2018-2019學(xué)年高中生物 專題2 細(xì)胞工程 2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程 2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)教學(xué)案（含解析）新人教版選修3.doc

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：動(dòng)物組織塊單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液―→原代培養(yǎng)―→傳代培養(yǎng)2．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般選用胚胎或幼齡動(dòng)物的組織，細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁(生長(zhǎng))和細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象3．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件包括：無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH及氣體環(huán)境4．動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，屬于無(wú)性繁殖5．用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)閭鞔?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型6．動(dòng)物體細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞是已經(jīng)去核的MⅡ期卵母細(xì)胞一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1．概念從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖2．過(guò)程[填圖](1)細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁2)接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制3)原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)4)傳代培養(yǎng)：貼滿瓶壁的細(xì)胞，出現(xiàn)接觸抑制后，需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖的培養(yǎng)過(guò)程3．條件(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境(2)營(yíng)養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境4．應(yīng)用[連線]二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1．動(dòng)物核移植的概念和類型(1)概念：①供體：動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核；②受體：去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞；③結(jié)果：形成重組胚胎，發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。

2)類型：哺乳動(dòng)物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植2．體細(xì)胞核移植的過(guò)程[填圖]3．體細(xì)胞核移植的應(yīng)用前景[連線]4．體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題(1)體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率非常低2)克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題，表現(xiàn)出生理缺陷、遺傳缺陷等3)克隆動(dòng)物食品的安全性問(wèn)題存在爭(zhēng)議1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的順序是(　　)①原代培養(yǎng)?、趥鞔囵B(yǎng)?、垡鹊鞍酌柑幚斫M織，形成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液A．①②③　　　　　　　　B．①③②C．②①③ D．③①②解析：選D　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是用動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官通過(guò)胰蛋白酶處理制成細(xì)胞懸液，再通過(guò)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)得到細(xì)胞株2．進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，最好選用的培養(yǎng)材料是(　　)A．衰老的動(dòng)物組織細(xì)胞B．成熟動(dòng)物個(gè)體的體細(xì)胞C．動(dòng)物的受精卵D．動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織解析：選D　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般選擇動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡個(gè)體的器官或組織作為培養(yǎng)材料，因?yàn)檫@些器官或組織的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)3．下列哪項(xiàng)條件不是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的(　　)A．無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境　　　B．充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C．適宜的溫度和pH D．95%的空氣和5%的氧氣解析：選D　二氧化碳培養(yǎng)箱的氣體條件是95%的空氣和5%的二氧化碳。

4．進(jìn)行哺乳動(dòng)物克隆時(shí)，細(xì)胞核供體細(xì)胞不能是(　　)A．乳腺細(xì)胞 B．卵細(xì)胞C．胃腺細(xì)胞 D．胚胎細(xì)胞解析：選B　卵細(xì)胞是由減數(shù)分裂形成的，其染色體數(shù)目是體細(xì)胞的一半，不能用作哺乳動(dòng)物克隆時(shí)的細(xì)胞核供體細(xì)胞5．在克隆多利羊的過(guò)程中，下列哪項(xiàng)技術(shù)沒(méi)有運(yùn)用到(　　)A．細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) B．細(xì)胞核移植技術(shù)C．胚胎移植技術(shù) D．基因工程技術(shù)解析：選D　多利羊的培育過(guò)程中首先運(yùn)用了細(xì)胞核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞，然后通過(guò)細(xì)胞的體外培養(yǎng)形成早期胚胎，最后把這個(gè)胚胎移植到代孕母羊子宮中完成后續(xù)的胚胎生長(zhǎng)發(fā)育在整個(gè)過(guò)程中沒(méi)有使用基因工程技術(shù)1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程 (1)選取幼齡動(dòng)物的組織、器官作為材料的原因動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，一般選取幼齡動(dòng)物的組織、器官，其細(xì)胞的分化程度較低，增殖能力強(qiáng)，有絲分裂旺盛，容易培養(yǎng)2)將動(dòng)物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的原因分散成單個(gè)細(xì)胞后容易培養(yǎng)，細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，其代謝廢物容易排出而用大塊組織培養(yǎng)時(shí)，內(nèi)部細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝廢物的排出都較困難，因此， 這些細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間的生存和生長(zhǎng)就較困難。

