高二生物選修3 基因工程的基本操作程序 ppt
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1、點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)目的基因的獲得n從基因文庫獲得從基因文庫獲得n基因文庫基因文庫n利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增n人工合成人工合成已知序列已知序列未知序列未知序列點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)基因文庫基因文庫: : 將含有某種生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許多DNADNA片段片段, ,導(dǎo)入導(dǎo)入受體菌的群體中儲存受體菌的群體中儲存, ,各個受體菌分別含有這種生物的各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因不同
2、的基因, ,稱為基因文庫稱為基因文庫(gene library)(gene library)基因組文庫基因組文庫: : 基因文庫中包含了一種生物所有的基因基因文庫中包含了一種生物所有的基因, ,這種基這種基因文庫叫做基因組文庫因文庫叫做基因組文庫. .部分基因文庫部分基因文庫: : 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因基因文庫中包含了一種生物的一部分基因, ,這種基這種基因文庫叫做部分基因文庫因文庫叫做部分基因文庫. .點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué) 用用DNADNA重組技術(shù)將某種生物的總重組技術(shù)將某種生物的總DNADNA用特定的限制性內(nèi)用
3、特定的限制性內(nèi)切酶切割成一個個片段,然后將這些片段隨機(jī)地連接在某些切酶切割成一個個片段,然后將這些片段隨機(jī)地連接在某些質(zhì)粒或其他載體上,再將它們轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中,通質(zhì)?;蚱渌d體上,再將它們轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中,通過細(xì)胞的增殖而構(gòu)成各個片段的無性繁殖系(克?。?,當(dāng)這過細(xì)胞的增殖而構(gòu)成各個片段的無性繁殖系(克?。?,當(dāng)這些克隆多到可以包括某種生物的全部基因時,這一批克隆的些克隆多到可以包括某種生物的全部基因時,這一批克隆的總體就稱為該種生物的基因文庫。這一定義也適用于線粒體總體就稱為該種生物的基因文庫。這一定義也適用于線粒體DNADNA和葉綠體和葉綠體DNADNA,分別稱為某種生物的線粒體
4、基因文庫或葉,分別稱為某種生物的線粒體基因文庫或葉綠體基因文庫。為了有效地保存基因文庫,可通過細(xì)菌在固綠體基因文庫。為了有效地保存基因文庫,可通過細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上繁殖而使包含各個特定體培養(yǎng)基上繁殖而使包含各個特定DNADNA片段的細(xì)菌增多。通過片段的細(xì)菌增多。通過分子雜交的方法,可以篩選出包含有所需基因的分子雜交的方法,可以篩選出包含有所需基因的DNADNA片段的細(xì)片段的細(xì)菌(或噬菌體)。經(jīng)過擴(kuò)增得到大量這樣的細(xì)菌(或噬菌菌(或噬菌體)。經(jīng)過擴(kuò)增得到大量這樣的細(xì)菌(或噬菌體),從中便可分離出所需基因的體),從中便可分離出所需基因的DNADNA片段。建立和使用基因片段。建立和使用基因文庫是分離
5、高等真核生物基因的有效手段,對于基因定位和文庫是分離高等真核生物基因的有效手段,對于基因定位和基因工程的研究都很有用?;蚬こ痰难芯慷己苡杏谩|c(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)人工合成 已知其序列已知其序列 已知其已知其mRNA 的序列的序列 已知其翻譯產(chǎn)物的氨基酸序列已知其翻譯產(chǎn)物的氨基酸序列點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)直接導(dǎo)入法有電擊、顯微注射、直接吸收、基因槍等直接導(dǎo)入法有電擊、顯微注射、直接吸收、基因槍等方法。方法。(1 1)電擊法:借助電擊儀高壓脈沖把目的基因打入宿主細(xì)胞。)電擊法:借助電擊儀高壓脈沖把目的
6、基因打入宿主細(xì)胞。(2 2)顯微注射法:利用微量注射器在顯微鏡下直接把目的基因注)顯微注射法:利用微量注射器在顯微鏡下直接把目的基因注入宿主細(xì)胞。入宿主細(xì)胞。(3 3)直接吸收法:把目的基因和宿主細(xì)胞混在一起,讓其吸收。)直接吸收法:把目的基因和宿主細(xì)胞混在一起,讓其吸收。(4 4)基因槍法:在金屬微粒上涂一層目的基因,然后發(fā)射到宿主)基因槍法:在金屬微粒上涂一層目的基因,然后發(fā)射到宿主細(xì)胞中。細(xì)胞中。間接導(dǎo)入法常用的載體是質(zhì)粒、間接導(dǎo)入法常用的載體是質(zhì)粒、 噬菌體、科斯質(zhì)粒。噬菌體、科斯質(zhì)粒。(1 1)質(zhì)粒是細(xì)菌染色體)質(zhì)粒是細(xì)菌染色體DNADNA以外的環(huán)狀雙鏈以外的環(huán)狀雙鏈DNADNA分子
7、,它能自分子,它能自我復(fù)制,也可整合到細(xì)胞染色體我復(fù)制,也可整合到細(xì)胞染色體DNADNA中與其一起表達(dá)。質(zhì)粒通常中與其一起表達(dá)。質(zhì)粒通常還含有標(biāo)記基因,這可以從細(xì)胞的表型特征來識別。還含有標(biāo)記基因,這可以從細(xì)胞的表型特征來識別。(2 2) 噬菌體是一種細(xì)菌病毒,其環(huán)狀雙鏈?zhǔn)删w是一種細(xì)菌病毒,其環(huán)狀雙鏈DNADNA可以作為目的基可以作為目的基因的載體。因的載體。(3 3)科斯質(zhì)粒是一種雜種質(zhì)粒,含有質(zhì)粒和)科斯質(zhì)粒是一種雜種質(zhì)粒,含有質(zhì)粒和 噬菌體的部分順序,噬菌體的部分順序,很適合用作真核生物基因的載體。很適合用作真核生物基因的載體。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)1.1.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞
8、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞其他方法:基因槍法,花粉管通道法其他方法:基因槍法,花粉管通道法點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)2.2.將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞顯微注射法顯微注射法點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)3.3.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是: : 首先用首先用CaCa2+ 2+ 處理細(xì)胞處理細(xì)胞, ,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNADNA分子的生理狀態(tài)分子的生理狀態(tài), ,這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞. . 第二步是將重組表達(dá)載體第二步是將重組表達(dá)載體DN
9、ADNA分子溶于緩分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合, ,在一定的溫度下促進(jìn)感在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收受態(tài)細(xì)胞吸收DNADNA分子分子, ,完成轉(zhuǎn)化過程完成轉(zhuǎn)化過程. . 第三步第三步點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)四、目的基因的檢測與鑒定四、目的基因的檢測與鑒定1、檢測與鑒定的目的、檢測與鑒定的目的目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性和表達(dá)其遺傳特性檢測目的基因是否插入了轉(zhuǎn)基因生物的染色體檢測目的基因是否插入了轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上上2、檢測目的基因
10、是否轉(zhuǎn)錄出了檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)另外:個體生物學(xué)水平的鑒定另外:個體生物學(xué)水平的鑒定點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)思考思考:檢測:檢測mRNA 是否合成,可以用分子雜交的方法嗎?是否合成,可以用分子雜交的方法嗎?#檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗原抗體雜交抗體雜交#個體生物學(xué)水平的鑒定個體生物學(xué)水平的鑒定點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)前三步的處理十分繁鎖,為保證目的基因得到有前三步的處理十分繁鎖,為保證目的基因得到有效利用,通常用大量的受體細(xì)胞來
11、接受不多的目的基效利用,通常用大量的受體細(xì)胞來接受不多的目的基因。這樣,處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的因。這樣,處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少,必須將它從中檢測出來。很少,必須將它從中檢測出來。無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物有表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物無表達(dá)產(chǎn)物細(xì)菌的檢測,將每個受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落,細(xì)菌的檢測,將每個受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落,檢測菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無表達(dá)產(chǎn)檢測菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無表達(dá)產(chǎn)物的菌落,保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。物的菌落,保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)多細(xì)胞生物
12、的檢測,將每個受體細(xì)胞單獨(dú)培多細(xì)胞生物的檢測,將每個受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個體,檢測這些個體是否攝養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個體,檢測這些個體是否攝入目的基因,攝入的基因是否表達(dá)(是否表現(xiàn)出入目的基因,攝入的基因是否表達(dá)(是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀)。淘汰無變化的個體,保留有相應(yīng)相應(yīng)的性狀)。淘汰無變化的個體,保留有相應(yīng)變化的個體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。變化的個體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。例:用棉鈴飼喂棉例:用棉鈴飼喂棉鈴蟲,如蟲吃后不出現(xiàn)鈴蟲,如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀,說明未攝入中毒癥狀,說明未攝入目的基因或攝入目的基目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲吃后中因未表達(dá)。如蟲吃后中毒死亡,則說明攝入了毒死亡,則說明
