北京市高考生物專(zhuān)題復(fù)習(xí) 專(zhuān)題28 克隆技術(shù)課件 新人教版

專(zhuān)題28克隆技術(shù)考點(diǎn)考點(diǎn)1 1 植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程1.(2016江蘇單科,9,2分)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞破裂C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動(dòng)物,其線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體五年高考答案答案D植物細(xì)胞融合前需先用酶解法去掉細(xì)胞壁,形成原生質(zhì)體,再用PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合,A錯(cuò)誤;人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子,不用原生質(zhì)體為材料,B錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞需與經(jīng)免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞融合,再經(jīng)篩選培養(yǎng)才能獲得單克隆抗體,C錯(cuò)誤;動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核取出,移入已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,核移植克隆動(dòng)物的線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體。解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵解答本題的關(guān)鍵是熟知題中所述的知識(shí)。植物細(xì)胞融合時(shí)需要先去掉細(xì)胞壁;原生質(zhì)體與植物細(xì)胞的區(qū)別在于有無(wú)細(xì)胞壁;能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞,而不是骨髓瘤細(xì)胞。2.(2013重慶理綜,5,6分)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線(xiàn)為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D.生根時(shí),培養(yǎng)基通常應(yīng)含-萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑答案答案B本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。在愈傷組織中,因植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁,阻礙了細(xì)胞融合,所以此時(shí)加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,不能獲得染色體加倍的細(xì)胞;消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害;愈傷組織出芽是細(xì)胞分化的結(jié)果,而細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá);生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,生根時(shí),培養(yǎng)基通常含有-萘乙酸等生長(zhǎng)素類(lèi)調(diào)節(jié)劑。故B項(xiàng)錯(cuò)誤。3.(2013江蘇單科,11,2分)某種極具觀(guān)賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是()A.利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上D.采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)答案答案B本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不發(fā)生性狀分離,可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗,也可采用將幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗;花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物,利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗,其高度不育,且會(huì)發(fā)生性狀分離,因此B項(xiàng)方案不能選用。4.(2015四川理綜,9,11分)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲(chóng)的轉(zhuǎn)基因棉,其過(guò)程如下圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。質(zhì)粒中“Bt”代表“Bt基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”(1)過(guò)程需用同種酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過(guò)程獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái),應(yīng)使用培養(yǎng)基。(2)過(guò)程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓進(jìn)入棉花細(xì)胞;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是。(3)若過(guò)程僅獲得大量的根,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加以獲得芽;部分接種在無(wú)激素培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根,原因是。(4)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲(chóng)性狀,常用方法是。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉能減少的使用,以減輕環(huán)境污染。答案答案(11分)(1)限制性核酸內(nèi)切(1分)選擇(1分)(2)T-DNA(1分)篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞(2分)(3)細(xì)胞分裂素濃度(1分)芽頂端合成的生長(zhǎng)素向基部運(yùn)輸,促進(jìn)根的分化(2分)(4)投放棉鈴蟲(chóng)(2分)農(nóng)藥(1分)解析解析本題考查基因工程與植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。(1)同種限制酶切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA,可獲得相同的黏性末端,以構(gòu)建基因表達(dá)載體。重組質(zhì)粒含完整的卡那霉素抗性基因,故應(yīng)使用含卡那霉素的選擇培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。(2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),其目的是利用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌將T-DNA導(dǎo)入棉花細(xì)胞中。除去農(nóng)桿菌后在含卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),其目的是篩選出含有目的基因的棉花細(xì)胞。(3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí),利于根的分化,抑制芽的形成,反之,有利于芽的分化,抑制根的形成。因芽頂端可合成生長(zhǎng)素,故接種在無(wú)激素的培養(yǎng)基上的芽也能長(zhǎng)根。(4)可用投放棉鈴蟲(chóng)的方法檢測(cè)抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)效果。轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的種植可減少農(nóng)藥使用量,從而減輕環(huán)境污染。5.