高考生物總復(fù)習(xí) 第一章第1節(jié) 微生物的分離和純培養(yǎng)課件 中圖版選修1

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1、第一章第一章 微生物培養(yǎng)技術(shù)微生物培養(yǎng)技術(shù)第一章第一章 微生物培養(yǎng)技術(shù)微生物培養(yǎng)技術(shù)第第1節(jié)節(jié)微生物的分離和純培養(yǎng)微生物的分離和純培養(yǎng)學(xué)習(xí)導(dǎo)航學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.了解有關(guān)微生物及其培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。了解有關(guān)微生物及其培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。2.理解消毒和滅菌的原理、方法、進(jìn)行無(wú)菌技理解消毒和滅菌的原理、方法、進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)的操作。術(shù)的操作。重點(diǎn)重點(diǎn)3.理解微生物接種的方法步驟，進(jìn)行大腸桿菌理解微生物接種的方法步驟，進(jìn)行大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)。的分離和純培養(yǎng)。 重、難點(diǎn)重、難點(diǎn)新知初探思維啟動(dòng)新知初探思維啟動(dòng)一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基1.含義：含義：由于微生物代謝方式的不同，因而由于微生物代謝方式的不同，因而對(duì)營(yíng)養(yǎng)物

2、質(zhì)的需求也是有差異的。根據(jù)微生對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求也是有差異的。根據(jù)微生物物_的需要，將各種營(yíng)養(yǎng)物的需要，將各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)混合在一起，配制成適合微生物生存的營(yíng)質(zhì)混合在一起，配制成適合微生物生存的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。養(yǎng)基質(zhì)。生長(zhǎng)繁殖和代謝生長(zhǎng)繁殖和代謝2.平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基將將_后的固體培養(yǎng)基基質(zhì)倒入后的固體培養(yǎng)基基質(zhì)倒入_，冷卻凝固后制成的培養(yǎng)基。，冷卻凝固后制成的培養(yǎng)基。二、接種技術(shù)二、接種技術(shù)1.含義含義：把相應(yīng)的研究對(duì)象移入：把相應(yīng)的研究對(duì)象移入_中中的過(guò)程。的過(guò)程。溶化溶化無(wú)菌培養(yǎng)皿無(wú)菌培養(yǎng)皿培養(yǎng)基培養(yǎng)基2.方法方法在平板培養(yǎng)基上接種的方法有平板劃線(xiàn)法、在平板培養(yǎng)基上接種的方法有平板劃線(xiàn)法、_法、法

3、、_法等。平法等。平板劃線(xiàn)法又包括連續(xù)劃線(xiàn)法和交叉劃線(xiàn)法。板劃線(xiàn)法又包括連續(xù)劃線(xiàn)法和交叉劃線(xiàn)法。稀釋涂布平板稀釋涂布平板稀釋混合平板稀釋混合平板判一判判一判(1)微生物是指由細(xì)胞組成的一類(lèi)個(gè)體微小微生物是指由細(xì)胞組成的一類(lèi)個(gè)體微小的生物。的生物。()(2)在微生物分離和純培養(yǎng)時(shí)，需要無(wú)菌操在微生物分離和純培養(yǎng)時(shí)，需要無(wú)菌操作。作。()(3)一般我們飲用的奶制品，多采用高溫滅一般我們飲用的奶制品，多采用高溫滅菌法。菌法。()(4)滅菌和消毒都能夠殺死細(xì)菌的芽孢等休滅菌和消毒都能夠殺死細(xì)菌的芽孢等休眠體。眠體。()三、無(wú)菌技術(shù)三、無(wú)菌技術(shù)1.目的和要求目的和要求在微生物的分離和純培養(yǎng)過(guò)程中，為了防

4、止在微生物的分離和純培養(yǎng)過(guò)程中，為了防止_污染，必須采用污染，必須采用_進(jìn)行操進(jìn)行操作。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要對(duì)所用的器材、培養(yǎng)作。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，要對(duì)所用的器材、培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌，對(duì)工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒?；M(jìn)行嚴(yán)格的滅菌，對(duì)工作場(chǎng)所進(jìn)行消毒。外來(lái)雜菌外來(lái)雜菌無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)2.滅菌和消毒滅菌和消毒滅菌滅菌消毒消毒概念概念用用_的的理化理化因素殺死環(huán)境因素殺死環(huán)境或物體內(nèi)或物體內(nèi)外外_的的微生物微生物用相用相對(duì)對(duì)_的的理化方理化方法殺死環(huán)境或物體上法殺死環(huán)境或物體上的病原微生物和有害的病原微生物和有害微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞常用常用方法方法_法法_消消毒法毒法和和_消消毒法毒法適用適用對(duì)象對(duì)象