13、攝入了抗蟲基因并得到表達(dá)??瓜x基因并得到表達(dá)。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)尋根問底(1)為什么要構(gòu)建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內(nèi)為什么要構(gòu)建基因文庫?直接從含有目的基因的生物體內(nèi)提取不行嗎?提取不行嗎?提示:提示:構(gòu)建基因文庫是獲取目的基因的方法之一,并構(gòu)建基因文庫是獲取目的基因的方法之一,并不是惟一的方式。如果所需要的目的基因序列已知,不是惟一的方式。如果所需要的目的基因序列已知,就可以通過就可以通過PCR方式從含有該基因的生物的方式從含有該基因的生物的DNA中,中,直接獲得,也可以通過反轉(zhuǎn)錄,用直接獲得,也可以通過反轉(zhuǎn)錄,用PCR方式從方式從mRNA中獲得,不一定要構(gòu)建基因文庫。
14、但如果所需要的目中獲得,不一定要構(gòu)建基因文庫。但如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的一的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的一段,或想從一種生物體內(nèi)獲得許多基因,或者想知道段,或想從一種生物體內(nèi)獲得許多基因,或者想知道這種生物與另一種生物之間有多少基因不同,或者想這種生物與另一種生物之間有多少基因不同,或者想知道一種生物在個體發(fā)育的不同階段表達(dá)的基因有什知道一種生物在個體發(fā)育的不同階段表達(dá)的基因有什么不同,或者想得到一種生物的全基因組序列,往往么不同,或者想得到一種生物的全基因組序列,往往就需要構(gòu)建基因文庫。就需要構(gòu)建基因文庫。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)尋根問底:
15、尋根問底:將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡便嗎?如將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡便嗎?如果這么做,結(jié)果會怎樣?果這么做,結(jié)果會怎樣?提示:提示:有人采用總有人采用總DNA注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,即將一個生物中注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,即將一個生物中的總的總DNA提取出來,通過注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體植物,提取出來,通過注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體植物,沒有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建,這種方法針對性差,完全靠運(yùn)氣,沒有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建,這種方法針對性差,完全靠運(yùn)氣,也無法確定什么基因?qū)肓耸荏w植物。此法目前爭議頗多,嚴(yán)也無法確定什么基因?qū)肓耸荏w植物。此法目前爭議頗多,嚴(yán)格來講不算基因工程。格來講不算基因
16、工程。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)1.1.利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素,聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素,聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功能的知識,結(jié)合基因工程操作程序的基本思路,思考一下,若要能的知識,結(jié)合基因工程操作程序的基本思路,思考一下,若要生產(chǎn)人的糖蛋白,可以用大腸桿菌嗎?生產(chǎn)人的糖蛋白,可以用大腸桿菌嗎?有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價結(jié)合的糖鏈,這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價結(jié)合的糖鏈,這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在和高爾基復(fù)合體上加工完成的,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細(xì)胞中,大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器,因此,在大于真核細(xì)胞
17、中,大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器,因此,在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。2.-2.-珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異常時,動物有可能患某種疾病,如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如常時,動物有可能患某種疾病,如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如讓你用基因工程的方法,使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的讓你用基因工程的方法,使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的-珠蛋白,珠蛋白,想一想,應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)?想一想,應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)?尋根問底:尋根問底:點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)(1)從小鼠中克隆出)從小鼠中克隆出-珠蛋白基因的編碼序列(珠蛋白基因的編碼序列
18、(cDNA)。)。(2)將將cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動子,另外加前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動子,另外加上抗四環(huán)素的基因,構(gòu)建成一個表達(dá)載體。上抗四環(huán)素的基因,構(gòu)建成一個表達(dá)載體。(3)將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中,然后在含有)將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中,然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中,大腸桿菌會因不含有抗四環(huán)素基因而死掉;如果培養(yǎng)基菌中,大腸桿菌會因不含有抗四環(huán)素基因而死掉;如果培養(yǎng)基上長出大腸桿菌菌落,則表明上長出大腸桿菌菌落,則表明-珠蛋白基因已進(jìn)入其中。珠蛋