(2013課標(biāo),40,15分,0.4841)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用酶和酶去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成組織,然后經(jīng)過(guò)形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱(chēng)為。(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案答案(15分)(1)纖維素(1分)果膠(1分)原生質(zhì)體(2分)愈傷(2分)再分化(或分化)(2分)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1分)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(2分,其他合理答案也給分)在減數(shù)分裂過(guò)程中,前者染色體聯(lián)會(huì)異常,而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(3分,其他合理答案也給分)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(1分,答對(duì)其中一個(gè)即給分)解析解析本題主要考查植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。(1)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的流程是先用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞最外層的細(xì)胞壁去除,獲得具有活力的原生質(zhì)體,然后將甲、乙植物的原生質(zhì)體用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合,形成融合細(xì)胞,再將融合細(xì)胞誘導(dǎo)脫分化,進(jìn)一步培養(yǎng)形成愈傷組織,最后經(jīng)過(guò)再分化形成完整的雜種植株。(2)在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,甲、乙兩種植物的二倍體體細(xì)胞融合為四倍體細(xì)胞,四倍體細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成四倍體植株,此植物體細(xì)胞由于含有三個(gè)或三個(gè)以上的染色體組,因此屬于多倍體。此四倍體由于含有2個(gè)甲植物的染色體組和2個(gè)乙植物的染色體組,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)正常,可育。而甲、乙有性雜交的后代細(xì)胞中含1個(gè)甲植物的染色體組和1個(gè)乙植物的染色體組,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂,不可育。(3)可將經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后制成人工種子,這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。以下為教師用書(shū)專(zhuān)用6.(2015浙江自選,18,10分)下面是關(guān)于植物克隆和生態(tài)工程的問(wèn)題。請(qǐng)回答:(1)為培育能高效吸收和富集重金屬鎘的轉(zhuǎn)基因植物,將野外采得的某植物幼葉消毒后,用酶混合液處理,獲得了原生質(zhì)體。酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇,其作用是。(2)將目的基因?qū)氲皆|(zhì)體,經(jīng)培養(yǎng)形成愈傷組織,再通過(guò)得到分散的胚性細(xì)胞,發(fā)育成,生長(zhǎng)發(fā)育后獲得轉(zhuǎn)基因植株。(3)愈傷組織繼代次數(shù)過(guò)多會(huì)喪失細(xì)胞全通能性的表達(dá)能力,下列原因錯(cuò)誤的是。A.愈傷組織發(fā)生遺傳變異B.愈傷組織不能分散成單細(xì)胞C.愈傷組織中激素平衡發(fā)生改變D.愈傷組織對(duì)外源激素敏感性發(fā)生改變(4)某農(nóng)業(yè)生態(tài)工程基地按照生態(tài)和規(guī)律,對(duì)種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)行了優(yōu)化設(shè)計(jì)。通過(guò)套種、間種和等技術(shù)的應(yīng)用,使種植的農(nóng)作物為該生態(tài)系統(tǒng)組成成分中的提供更多的食物。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中盡量不施用農(nóng)藥,其目的是。A.減少水土流失B.減少土壤肥力C.減少環(huán)境污染D.減少生物多樣性答案答案(10分)(1)維持滲透壓(2)液體懸浮培養(yǎng)胚狀體(3)B(4)經(jīng)濟(jì)輪種消費(fèi)者C解析解析(1)混合液中加入甘露醇,可以維持一定的滲透壓,保持去壁后的原生質(zhì)體的正常形態(tài)。(2)導(dǎo)入目的基因的原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)形成愈傷組織后,采用液體懸浮培養(yǎng)獲得分散的胚性細(xì)胞,胚性細(xì)胞可發(fā)育成胚狀體,進(jìn)而發(fā)育成植株個(gè)體。(3)愈傷組織細(xì)胞繼代培養(yǎng)次數(shù)過(guò)多由于外源植物激素平衡改變而不能分化成胚狀體而失去全能性,也有可能發(fā)生變異,致使對(duì)外源激素敏感性改變,而失去全能性。愈傷組織分化形成胚狀體不需要分散成單個(gè)細(xì)胞。(4)構(gòu)建農(nóng)業(yè)生態(tài)工程基地需遵循生態(tài)和經(jīng)濟(jì)規(guī)律,對(duì)種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)。如種植業(yè)中采用套種、間種和輪種等技術(shù),可使農(nóng)作物為消費(fèi)者提供更多的食物。另外,為減少環(huán)境污染,農(nóng)業(yè)生態(tài)工程要求盡量不施用農(nóng)藥。7.2014江蘇單科,29(1)(3)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為。(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、。(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀(guān)察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是、。答案答案(1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓(3)秋水仙素(低溫)果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期解析解析(1)外植體經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)分析坐標(biāo)曲線(xiàn)圖,可見(jiàn)培養(yǎng)液中的蔗糖濃度已降至較低,pH也由6降為4,因此使得細(xì)胞生命活動(dòng)受阻,細(xì)胞干重減小。培養(yǎng)液中的蔗糖可為培養(yǎng)的細(xì)胞提供能源,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。(3)二倍體愈傷組織經(jīng)秋水仙素、低溫等人工誘導(dǎo)處理,可產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。植物細(xì)胞之間除纖維素外,還存在果膠層,因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)人工誘導(dǎo)后,細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍成4n,染色體數(shù)為4n的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,處于有絲分裂后期的細(xì)胞中含有8n條染色體;若加倍到4n的細(xì)胞,經(jīng)誘導(dǎo)后繼續(xù)加倍形成染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,這樣的細(xì)胞再進(jìn)行有絲分裂,在中期時(shí)會(huì)看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞。評(píng)析評(píng)析本題主要考查植物組織培養(yǎng)、人工誘導(dǎo)多倍體及固定化技術(shù)等相關(guān)知識(shí)。試題難度中等。理解細(xì)胞脫分化、秋水仙素的生理作用等基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的關(guān)鍵。8.