2019-2020學年高中生物 第4部分 淺嘗現代生物技術 第7課時 植物的組織培養(yǎng)學案 浙科版選修1

第7課時植物的組織培養(yǎng)學習目標1.進行菊花的組織培養(yǎng)。2.嘗試植物激素的應用。3.說明植物組織培養(yǎng)的原理。一、植物的組織培養(yǎng)1.概念：取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無菌的條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產生愈傷組織，或進而生根發(fā)芽。2.原理：植物細胞的全能性。3.過程：外植體愈傷組織芽、根植株。4.實驗中使用的激素(1)人工合成的萘乙酸代替生長素，人工合成的芐基腺嘌呤代替細胞分裂素。特別提醒植物中存在的天然激素都有相應的使之分解的酶，這樣，天然激素在植物體內的作用和存在時間就較短，而人工合成的激素在植物中沒有相應分解它的酶，所以作用和存在的時間長，作用效果明顯。(2)兩者的摩爾濃度比決定組織是生根，還是生芽。細胞分裂素與生長素的比例高時，誘導芽的生成；兩者比例大致相等時，愈傷組織繼續(xù)生長而不分化；兩者比例低時，會趨于生根。5.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基的比較(1)發(fā)芽培養(yǎng)基：細胞分裂素摩爾濃度大于生長素摩爾濃度的培養(yǎng)基。(2)生根培養(yǎng)基：生長素摩爾濃度大于細胞分裂素摩爾濃度的培養(yǎng)基。歸納總結(1)細胞具有全能性的原因：生物體的每個體細胞都是由受精卵經有絲分裂形成的，含有本物種全套的遺傳物質，都有發(fā)育成完整個體所必需的全套基因。(2)植物體細胞表現出全能性的條件：脫離原來所在植物體(離體培養(yǎng))、營養(yǎng)供給、激素控制、無菌條件、適宜的溫度、pH和光照等外界條件。(3)細胞全能性大小的比較：受精卵>生殖細胞>體細胞；幼嫩組織細胞>成熟組織細胞；分化程度低的細胞>分化程度高的細胞。(4)植物組織培養(yǎng)的一般過程分析名稱過程特點條件脫分化由外植體形成愈傷組織排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞團離體提供營養(yǎng)物質(有機物、無機物)提供激素提供其他適宜條件再分化由愈傷組織形成幼苗或胚狀體結構有根、芽或有生根發(fā)芽的能力營養(yǎng)生長、生殖生長發(fā)育成完整的植物體由根、莖、葉、花、果實、種子組成栽培例1(2019·紹興一中模擬)誘導叢狀苗時，培養(yǎng)基中應添加的植物激素及配比是()A.生長素濃度高于細胞分裂素濃度B.生長素濃度低于細胞分裂素濃度C.生長素濃度低于赤霉素濃度D.生長素濃度高于赤霉素濃度答案B解析誘導叢狀苗時，培養(yǎng)基中應添加的植物激素及配比是細胞分裂素濃度大于生長素濃度，B項符合題意。方法技巧植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用(1)在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素。植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。(2)激素使用的先后順序及其用量的比例對細胞分裂和分化的影響激素使用的先后順序產生的影響使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高激素用量比例產生的影響生長素/細胞分裂素的值結果比值高時趨于生根比值低時誘導芽的生成比值適中愈傷組織繼續(xù)生長不分化例2圖甲是植物組織培養(yǎng)過程示意圖，圖乙是植物激素對愈傷組織分化影響的示意圖。據圖回答下列問題：(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有_。(2)為了保證植物的正常生長，容器內裝有的培養(yǎng)基中除含有小分子有機物和水，還需要含有植物生長所需要的_。(3)在過程A中，為了有利于嫩枝組織細胞啟動細胞分裂形成愈傷組織，常常需要在配制好的培養(yǎng)基中添加_。嫩枝組織細胞接種后25d時，若發(fā)現其邊緣局部污染，原因可能是_。(4)在圖甲過程B中，若愈傷組織沒有形成根，但分化出了芽，根據圖乙分析其原因可能是培養(yǎng)基中生長素_，細胞分裂素_；若要獲得更多的愈傷組織，培養(yǎng)基中兩種激素的含量應該是細胞分裂素量_，生長素少。A.較少B.較多C.中等D.不確定答案(1)全能性(2)各種無機鹽(3)植物激素嫩枝組織細胞消毒不徹底(4)ABC解析(1)植物細胞具有全能性，這是植物組織培養(yǎng)的理論基礎。(2)為了保證植物的正常生長，培養(yǎng)基中一定要添加各種無機鹽。(3)植物組織培養(yǎng)過程中，啟動細胞分裂和愈傷組織的分化都離不開植物激素。培養(yǎng)的嫩枝組織細胞周圍發(fā)生局部污染，可能是因為嫩枝組織細胞消毒不徹底。