果蠅雜交實(shí)驗(yàn)山東大學(xué).doc

果蠅雜交實(shí)驗(yàn)摘要 果蠅（Drosophila）是遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的動(dòng)物之一。因?yàn)楣壢旧w數(shù)目少、生活史短、繁殖率高、飼養(yǎng)簡(jiǎn)便，在基因分離、連鎖、交換等方面有著深入的研究。本次實(shí)驗(yàn)通過設(shè)計(jì)雜交實(shí)驗(yàn)，觀察記錄實(shí)驗(yàn)過程中的性狀和數(shù)據(jù)，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)知識(shí)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，并驗(yàn)證分離定律、自由組合定律、連鎖交換定律和伴性遺傳。1. 引言普通果蠅的生活史歷經(jīng)卵，幼蟲，蛹和成蟲四個(gè)階段，是一個(gè)完全變態(tài)過程。果蠅具有生活史短，突變型多，染色體數(shù)目少（2n=8）,繁殖率高，飼養(yǎng)簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，是進(jìn)行遺傳學(xué)研究的好材料。普通果蠅突變型中，有常染色體的殘翅及伴性遺傳的白眼等容易觀察到的性狀，便于實(shí)驗(yàn)分析。實(shí)驗(yàn)中選用的果蠅突變性狀一般都可用肉眼鑒定，例如紅眼與白眼，正常翅與殘翅等。而另一些性狀可在解剖鏡下鑒定，如焦剛毛與直剛毛等。列表如下：表一：本次雜交實(shí)驗(yàn)中使用的果蠅突變品系影響部分突變名稱基因符號(hào)染色體上的座位翅殘翅vgIIR67.0眼色白眼wX1.5體色黑檀體bIIR48.5剛毛卷剛毛snX21.0翅型小翅mX36.1（卷剛毛的基因符號(hào)為sn3，報(bào)告中簡(jiǎn)寫為sn。）分離定律：在生物的體細(xì)胞中，控制同一性狀的遺傳因子成對(duì)存在，不相融合；在形成配子時(shí)，成對(duì)的遺傳因子發(fā)生分離，分離后的遺傳因子分別進(jìn)入不同的配子中，隨配子遺傳給后代的現(xiàn)象叫做孟德爾分離定律。理論上配子分離比是11，F(xiàn)2代基因型分離比是121，若顯性完全，F(xiàn)2代表型分離比是31 。野生型果蠅為紅眼、灰身、長(zhǎng)翅、直剛毛，與這些性狀對(duì)應(yīng)的突變性狀很多，其中灰身（+）與黑身（b）是一對(duì)相對(duì)性狀，且灰身對(duì)黑身為完全顯性，控制這對(duì)相對(duì)性狀的基因位于第二號(hào)染色體上。用具有這對(duì)相對(duì)性狀的兩純合親本雜交，性狀的遺傳行為應(yīng)符合分離定律。自由組合定律：當(dāng)具有兩對(duì)（或更多對(duì)）相對(duì)性狀的親本進(jìn)行雜交，在子一代產(chǎn)生配子時(shí)，在等位基因分離的同時(shí)，非同源染色體上的基因表現(xiàn)為自由組合。實(shí)質(zhì)上就是不同相對(duì)性狀的等位基因在配子形成過程中，等位基因間的分離和組合是互不干擾，各自獨(dú)立分配到配子中去，它們所決定的兩對(duì)相對(duì)性狀在F2代是自由組合的，在雜種第二代表型分離比就呈9331。黑體果蠅的體色為黑色（b），與之相對(duì)應(yīng)的野生型果蠅的體色為灰色（+），灰色對(duì)黑色為完全顯性，控制這對(duì)相對(duì)性狀的基因位于第二號(hào)染色體上；果蠅另一突變性狀為焦剛毛（sn），與之對(duì)應(yīng)的野生型性狀為直剛毛（+），控制這對(duì)相對(duì)性狀的基因位于第一號(hào)染色體上，直剛毛對(duì)焦剛毛為完全顯性。