(2014廣東理綜,29,16分)鐵皮石斛是我國(guó)名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡(jiǎn)稱(chēng)PLBs,類(lèi)似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下:新生營(yíng)養(yǎng)芽PLBsPLBs實(shí)驗(yàn)結(jié)果在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時(shí)間的變化如圖所示,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)選用新生營(yíng)養(yǎng)芽為外植體的原因是,誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過(guò)程稱(chēng)。(2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在,。(3)脫落酸(ABA)能提高生物堿含量,但會(huì)抑制PLBs的生長(zhǎng)。若采用液體培養(yǎng),推測(cè)添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開(kāi)展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測(cè),在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案時(shí)探討了以下問(wèn)題:ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式:設(shè)4個(gè)ABA處理組,1個(gè)空白對(duì)照組,3次重復(fù)。因ABA受熱易分解,故一定濃度的無(wú)菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基后按比例加入。實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣:實(shí)驗(yàn)50天完成,每10天取樣,將樣品(PLBs)稱(chēng)重(g/瓶)后再測(cè)定生物堿含量。如初始(第0天)數(shù)據(jù)已知,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需測(cè)定的樣品數(shù)為。依所測(cè)定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時(shí)間:當(dāng)某3個(gè)樣品(重復(fù)樣)的時(shí),其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間是適宜培養(yǎng)時(shí)間。答案答案(16分)(1)細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)形成PLBs(2分)細(xì)胞的脫分化(2分)(2)生長(zhǎng)起始較快(2分)快速生長(zhǎng)時(shí)間較長(zhǎng)(2分)PLBs產(chǎn)量較高(2分)(3)滅菌、冷卻(2分)75(1分)PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大(3分)解析解析本題主要考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí),并以植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)為背景考查實(shí)驗(yàn)探究能力。(1)植物組織培養(yǎng)中外植體常選用莖尖、芽尖,原因是莖尖和芽尖分裂能力強(qiáng),易誘導(dǎo)其脫分化,而且一般不含病毒。(2)從圖中比較光照和黑暗條件下PLBs重量曲線(xiàn)可知,光照條件下PLBs生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在開(kāi)始生長(zhǎng)時(shí)間,快速生長(zhǎng)的時(shí)間及達(dá)到生長(zhǎng)穩(wěn)定時(shí)重量的大小等方面。(3)因ABA受熱易分解,所以必須在培養(yǎng)基滅菌并冷卻至常溫時(shí)才能加入無(wú)菌ABA。依題干信息可知,本實(shí)驗(yàn)有5組,每組3個(gè)樣品,需分別在第0天、10天、20天、30天、40天、50天測(cè)定PLBs重量和生物堿含量,而初始數(shù)據(jù)(第0天)已知,因此還需測(cè)定的樣品數(shù)是535=75。根據(jù)實(shí)驗(yàn)探究目的,當(dāng)3個(gè)樣品(重復(fù)樣)的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時(shí),其對(duì)應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間為適宜培養(yǎng)時(shí)間。9.(2013天津理綜,9,15分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線(xiàn)處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程所需的酶是。(2)過(guò)程后,在顯微鏡下觀(guān)察融合的活細(xì)胞中有供體的存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖,通過(guò)、染色和制片等過(guò)程制成裝片,然后在顯微鏡下觀(guān)察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株14中一定是雜種植株的有。(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。答案答案(15分)(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌解析解析本題考查植物細(xì)胞工程,染色體變異的實(shí)驗(yàn)鑒定以及高抗性的雜種植株的篩選等相關(guān)知識(shí)。(1)去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。(2)葉肉細(xì)胞含有葉綠體,因此通過(guò)PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體,以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用,因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇,使原生質(zhì)體處于等滲溶液中,以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要判斷染色體變異的類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖,通過(guò)解離、漂洗、染色、制片等過(guò)程制成裝片,然后進(jìn)行顯微觀(guān)察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)根據(jù)兩親本的差異性條帶,可知再生植株1、2和4既有花椰菜的條帶,又有黑芥的條帶,因此再生植株1、2和4一定為雜種植株。(6)要篩選出高抗性的雜種植株,應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的病原體接種實(shí)驗(yàn),即接種黑腐病菌?？键c(diǎn)考點(diǎn)2 2 動(dòng)物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程1.(2015天津理綜,6,6分)2015年2月3日,英國(guó)議會(huì)下院通過(guò)一項(xiàng)歷史性法案,允許以醫(yī)學(xué)手段培育“三親嬰兒”。三親嬰兒的培育過(guò)程可選用如下技術(shù)路線(xiàn)。據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.該技術(shù)可避免母親的線(xiàn)粒體遺傳病基因傳遞給后代B.捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒C.三親嬰兒的染色體全部來(lái)自母親提供的細(xì)胞核D.三親嬰兒的培育還需要早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)答案答案C分析圖示可知:母親只提供細(xì)胞核,因而可避免母親的線(xiàn)粒體遺傳病基因傳遞給后代,A正確;紅綠色盲基因?qū)儆诤嘶?而捐獻(xiàn)者提供的是去核卵母細(xì)胞,其紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒,B正確;三親嬰兒的染色體一半來(lái)自母親提供的細(xì)胞核,一半來(lái)自精子,C錯(cuò)誤;體外受精形成的受精卵需培養(yǎng)形成早期胚胎,而后經(jīng)胚胎移植進(jìn)入受體子宮內(nèi),D正確。評(píng)析評(píng)析本題以三親嬰兒的培育過(guò)程為信息載體,考查了學(xué)生的理解能力和對(duì)知識(shí)的應(yīng)用能力,試題難度中等。