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2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案

  • 資源ID:105582482       資源大小:26KB        全文頁數(shù):3頁
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2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案

2022年高三生物總復(fù)習(xí) 13-3DNA的粗提取與鑒定學(xué)案 【具體要求】 具體內(nèi)容 考綱 學(xué)習(xí)要求 嘗試對(duì)植物或動(dòng)物組織中的DNA進(jìn)行粗提取 A 理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。 了解DNA的物理化學(xué)性質(zhì) A 知道生物大分子的性質(zhì)及一般的提取方法,明確DNA的粗提取和鑒定方法 理解DNA粗提取以及DNA鑒定的原理 B 能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理。能對(duì)實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂。 【基礎(chǔ)知識(shí)】 一、原理 提取生物大分子的基本思路是 。對(duì)于DNA的粗提取而言,就是要利用 、 等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。 1)DNA的溶解性 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使 充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。 此外,DNA不溶于 溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。【思考】:如何用坐標(biāo)表示DNA隨NaCl溶液變化的溶解性曲線? 2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ,但是對(duì) 沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80oC的高溫,而DNA在 以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解 ,但對(duì)DNA沒有影響。 3)DNA的鑒定 在 條件下,DNA遇 會(huì)被染成 色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。 二、實(shí)驗(yàn)步驟 1)實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮,但是使用 的生物組織,成功的可能性更大。 【思考】在下面的生物材料中選取適合的實(shí)驗(yàn)材料: 魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養(yǎng)基的大腸桿菌 2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液 動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的 ,同時(shí)用 攪拌,過濾后收集濾液即可。 【思考】:如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用 溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。 3)去除濾液中的雜質(zhì) 【思考】用高鹽濃度的溶液和用低鹽濃度的NaC溶液為什么能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)? 4)DNA的析出與鑒定 將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積 、冷卻的 ,靜置 ,溶液中會(huì)出現(xiàn) ,這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。 DNA溶解在2 mol/l的NaCl溶液中 + 二苯胺試劑 溶液顏色變 。 【思考】鑒定粗提取的DNA為什么要進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)? 三.【典型例題】 1.(09通州)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對(duì)DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C.在DNA濾液中加入一定量蛋白酶,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 D.在溶有DNA的2mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,攪拌后取濾液進(jìn)行以后實(shí)驗(yàn) 2.(09南通)下列對(duì)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用85℃的高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對(duì)DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C.利用DNA在0.14 mol·L-1NaCl溶液中溶解度最大的特點(diǎn),可將DNA與雜質(zhì)分離 D.在DNA濾液中加入嫩肉粉,通過木瓜蛋白酶的作用,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 3.(09揚(yáng)州)下列關(guān)于 DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述中,正確的是 A.選材:雞血,因?yàn)殡u血紅細(xì)胞有細(xì)胞核,其它動(dòng)物紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核 B.DNA粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液,因?yàn)镈NA在其中溶解度不同 C.提純:酒精,因?yàn)镈NA溶于酒精,蛋白質(zhì)不溶于酒精 D.鑒定:二苯胺試劑,因?yàn)镈NA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 4.下列操作可以達(dá)到目的的選項(xiàng)是 選項(xiàng) 操作 目的 A 溶解海藻酸鈉時(shí)用大火加熱 海藻酸鈉可以快速溶解 B 將裝有蛋白質(zhì)粗制品的透析袋(玻璃紙制成)放入透析液中 蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離 C 在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中,雞血中加入蒸餾水 稀釋血液,防止凝固 D 洋蔥根尖解離后漂洗 使細(xì)胞分散,有利觀察 5.(多選 09蘇北四市)“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,不正確的是 A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白質(zhì)不溶于酒精溶液,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 B.利用高溫能使蛋白質(zhì)變性,卻對(duì)DNA沒有影響的特性,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 C.在DNA濾液中加入一定量蛋白酶,可將DNA與蛋白質(zhì)分離 D.在溶有DNA的2mol/L氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,攪拌后取濾液進(jìn)行以后實(shí)驗(yàn) 6.(09興化)某同學(xué)以菜花為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn),步驟如下: 步驟一:稱取30g菜花,去梗取花,切碎。 步驟二:將碎菜花放入研缽中,倒入10mL研磨液,充分研磨10min。 步驟三:在漏斗中墊上濾紙,將菜花研磨液過濾到燒杯中。在冰箱中放置幾分鐘,取上清液。 步驟四:將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的某溶液中,并用玻璃棒緩緩、輕輕地?cái)嚢枞芤?。將絮狀物纏繞在玻璃棒上。 請(qǐng)回答下列問題: (1)請(qǐng)指出并改正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的錯(cuò)誤:___________________。 (2)步驟二的目的是使菜花細(xì)胞破碎,釋放DNA,加入研磨液的主要成分有____和___等。 (3)如要使步驟三所得上清液中雜質(zhì)減少,可進(jìn)行______操作后再置于冰箱。 (4)步驟四中所用兩倍體積的某溶液為_________________,需“緩緩、輕輕地”攪拌溶液的原因是 _______ _______。 (5)簡(jiǎn)要說明鑒定步驟四所得絮狀物是DNA的基本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路:____________________ (1)濾紙應(yīng)改為紗布(或尼龍布) (2)洗滌劑 NaCl (3)離心 (4)體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精 防止DNA斷裂 (5)將絮狀物溶于0.015mol/L(或2mol/L)的NaCl溶液中,加入二苯胺試劑,沸水浴加熱,觀察顏色變化,同時(shí)用相應(yīng)濃度的NaCl做對(duì)照實(shí)驗(yàn)。(2分)

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