用具有這兩對(duì)相對(duì)性狀的純合親本雜交，其性狀的遺傳行為應(yīng)符合自由組合定律。伴性遺傳：位于性染色體上的基因，其傳遞方式與位于常染色體上的基因不同，它的傳遞方式與雌雄性別有關(guān)，因此稱為伴性遺傳。生物某些性狀的遺傳常與性別聯(lián)系在一起，這種現(xiàn)象稱為伴性遺傳（sex-linkedinheritance），這是由于支配某些性狀的基因位于性染色體上。果蠅屬XY型生物，共有四對(duì)染色體，第一對(duì)為性染色體，其余三對(duì)為常染色體。雌果蠅的性染色體構(gòu)型為XX，、雄果蠅為XY?？刂乒壯凵幕蛭挥赬染色體上，在Y染色體則沒有與之相應(yīng)的等位基因。將紅眼（+）果蠅和白眼（w）果蠅雜交，其后代眼色的表現(xiàn)與性別有關(guān)。而且，正反交的結(jié)果不同。連鎖交換定律：連鎖是指在同一同源染色體上的非等位基因連在一起而遺傳的現(xiàn)象；互換是指同源染色體的非姊妹染色單體之間的對(duì)應(yīng)片段的交換，從而引起相應(yīng)基因間的交換與重組。同一條染色體上的基因是連鎖的，而同源染色體基因之間可以發(fā)生一定頻度的交換，因此在子代中將發(fā)現(xiàn)一定頻度的重組型，但一般比親組型少得多?；虻倪B鎖交換定律(linkage and cross-over law)是遺傳學(xué)的三大基本規(guī)律之一，描述了位于同一染色體上的基因的遺傳呈現(xiàn)連鎖現(xiàn)象，而同源染色體上的非等位基因之間又存在一定的交換現(xiàn)象。果蠅的翅膀是一種分析器官大小、形狀和發(fā)育格局的良好的分析系統(tǒng)。許多基因參與了翅的發(fā)育調(diào)控，新的遺傳控制機(jī)理還在發(fā)現(xiàn)和不斷研究中，重要基因的突變或相互作用可能導(dǎo)致功能變異及翅型變化。果蠅的白眼、小翅、卷剛毛(w、m、sn)這3對(duì)基因都位于x染色體上，它們之間也呈現(xiàn)一定的連鎖互換現(xiàn)象。2. 材料和方法2.1 實(shí)驗(yàn)材料材料：不同品系的果蠅18號(hào)：野生型果蠅：紅眼、灰身、長(zhǎng)翅、直剛毛（+ + + +）14號(hào)：黑殘果蠅：黑檀體、殘翅（ee vgvg）品系；6號(hào)：三隱果蠅：灰身、白眼、小翅、卷剛毛（+ w m sn/+ w m sn）。（其中，白眼、小翅和卷剛毛性狀均位于X染色體上）培養(yǎng)瓶，麻醉瓶，白色塑料板，小毛筆，油性記號(hào)筆； 麻醉劑：乙醚。2.2 實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 第一周（3月21日/28日）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)：我們組實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證自由組合定律與連鎖交換定律，所以我們要選取不同品系的果蠅進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。14號(hào)果蠅（黑檀體、殘翅）和18號(hào)野生型果蠅（灰身、長(zhǎng)翅）雜交用于驗(yàn)證自由組合定律；6號(hào)果蠅（白眼、小翅、卷剛毛）和18號(hào)野生型果蠅（紅眼、長(zhǎng)翅、直剛毛）雜交用于驗(yàn)證伴性遺傳和連鎖交換定律。表二：親本果蠅類型項(xiàng)目自由組合定律基因的連鎖與交換親本18號(hào)（灰身，長(zhǎng)翅）18號(hào)（紅眼、長(zhǎng)翅、直剛毛）14號(hào)（檀黑體、殘翅）6號(hào)（白眼、小翅、焦剛毛）收集處女蠅：在做雜交實(shí)驗(yàn)6-8小時(shí)前，選擇生長(zhǎng)較好、含蛹較多的培養(yǎng)瓶，將瓶中的所有成蠅都清除。