同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)3)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)①原代培養(yǎng)：是細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，即在沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)②傳代培養(yǎng)：是在細(xì)胞懸液培養(yǎng)一段時(shí)間后，分瓶再進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)4)細(xì)胞株和細(xì)胞系①細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到10～50代，這樣的傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞株②細(xì)胞系：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞在傳到50代后，有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，獲得不死性，這種具有癌變特點(diǎn)的細(xì)胞稱為細(xì)胞系2．植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基類型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、氨基酸、植物激素等無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖、維生素、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等取材植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織過(guò)程脫分化、再分化原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)結(jié)果獲得新個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)物大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物用途①快速繁殖名貴花卉和果樹；②培養(yǎng)無(wú)病毒植株、轉(zhuǎn)基因植物；③大規(guī)模生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物，如藥物、食品添加劑、香料、色素等①生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；②檢測(cè)有毒物質(zhì)；③用于生理、病理、藥理等方面的研究相同點(diǎn)①都需要人工條件下的無(wú)菌操作，無(wú)菌培養(yǎng)；②都需要配制合成培養(yǎng)基；③都需要適宜的溫度、pH等條件[名師點(diǎn)撥]　有關(guān)植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的三點(diǎn)提醒(1)植物組織培養(yǎng)過(guò)程中存在脫分化和再分化，而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有脫分化和再分化過(guò)程。

2)植物組織培養(yǎng)可獲得新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能得到細(xì)胞，沒(méi)有體現(xiàn)細(xì)胞的全能性3)兩種技術(shù)手段培養(yǎng)過(guò)程中都進(jìn)行有絲分裂，不涉及減數(shù)分裂，都可稱為克隆[題組沖關(guān)]1．下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)區(qū)別的是(　　)A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)基的成分有所不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而植物組織培養(yǎng)不能D．植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性解析：選A　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分不同，如培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)基需加入血清，而植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基則不需加入血清動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)都需要在無(wú)菌、人工控制的條件下進(jìn)行；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都可發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變；植物組織培養(yǎng)最終能夠形成完整的植物體，能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞最終不能被培養(yǎng)成新的動(dòng)物，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性2．回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面____________時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的____________此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是____________。

要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用酶處理，常用的酶是____________2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)____________________的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成____________細(xì)胞，這種細(xì)胞的黏著性__________，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量____________3)用某種大分子染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是_________________________________________________________________4)檢查某種有毒物質(zhì)是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用分裂到____________期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察5)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常在________________條件下保存細(xì)胞因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中____________的活性降低，細(xì)胞新陳代謝的速率降低6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚當(dāng)作____________進(jìn)行攻擊解析：(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞表現(xiàn)出接觸抑制現(xiàn)象，此時(shí)是單層細(xì)胞。

用胰蛋白酶處理可以使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)2)隨著細(xì)胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)改變而變成不死性細(xì)胞，這種細(xì)胞的細(xì)胞膜表面糖蛋白減少，細(xì)胞黏著性降低3)由于活細(xì)胞的膜具有選擇透過(guò)性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)；死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失了選擇透過(guò)性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色4)由于細(xì)胞分裂中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，因此最好選用分裂到中期的細(xì)胞用顯微鏡觀察染色體數(shù)目5)由于在冷凍、超低溫或液氮條件下，細(xì)胞中酶的活性降低，細(xì)胞新陳代謝的速率降低，通常在此條件下保存細(xì)胞6)機(jī)體把移植的皮膚當(dāng)作抗原攻擊，會(huì)發(fā)生排斥現(xiàn)象答案：(1)相互接觸　接觸抑制　單層(或一層)　胰蛋白酶　(2)衰老甚至死亡　不死性　降低　減少　(3)活細(xì)胞的膜具有選擇透過(guò)性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色(或死細(xì)胞的膜喪失了選擇透過(guò)性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色)　(4)中(5)冷凍(或超低溫、液氮)　酶　(6)抗原1．細(xì)胞核移植的原理動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理是細(xì)胞核的全能性，而不是動(dòng)物細(xì)胞的全能性因?yàn)閯?dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，不能經(jīng)培養(yǎng)直接發(fā)育成完整個(gè)體，所以用體細(xì)胞核移植技術(shù)能夠得到克隆動(dòng)物，說(shuō)明動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。

