、影響；學(xué)習(xí)篩試肝功能保護(hù)藥的方法。實驗內(nèi)容：實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：鼠籠、天平、注射器（1ml）、小鼠灌胃器、組織剪。藥品：5%四氯化碳油溶液、0.3%戊巴比妥鈉溶液、生理鹽水。動物：小鼠4只， 體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：1、 取正常小鼠和肝功能已被破壞的（實驗前48h皮下注射5%四氯化碳油溶液0.1ml/10g鼠 各2只，稱其體重。2、 分別由腹腔注射 0.3%戊巴比妥鈉溶液 0.15m1/l0g （45 mg/kg），觀察動物反應(yīng)。記錄各鼠的翻正反射消失的潛伏時間（從腹腔注射該藥到翻正反射消失的間隔時間）和持續(xù)時間（從翻正反射消失到翻正反射恢復(fù)的間隔時間）。小鼠蘇醒后，頸

35、椎脫臼處死，剖取肝臟，比較兩組動物肝臟大小、顏色及充血程度。3、將實驗結(jié)果整理記錄下表：肝功能損害對戊巴比妥鈉的影響組別 鼠號 體重給藥時間翻正反射作用持續(xù)時間 肝臟肉眼觀察（g）消失時間 恢復(fù)時間（min）正常組 12肝損傷組34【注意事項】1. 如室溫在20C以下，應(yīng)給麻醉小鼠保暖， 否則動物將因體溫下降，代謝減慢而不易蘇醒。2. 四氯化碳是一種肝臟毒物，其中毒動物常被作為中毒件肝炎的動物模型，用于觀察肝臟功能狀態(tài)對藥物作用的影響及篩選和試驗肝功能保護(hù)藥。其油溶液可用植物油配制； 亦可用甘油配成5%勺制劑，實驗前 24h皮下注射0.08m1/l0g。3. 四氯化碳中毒小鼠的肝臟比較腫大，有

36、的充血，有的變成灰黃色，觸之有油膩感，其小葉比正常肝臟更清楚。實驗提示：實驗思考：1 為什么損害肝臟的小鼠注射戊巴比妥鈉后作用維持時間延長？2 討論肝功能與臨床用藥的關(guān)系。實驗十一 抗疲勞作用實驗實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)小白鼠游泳抗疲勞實驗方法，了解人參蜂王漿抗疲勞作用。 實驗內(nèi)容： 實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材：恒溫水浴箱、1g鉛塊、鼠籠、天平、注射器（1ml）、小鼠灌胃器。藥品： 人參蜂王漿口服液、生理鹽水。動物：小鼠4只， 體重1822g,雌雄不拘。實驗步驟：取小鼠4只，體重1822g，雌雄均可，稱重后隨即分兩組，一組為給藥組，灌胃 給予人參蜂王漿0.03ml/g，對照組給等容積生理鹽水，用藥后

37、 30min，將小鼠尾附加1g 鉛塊，后將小鼠放入調(diào)好的恒溫水浴箱中，水溫25C 1C ,水深20cm，觀察小鼠放入水中至溺死的時間，最后匯總?cè)繉嶒灲Y(jié)果，進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理?！咀⒁馐马棥?. 每鼠負(fù)重鉛塊綁縛尾中部，沒鼠距尾根部距離要相等。2. 避免鼠尾絞附一起。實驗提示： 以小鼠游泳為抗疲勞指標(biāo)，補(bǔ)益藥等具抗疲勞作用的藥物可延長小鼠游泳時 間。實驗思考：1 、人參蜂王漿抗疲勞作用如何？2、解釋人身蜂王漿為何具此作用？實驗體會 :實驗報告 :1、集中全班各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。2 、設(shè)計實驗報告表格。實驗十二 傳出神經(jīng)對兔血壓的影響實驗?zāi)康模?觀察傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對血壓的影響和該系統(tǒng)藥物之間的相

38、互作用。實驗內(nèi)容： 實驗器材、藥品和動物的準(zhǔn)備器材： 注射器、手術(shù)臺、小剪刀、手術(shù)刀、氣管套管、粗線、動脈夾、動脈套管、 檢壓劑、心電圖機(jī)、止血鉗、滴定管。藥品： 20%烏拉坦、生理鹽水、 0.01%腎上腺素、 0.01%去甲腎上腺素、 0.005%異丙腎 上腺素、 0.5%酚妥拉明、 0.1%心得安、 0.5%肝素、生理鹽水。動物：家兔。實驗步驟：1 、家兔稱重后，以 20%烏拉坦 5ml/kg 麻醉后，將動物仰臥位固定于手術(shù)臺上。2、剪去頸部毛，切開頸部正中皮膚，于氣管旁分離出一側(cè)頸總動脈，將遠(yuǎn)心端結(jié)扎，在距3 5cm的近心端處，用動脈夾夾住動脈，阻斷血流，然后在靠近結(jié)扎線處用眼科剪刀 剪

39、一小口，將其連于微動力感受器并已充滿0.5%肝素鈉的動脈套管朝向心方向插入頸總動脈內(nèi)，并扎緊。3、緩慢放開動脈夾，描記正常血壓，待血壓穩(wěn)定后開始沿耳緣靜脈給藥，每給一種藥 物應(yīng)待前一種藥物作用完全消失后，再給下一種藥物。（1） 0.01%腎上腺素 0.3ml/kg（2） 0.01%去甲腎上腺素 0.3ml/kg（3）0.005%異丙腎上腺素 0.3ml/kg（4）0.5%酚妥拉明 0.3ml/kg 緩慢注入， 0.01% 腎上腺素 0.3ml/kg（5）0.1%心得安 0.3ml/kg 緩慢注射。 【注意事項】1、麻醉藥不宜超量，且密切注意實驗動物的呼吸情況。 2、實驗所用藥物溶液均應(yīng)在臨用前配制，以確保實驗結(jié)果。實驗提示： 血壓的變化主要受每分輸出量、外周阻力、體循環(huán)血量充盈壓三個因素的影 響。 傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物通過擬似或拮抗神經(jīng)遞質(zhì)， 作用于分布在心血管上的腎上腺素受 體或膽堿受體， 來影響心肌收縮力、血管舒縮程度和循環(huán)血量充盈程度進(jìn)而升高或降低 血壓。實驗思考：1、比較擬腎上腺素藥對血壓、心率的影響有何不同，分析其作用原理。2、比較擬膽堿藥對血壓、心率的影響有何不同，分析其作用原理。實驗體會 :實驗報告 : 1、集中全班各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。2 、設(shè)計實驗報告表格。