疑難突破疑難突破真核生物的有性生殖過(guò)程,遺傳物質(zhì)大部分來(lái)母方,小部分來(lái)自父方;染色體一半來(lái)自母方,一半來(lái)自父方。2.(2014北京理綜,5,6分)在25的實(shí)驗(yàn)條件下可順利完成的是()A.光合色素的提取與分離B.用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖C.大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)D.制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基答案答案A用斐林(本尼迪特)試劑鑒定還原糖時(shí)需5065水浴加熱,B錯(cuò)誤;大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng),需要保持在大鼠的正常體溫3739,C錯(cuò)誤;制備用于植物組織培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基需高溫滅菌,D錯(cuò)誤;光合色素的提取與分離在室溫下即可完成,A正確。3.(2014浙江理綜,3,6分)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀答案答案B連續(xù)細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型,A錯(cuò)誤;癌細(xì)胞在合適條件下可以發(fā)生不定向的基因突變而逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞,B正確;由一個(gè)單細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆,C錯(cuò)誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,D錯(cuò)誤。4.(2013重慶理綜,2,6分)題圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是()A.是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B.中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案答案D本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)。是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞;中使用聚乙二醇或滅活的病毒等,有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性;是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。5.(2017課標(biāo)全國(guó),38,15分)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個(gè)片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)現(xiàn)要通過(guò)基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動(dòng)子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是。(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過(guò)程中,在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為,加入了作為合成DNA的原料。(3)現(xiàn)通過(guò)基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用,某同學(xué)做了如下實(shí)驗(yàn):將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對(duì)照,培養(yǎng)并定期檢測(cè)T淋巴細(xì)胞濃度,結(jié)果如圖2。由圖2可知:當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加,此時(shí)若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是。僅根據(jù)圖1、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會(huì)降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。答案答案(1)編碼乙的DNA序列起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA無(wú)起始密碼子(2)模板dNTP(3)進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液的pHC解析解析本題主要考查基因工程技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理。(1)分析編碼蛋白乙的DNA序列可知,起始端無(wú)ATG,轉(zhuǎn)錄出的mRNA不含起始密碼子,所以直接利用該DNA片段構(gòu)建的表達(dá)載體在宿主細(xì)胞中不能翻譯出蛋白乙。(2)進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),需要在反應(yīng)體系中加入熱穩(wěn)定DNA聚合酶、引物、模板DNA、原料dNTP(dCTP、dATP、dGTP、dTTP)等。(3)因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)具有細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時(shí),若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖,則需分瓶進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng);在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需提供一定的氣體環(huán)境,其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。由圖2可知,加入蛋白丙刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果明顯比蛋白甲、乙低;結(jié)合圖1中蛋白丙與蛋白甲、乙的DNA序列可知,缺少C片段所編碼的肽段,會(huì)降低蛋白刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。知識(shí)拓展知識(shí)拓展認(rèn)識(shí)dNTPdNTP是脫氧核糖核苷三磷酸的縮寫(xiě),是dCTP、dATP、dGTP、dTTP的統(tǒng)稱(chēng)?！癲”代表脫氧,“N”代表變量A、T、C、G中的一種。dNTP可作為生物DNA合成以及PCR過(guò)程的原料。6.(2016課標(biāo)全國(guó),40,15分)下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為。過(guò)程表示去除細(xì)胞核,該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采用的方法。代表的過(guò)程是。(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣,其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了。答案答案(15分)(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析解析(1)因供體的性別不確定,故其細(xì)胞核內(nèi)的性染色體組成為XX或XY;一般將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到M中期,用顯微操作法將其細(xì)胞核去除;代表的過(guò)程是胚胎移植。(2)傳代培養(yǎng)10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型,超過(guò)10代以后,供體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀會(huì)產(chǎn)生影響。(4)克隆動(dòng)物的成功可以證明動(dòng)物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。以下為教師用書(shū)專(zhuān)用7.(2013浙江理綜,6,6分)實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚組織皮膚細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞1培養(yǎng)細(xì)胞2A.甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化C.丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D.丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性答案答案C本題主要考查了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。取小鼠皮膚組織進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒;通過(guò)胰蛋白酶消化皮膚組織可獲得皮膚細(xì)胞;丙過(guò)程為最初的傳代培養(yǎng),得到的細(xì)胞大多具有正常二倍體核型;來(lái)源于多個(gè)細(xì)胞的非克隆培養(yǎng)所得到的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,該實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞屬于非克隆培養(yǎng),丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性。8.(2015安徽理綜,31,9分)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊,以便通過(guò)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白,其技術(shù)路線(xiàn)如圖。(1)由過(guò)程獲得的A為。(2)在核移植之前,必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核,目的是。受體應(yīng)選用期卵母細(xì)胞。(3)進(jìn)行胚胎移植時(shí),代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生,這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆,理論上可獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊,這是因?yàn)?。答案答?1)含目的基因的表達(dá)載體(2)保證核遺傳物質(zhì)來(lái)自含目的基因的成纖維細(xì)胞M(3)免疫排斥反應(yīng)(4)整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析解析(1)在基因工程中,構(gòu)建基因表達(dá)載體后才能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。(2)核移植技術(shù)選用的成熟卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期(M中期),需去掉細(xì)胞核以保證得到的克隆動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)來(lái)自于含目的基因的成纖維細(xì)胞。(3)胚胎移植時(shí)受體動(dòng)物對(duì)移入的胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎的存活提供了可能。(4)由于整合有目的基因的胎兒成纖維細(xì)胞具有增殖能力,可進(jìn)行傳代培養(yǎng),所以理論上可利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和核移植技術(shù),獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因綿羊。9.(2014課標(biāo),40,15分,0.4871)某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條),并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè),得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí),所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是小鼠,理由是。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有,體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是。(3)雜交瘤細(xì)胞中有個(gè)細(xì)胞核,染色體數(shù)目最多是條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是。答案答案(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)不能無(wú)限增殖解析解析(1)分析題圖可知,經(jīng)4次免疫后,小鼠Y的血清抗體效價(jià)就可達(dá)到16000以上。由于4次免疫后的Y小鼠的血清抗體效價(jià)最高,故最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,而且誘導(dǎo)融合率不可能達(dá)到100%,所以會(huì)有未融合的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞、融合的具有同種核的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞三種類(lèi)型。(3)雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的核物質(zhì),但細(xì)胞核只有一個(gè)。由于雜交瘤細(xì)胞在分裂過(guò)程中染色體會(huì)丟失,故細(xì)胞核中染色體數(shù)目最多是40+60=100(條)。(4)B淋巴細(xì)胞已經(jīng)分化,沒(méi)有無(wú)限增殖的潛能。評(píng)析評(píng)析本題考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí),難度較大。理解細(xì)胞融合的原理與操作過(guò)程是解題關(guān)鍵。A A組組 2015201720152017年高考模擬年高考模擬基礎(chǔ)題組基礎(chǔ)題組時(shí)間:20分鐘分值:48分選擇題(每題6分,共48分)1.(2017北京西城期末,13)下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖,沒(méi)有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時(shí)間后被機(jī)體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥,可抑制DNA和RNA的合成,對(duì)正常細(xì)胞也有一定毒性。下列說(shuō)法不正確的是()A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的三年模擬B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程C.在治療中,應(yīng)先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強(qiáng),能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害答案答案C根據(jù)B淋巴細(xì)胞分泌特異性抗體和骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性,利用融合篩選出的雜交瘤細(xì)胞,來(lái)制備單克隆抗體,A正確;阿霉素可抑制DNA和RNA的合成,即抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程,B正確;據(jù)圖可知,要先注射生物導(dǎo)彈,生物導(dǎo)彈可使非活化磷酸阿霉素,轉(zhuǎn)化成活化的阿霉素,能更好地殺死腫瘤細(xì)胞,C錯(cuò)誤;單克隆抗體能將阿霉素定向帶到腫瘤細(xì)胞所在的位置,能減輕阿霉素對(duì)正常細(xì)胞的傷害,D正確。解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵準(zhǔn)確獲取圖中信息是解題關(guān)鍵。2.(2017北京豐臺(tái)期末,19)如圖為植物體細(xì)胞雜交及組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列說(shuō)法不正確的是()A.過(guò)程分別需要用胰蛋白酶和聚乙二醇進(jìn)行處理B.高爾基體在過(guò)程發(fā)揮了重要作用C.過(guò)程需要更換培養(yǎng)基,才能進(jìn)一步分化為植株D.A、B的基因型分別為Rr、Yy,則雜種植株的基因型為RrYy答案答案A過(guò)程分別需要用纖維素酶、果膠酶和聚乙二醇進(jìn)行處理;高爾基體在過(guò)程再生細(xì)胞壁中發(fā)揮了重要作用;過(guò)程需要更換培養(yǎng)基,調(diào)整細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例后,才能進(jìn)一步分化為植株。