(4)從圖乙可知，植物激素的種類及其濃度配比都會影響愈傷組織分化的方向，具體結合圖示和題干信息回答即可。二、菊花的組織培養(yǎng)過程歸納總結植物組織培養(yǎng)操作提醒(1)若培養(yǎng)基中沒有添加人工合成的激素，得不到幼苗。(2)菊花培養(yǎng)時莖段方向插反，莖基部朝上，頂端向下插入培養(yǎng)基內，得不到叢狀苗。(3)無菌操作不嚴格，如外植體帶菌，培養(yǎng)基和接種器具滅菌不徹底，接種時帶入雜菌等導致培養(yǎng)失敗。例3下面是有關“植物的組織培養(yǎng)”實驗的流程。請回答：(1)植物組織培養(yǎng)，就是在無菌條件下，將植物組織接種在_上，給予一定的溫度和光照，使之產生_組織，或進而生根發(fā)芽。(2)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和_組成，圖示中，X培養(yǎng)基為_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中常用的凝固劑是_。對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應采用的滅菌方法是_。(3)待苗生根后，移至草炭土或蛭石中培養(yǎng)，這一階段通常稱為_。A.接種B.消毒C.鍛煉D.定植答案(1)培養(yǎng)基愈傷(2)有機成分生根瓊脂高壓蒸汽滅菌法(3)C解析(1)植物組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，在無菌條件下接種在培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產生愈傷組織，或進而生根發(fā)芽，培養(yǎng)為成熟植株的技術。(2)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和有機成分組成；分析圖示可知，X是發(fā)芽后的叢狀苗繼續(xù)培養(yǎng)獲得生根苗的培養(yǎng)基，因此X是生根培養(yǎng)基；培養(yǎng)基中一般采用瓊脂作為凝固劑；培養(yǎng)基滅菌的方法常用的是高壓蒸汽滅菌法。(3)將生根的幼苗移入草炭土或蛭石中進行培養(yǎng)的階段，稱之為鍛煉，C項符合題意。特別提醒LB培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的比較LB培養(yǎng)基以蛋白胨、酵母提取物等有機營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量的無機營養(yǎng)，無機鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類。此外進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需添加特定配比的生長素和細胞分裂素。例4鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一，用組織培養(yǎng)技術繁殖其幼苗的流程如下：新生營養(yǎng)芽叢狀苗幼苗請回答以下問題：(1)選用新生營養(yǎng)芽為培養(yǎng)材料的原因是_，原球莖細胞的細胞壁_(填“厚”或“薄”)。(2)某小組為研究培養(yǎng)鐵皮石斛的培養(yǎng)基中蔗糖和光各自的作用，進行了對照實驗，結果如下：培養(yǎng)條件加蔗糖不加蔗糖光正常生長，分化不生長，死亡暗只生長，不分化不生長，死亡根據以上實驗結果，下列說法正確的是_。A.光為生長提供能量，蔗糖促進細胞分化B.整個組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中都不用加入蔗糖也可發(fā)育成幼苗C.光照只會影響到光合作用的效率D.蔗糖為生長、分化提供能量，光促進細胞分化(3)生物堿屬于鐵皮石斛的_代謝產物，除了從植株中提取，也可以通過將含有原球莖的試管放在搖床上，通過_懸浮培養(yǎng)分散成單細胞，然后培養(yǎng)特定細胞系實現工業(yè)化生產。答案(1)分裂旺盛，全能性容易表達薄(2)D(3)次生液體解析(1)新生的芽幼嫩，分裂能力強，全能性易表達，植物組織培養(yǎng)過程中一般選用新生營養(yǎng)芽為培養(yǎng)材料。原球莖細胞類似愈傷組織，由于愈傷組織是一團未分化的薄壁細胞，因此，原球莖細胞的細胞壁薄。(2)通過對比加蔗糖條件下，有光組能夠正常分化，無光組無法發(fā)生分化，說明光能促進細胞分化；比較不加蔗糖條件下，有無光照均死亡，說明蔗糖為生長提供能量。若保證組織培養(yǎng)正常，需要加入蔗糖，故A、B、C錯誤，D正確。(3)生物堿屬于鐵皮石斛的次生代謝產物，獲取方法可以從植株中提取，也可以通過液體懸浮細胞培養(yǎng)，將愈傷組織(原球莖)分散成單細胞，然后通過培養(yǎng)特定細胞系實現工業(yè)化生產。