5、所用器材、培所用器材、培養(yǎng)基養(yǎng)基工作場(chǎng)所工作場(chǎng)所強(qiáng)烈強(qiáng)烈所有所有溫和溫和高溫滅菌高溫滅菌射線(xiàn)射線(xiàn)化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑四、大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)四、大腸桿菌的分離和純培養(yǎng)1.方法方法：_。2.步驟步驟平板劃線(xiàn)分離法平板劃線(xiàn)分離法牛肉膏蛋白胨瓊脂牛肉膏蛋白胨瓊脂接種環(huán)接種環(huán)連續(xù)連續(xù)交叉交叉菌落菌落倒置倒置想一想想一想劃線(xiàn)法為什么可以分離出大腸桿菌？劃線(xiàn)法為什么可以分離出大腸桿菌？【提示提示】隨著線(xiàn)的延長(zhǎng)，菌數(shù)越來(lái)越少隨著線(xiàn)的延長(zhǎng)，菌數(shù)越來(lái)越少,最最終可分離得到由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。終可分離得到由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一要點(diǎn)一無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)1.概念：概念：無(wú)菌

6、技術(shù)不僅能防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)不僅能防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染，保持微生物的純物被其他外來(lái)微生物污染，保持微生物的純培養(yǎng)，而且在分離、轉(zhuǎn)接時(shí)亦能防止其他微培養(yǎng)，而且在分離、轉(zhuǎn)接時(shí)亦能防止其他微生物污染。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外生物污染。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵，無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜來(lái)雜菌的入侵，無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)，主要包括以下幾個(gè)方面：菌的污染展開(kāi)，主要包括以下幾個(gè)方面：(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。雙手用肥皂洗凈，擦干后進(jìn)行清潔和消毒。雙手用肥皂洗凈，擦干后用用75%酒精

7、消毒。酒精消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌，養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌，接種環(huán)用火焰灼燒來(lái)滅菌。接種環(huán)用火焰灼燒來(lái)滅菌。(3)為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。(4)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。具與周?chē)奈锲废嘟佑|。2.常見(jiàn)消毒滅菌方法及其適用范圍常見(jiàn)消毒滅菌方法及其適用范圍方法方法適用范圍適用范圍煮沸消煮沸消毒法毒法日常生活中廣泛使用日常生活

8、中廣泛使用巴氏消巴氏消毒法毒法牛奶、啤酒等不宜進(jìn)行高溫消牛奶、啤酒等不宜進(jìn)行高溫消毒的液體毒的液體化學(xué)藥化學(xué)藥劑消毒劑消毒法法皮膚、傷口、動(dòng)植物組織表面皮膚、傷口、動(dòng)植物組織表面消消毒毒,空空氣、手術(shù)器械、塑料氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等或玻璃器皿等方法方法適用范圍適用范圍紫外線(xiàn)紫外線(xiàn)消毒法消毒法接種室空氣接種室空氣灼燒滅灼燒滅菌法菌法微生物接種工具，如接種環(huán)、微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接接種針或其他金屬用具等，接種過(guò)程中試管口或錐形瓶口等種過(guò)程中試管口或錐形瓶口等干熱滅干熱滅菌法菌法玻璃器皿、金屬用具等玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌法法培養(yǎng)基及多種器材

9、、物品培養(yǎng)基及多種器材、物品特別提醒特別提醒無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還能有效培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。避免操作者自身被微生物感染。 細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用了高壓蒸汽細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中分別采用了高壓蒸汽滅菌鍋、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理滅菌鍋、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A接種環(huán)、手、培養(yǎng)基接種環(huán)、手、培養(yǎng)基B高壓鍋、手、接種環(huán)高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán)培養(yǎng)基、手、接種環(huán)D接種環(huán)、手、高壓鍋接種環(huán)、手、高壓鍋