植物體細(xì)胞雜交后形成的雜種植株的基因型即為雜交前植株基因型的組合。易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示胰蛋白酶用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中組織細(xì)胞的離散處理。3.(2016北京海淀期末,30)下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中,不正確的是()A.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性B.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分基本相同答案答案D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基特有的成分有葡萄糖、動(dòng)物血清或血漿、抗生素等;植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基特有的成分有蔗糖、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素、瓊脂等,D錯(cuò)誤。動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理都是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,C正確。4.(2016北京豐臺(tái)期末,49)下列屬于克隆的過(guò)程是()將目的基因與載體結(jié)合并在受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增由一個(gè)精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成四個(gè)精子通過(guò)植物組織培養(yǎng)將離體細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株固體培養(yǎng)基上的一個(gè)細(xì)菌繁殖形成一個(gè)菌落由一個(gè)受精卵細(xì)胞形成一個(gè)多細(xì)胞個(gè)體A.B.C.D.答案答案D克隆意為復(fù)制,中擴(kuò)增重組DNA屬于分子水平的克隆,產(chǎn)生遺傳信息相同的DNA;屬于植物個(gè)體的克隆,通過(guò)組織培養(yǎng)產(chǎn)生遺傳物質(zhì)相同的子代;屬于微生物個(gè)體或細(xì)胞水平的克隆,單菌落中的細(xì)菌遺傳物質(zhì)均相同,為減數(shù)分裂產(chǎn)生精子的過(guò)程,基因可能發(fā)生分離和重組,精子中遺傳物質(zhì)和精原細(xì)胞不同;一個(gè)受精卵形成多細(xì)胞個(gè)體屬于生長(zhǎng)發(fā)育,D正確。5.(2016北京西城期末,18)下圖是科學(xué)家利用供體生物DNA中的無(wú)限增殖調(diào)控基因,制備單克隆抗體的過(guò)程。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.經(jīng)限制酶處理后的目的基因與載體的黏性末端相同B.是經(jīng)特定抗原免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞C.此種制備單克隆抗體的方法涉及轉(zhuǎn)基因及動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)D.經(jīng)檢測(cè)和篩選后的,既能無(wú)限增殖又可分泌單克隆抗體答案答案C據(jù)圖分析:該過(guò)程包括轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),不包括動(dòng)物細(xì)胞融合,C錯(cuò)誤;經(jīng)同種限制酶處理后目的基因與載體露出相同的黏性末端,A正確;受體細(xì)胞導(dǎo)入無(wú)限增殖調(diào)控基因可以制備單克隆抗體,說(shuō)明該細(xì)胞能分泌抗體,為效應(yīng)B細(xì)胞,B正確;由于為導(dǎo)入了無(wú)限增殖調(diào)控基因的B淋巴細(xì)胞,因此其既能夠產(chǎn)生特異性抗體,又能無(wú)限增殖,D正確。6.(2016北京東城期末,28)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟中不正確的是()A.將特定的抗原蛋白注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B.在融合前需要用纖維素酶分別處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C.用聚乙二醇(PEG)作誘導(dǎo)劑,使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D.篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體答案答案B纖維素酶可用于植物體細(xì)胞雜交時(shí)去除細(xì)胞壁,B錯(cuò)誤。7.(2016北京豐臺(tái)期末,50)對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說(shuō)法不正確的是()A.在利用肝腫瘤組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí),可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是抑制細(xì)胞呼吸C.為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素D.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入血清、血漿等天然成分答案答案B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH,B錯(cuò)誤。8.(2016北京東城期末,29)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,不正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性B.傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞C.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物答案答案A細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織,分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖,故依據(jù)的原理是細(xì)胞增殖,A錯(cuò)誤。B B組組 2015201720152017年高考模擬年高考模擬綜合題組綜合題組時(shí)間:50分鐘分值:70分一、選擇題(每題6分,共48分)1.(2017北京順義期末,29)下列有關(guān)生物工程技術(shù)的敘述,正確的是()A.DNA連接酶的作用部位是DNA分子中堿基之間的氫鍵B.去除植物細(xì)胞壁、將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理C.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因作為目的基因D.植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合體現(xiàn)細(xì)胞膜有選擇透過(guò)性答案答案B去除植物細(xì)胞壁需要纖維素酶和果膠酶,將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞需要胰蛋白酶或膠原蛋白酶。深度解析深度解析DNA連接酶的作用部位是兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵;基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因作為標(biāo)記基因;植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。2.(2017北京東城期末,30)下圖為培育甘蔗脫毒苗的兩條途徑,研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)程獲得的幼苗脫毒效果更好。下列敘述不正確的是()A.帶葉原基的芽與植物體其他組織中的病毒含量相同B.過(guò)程的作用是使組織中的病毒在圖中處理溫度下部分或全部失活C.過(guò)程、所用培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同D.