8小時(shí)內(nèi)，瓶中生長(zhǎng)出的雌蠅均尚未發(fā)生交配，為我們所需的處女蠅。接種：按照設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的正交和反交方式，將處理好的雌雄果蠅分出性別并確認(rèn)性狀正確后，每個(gè)培養(yǎng)瓶中接種2-3只不同性別的果蠅，貼好標(biāo)簽和記號(hào)，寫明雜交組合和姓名。置于室溫培養(yǎng)。2.2.2 第二周（3月28日/4月4日）培養(yǎng)瓶中的親本蠅已培養(yǎng)7天，為避免混淆，在F1孵出前將親本蠅倒出。2.2.3 第三周（4月4日/4月11日）雜交親本之后的第11-12天，F(xiàn)1開始出現(xiàn)。觀察并記錄F1代的性狀，如果沒有出現(xiàn)預(yù)期外的性狀，則可以選取3-4對(duì)F1子蠅接入新的培養(yǎng)瓶中，置于室溫下培養(yǎng)。2.2.4 第四周（4月11日/4月18日） 在F2代成蟲出來之前，為避免親子蠅混淆，要倒出培養(yǎng)瓶中所有的F1果蠅。2.2.5 第五周及第六周（4月14日23日/4月21日30日）接種F110天之后，F(xiàn)2代子蠅出現(xiàn)，在出現(xiàn)后的10天之內(nèi)，每間隔2-3天統(tǒng)計(jì)并記錄瓶中F2代果蠅的性狀和數(shù)目，以及相應(yīng)雌雄比例。2.2.6 數(shù)據(jù)分析對(duì)自己組統(tǒng)計(jì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析并且對(duì)雜交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行2測(cè)驗(yàn)，對(duì)比實(shí)驗(yàn)值和期望值。3. 結(jié)果3.1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及分析3.1.1自由組合定律表三：果蠅18號(hào)與14號(hào)的雜交結(jié)果正交（雌18號(hào)雄14號(hào)）反交（雌14號(hào)雄18號(hào)）F1表型灰身長(zhǎng)翅 表型灰身長(zhǎng)翅雌雄雌雄數(shù)目1623數(shù)目93F2表型灰身長(zhǎng)翅灰身殘翅黑身長(zhǎng)翅黑身殘翅表型灰身長(zhǎng)翅灰身殘翅黑身長(zhǎng)翅黑身殘翅數(shù)目198585312數(shù)目627164比例49.514.513.253比例15.51.75413.1.1.1圖譜18號(hào) 灰身長(zhǎng)翅（AABB） 14號(hào) 黑檀體殘翅（aabb）【正反交相同】P: AABB（灰身長(zhǎng)翅）aabb（黑檀體殘翅） F1: AaBb(灰身長(zhǎng)翅)自交F2：AABB AaBB AABb AaBb aaBB aaBb AAbb Aabb aabb灰身長(zhǎng)翅 黑檀體長(zhǎng)翅 灰身殘翅 黑檀體殘翅理論 比值： 9 ： 3 ： 3 ： 1實(shí)際 正交 數(shù)量： 198 5 4 1 比值： 49.5 ： 14.5 ： 13.25 ： 4 反交 數(shù)量： 62 7 16 4 比值： 15.5 ： 1.75 ： 4 ： 13.1.1.2 適合度檢驗(yàn)我們通過卡方檢驗(yàn)來判斷實(shí)際結(jié)果與預(yù)期結(jié)果是否符合。體色基因和翅型基因是在不同的染色體上的，他們?cè)谧裱杂山M合定律的同時(shí)，各自又遵循分離定律。