1.判斷正誤：(1)在植物組織培養(yǎng)中，為了誘導菊花試管苗生根，在培養(yǎng)基中一般不加入NAA()(2)LB培養(yǎng)基和MS培養(yǎng)基相同，都能用于微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)()(3)MS培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可鑒定分解尿素的微生物()(4)在植物組織培養(yǎng)中，二倍體植株的花粉經脫分化與再分化后可得到穩(wěn)定遺傳的植株()(5)制備MS培養(yǎng)基和制備母液時，不同營養(yǎng)成分配制比例有所不同()(6)在植物組織培養(yǎng)中，以花粉作為外植體可得到單倍體植株()(7)植物組織培養(yǎng)過程中無需從外部添加糖類()(8)每次配制MS培養(yǎng)基都需精確稱量配方中的各種成分()(9)感染雜菌的培養(yǎng)基和使用過的培養(yǎng)基都必須經滅菌處理后才能丟棄()答案(1)×(2)×(3)×(4)×(5)(6)(7)×(8)×(9)2.某愈傷組織在如圖甲所示的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后得到如圖乙所示的結構。經分析可知該培養(yǎng)基中()A.細胞分裂素多，生長素少B.細胞分裂素少，生長素多C.細胞分裂素和生長素的用量相等D.只有生長素答案B解析從圖乙中可以看出，該培養(yǎng)基有利于生根且抑制芽的形成，所以可推斷該培養(yǎng)基中生長素多，細胞分裂素少。3.在菊花莖段的組織培養(yǎng)實驗中，對已長出的健壯叢狀苗應該進行怎樣的處理()A.移入日光下，在生芽培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)B.移入日光下，在生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)C.轉入黑暗遮陰環(huán)境中，在草炭土或蛭石中栽種D.轉入黑暗遮陰環(huán)境中，在80%以上濕度下，在任意自然泥土中栽種答案B解析植物的組織培養(yǎng)過程按照以下流程進行：植物組織叢狀苗生根苗幼苗成體，從上述流程不難發(fā)現，只有選項B是正確的。4.植物組織培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)都需要無菌操作，下列不適宜用高壓蒸汽滅菌的是()A.接種環(huán)和鑷子B.三角瓶和廣口瓶C.發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基D.用于培養(yǎng)的幼莖和幼芽答案D解析微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中所需的操作器具、培養(yǎng)基均需要高壓蒸汽滅菌，而微生物的菌種和植物組織培養(yǎng)的幼莖和幼芽不能用高壓蒸汽滅菌，否則會造成其死亡，D項符合題意。5.請分析回答下列有關生物技術專題方面的問題：(1)下表是一種培養(yǎng)基配方，請回答下列問題：成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g該培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌時要在_g/cm2壓力下滅菌30分鐘，為了防止尿素加熱分解，需要單獨用_過濾去除細菌。該培養(yǎng)基屬于什么培養(yǎng)基(多選)_。A.液體B.固體C.鑒定D.選擇F.天然如果要對培養(yǎng)的菌落進行純化，一般采用_(方法)，操作的第一步及每次劃線之前都要對接種環(huán)進行_處理，目的是對接種環(huán)進行_。制備培養(yǎng)基的操作步驟是_(填選項字母)。a.倒平板b.計算c.溶化d.稱量e.滅菌A.abcdeB.ebdcaC.bdcaeD.bdcea(2)如圖是植物組織培養(yǎng)的示意簡圖，請回答下列問題：B表示的是_，它是由高度液泡化的、呈無定型狀態(tài)的薄壁細胞組成的。A能被培養(yǎng)成為C的根本原因是_。植物激素中_是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。答案(1)500G6玻璃砂漏斗BD劃線分離法灼燒滅菌D(2)愈傷組織A具有發(fā)育成該種植物所需的全部基因細胞分裂素和生長素解析(1)題干培養(yǎng)基配方中有葡萄糖，所以在高壓蒸汽滅菌時要在500g/cm2壓力下滅菌30分鐘，為了防止尿素加熱分解，需要單獨用G6玻璃砂漏斗過濾去除細菌。該培養(yǎng)基中添加了瓊脂，尿素作為唯一氮源物質，故該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，用于選擇含有脲酶的細菌。