海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取與鑒定》課件 新人教版選修1

自主學(xué)習(xí)（實(shí)驗(yàn)思路）自主學(xué)習(xí)（實(shí)驗(yàn)思路） 1、DNA從哪提??？（用什么方法破碎細(xì)胞而從哪提?。浚ㄓ檬裁捶椒ㄆ扑榧?xì)胞而DNA不受破壞）不受破壞） 2、怎樣將、怎樣將DNA與細(xì)胞中的其他生物大分子分離？與細(xì)胞中的其他生物大分子分離？ 3、怎樣鑒定我們提取的、怎樣鑒定我們提取的DNA？一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）提?。ㄒ唬┨崛NADNA的方法的方法閱讀課本閱讀課本5454頁(yè)，思考：頁(yè)，思考：提取生物大分子的基本思路是什么？提取生物大分子的基本思路是什么？DNADNA主要與哪些生物大分子分離？主要與哪些生物大分子分離？方法方法1 1：根據(jù)：根據(jù)DNADNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的濃度的NaClNaCl溶液中的溶解度不同，提取溶液中的溶解度不同，提取DNADNA結(jié)合圖，思考回答課本的問(wèn)題結(jié)合圖，思考回答課本的問(wèn)題 在在NaClNaCl溶液濃度小于溶液濃度小于0.14 mol/L0.14 mol/L時(shí)，時(shí)，DNADNA的溶的溶解度隨解度隨NaClNaCl溶液濃度的溶液濃度的增 加 而 逐 漸 降 低 ； 在增 加 而 逐 漸 降 低 ； 在0.14 mol/L0.14 mol/L時(shí)，時(shí)，DNADNA溶解溶解度最小；當(dāng)溶液濃度繼度最??；當(dāng)溶液濃度繼續(xù)增加時(shí)，續(xù)增加時(shí)，DNADNA的溶解度的溶解度又逐漸增大。又逐漸增大。當(dāng)當(dāng)NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為2 mol2 molL L時(shí)，時(shí)，DNADNA的溶解度最大，濃度為的溶解度最大，濃度為 0.14 mol0.14 molL L時(shí)，時(shí)，DNADNA的溶解度最的溶解度最低。利用這一原理，可以使低。利用這一原理，可以使DNADNA在在鹽溶液中溶解或析出鹽溶液中溶解或析出1、DNADNA在在0.14 mol0.14 molL NaClL NaCl溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)此時(shí)的溶解度最高的特點(diǎn)，可以使此時(shí)的溶解度最高的特點(diǎn)，可以使DNADNA與蛋白質(zhì)分離，與蛋白質(zhì)分離，形成沉淀析出，通過(guò)過(guò)濾，得到初提取的濾出物形成沉淀析出，通過(guò)過(guò)濾，得到初提取的濾出物DNADNA。2 2、利用、利用DNADNA不溶于不溶于酒精酒精，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精的特點(diǎn)，可以將精的特點(diǎn)，可以將DNADNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。3 3、蛋白酶蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNADNA沒(méi)有影響沒(méi)有影響4 4、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080C C的高溫的高溫，而，而DNADNA在在8080C C以上才會(huì)變性（蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生以上才會(huì)變性（蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生沉淀）沉淀）5 5、洗滌劑洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜（脂質(zhì)），但對(duì)能夠瓦解細(xì)胞膜（脂質(zhì)），但對(duì)DNADNA沒(méi)有影響沒(méi)有影響（在植物材料中提取（在植物材料中提取DNADNA使用）使用）（二）檢驗(yàn)原理：（二）檢驗(yàn)原理： 1 1、DNADNA遇二苯胺（沸水?。