2．供體和受體的選擇(1)供體：一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)2)受體：選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞，其原因是：①卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)②卵母細(xì)胞體積大，便于操作③卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富3．克隆動(dòng)物的遺傳特點(diǎn)克隆動(dòng)物的親本有三個(gè)，即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體1)克隆動(dòng)物細(xì)胞核基因來(lái)自體細(xì)胞核供體，因此，克隆動(dòng)物的性狀與體細(xì)胞核供體基本相同2)克隆動(dòng)物的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，因此，克隆動(dòng)物的性狀與卵母細(xì)胞供體部分相同3)代孕母體沒(méi)有為克隆動(dòng)物提供遺傳物質(zhì)，因此，克隆動(dòng)物的性狀與代孕母體沒(méi)有直接關(guān)系[題組沖關(guān)]3．下列對(duì)哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的描述錯(cuò)誤的是(　　)A．該技術(shù)的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植B．通常采用減數(shù)第二次分裂中期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞C．可通過(guò)顯微操作法除去卵母細(xì)胞核D．克隆動(dòng)物是對(duì)提供體細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行了完全復(fù)制解析：選D　克隆動(dòng)物絕大部分遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞核，但細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的遺傳物質(zhì)來(lái)自受體卵母細(xì)胞，其次生物的性狀還受環(huán)境的影響，因此，克隆動(dòng)物并不是對(duì)提供體細(xì)胞的動(dòng)物進(jìn)行完全復(fù)制。

4．(全國(guó)卷Ⅱ節(jié)選)如圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程回答下列問(wèn)題：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_(kāi)_______________過(guò)程①表示去除細(xì)胞核，該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用__________的方法2)經(jīng)過(guò)多次傳代后，供體細(xì)胞中____________的穩(wěn)定性會(huì)降低因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_____________________________________________________4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了________________________________________________________________________解析：(1)哺乳動(dòng)物的正常細(xì)胞核中性染色體的組成為XX(雌性)或XY(雄性)卵母細(xì)胞在培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂的中期時(shí)，常采用顯微操作法去除細(xì)胞核2)一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞在傳代培養(yǎng)到10～50代時(shí)，部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，即遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。