如果要對培養(yǎng)的菌落進行純化，一般采用劃線分離法，操作的第一步及每次劃線之前都要對接種環(huán)進行灼燒滅菌。制備培養(yǎng)基的操作步驟是：計算稱量溶化滅菌倒平板。(2)外植體經脫分化產生愈傷組織，愈傷組織是由高度液泡化的、呈無定型狀態(tài)的薄壁細胞組成的。外植體A能被培養(yǎng)成為植株C的根本原因是A具有發(fā)育成該種植物所需的全部基因。植物激素中細胞分裂素和生長素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。題組一植物組織培養(yǎng)的原理和基本過程1.影響植物組織培養(yǎng)的因素包括()培養(yǎng)基的配制外植體的選取激素的運用消毒溫度、pH、光照A.B.C.D.答案A解析進行植物組織培養(yǎng)，對培養(yǎng)條件要求相當嚴格，需要配制適宜培養(yǎng)基；外植體的脫分化因植物種類、器官來源及其生理狀態(tài)的不同而有很大差別；另外在培養(yǎng)過程中需要無菌操作及適宜的溫度、pH、光照等條件。2.下列關于運用植物組織培養(yǎng)技術產生新個體的敘述，錯誤的是()A.屬于無性生殖B.主要理論依據是植物細胞具有全能性C.培養(yǎng)過程中由于人工培養(yǎng)基含大量營養(yǎng)，不需光照就能發(fā)育成完整植株D.人工培養(yǎng)基中含植物生長發(fā)育所需的全部營養(yǎng)物質，包括礦質元素、糖、維生素等答案C解析植物組織培養(yǎng)技術即植物無菌培養(yǎng)技術，是根據植物細胞具有全能性的原理將外植體培養(yǎng)成完整植株的技術，盡管培養(yǎng)基中含大量營養(yǎng)，培養(yǎng)過程中仍需光照條件，方可形成完整植株(葉綠素的形成需要光照)。3.(2018·樂清中學期末)下圖表示植物組織培養(yǎng)過程。據圖分析，下列敘述正確的是()A.試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑，不含有有機物B.試管中的細胞能進行減數分裂C.調節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的比例可誘導產生不同的植物器官D.植株根尖細胞的全能性比植株根尖細胞的強答案C解析試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑和有機物等，A錯誤；試管中的細胞進行分裂的方式是有絲分裂，B錯誤；調節(jié)培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的比例，可誘導產生根和芽，C正確；植株根尖細胞的全能性與植株根尖細胞的全能性相同，D錯誤。4.(2019·桐鄉(xiāng)質檢)無菌技術是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關鍵，以下說法正確的是()由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對無菌操作的要求非常嚴格對培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌對培養(yǎng)材料進行表面消毒時，一方面要考慮藥劑的消毒效果，另一方面還要考慮植物材料的耐受能力培養(yǎng)中不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對待對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌如果不小心引起污染，將可能造成培養(yǎng)工作前功盡棄A.B.C.D.答案C解析對培養(yǎng)材料用高壓蒸汽滅菌會殺死細胞。題組二植物激素的應用5.在植物組織培養(yǎng)過程中，生長素用量與細胞分裂素用量的比值高時，下列描述正確的是()A.有利于根的分化和芽的形成B.不利于根的分化和芽的形成C.有利于芽的形成，抑制根的分化D.有利于根的分化，抑制芽的形成答案D解析生長素用量與細胞分裂素用量的比值高時，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的形成。6.下列關于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說法中，不正確的是()A.植物組織培養(yǎng)中的關鍵性激素是生長素和細胞分裂素B.先使用生長素，后使用細胞分裂素，有利于細胞分裂和分化C.先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化D.同時使用生長素和細胞分裂素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向答案B解析用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除營養(yǎng)成分外，還需添加植物激素，一般包括生長素和細胞分裂素；外植體脫分化、再分化的誘導方向取決于二者的比例；先使用生長素，后使用細胞分裂素，有利于細胞分裂，但細胞不分化；先使用細胞分裂素，后使用生長素，對細胞的分裂和分化均有利。