實(shí)驗(yàn)一神經(jīng)干動(dòng)作電位.ppt
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實(shí)驗(yàn)一神經(jīng)干動(dòng)作電位.ppt
生理學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)一 神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及傳導(dǎo)速 度和不應(yīng)期的測定 【 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?】 1.學(xué)習(xí)和掌握 制備蛙類神經(jīng)干 制作方法。 2. 學(xué)習(xí)使用 BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) 引導(dǎo) 蛙類坐骨神經(jīng)干 動(dòng)作電位 的方法。 分析神經(jīng)干動(dòng)作電位的 基本波形、幅值 、時(shí)程 ,測定神經(jīng)興奮的 傳導(dǎo)速度 和 不應(yīng)期 。 【 實(shí)驗(yàn)原理 】 神經(jīng)干動(dòng)作電位是神經(jīng)興奮 的客觀標(biāo)志。它是由粗細(xì)不等、興奮性不 同的神經(jīng)纖維所組成的,故在神經(jīng)干表面 記錄的動(dòng)作電位為復(fù)合性動(dòng)作電位。這種 電位的幅度在一定范圍內(nèi)可隨刺激強(qiáng)度的 增加而加大。 處于興奮部位的膜外電位負(fù)于靜息部位, 當(dāng)神經(jīng)沖動(dòng)通過后,該處的電位又恢復(fù) 到靜息水平,這一可擴(kuò)布的、一過性的 電位變化,即動(dòng)作電位。如果將兩個(gè)引 導(dǎo)電極分別置于神經(jīng)干表面,當(dāng)神經(jīng)干 一端興奮時(shí),興奮波先后通過兩個(gè)引導(dǎo) 電極處,記錄到兩個(gè)方向相反的電位偏 轉(zhuǎn)波形,稱為 雙向動(dòng)作電位 。 【 實(shí)驗(yàn)對象 】 蟾蜍或蛙 【 實(shí)驗(yàn)器材 】 蛙類手術(shù)器械(粗剪刀,眼科 剪,手術(shù)剪,鑷子,探針,蠟盤,玻璃分針 ,大頭針,)培養(yǎng)皿,神經(jīng)屏蔽盒,引導(dǎo)線 ,刺激電極,任氏液, BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn) 系統(tǒng),廢液缸,張力換能器。 【 實(shí)驗(yàn)步驟 】 1.制備坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標(biāo)本 ( 1)破壞腦脊髓 ( 2)剪除軀干上部及內(nèi)臟 ( 3)剝皮及分離下肢 ( 4)制備坐骨神經(jīng) -腓神經(jīng)標(biāo)本。 2.儀器連接 ( 1)開機(jī)并啟動(dòng) BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) ( 2)本實(shí)驗(yàn)采用雙通道記錄,將兩對引導(dǎo) 電極分別與通道 1和通道 2連接,刺激電極 連接至刺激器輸出接口。 連接方法如見圖: BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng) 神經(jīng)屏蔽盒 CH1 CH2 刺激輸出 刺激電極 地線 C1 C2 C3 C4 儀器連接示意圖 ( 3)將坐骨神經(jīng) 腓神經(jīng)標(biāo)本放入神經(jīng)屏蔽 盒(坐骨神經(jīng)中樞端放在刺激電極上,外周 端放在引導(dǎo)電極上)。 【 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 】 1、觀察細(xì)胞外引導(dǎo)雙相動(dòng)作電位的波形特點(diǎn) 、測定幅值及時(shí)程。 2、測定神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度。 3、測定不應(yīng)期: 記下第二個(gè)動(dòng)作電位剛消失時(shí)的兩個(gè)刺激脈 沖之間的波間隔,此時(shí)的波間隔值即為絕對 不應(yīng)期。用不應(yīng)期減去絕對不應(yīng)期即可得出 相對不應(yīng)期 【 結(jié)果分析 】 1.