因此，選材時(shí)一般選10代以內(nèi)的細(xì)胞，以保證細(xì)胞正常的二倍體核型3)獲得的克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物基本相同，但不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析，其原因是：克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響4)高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，但其細(xì)胞核的全能性在卵母細(xì)胞質(zhì)中物質(zhì)的作用下仍能得以表達(dá)故克隆羊“多莉(利)”以及其他克隆動(dòng)物的培育成功，證明了高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性答案：(1)XX或XY　 顯微操作　(2)遺傳物質(zhì)　(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響　(4)已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性[方法規(guī)律]判斷有性生殖與無(wú)性生殖的兩種方法(1)從概念上判斷①有性生殖是指經(jīng)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合而成的合子或有性配子直接發(fā)育成個(gè)體的生殖方式②無(wú)性生殖是指不經(jīng)過(guò)生殖細(xì)胞的結(jié)合由親本直接產(chǎn)生子代的生殖方式2)從培養(yǎng)細(xì)胞的種類上判斷①組織培養(yǎng)中培養(yǎng)的不是體細(xì)胞而是有性配子或合子時(shí)，才屬于有性生殖②植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞核移植都屬于無(wú)性生殖 [隨堂基礎(chǔ)鞏固]　1．一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件有(　　)①無(wú)毒的環(huán)境?、跓o(wú)菌的環(huán)境　③培養(yǎng)液中需加血漿?、軠囟扰c動(dòng)物體溫相近?、菪枰狾2?、藜覥O2維持培養(yǎng)液的pHA．①②③④⑤⑥　　　　　　B．①②③④C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥解析：選A　動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒，在細(xì)胞培養(yǎng)液中需添加血清、血漿等一些天然成分，培養(yǎng)溫度一般與動(dòng)物體溫相近。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還需要O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2可維持培養(yǎng)液的pH2．下列過(guò)程屬于動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)的是(　　)A．用胰蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞的過(guò)程B．從機(jī)體取得細(xì)胞后初次進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程C．出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程D．哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程解析：選B　原代培養(yǎng)是最初的細(xì)胞培養(yǎng)，即還沒(méi)有分瓶培養(yǎng)前的細(xì)胞培養(yǎng)3．下列有關(guān)核移植的說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　)A．用核移植技術(shù)得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物B．核移植的受體細(xì)胞最好是受精卵C．核移植技術(shù)可以充分發(fā)揮優(yōu)良種畜的生殖潛力D．用核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的過(guò)程屬于無(wú)性生殖解析：選B　核移植的受體細(xì)胞應(yīng)該是MⅡ期的卵母細(xì)胞，相對(duì)受精卵來(lái)說(shuō)，MⅡ期的卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)所含的物質(zhì)更有利于細(xì)胞核全能性的表達(dá)4．科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖所示(成纖維細(xì)胞可增殖)下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)A．過(guò)程②常用的方法是顯微注射法B．代孕母羊要注射免疫抑制劑防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)使移植胚胎死亡C．卵母細(xì)胞去核的目的是保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞D．整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)從而獲得大量的細(xì)胞群解析：選B　將目的基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法；代孕母羊不會(huì)對(duì)移植胚胎產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)；卵母細(xì)胞去核的目的是保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞；整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可增殖，可進(jìn)行傳代培養(yǎng)從而獲得大量的細(xì)胞群。

5．有關(guān)動(dòng)、植物體細(xì)胞的離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是(　　)A．都需用CO2培養(yǎng)箱　　　 B．都需用液體培養(yǎng)基C．都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行 D．都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性解析：選C　動(dòng)、植物體細(xì)胞的離體培養(yǎng)都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行；動(dòng)物的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基，不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性；植物的體細(xì)胞離體培養(yǎng)一般用固體培養(yǎng)基，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性6．下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是(　　)A．大規(guī)模生產(chǎn)干擾素，用于抵抗病毒感染B．為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚C．大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等D．利用體細(xì)胞克隆技術(shù)，促進(jìn)優(yōu)良種畜的繁育解析：選C　動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用是多方面的，許多重要的生物制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等，都可借助于動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)；也可為大面積燒傷的病人進(jìn)行自身皮膚移植；還可加快優(yōu)良種畜繁育大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等是通過(guò)植物組織培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)的7．科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(如下圖所示)，請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列問(wèn)題：(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)之前，要對(duì)取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織進(jìn)行分離，形成單個(gè)細(xì)胞，這一過(guò)程中需要利用________酶處理，不能用纖維素酶與果膠酶的原因是____________。

2)形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用________期的卵母細(xì)胞，并去掉其細(xì)胞核的原因是______________________________________________________________________________3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出____________和____________等特點(diǎn)4)重組細(xì)胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛體內(nèi)會(huì)生出與供體奶牛遺體性狀相同的犢牛，但也有可能出現(xiàn)性狀上的某些差異，原因是______________________________；________________________________________5)上圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為_(kāi)_______轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說(shuō)明了動(dòng)物__________具有全能性解析：(1)對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行分離，用胰蛋白酶處理，才能形成單個(gè)細(xì)胞因?yàn)槊妇哂袑Ｒ恍?，所以不能用纖維素酶和果膠酶將動(dòng)物細(xì)胞分散開(kāi)2)去掉卵母細(xì)胞核后，重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體細(xì)胞核，其性狀主要由供體細(xì)胞核決定3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)會(huì)表現(xiàn)出細(xì)胞貼壁和接觸抑制的特點(diǎn)。