題組三菊花組織培養(yǎng)的實驗操作7.進行植物組織培養(yǎng)的基本流程是()A.配制培養(yǎng)基取外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培B.配制培養(yǎng)基取外植體消毒接種栽培移栽培養(yǎng)C.配制培養(yǎng)基取外植體消毒接種移栽培養(yǎng)栽培D.取外植體消毒配制培養(yǎng)基接種培養(yǎng)移栽栽培答案A解析進行植物組織培養(yǎng)的一般流程是：配制培養(yǎng)基并滅菌，再取植物幼嫩的部分(外植體)并消毒，然后接種到培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，形成愈傷組織后移栽長出試管苗，最后栽種在土壤中。8.(2019·義烏模擬)菊花的組織培養(yǎng)需要嚴格的無菌操作，下列說法不正確的是()A.對培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌B.幼苗要先移植到消過毒的蛭石或者草炭土等環(huán)境下生活一段時間C.用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，一旦感染雜菌則前功盡棄D.將菊花莖段插入時應注意方向，不應倒插，是為了防止雜菌污染答案D解析植物的組織培養(yǎng)需要嚴格的無菌操作，將菊花莖段插入時要注意莖段的形態(tài)學上下端，不應倒插，是為了生長素的極性運輸，保證成活率，D項錯誤。9.菊花莖的切段在發(fā)芽培養(yǎng)基培養(yǎng)的過程中，有關描述錯誤的是()A.莖的切段不能帶有葉片B.要始終保持在無菌環(huán)境中培養(yǎng)C.培養(yǎng)基中芐基腺嘌呤與萘乙酸的比例要較高D.莖的切段經過脫分化和再分化可形成叢狀苗答案A解析菊花切段接種時，將每段放入1瓶生芽培養(yǎng)基中，每段至少有1張葉片，A錯誤；植物組織培養(yǎng)在生芽和生根的過程中，要始終保持無菌環(huán)境，B正確；發(fā)芽培養(yǎng)基中，細胞分裂素類激素的含量高于生長素類激素的含量，在菊花組織培養(yǎng)過程中，細胞分裂素類激素采用的是芐基腺嘌呤，生長素類激素采用的是萘乙酸，C正確；莖的切段(外植體)通過脫分化形成愈傷組織，再通過再分化產生胚狀體或叢狀苗，D正確。10.在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了34天后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現有的瓶內外植體正常生長，有的瓶內外植體死亡，你認為外植體死亡的原因不可能是()A.接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底B.接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體C.愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照D.培養(yǎng)過程中保持溫度、pH的適宜，但沒有及時調整各種營養(yǎng)物質、激素的比例答案C解析接種時培養(yǎng)基滅菌不徹底，外植體就會受到微生物的污染，從而導致實驗前功盡棄，A項不符合題意；接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體，會導致溫度過高而殺死外植體，B項不符合題意；愈傷組織形成過程中，細胞還沒有開始再分化，沒有葉綠素和葉綠體的形成，不可能進行光合作用，因此愈傷組織形成初期不需要充足的光照，C項符合題意；培養(yǎng)的不同階段，對主要營養(yǎng)物質和激素的需求不同，所以培養(yǎng)過程中要及時調整各種營養(yǎng)物質、激素的比例，D項不符合題意。11.(2018·浙江名校協(xié)作體聯考)下圖表示菊花的嫩枝離體培養(yǎng)過程，請據圖回答下面的問題：(1)若使用自然生長的嫩枝進行組織培養(yǎng)，需將材料放在70%乙醇中浸泡10min，再放入_中浸泡5min，然后用另一該溶液浸泡5min，最后在_中用無菌水清洗。(2)實驗中使用的生長素是人工合成的_，培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)時，有利于芽的分化。(3)待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持_(A.8%B.30%C.60%D.80%)以上的濕度，23天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止。