上圖中脫毒苗的培育過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性答案答案A根據(jù)題目分析可知,本題是采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),利用植物細(xì)胞的全能性,培育甘蔗脫毒苗,D正確;和為再分化過(guò)程,誘導(dǎo)生芽和誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同,C正確;溫度處理,可以使組織中的病毒部分或全部失活,B正確;帶葉原基的芽與植物體其他組織中的病毒含量不同,A錯(cuò)誤。易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用順序和不同配比會(huì)影響組織分化的方向。3.(2017北京順義期末,28)下列現(xiàn)代生物技術(shù)實(shí)踐中不需進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的是()A.通過(guò)單倍體育種培育矮稈抗病的水稻品種B.通過(guò)植物體細(xì)胞雜交方法培育白菜甘藍(lán)C.通過(guò)誘變育種的方法培育高產(chǎn)大豆D.通過(guò)轉(zhuǎn)入Bt基因的方法培育抗蟲(chóng)棉答案答案C誘變育種是指利用物理因素或化學(xué)因素誘發(fā)生物發(fā)生基因突變,植物育種中一般作用于處理萌發(fā)的種子或幼苗,不需要再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。解后反思解后反思要判斷哪些生物技術(shù)實(shí)踐需要植物組織培養(yǎng),其實(shí)可以從植物組織培養(yǎng)的操作對(duì)象入手,一般是特定的植物細(xì)胞或離體的組織器官才需要在人工條件下實(shí)現(xiàn)其細(xì)胞的全能性,A、B、D三種技術(shù)中很明顯必須進(jìn)行植物組織培養(yǎng)才能最終培育成完整植株。4.(2016北京海淀一模,5)在應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得白菜甘藍(lán)的操作步驟中,不正確的是()A.用鹽酸和酒精的混合液解離以獲得原生質(zhì)體B.用聚乙二醇誘導(dǎo)白菜和甘藍(lán)的原生質(zhì)體融合C.用植物組織培養(yǎng)技術(shù)把雜種細(xì)胞培養(yǎng)成植株D.經(jīng)篩選獲得符合要求的白菜甘藍(lán)雜種植株答案答案A在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,需要用纖維素酶和果膠酶去壁以獲得原生質(zhì)體,用鹽酸和酒精的混合液解離細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,可用于觀(guān)察洋蔥根尖有絲分裂實(shí)驗(yàn),A錯(cuò)誤。5.(2016北京延慶一模,5)在培育“白菜甘藍(lán)”的常規(guī)操作過(guò)程中,不需要的是()A.在嚴(yán)格的無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作B.用酶解法在高滲溶液中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行去壁處理C.借助標(biāo)記基因篩選融合成功的原生質(zhì)體D.適當(dāng)調(diào)整,以利于愈傷組織再分化細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素答案答案C培育“白菜甘藍(lán)”需要運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù),C項(xiàng)所述操作不需要;用酶解法在高滲溶液中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行去壁處理可保證原生質(zhì)體不會(huì)因?yàn)槲疂q破;組織培養(yǎng)過(guò)程中,調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例可改變愈傷組織的分化方向。6.(2015北京東城綜合測(cè)試,29)下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中不正確的是()A.植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁獲得的原生質(zhì)體仍然具有全能性B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需用胰蛋白酶處理獲取單個(gè)細(xì)胞C.需使用特定的選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞D.DNA連接酶將DNA分子堿基對(duì)之間的氫鍵連接起來(lái)答案答案D植物細(xì)胞的細(xì)胞壁為細(xì)胞的非生命部分,對(duì)細(xì)胞全能性無(wú)影響;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)成分,使細(xì)胞離散開(kāi),避免出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象而影響細(xì)胞增殖;因瘤細(xì)胞與免疫后的B淋巴細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)融合處理后,得到不同種類(lèi)的融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞,故需用特定的選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞;DNA連接酶作用的部位是不同脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。7.(2015北京石景山一模,5)下表是不同篩選的方法或結(jié)果,完全正確的一組是()選項(xiàng)目的方法或結(jié)果A篩選耐鹽的楊樹(shù)品種用不同濃度的NaCl液處理不同品種楊樹(shù)幼苗,凈光合效率最大的為耐鹽品種B篩選土壤中能分解尿素的細(xì)菌培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源,同時(shí)添加酚紅指示劑C基因工程中篩選含目的基因的細(xì)胞用作載體的質(zhì)粒應(yīng)含有某種抗生素抗性基因D篩選產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞在具有篩選作用的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)答案答案BA選項(xiàng)應(yīng)用不同濃度的NaCl液處理相同品種楊樹(shù)幼苗,凈光合效率最大的為耐鹽品種;基因工程中用作載體的質(zhì)粒應(yīng)含有某種抗生素抗性基因或其他的標(biāo)記基因;應(yīng)用抗原抗體特異性雜交的特點(diǎn),篩選產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。8.(2015北京東城綜合測(cè)試,27)將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”,能夠用于殺死人類(lèi)的某些癌細(xì)胞,其過(guò)程如下圖所示。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同B.經(jīng)形成的雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖并產(chǎn)生單一抗體C.過(guò)程需要篩選并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞D.抗體的靶向作用使過(guò)程具有高度特異性答案答案B過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理均為細(xì)胞膜的流動(dòng)性;經(jīng)過(guò)形成的雜交瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖,因不同的脾細(xì)胞(脾中含淋巴細(xì)胞)分泌的抗體不一定相同,形成的雜交瘤細(xì)胞種類(lèi)較多,分泌的也不是單一的抗體;過(guò)程需要篩選并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞;生物導(dǎo)彈是抗癌藥物與單抗連接,抗體具有與抗原特異性結(jié)合的特點(diǎn),使過(guò)程具有高度特異性。9.(2017北京朝陽(yáng)二模,31)金黃色葡萄球菌可引起皮膚傷口感染、敗血癥等疾病。有研究發(fā)現(xiàn)機(jī)體自身可產(chǎn)生免疫活性物質(zhì)IL-33抵御金黃色葡萄球菌感染,科研人員對(duì)IL-33作用機(jī)制進(jìn)行了研究。(12分)(1)皮膚感染金黃色葡萄球菌后,皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞分泌IL-33抵御感染屬于免疫。