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海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取與鑒定》課件 新人教版選修1

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海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取與鑒定》課件 新人教版選修1

自主學習(實驗思路)自主學習(實驗思路) 1、DNA從哪提?。浚ㄓ檬裁捶椒ㄆ扑榧毎鴱哪奶崛??(用什么方法破碎細胞而DNA不受破壞)不受破壞) 2、怎樣將、怎樣將DNA與細胞中的其他生物大分子分離?與細胞中的其他生物大分子分離? 3、怎樣鑒定我們提取的、怎樣鑒定我們提取的DNA?一、基礎(chǔ)知識一、基礎(chǔ)知識(一)提?。ㄒ唬┨崛NADNA的方法的方法閱讀課本閱讀課本5454頁,思考:頁,思考:提取生物大分子的基本思路是什么?提取生物大分子的基本思路是什么?DNADNA主要與哪些生物大分子分離?主要與哪些生物大分子分離?方法方法1 1:根據(jù):根據(jù)DNADNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的濃度的NaClNaCl溶液中的溶解度不同,提取溶液中的溶解度不同,提取DNADNA結(jié)合圖,思考回答課本的問題結(jié)合圖,思考回答課本的問題 在在NaClNaCl溶液濃度小于溶液濃度小于0.14 mol/L0.14 mol/L時,時,DNADNA的溶的溶解度隨解度隨NaClNaCl溶液濃度的溶液濃度的增 加 而 逐 漸 降 低 ; 在增 加 而 逐 漸 降 低 ; 在0.14 mol/L0.14 mol/L時,時,DNADNA溶解溶解度最?。划斎芤簼舛壤^度最?。划斎芤簼舛壤^續(xù)增加時,續(xù)增加時,DNADNA的溶解度的溶解度又逐漸增大。又逐漸增大。當當NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為2 mol2 molL L時,時,DNADNA的溶解度最大,濃度為的溶解度最大,濃度為 0.14 mol0.14 molL L時,時,DNADNA的溶解度最的溶解度最低。利用這一原理,可以使低。利用這一原理,可以使DNADNA在在鹽溶液中溶解或析出鹽溶液中溶解或析出1、DNADNA在在0.14 mol0.14 molL NaClL NaCl溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)此時的溶解度最高的特點,可以使此時的溶解度最高的特點,可以使DNADNA與蛋白質(zhì)分離,與蛋白質(zhì)分離,形成沉淀析出,通過過濾,得到初提取的濾出物形成沉淀析出,通過過濾,得到初提取的濾出物DNADNA。2 2、利用、利用DNADNA不溶于不溶于酒精酒精,細胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒,細胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精的特點,可以將精的特點,可以將DNADNA與蛋白質(zhì)進一步分離。與蛋白質(zhì)進一步分離。3 3、蛋白酶蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對能水解蛋白質(zhì),但是對DNADNA沒有影響沒有影響4 4、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080C C的高溫的高溫,而,而DNADNA在在8080C C以上才會變性(蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生以上才會變性(蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生沉淀)沉淀)5 5、洗滌劑洗滌劑能夠瓦解細胞膜(脂質(zhì)),但對能夠瓦解細胞膜(脂質(zhì)),但對DNADNA沒有影響沒有影響(在植物材料中提?。ㄔ谥参锊牧现刑崛NADNA使用)使用)(二)檢驗原理:(二)檢驗原理: 1 1、DNADNA遇二苯胺(沸水浴)呈藍色遇二苯胺(沸水?。┏仕{色 2 2、甲基綠與、甲基綠與DNADNA結(jié)合,呈綠色結(jié)合,呈綠色(二)破碎細胞,獲取含(二)破碎細胞,獲取含DNA的濾液的濾液(DNA釋放和溶解)釋放和溶解) 1、破碎動物細胞的方法、破碎動物細胞的方法2、破碎植物細胞的方法、破碎植物細胞的方法滲透吸水脹破滲透吸水脹破洗滌劑洗滌劑+食鹽攪拌研磨食鹽攪拌研磨(三)去除濾液中的雜質(zhì)(三)去除濾液中的雜質(zhì)(DNADNA的純化)的純化) 閱讀課本閱讀課本5555頁的三個方案頁的三個方案新鮮的雞血新鮮的雞血 雞血細胞雞血細胞 離心離心雞血雞血細胞細胞足量的蒸餾水足量的蒸餾水玻璃棒一個方向玻璃棒一個方向快速充分攪拌快速充分攪拌細胞細胞破裂破裂一層紗布一層紗布過濾(過濾(1)含染色質(zhì)的濾液含染色質(zhì)的濾液3、去除濾液中的雜質(zhì),獲取、去除濾液中的雜質(zhì),獲取DNA的粗提取物的粗提取物 (DNA的的純化)純化) 染色染色質(zhì)濾質(zhì)濾液液玻璃棒一個方向攪拌玻璃棒一個方向攪拌DNA溶液溶液3、去除濾液中的雜質(zhì),獲取、去除濾液中的雜質(zhì),獲取DNA的粗提取物的粗提取物 (DNA的的純化)純化) DNA溶液溶液藍色藍色無藍色無藍色1、在制備雞血細胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的、在制備雞血細胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的是(是( ) A .防止凝血防止凝血 B. 加快加快DNA析出析出 C .加快加快DNA溶解溶解 D.加速凝血加速凝血2、DNA的溶解度最低時,的溶解度最低時,NaCl的物質(zhì)的量濃度為(的物質(zhì)的量濃度為( ) A . 2mol/l B. 0.1mol/l C . 0.14mol/l D. 0.015mol/l3、在向溶解、在向溶解DNA的的NaCl溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是( ) A .加快加快DNA溶解的速度溶解的速度 B. 加快溶解雜質(zhì)的速度加快溶解雜質(zhì)的速度 C .減小減小DNA的溶解度,加快的溶解度,加快DNA析出析出 D.減小雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出減小雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出4、向溶有、向溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中不斷加溶液中不斷加入蒸餾水入蒸餾水,在這個過程中在這個過程中DNA的溶解度變化情況的溶解度變化情況分別是分別是 A 減小減小;減小減小 B 增大增大;增大增大 C 先減小后增大先減小后增大 D增大增大; 減小減小5、欲使溶有、欲使溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中的溶液中的DNA析出,最有效的辦法是析出,最有效的辦法是 A 加蒸餾水加蒸餾水 B 加礦泉水加礦泉水 C 加清水加清水 D 加生理鹽水加生理鹽水6、與析出、與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的是粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的是A 操作時緩慢滴加蒸餾水,降低操作時緩慢滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度的溶解度B 操作時用玻棒輕緩攪拌以保證操作時用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整分子的完整C 加蒸餾水可以同時降低加蒸餾水可以同時降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度和蛋白質(zhì)的溶解度D 當絲狀粘稠物不再增加時,當絲狀粘稠物不再增加時,NaCl溶液的濃度可溶液的濃度可以認為是以認為是0.14mol/L7、你能采用其他方法對、你能采用其他方法對DNA進行鑒定嗎?進行鑒定嗎?用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。8、DNA遇二苯胺會染成(沸水?。┯龆桨窌境桑ǚ兴。?A 硅紅色硅紅色 B 紅色紅色 C 紫色紫色 D 藍色藍色

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