4)重組細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的犢牛與供體奶牛不完全相同，因?yàn)橹亟M細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自供體細(xì)胞核，少量來(lái)自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，另外性狀還受環(huán)境的影響5)克隆動(dòng)物的成功證明了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性答案：(1)胰蛋白(或膠原蛋白)　酶具有專一性(2)MⅡ(或減Ⅱ中)　使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來(lái)自供體細(xì)胞(或避免卵細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)對(duì)后代造成干擾)　(3)細(xì)胞貼壁　接觸抑制(4)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制　生物的性狀受環(huán)境因素的影響(兩空順序可以顛倒)(5)核移植(或體細(xì)胞核移植)　體細(xì)胞的細(xì)胞核[課時(shí)跟蹤檢測(cè)]　　一、選擇題1．關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織B．將所取的組織需用胰蛋白酶等處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C．在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細(xì)胞都會(huì)衰老死亡解析：選D　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)傳至50代左右，若細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，就能在適宜培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去2．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)A．可用于檢測(cè)某種物質(zhì)的毒性B．可通過(guò)培養(yǎng)各種病變細(xì)胞，用于藥理等方面的研究C．可通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素等D．經(jīng)過(guò)脫分化、再分化，可構(gòu)建人造皮膚解析：選D　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)沒(méi)有脫分化與再分化過(guò)程。

3．下列關(guān)于哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物的敘述，正確的是(　　)A．體細(xì)胞核移植過(guò)程中通常用卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞B．目前科學(xué)家可以用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動(dòng)物個(gè)體C．利用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)可有選擇地繁殖某一性別的家畜D．用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代50代以內(nèi)的細(xì)胞解析：選C　體細(xì)胞核移植過(guò)程中常用減Ⅱ中期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制，不能經(jīng)過(guò)培養(yǎng)獲得動(dòng)物個(gè)體；用于核移植的供體細(xì)胞一般是10代以內(nèi)的細(xì)胞；克隆動(dòng)物細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體細(xì)胞，其性別與提供細(xì)胞核的動(dòng)物一致，因此可有選擇地克隆某一性別的家畜4．名為“我的皮膚”的生物活性繃帶自從在英國(guó)誕生后，給皮膚燒傷病人帶來(lái)了福音該活性繃帶的原理是先采集一些細(xì)胞樣本，再讓其在特殊的膜片上增殖5～7天后，將膜片敷在患者的傷口上，膜片會(huì)將細(xì)胞逐漸“釋放”到傷口，并促進(jìn)新生皮膚層生長(zhǎng)，達(dá)到加速傷口愈合的目的下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是(　　)A．“我的皮膚”的獲得技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程B．人的皮膚燒傷后會(huì)因人體第二道防線的破壞而導(dǎo)致免疫力下降C．種植在膜片上的細(xì)胞樣本最好選自患者本人D．膜片能否把細(xì)胞順利“釋放”到傷口，加速患者自身皮膚愈合與細(xì)胞膜上的HLA有關(guān)解析：選B　根據(jù)題意，“我的皮膚”的獲得技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；人的皮膚燒傷后會(huì)因人體第一道防線的破壞而導(dǎo)致免疫力下降；種植在膜片上的細(xì)胞樣本最好選自患者本人，以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；人類白細(xì)胞抗原(HLA)是人類主要組織相容性復(fù)合物，作為不同個(gè)體免疫細(xì)胞相互識(shí)別的標(biāo)志，因此膜片能否把細(xì)胞順利“釋放”到傷口，加速患者自身皮膚愈合與細(xì)胞膜上的HLA有關(guān)。