解釋雙相動(dòng)作電位產(chǎn)生的機(jī)制,記錄動(dòng)作 電位的 時(shí)程、幅值 。 (3) 2.測定神經(jīng)干動(dòng)作電位 傳導(dǎo)速度 :V= S/ T (m/s) 。( 4) 3.動(dòng)作電位 不應(yīng)期 的測量( 5) 4.刺激強(qiáng)度 與復(fù)合動(dòng)作電位幅值的關(guān)系( 6) 【 注意事項(xiàng) 】 1.破壞蟾蜍的腦和脊髓時(shí),應(yīng)防止其耳后腺及 皮膚分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼內(nèi)或污染 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。 2.制備神經(jīng)標(biāo)本過程中,應(yīng)避免用手捏神經(jīng)或 鑷子夾傷神經(jīng)。 3.為了防止神經(jīng)標(biāo)本干燥,制備過程中需不斷 滴加任氏液,使其保持良好的興奮性。 4.將神經(jīng)干放入屏蔽盒之前,用刀片輕刮引 導(dǎo)電極,以保證電極和神經(jīng)干密切接觸。 5制作標(biāo)本過程中,切勿傷及神經(jīng)干及其分 支,避免牽拉和其它不良刺激, 6實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)經(jīng)常在標(biāo)本上滴加任氏液 以保持濕潤,使其保持良好的興奮性。 7每次刺激標(biāo)本以后,必須讓肌肉休息 1-2 分鐘,以防標(biāo)本疲勞。 雙向動(dòng)作電位 傳導(dǎo)速度: 動(dòng)作電位在神經(jīng)干的傳導(dǎo)速度, 可用電生理學(xué)方法進(jìn)行測量。測定神經(jīng)沖動(dòng) 在神經(jīng)干上傳導(dǎo)的距離( S)和通過該距離所 需時(shí)間( t),即可計(jì)算出神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速 度 (V), V S/ t。 不應(yīng)期: 當(dāng)雙脈沖的間隔時(shí)間為 20ms 左右 時(shí),示波器熒光屏上呈現(xiàn)兩個(gè)同樣大小的動(dòng) 作電位。逐漸縮短雙脈沖之間的間隔,第二 個(gè)動(dòng)作電位逐漸向第一個(gè)動(dòng)作電位靠近,振 幅也隨之降低,最后可因落在第一個(gè)動(dòng)作電 位的絕對不應(yīng)期內(nèi)而完全消失。 刺激強(qiáng)度與復(fù)合動(dòng)作電位幅值的關(guān)系 一根神經(jīng)纖維在受到閾值以上刺激產(chǎn)生動(dòng)作 電位不隨著刺激強(qiáng)度增大而增大 , 但是坐骨神經(jīng)干是有許多神經(jīng)纖維組成的 ,在受到閾值以上刺激時(shí) ,由于引起不同數(shù)目神 經(jīng)纖維產(chǎn)生動(dòng)作電位 ,隨著刺激強(qiáng)度增大 ,神經(jīng) 纖維產(chǎn)生動(dòng)作電位的數(shù)目也越多 ,動(dòng)作電位的 幅度也就越大 ,當(dāng)全部神經(jīng)纖維都產(chǎn)生動(dòng)作電 位時(shí) ,動(dòng)作電位的幅度就不會(huì)增大了 故在一定范圍內(nèi) ,坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位的幅 度為何隨著刺激強(qiáng)度增大而增大 實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求 神經(jīng)干動(dòng)作電位引導(dǎo)及其傳導(dǎo)速度和不應(yīng)期測定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二、實(shí)驗(yàn)器材 三、實(shí)驗(yàn)步驟 四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.動(dòng)作電位的時(shí)程 及幅度 2. 寫出閾刺激 、最大刺激強(qiáng)度 ; 3.相對不應(yīng)期 、絕對不應(yīng)期 4.傳導(dǎo)速度: 五、思考題 1.雙相動(dòng)作電位產(chǎn)生機(jī)制。 2.動(dòng)作電位隨刺激增大機(jī)制,與全或無是否矛盾?