于是我們通過對(duì)單對(duì)性狀的結(jié)果進(jìn)行適合度檢驗(yàn)來驗(yàn)證分離定律，對(duì)兩對(duì)性狀的結(jié)果進(jìn)行適合度檢驗(yàn)來驗(yàn)證自由組合定律。檢驗(yàn)結(jié)果如下：表四：18號(hào)果蠅與14號(hào)果蠅雜交的單因子適合度檢驗(yàn)正交基因體色基因（A/a）翅型基因（B/b）表型灰身檀黑合計(jì)長(zhǎng)翅殘翅合計(jì)觀察值（O）2566532125170321預(yù)期值（E）240.7580.25321240.7580.25321（O-E）2/E0.9662.8983.8640.4361.3091.74523.8641.745P（n=1）0.02-0.05(<0.05)0.1-0.25(>0.05)反交基因體色基因（A/a）翅型基因（B/b）表型灰身檀黑合計(jì)長(zhǎng)翅殘翅合計(jì)觀察值（O）692089781189預(yù)期值（E）66.7522.258966.7522.2589（O-E）2/E0.0760.2280.2951.8965.6887.58420.2957.584P（n=1）0.10-0.50（>0.05）<0.01表五：18號(hào)果蠅與14號(hào)果蠅雜交的雙因子適合度測(cè)驗(yàn)表型合計(jì)正交灰身長(zhǎng)翅檀黑長(zhǎng)翅灰身殘翅檀黑殘翅觀察值（O）198585312321預(yù)期值（E）180.5660.1960.1920.06321（O-E）2/E1.680.080.860.403.0223.02P（n=3）0.25-0.50(>0.05)反交觀察值（O）62716489預(yù)期值（E）50.0616.6916.695.5689（O-E）2/E2.855.630.030.448.9528.95P(n=3)0.02-0.05（<0.05）3.1.1.3數(shù)據(jù)分析適合度檢驗(yàn)的結(jié)果表明：?jiǎn)螌?duì)性狀檢驗(yàn)中，體色基因的正交結(jié)果不在分離定律的隨機(jī)誤差范圍內(nèi)，反交結(jié)果符合；翅型基因的正交結(jié)果在分離定律隨機(jī)誤差范圍內(nèi)，反交結(jié)果不符合。兩對(duì)性狀檢驗(yàn)中，正交結(jié)果在自由組合定律隨機(jī)誤差范圍內(nèi)，反交結(jié)果不符合。對(duì)于這種正反交始終一種符合一種不符合的驗(yàn)證結(jié)果，結(jié)合產(chǎn)生的后代數(shù)量來看，我們提出了這樣的猜想：是否是不同基因在雌雄配子中的存活率不同，使其在正交與反交時(shí)產(chǎn)生了差異，導(dǎo)致后代的數(shù)量有明顯不同，從而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常。我們查閱了相關(guān)的文獻(xiàn)1，發(fā)現(xiàn)有人做過對(duì)中國(guó)春與粗山羊草的正反交授粉后不同時(shí)間固定的子房的胚胎學(xué)研究，結(jié)果出現(xiàn)了正交所形成的正常胚的質(zhì)量比反交形成的胚質(zhì)量要好；而在反交組合中,受精發(fā)育過程較正常,而在正交組合中受精過程延遲,多數(shù)受精卵敗育的情況。另外在之前別人做的果蠅雜交實(shí)驗(yàn)中他們有提出：殘翅突變比黑檀體突變對(duì)果蠅生存的影響更大。那么就可能是殘翅降低了果蠅的生存能力，使殘翅果蠅存活率低。這些也只是對(duì)于我們猜想的一個(gè)例證，目前沒有具體證明相關(guān)結(jié)論。 另外，我們認(rèn)為反交實(shí)驗(yàn)做的組數(shù)比正交要少也存在關(guān)系。由于在反交組的F1代果蠅在接入新的培養(yǎng)瓶的過程中出現(xiàn)了死亡，導(dǎo)致其后代的數(shù)目要遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于正交組。