(2)科研人員用金黃色葡萄球菌感染小鼠,觀(guān)察小鼠背部皮膚潰爛情況和皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞中IL-33的表達(dá)情況,結(jié)果如圖1。二、非選擇題(共22分)由圖可知,感染后第天皮膚潰爛面積最大;皮膚潰爛面積變化與IL-33表達(dá)量變化趨勢(shì)。(3)已有研究證實(shí),角質(zhì)形成細(xì)胞通過(guò)表達(dá)REG3A抵御病菌。為了檢測(cè)REG3A的免疫功能,科研人員將等量的金黃色葡萄球菌分別與不同濃度的REG3A混合,采用法,統(tǒng)計(jì)3小時(shí)后金黃色葡萄球菌活菌的數(shù)量,結(jié)果如圖2。結(jié)果表明隨著濃度的增加,REG3A抑菌效果。(4)科研人員為了研究REG3A和IL-33的關(guān)系,利用技術(shù)培養(yǎng)角質(zhì)形成細(xì)胞并檢測(cè)細(xì)胞中REG3A及IL-33表達(dá)量,結(jié)果如圖3。圖3綜合上述結(jié)果,推測(cè)小鼠機(jī)體抵御金黃色葡萄球菌感染的調(diào)控機(jī)制如圖4,請(qǐng)?zhí)顚?xiě)相關(guān)內(nèi)容。,。答案答案(1)非特異性(2)3一致(3)稀釋涂布平板逐漸增強(qiáng)(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)IL-33REG3A促進(jìn)(+)抑制(-)解析解析(1)非特異性免疫是人類(lèi)在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中建立起來(lái)的天然的防御屏障,是生來(lái)就有的,不針對(duì)特定的病原體。它包括兩道防線(xiàn),第一道防線(xiàn)是指皮膚黏膜的阻擋作用,黏膜上的纖毛的清掃作用以及皮膚分泌物的殺菌作用,第二道防線(xiàn)是指吞噬細(xì)胞以及體液中的殺菌物質(zhì)。(2)由圖1可知,隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng),皮膚潰爛面積與IL-33表達(dá)量都是先增加后下降,感染后第3天皮膚潰爛面積最大,且IL-33表達(dá)量也最大,可見(jiàn)二者的變化趨勢(shì)一致。(3)若要統(tǒng)計(jì)活菌的數(shù)量,常采用的是稀釋涂布平板法。由圖2曲線(xiàn)圖可知,在一定范圍內(nèi),隨著REG3A濃度的增加,金黃色葡萄球菌活菌的數(shù)量在減少,表明REG3A抑菌效果在逐漸增強(qiáng)。(4)解答本題的關(guān)鍵是讀懂圖3所給出的信息,IL-33shRNA和金黃色葡萄球菌的有(+)或無(wú)(-)代表了實(shí)驗(yàn)處理,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知:施加金黃色葡萄球菌(+)比不施加金黃色葡萄球菌(-),REG3A和IL-33所對(duì)應(yīng)圖像變粗,即REG3A和IL-33含量增多,說(shuō)明金黃色葡萄球菌促進(jìn)了二者的表達(dá)。施加IL-33shRNA(+)比不施加IL-33shRNA(-),REG3A和IL-33所對(duì)應(yīng)圖像變細(xì),可知IL-33shRNA抑制了REG3A和IL-33的產(chǎn)生,而IL-33shRNA應(yīng)該直接抑制IL-33的產(chǎn)生,REG3A也被抑制,可推測(cè)是因?yàn)镮L-33的減少導(dǎo)致,所以IL-33促進(jìn)REG3A的合成。綜合以上信息可得出,、小鼠機(jī)體抵御金黃色葡萄球菌感染的調(diào)控機(jī)制是:金黃色葡萄球菌感染后,角質(zhì)形成細(xì)胞中IL-33表達(dá)量增加促進(jìn)REG3A表達(dá)量的增加,進(jìn)而促進(jìn)了金黃色葡萄球菌活菌的數(shù)量的減少,抑制金黃色葡萄球菌的感染。解后反思解后反思本題以“金黃色葡萄球菌感染小鼠”為背景材料,來(lái)探究IL-33抵御金黃色葡萄球菌感染的作用機(jī)制,重點(diǎn)考查了考生的信息獲取和綜合運(yùn)用能力,問(wèn)題的設(shè)計(jì)中只有3個(gè)空考查了基礎(chǔ)知識(shí)“非特異性免疫、稀釋涂布平板和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)”,其他7個(gè)問(wèn)題的答案全部來(lái)自于圖形所給出的信息。對(duì)于圖形信息題考生應(yīng)學(xué)會(huì)觀(guān)察圖形,收集有用的信息,明確關(guān)鍵點(diǎn)以及曲線(xiàn)的走勢(shì),整體比較得出結(jié)論;對(duì)于實(shí)驗(yàn)信息題考生應(yīng)明確實(shí)驗(yàn)的目的,確定實(shí)驗(yàn)的變量,分析實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,找到自變量和因變量的關(guān)系。10.(2016北京豐臺(tái)期末,57)人類(lèi)在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖:(10分)(1)過(guò)程代表的過(guò)程是。(2)過(guò)程構(gòu)建出的表達(dá)載體必須要含有和目的基因等結(jié)構(gòu)。(3)生產(chǎn)藥物時(shí)可用微生物做受體細(xì)胞,則應(yīng)采用處理,使受體細(xì)胞處于,從而將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞;藥物生產(chǎn)也可用乳腺生物反應(yīng)器,那么應(yīng)采用的方法,將表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞。(4)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)技術(shù)名稱(chēng)是,誘導(dǎo)該過(guò)程的化學(xué)試劑是。(5)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí),可選用圖中基因工程生產(chǎn)的作疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí),可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒,與已知病毒進(jìn)行比較;或用圖中的進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。答案答案(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)(至少答出兩種)(3)Ca2+感受態(tài)(或容易吸收周?chē)鶧NA的狀態(tài))顯微注射(4)動(dòng)物細(xì)胞融合聚乙二醇(PEG)(5)A蛋白核酸序列抗A蛋白的單克隆抗體解析解析(1)以病毒RNA為模板獲得病毒DNA的過(guò)程稱(chēng)為逆轉(zhuǎn)錄。(2)基因表達(dá)載體需要具備啟動(dòng)子、目的基因、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等結(jié)構(gòu)。啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄,終止子終止目的基因轉(zhuǎn)錄,標(biāo)記基因的作用是鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因,從而篩選含有目的基因的細(xì)胞,復(fù)制原點(diǎn)保證表達(dá)載體自我復(fù)制。(3)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常利用Ca2+轉(zhuǎn)化法,首先用Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能夠吸收環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)即感受態(tài);若將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞,常采用顯微注射技術(shù)。(4)是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù),誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有化學(xué)試劑聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。(5)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí),可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí),可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒,與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較;或采用抗原抗體雜交法,即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。