19、白基因已進(jìn)入其中。(4)培養(yǎng)進(jìn)入了)培養(yǎng)進(jìn)入了-珠蛋白基因的大腸桿菌,收集菌體,破碎后珠蛋白基因的大腸桿菌,收集菌體,破碎后從中提取從中提取-珠蛋白。珠蛋白。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)思考:思考:作為基因工程表達(dá)載體,只需含有目的基因就可以完作為基因工程表達(dá)載體,只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎?為什么?成任務(wù)嗎?為什么?不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用,還需不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用,還需要有其他控制元件,如啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建要有其他控制元件,如啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是:上述元件的主要理由是:(1)
20、 生物之間進(jìn)行基因交流,只有使用受體生物自身基因的啟生物之間進(jìn)行基因交流,只有使用受體生物自身基因的啟動子才能比較有利于基因的表達(dá);動子才能比較有利于基因的表達(dá);(2) 通過通過cDNA文庫獲得的目的基因沒有啟動子,只將編碼序列文庫獲得的目的基因沒有啟動子,只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄;導(dǎo)入受體生物中無法轉(zhuǎn)錄;點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)(3) 目的基因是否導(dǎo)入受體生目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記;物中需要有篩選標(biāo)記;(4) 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平,往往還要增加一些其他調(diào)水平,往往還要增加一些其他調(diào)控元件,如增強(qiáng)子等;控元件,如增強(qiáng)子等;(5) 有時需
21、要確定目的基因表有時需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位,達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位,往往要加上可以標(biāo)識存在部位的往往要加上可以標(biāo)識存在部位的基因(或做成目的基因與標(biāo)識基基因(或做成目的基因與標(biāo)識基因的融合基因),如綠色熒光蛋因的融合基因),如綠色熒光蛋白基因等。白基因等。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)3.根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理,你能分你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎?若將一個抗病基因?qū)魧⒁粋€抗病基因?qū)胄←溨腥胄←溨?理論上講你應(yīng)該怎樣做理論上講你應(yīng)該怎樣做?要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株,因
22、為不是所有的農(nóng)桿菌菌株都要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株,因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物;可以侵染單子葉植物;要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì),一般為乙酰丁香酮等,目的是使要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì),一般為乙酰丁香酮等,目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏(趨化性)和激活農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏(趨化性)和激活農(nóng)桿菌的的Vir區(qū)(誘導(dǎo))的基因,使區(qū)(誘導(dǎo))的基因,使T-DNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體轉(zhuǎn)移并插入到染色體DNA上。上。點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)1為了培育節(jié)水高產(chǎn)品種,科學(xué)家將大麥中與抗旱為了培育節(jié)水高產(chǎn)品種,科學(xué)家將大麥中與抗旱節(jié)水有關(guān)的基因?qū)胄←湥玫睫D(zhuǎn)基因小麥,其節(jié)水有關(guān)的基因?qū)?/p>
23、入小麥,得到轉(zhuǎn)基因小麥,其水分利用率提高了水分利用率提高了20%。這項(xiàng)技術(shù)的遺傳學(xué)原理。這項(xiàng)技術(shù)的遺傳學(xué)原理是是A基因重組基因重組 B基因突變基因突變 C基因復(fù)制基因復(fù)制 D基因分離基因分離鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)2利用蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因培育的抗蟲棉是利用蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因培育的抗蟲棉是否成功,最好檢測否成功,最好檢測A是否有抗生素產(chǎn)生是否有抗生素產(chǎn)生 B是否有目的基因表達(dá)是否有目的基因表達(dá)C是否有抗蟲的性狀出現(xiàn)是否有抗蟲的性狀出現(xiàn) D是否能分離到目的基因是否能分離到目的基因 鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)3水母發(fā)光蛋白由水母發(fā)光蛋白由236個氨基