10、例例1【解析解析】此題考查學(xué)生對(duì)無(wú)菌技術(shù)的掌握。此題考查學(xué)生對(duì)無(wú)菌技術(shù)的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個(gè)設(shè)備，通常用于高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個(gè)設(shè)備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻梢匝杆?gòu)氐椎販缇m用于方法?；鹧孀茻梢匝杆?gòu)氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。微生物的接種工具，如接種環(huán)?！敬鸢复鸢浮緾變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練下列操作錯(cuò)誤的是下列操作錯(cuò)誤的是()A用酒精擦拭雙手用酒精擦拭雙手B用氯氣消毒水源用氯氣消毒水源C實(shí)驗(yàn)室用紫外線(xiàn)進(jìn)行消毒實(shí)驗(yàn)室用紫外線(xiàn)進(jìn)行消毒D玻璃器皿玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿吸管、培養(yǎng)皿)用酒精直

11、接擦拭用酒精直接擦拭即可達(dá)到徹底滅菌的目的即可達(dá)到徹底滅菌的目的解析：選解析：選D。玻璃器皿、金屬用具等耐高。玻璃器皿、金屬用具等耐高溫、需要保持干燥的物品，應(yīng)采用干熱滅溫、需要保持干燥的物品，應(yīng)采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，而用酒精直接擦拭達(dá)不到菌法進(jìn)行滅菌，而用酒精直接擦拭達(dá)不到徹底滅菌的目的。徹底滅菌的目的。要點(diǎn)二要點(diǎn)二探究微生物的分離和純培養(yǎng)探究微生物的分離和純培養(yǎng)1.菌落的含義及菌種的鑒定菌落的含義及菌種的鑒定在固體平板培養(yǎng)基上，由單個(gè)微生物細(xì)胞或在固體平板培養(yǎng)基上，由單個(gè)微生物細(xì)胞或孢子繁殖而來(lái)的一個(gè)具有特定形狀的子細(xì)胞孢子繁殖而來(lái)的一個(gè)具有特定形狀的子細(xì)胞群體，稱(chēng)為菌落。其各方面特征，

12、如形狀、群體，稱(chēng)為菌落。其各方面特征，如形狀、大小、表面、邊緣、隆起、透明度、顏色等大小、表面、邊緣、隆起、透明度、顏色等均可作為菌種鑒定的依據(jù)。均可作為菌種鑒定的依據(jù)。2.純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)純培養(yǎng)過(guò)程中如果劃線(xiàn)接種形成的菌落特征純培養(yǎng)過(guò)程中如果劃線(xiàn)接種形成的菌落特征不一致不一致,說(shuō)明含雜菌，需要進(jìn)一步劃線(xiàn)挑菌，說(shuō)明含雜菌，需要進(jìn)一步劃線(xiàn)挑菌，直至純化。直至純化。3.培養(yǎng)不同的微生物，需要不同的培養(yǎng)不同的微生物，需要不同的pH微生物種類(lèi)微生物種類(lèi)最適最適pH大腸桿菌等細(xì)菌大腸桿菌等細(xì)菌中性中性放線(xiàn)菌放線(xiàn)菌偏堿性偏堿性酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌微酸性微酸性 (1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮在大腸桿

13、菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。驗(yàn)材料。例例2(2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_(消毒、滅菌消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線(xiàn)殺滅，其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還殺

14、滅，其原因是紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還能能_。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的品稀釋的_。(4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的

15、檢測(cè)方法是測(cè)方法是_。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_處理后才能丟棄處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，造成污染。，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，造成污染。【解析解析】(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期單、變異類(lèi)型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)短等優(yōu)點(diǎn),培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外

16、所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行滅菌；而消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)行滅菌；而消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，所以操作者的雙手需要進(jìn)行清害的微生物，所以操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒；紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還能損洗和消毒；紫外線(xiàn)能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷傷DNA的結(jié)構(gòu)。的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保到

17、瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例合適。證樣品稀釋的比例合適。(4)對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素因?yàn)橛械拇?/p>

18、腸桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素,并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，造成污染。以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散，造成污染。【答案答案】(1)溫度溫度酸堿度酸堿度易培養(yǎng)易培養(yǎng)生活生活周期短周期短(2)滅菌滅菌消毒消毒損傷損傷DNA的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)(3)比例合適比例合適(4)鑒定鑒定(或分類(lèi)或分類(lèi))(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(6)滅菌滅菌互動(dòng)探究互動(dòng)探究大腸桿菌菌落在固體平板培養(yǎng)基上是什么形大腸桿菌菌落在固體平板培養(yǎng)基上是什么形狀？狀？【提示提示】菌落光滑、圓形菌落光滑、圓形,易與基質(zhì)脫離。易與基質(zhì)脫離。