答案(1)5%次氯酸鈉溶液超凈臺(2)萘乙酸(NAA)低(3)D解析(1)對自然莖段進行消毒時，具體操作為：70%乙醇消毒10min5%次氯酸鈉溶液浸泡5min另一5%次氯酸鈉溶液浸泡5min在超凈臺中用無菌水清洗。(2)菊花的嫩枝離體培養(yǎng)過程中，使用的生長素是人工合成的萘乙酸(NAA)，生長素和細胞分裂素的比值能夠影響菊花莖段的分化，當培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值低時，有利于芽的分化，反之有利于根的分化。(3)待生根后，將苗移至草炭土或蛭石中進行濕度鍛煉，先用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度，23天后打開玻璃罩逐漸降低濕度進行鍛煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止，D項符合題意。12.(2019·東陽適應測試)植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術，以下是實驗室進行植物組織培養(yǎng)的一般過程。請回答：(1)以下設備及用品中，該實驗無需使用的是_。A.酒精燈B.滅菌鍋C.封口膜D.玻璃刮刀(2)培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基有：MS培養(yǎng)基、_、生根培養(yǎng)基。與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)一般要添加_、_作為生長調節(jié)劑。(3)下表所列該實驗設備、用品及材料與其滅菌或消毒方法的對應關系中，錯誤的選項是_。選項對象方法A三角瓶高壓蒸汽滅菌B培養(yǎng)基G6玻璃砂漏斗過濾C超凈臺紫外燈照射D自然生長的莖段70%乙醇和5%次氯酸鈉先后浸泡(4)離體組織接種后脫分化形成_，在不同配比激素的誘導下，依次經歷_和生根苗兩個階段，形成試管苗。定植前還需要將試管苗移栽至草炭土或蛭石中繼續(xù)培養(yǎng)，其目的是_。答案(1)D(2)發(fā)芽培養(yǎng)基生長素(或生長素類似物或萘乙酸)細胞分裂素(或細胞分裂素類似物或芐基腺嘌呤)(3)B(4)愈傷組織叢狀苗濕度鍛煉或煉苗(以適應土壤種植)解析(1)在植物組織培養(yǎng)過程中，需要用到酒精燈、滅菌鍋、封口膜等，玻璃刮刀是在做微生物分離實驗時使用的。(2)在植物組織培養(yǎng)過程中，涉及的培養(yǎng)基有：MS培養(yǎng)基、發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)一般要添加生長素和細胞分裂素或其類似物作為生長調節(jié)劑。(3)三角瓶和培養(yǎng)基都需要進行高壓蒸汽滅菌，A正確、B錯誤；超凈臺需要用紫外燈照射，C正確；對自然生長的莖段，需要先后用70%乙醇和5%次氯酸鈉進行浸泡，最后用無菌水清洗，D正確。(4)外植體經脫分化形成愈傷組織，在不同配比激素的誘導下，依次經歷叢狀苗和生根苗兩個階段，形成試管苗。定植前還需要將試管苗移栽至草炭土或蛭石中進行濕度鍛煉。13.(2019·長興高二檢測)請回答下列有關生物技術實踐方面的問題：(1)傳統(tǒng)發(fā)酵技術應用十分廣泛，果酒和果醋就是常見例子。當發(fā)酵裝置由果酒釀造轉為果醋釀造時，首先要提高_，其次要注意通入_。(2)微生物培養(yǎng)基通常在壓力為100kPa，溫度為_條件下，滅菌1530min，然后待培養(yǎng)基冷卻至_左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。(3)菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇_的莖上部新萌生的側枝；進行菊花組織培養(yǎng)時，一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在_，并每天光照不少于14.5h。答案(1)發(fā)酵溫度無菌空氣(2)12160(3)未開花植株1825解析(1)果酒制作需要在缺氧且溫度為2530的環(huán)境中進行，而果醋制作要在有氧且溫度為3035的環(huán)境中進行，所以當發(fā)酵裝置由果酒釀造轉為果醋釀造時，首先要提高發(fā)酵溫度，并注意適時通過充氣口通入無菌空氣。(2)微生物培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌，即在壓力為100kPa，溫度為121條件下，滅菌1530min，然后待培養(yǎng)基冷卻至60左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。(3)菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝；一般將pH控制在5.8左右，溫度控制在1825，并保證每天光照不少于14.5h。14