24、酸構(gòu)成,其中天冬氨個氨基酸構(gòu)成,其中天冬氨酸、甘氨酸和絲氨酸構(gòu)成發(fā)光環(huán),現(xiàn)已將這種蛋酸、甘氨酸和絲氨酸構(gòu)成發(fā)光環(huán),現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是A促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞促使目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 B促使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制促使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制C使目的基因容易被檢測出來使目的基因容易被檢測出來 D使目的基因容易成功表達(dá)使目的基因容易成功表達(dá)鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)4 4根據(jù)根據(jù)mRNAmRNA的信息推出獲取目的基因的方法是()的信息推出獲取目的基因的方
25、法是()A A、用用DNADNA探針測出目的基因探針測出目的基因B B、用用mRNAmRNA探針測出目的基因探針測出目的基因C C、用用mRNAmRNA反轉(zhuǎn)錄形成目的基因反轉(zhuǎn)錄形成目的基因D D、用用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增mRNAmRNA鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)5 PCR5 PCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增DNA,DNA,需要的條件是需要的條件是( )( )目的基因引物四種脫氧核苷酸目的基因引物四種脫氧核苷酸DNADNA聚合酶聚合酶等等mRNAmRNA核糖體核糖體A A、B B、C C、D D、 鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)6 6 獲取目的基因的方法有多種,下列
26、不屬于目的獲取目的基因的方法有多種,下列不屬于目的基因獲取方法的是()基因獲取方法的是()A A、從基因組文庫中獲取從基因組文庫中獲取B B、從從cDNAcDNA文庫中獲取文庫中獲取 C C、從含目的基因生物細(xì)胞中獲取從含目的基因生物細(xì)胞中獲取D D、利用利用PCRPCR技術(shù)獲取技術(shù)獲取鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)7 7 下列高科技成果中,根據(jù)基因重組原理進(jìn)行的下列高科技成果中,根據(jù)基因重組原理進(jìn)行的是(是( ) A A、我國科學(xué)家袁隆平利用雜交技術(shù)培育出超級我國科學(xué)家袁隆平利用雜交技術(shù)培育出超級水稻。水稻。 B B、我國科學(xué)家將蘇云金桿菌的某些基因轉(zhuǎn)移到我國科學(xué)家將蘇云金桿菌
27、的某些基因轉(zhuǎn)移到棉花體內(nèi),培育出抗蟲棉。棉花體內(nèi),培育出抗蟲棉。 C C、我國科學(xué)家通過返回式衛(wèi)星搭載種子培育出我國科學(xué)家通過返回式衛(wèi)星搭載種子培育出太空椒。太空椒。 D D、我國科學(xué)家通過體細(xì)胞我國科學(xué)家通過體細(xì)胞克隆克隆技術(shù)培育出克隆技術(shù)培育出克隆牛。牛。 鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)8 8 有關(guān)基因工程的敘述正確的是有關(guān)基因工程的敘述正確的是( )A A、 限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基限制性內(nèi)切酶只在獲得目的基因時才使用因時才使用B B、 DNA DNA連接酶可以切斷磷酸二酯鍵連接酶可以切斷磷酸二酯鍵C C、 質(zhì)粒都可以做載體質(zhì)粒都可以做載體基因工程都能定向改變生物的性狀基
28、因工程都能定向改變生物的性狀 鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)9 科學(xué)家將控制某藥物蛋白合成的基因轉(zhuǎn)移到白色科學(xué)家將控制某藥物蛋白合成的基因轉(zhuǎn)移到白色來亨雞胚胎細(xì)胞的來亨雞胚胎細(xì)胞的DNADNA中中, ,發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋該藥物蛋白的雞蛋, ,在每一只雞蛋的蛋清中都含有大在每一只雞蛋的蛋清中都含有大量的藥物蛋白量的藥物蛋白; ;而且這些驗(yàn)收孵出的雞而且這些驗(yàn)收孵出的雞, ,仍能產(chǎn)出含仍能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋該藥物蛋白的雞蛋. .據(jù)此分析據(jù)此分析()()A.A.這些雞是轉(zhuǎn)基因工程的產(chǎn)物這些雞是轉(zhuǎn)基因工程的產(chǎn)物 B.B.這種變異屬于可遺傳的變異這種變異屬于可遺傳的變異C.C.該過程運(yùn)用了胚胎移植技術(shù)該過程運(yùn)用了胚胎移植技術(shù) D. D. 該種變異屬于定向變異該種變異屬于定向變異鞏固練習(xí)鞏固練習(xí)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)點(diǎn)點(diǎn)生物學(xué)教學(xué)10 10 下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本過程圖,據(jù)圖回答:過程圖,據(jù)圖回答:(1 1)過程需要)過程需要_酶的參與。(酶的參與。(2 2)物)物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的質(zhì)是從大腸桿菌分離出的_。其化學(xué)本。其化學(xué)本質(zhì)是質(zhì)是_,它必須能在宿主細(xì)胞中,它必須能在宿主細(xì)胞中_。(3)(3)過程表明目的基因過程表明目的基因_
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