5．下圖是某克隆羊的培育過(guò)程模式圖，則與獲得該克隆羊接近的生殖方式和其發(fā)育成熟時(shí)所分泌的主要性激素分別是(　　)A．無(wú)性生殖；雄性激素　　　　B．無(wú)性生殖；雌性激素C．有性生殖；雄性激素 D．有性生殖；雌性激素解析：選A　克隆羊的產(chǎn)生屬于無(wú)性生殖；由于此過(guò)程是雄性羊供核，故得到的克隆羊?yàn)樾坌?，所分泌的性激素是雄性激?．動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，不能從該圖獲得的結(jié)論是(　　)A．正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B．有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大C．培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D．培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大解析：選A　分析圖中曲線可知，對(duì)癌細(xì)胞來(lái)說(shuō)，相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，培養(yǎng)基中有無(wú)血清，其細(xì)胞數(shù)目相差不大，說(shuō)明培養(yǎng)基中有無(wú)血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大；對(duì)正常細(xì)胞來(lái)說(shuō)，在相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒(méi)有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目，說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞的培養(yǎng)影響較大；在相同條件和相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大，正常細(xì)胞達(dá)到一定的數(shù)目后不再增加，而癌細(xì)胞卻能不斷增加。

7．在將動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞時(shí)，可以使用胰蛋白酶由此判斷以下推測(cè)不合理的是(　　)A．動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系B．處理時(shí)一定要注意處理時(shí)間、加酶量C．胰蛋白酶一定不會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致解析：選C　胰蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解，胰蛋白酶可破壞動(dòng)物細(xì)胞之間的聯(lián)系，可推測(cè)動(dòng)物細(xì)胞之間可能依靠蛋白質(zhì)相互聯(lián)系；細(xì)胞膜中含有蛋白質(zhì)成分，所以一定要注意處理的時(shí)間和酶的用量，以防止對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷；酶促反應(yīng)需要適宜的pH，所以培養(yǎng)液的pH應(yīng)與胰蛋白酶作用的適宜pH基本一致8．實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如圖所示下列敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．甲過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行B．乙過(guò)程可用胰蛋白酶處理皮膚組織C．丙過(guò)程是原代培養(yǎng)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D．丁過(guò)程是傳代培養(yǎng)細(xì)胞，不能保持二倍體核型解析：選D　取小鼠的皮膚組織應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；乙過(guò)程可用胰蛋白酶處理皮膚組織，獲得單細(xì)胞懸液；原代培養(yǎng)會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象；傳代培養(yǎng)細(xì)胞通常10代以內(nèi)能保持二倍體核型，10代以后核型可能發(fā)生變化9．對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　)A．在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B．細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸C．為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分解析：選B　在利用肝組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，以分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，得到單個(gè)細(xì)胞；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，要求對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行消毒、滅菌，也可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；合成培養(yǎng)基通常需加入血清、血漿等天然成分。

10．如圖為小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)培養(yǎng)的過(guò)程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)A．可用膠原蛋白酶分散組織塊中的細(xì)胞B．MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化C．加入培養(yǎng)液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自傳代培養(yǎng)的細(xì)胞D．細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象解析：選C　將動(dòng)物組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶；由圖可知，在胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液中加入MEF細(xì)胞不分化，但未加MEF細(xì)胞的一組易分化，據(jù)此推知MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化；加入培養(yǎng)液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自原代培養(yǎng)的細(xì)胞；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象二、非選擇題11．某研究小組進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量________2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是________________________________________________________________________。