┏仕{(lán)色遇二苯胺（沸水浴）呈藍(lán)色 2 2、甲基綠與、甲基綠與DNADNA結(jié)合，呈綠色結(jié)合，呈綠色（二）破碎細(xì)胞，獲取含（二）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液的濾液(DNA釋放和溶解）釋放和溶解） 1、破碎動(dòng)物細(xì)胞的方法、破碎動(dòng)物細(xì)胞的方法2、破碎植物細(xì)胞的方法、破碎植物細(xì)胞的方法滲透吸水脹破滲透吸水脹破洗滌劑洗滌劑+食鹽攪拌研磨食鹽攪拌研磨（三）去除濾液中的雜質(zhì)（三）去除濾液中的雜質(zhì)（DNADNA的純化）的純化） 閱讀課本閱讀課本5555頁(yè)的三個(gè)方案頁(yè)的三個(gè)方案新鮮的雞血新鮮的雞血 雞血細(xì)胞雞血細(xì)胞 離心離心雞血雞血細(xì)胞細(xì)胞足量的蒸餾水足量的蒸餾水玻璃棒一個(gè)方向玻璃棒一個(gè)方向快速充分?jǐn)嚢杩焖俪浞謹(jǐn)嚢杓?xì)胞細(xì)胞破裂破裂一層紗布一層紗布過(guò)濾（過(guò)濾（1）含染色質(zhì)的濾液含染色質(zhì)的濾液3、去除濾液中的雜質(zhì)，獲取、去除濾液中的雜質(zhì)，獲取DNA的粗提取物的粗提取物 （DNA的的純化）純化） 染色染色質(zhì)濾質(zhì)濾液液玻璃棒一個(gè)方向攪拌玻璃棒一個(gè)方向攪拌DNA溶液溶液3、去除濾液中的雜質(zhì)，獲取、去除濾液中的雜質(zhì)，獲取DNA的粗提取物的粗提取物 （DNA的的純化）純化） DNA溶液溶液藍(lán)色藍(lán)色無(wú)藍(lán)色無(wú)藍(lán)色1、在制備雞血細(xì)胞液的過(guò)程中，加入檸檬酸鈉的目的、在制備雞血細(xì)胞液的過(guò)程中，加入檸檬酸鈉的目的是（是（ ） A .防止凝血防止凝血 B. 加快加快DNA析出析出 C .加快加快DNA溶解溶解 D.加速凝血加速凝血2、DNA的溶解度最低時(shí)，的溶解度最低時(shí)，NaCl的物質(zhì)的量濃度為（的物質(zhì)的量濃度為（ ） A . 2mol/l B. 0.1mol/l C . 0.14mol/l D. 0.015mol/l3、在向溶解、在向溶解DNA的的NaCl溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（ ） A .加快加快DNA溶解的速度溶解的速度 B. 加快溶解雜質(zhì)的速度加快溶解雜質(zhì)的速度 C .減小減小DNA的溶解度，加快的溶解度，加快DNA析出析出 D.減小雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出減小雜質(zhì)的溶解度，加快雜質(zhì)的析出4、向溶有、向溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中不斷加溶液中不斷加入蒸餾水入蒸餾水,在這個(gè)過(guò)程中在這個(gè)過(guò)程中DNA的溶解度變化情況的溶解度變化情況分別是分別是 A 減小減小;減小減小 B 增大增大;增大增大 C 先減小后增大先減小后增大 D增大增大; 減小減小5、欲使溶有、欲使溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中的溶液中的DNA析出，最有效的辦法是析出，最有效的辦法是 A 加蒸餾水加蒸餾水 B 加礦泉水加礦泉水 C 加清水加清水 D 加生理鹽水加生理鹽水6、與析出、與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是粘稠物有關(guān)的敘述，不正確的是A 操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水，降低DNA的溶解度的溶解度B 操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整分子的完整C 加蒸餾水可以同時(shí)降低加蒸餾水可以同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度和蛋白質(zhì)的溶解度D 當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí)，NaCl溶液的濃度可溶液的濃度可以認(rèn)為是以認(rèn)為是0.14mol/L7、你能采用其他方法對(duì)、你能采用其他方法對(duì)DNA進(jìn)行鑒定嗎？進(jìn)行鑒定嗎？用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。8、DNA遇二苯胺會(huì)染成（沸水浴）遇二苯胺會(huì)染成（沸水?。?A 硅紅色硅紅色 B 紅色紅色 C 紫色紫色 D 藍(lán)色藍(lán)色