3)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長(zhǎng)________________藥物實(shí)驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更____若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用________消化處理4)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的________5)已知癌細(xì)胞的X基因表達(dá)過(guò)量與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)要實(shí)驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入________，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無(wú)菌生理鹽水經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的________或________合成水平的差異，確定Y的藥效解析：(1)腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖能力，細(xì)胞周期短，相同時(shí)間內(nèi)，甲細(xì)胞的數(shù)量多于乙細(xì)胞2)動(dòng)物血清中含有胰島素、生長(zhǎng)激素等，能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，是天然的培養(yǎng)基3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了獲得細(xì)胞懸液，需用胰蛋白酶處理組織塊，使組織塊中的細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要?jiǎng)?chuàng)造無(wú)菌的環(huán)境，因此為了防止病菌污染，可在培養(yǎng)基中添加抗生素5)設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)需要遵循單一變量原則，因此A組需要加入藥物Y，可通過(guò)檢測(cè)基因是否完成轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)確定Y的藥效。

答案：(1)多　(2)血清中含有適合動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)　(3)產(chǎn)生接觸抑制　多　胰蛋白酶　(4)抗生素　(5)藥物Y　mRNA　蛋白質(zhì)12．下面是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)圖中①所示的結(jié)構(gòu)名稱是____________2)圖中Ⅰ、Ⅲ所示的生物技術(shù)名稱分別是__________、____________3)過(guò)程Ⅰ通常用去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)樗黖_____________________________________________________4)圖中過(guò)程Ⅲ通常用②作受體細(xì)胞的原因是__________________________5)圖示治病的方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是________________該種基因治療所屬類型為_(kāi)_________________解析：(1)①是從供體(患者)體細(xì)胞分離出的細(xì)胞核2)Ⅰ表示核移植技術(shù)，Ⅲ表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)3)核移植時(shí)，通常用去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是卵母細(xì)胞體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，尤其是它含有能促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。

4)②為胚胎干細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)可形成各種類型的組織器官5)通過(guò)自身細(xì)胞的細(xì)胞核移植得到克隆器官，將其移植到患者體內(nèi)后不會(huì)發(fā)生 免疫排斥答案：(1)細(xì)胞核　(2)核移植技術(shù)　轉(zhuǎn)基因技術(shù)(或基因工程、DNA重組技術(shù)、基因拼接技術(shù))　(3)含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)　(4)這些細(xì)胞分化程度很低，具有全能性，可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì)胞、組織、器官　(5)沒(méi)有排斥反應(yīng)　體外基因治療13．甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)可能有一定致畸、致癌作用，利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強(qiáng)弱請(qǐng)依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告1)實(shí)驗(yàn)步驟：①制備細(xì)胞懸液：用____________處理小白鼠胚胎組織使其離散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液②進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)：a．取A、B、C三個(gè)潔凈的錐形瓶，分別加入________b．向A、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的化學(xué)物質(zhì)甲、乙，并將其搖勻；C瓶加等量生理鹽水，作為對(duì)照c．把3個(gè)培養(yǎng)瓶放在37 ℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)③制作臨時(shí)裝片④鏡檢和統(tǒng)計(jì)：把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，尋找處于有絲分裂中期的細(xì)胞，與小白鼠正常體細(xì)胞有絲分裂高倍顯微鏡照片進(jìn)行對(duì)比，以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞統(tǒng)計(jì)________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：培養(yǎng)瓶ABC變異細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的百分比1.3%12.5%0.1%(3)請(qǐng)寫出實(shí)驗(yàn)結(jié)論：__________________________________________________________________________________________________________________________________解析：(1)①解離組織細(xì)胞常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶②根據(jù)b的實(shí)驗(yàn)步驟可以得出：a中A、B、C三個(gè)潔凈的錐形瓶，分別加入等量的細(xì)胞懸浮液④根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?，?yīng)統(tǒng)計(jì)該時(shí)期變異的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比3)C組為對(duì)照組，A與B組變異細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)的比例均比C組高，說(shuō)明甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有一定毒性，B組數(shù)據(jù)比A組的數(shù)據(jù)大說(shuō)明乙的毒性比甲的毒性大答案：(1)①胰蛋白酶?、赼.等量的細(xì)胞懸浮液?、茉摃r(shí)期變異的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞總數(shù)的百分比　(3)甲、乙兩種化學(xué)物質(zhì)均有一定毒性，且乙的毒性比甲的毒性大。