F1代數(shù)量上的差異可能是導(dǎo)致F2代出現(xiàn)結(jié)果一邊倒的原因。3.1.2連鎖交換定律表六：果蠅18號(hào)與6號(hào)雜交結(jié)果F1（1）正交（雌18號(hào)雄6號(hào)）反交（雌6號(hào)雄18號(hào)）F1表型紅長(zhǎng)直 白小卷 表型紅長(zhǎng)直白小卷雌雄雌雄雌雄雌雄數(shù)目131700數(shù)目160113比例3.254.25/比例4/0.253.25如表中藍(lán)色數(shù)字所示，F(xiàn)1代中不應(yīng)該出現(xiàn)性狀為白眼小翅卷剛毛的雌性果蠅。通過小組人員和老師討論，一致認(rèn)為三種性狀都發(fā)生了改變，因此基本不存在變異的可能性。最可能的原因是在接入親本時(shí)沒有仔細(xì)看清楚性狀，將性狀為白眼小翅卷剛毛的雄性果蠅誤認(rèn)為是白眼小翅卷剛毛的雌性果蠅接入了培養(yǎng)瓶中，產(chǎn)出的F1代中便存在白眼小翅卷剛毛的雌性果蠅。至于該性狀的果蠅數(shù)量如此少，我認(rèn)為可能是因?yàn)镕1代果蠅獲得的數(shù)量過少。因此，該組果蠅應(yīng)當(dāng)被舍棄，無法進(jìn)行后續(xù)自交來驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。我們采用了另一小組的性狀正常的果蠅的反交F1代，進(jìn)行后續(xù)的自交實(shí)驗(yàn)。表七：果蠅18號(hào)與6號(hào)雜交結(jié)果F2（2）F2表現(xiàn)型正交（雌18號(hào)雄6號(hào)）反交（雌14號(hào)雄18號(hào)）雌性雄性合計(jì)雌性雄性合計(jì)紅長(zhǎng)直（+ + +）11544159292352白小卷（w m sn）0242420929白小直（w m +）022000紅長(zhǎng)卷（+ + sn）000000紅小直（+ m +）12820257白長(zhǎng)卷（w + sn）011314白長(zhǎng)直（w + +）044134紅小卷（+ m sn）033000合計(jì)12786213554196表八：果蠅18號(hào)與6號(hào)雜交反交結(jié)果【全班】（3）F2 表型1組2組3組4組5組6組7組合計(jì)比例紅長(zhǎng)直（+ + +）1425212520232415274.912%白小卷（w m sn）9588891360白小直（w m +）000000001.413%紅長(zhǎng)卷（+ + sn）10003004紅小直（+ m +）612088103514.488%白長(zhǎng)卷（w + sn）20110116白長(zhǎng)直（w + +）1313133159.187%紅小卷（+ m sn）114010411合計(jì)34353737414455283100%3.1.2.1圖譜P: 紅長(zhǎng)直（+ + +/Y） 白小卷（w m sn/ w m sn）F1： 白小卷（w m sn/Y） 紅長(zhǎng)直（+ + +/ w m sn）F2: 紅長(zhǎng)直（+ + +） 白小卷（w m sn） 白小直（w m +） 紅長(zhǎng)卷（+ + sn）紅小直（+ m +） 白長(zhǎng)卷（w + sn） 白長(zhǎng)直（w + +） 紅小卷（+ m sn）3.1.2.2結(jié)果分析正交的F1代中雄性果蠅和雌性果蠅均為紅長(zhǎng)直，無法進(jìn)行三點(diǎn)測(cè)交實(shí)驗(yàn)計(jì)算重組率。而反交的F1代中雄性果蠅均為三隱性，雌性均為顯性，可以用于三點(diǎn)測(cè)交重組率的計(jì)算。表九：三點(diǎn)測(cè)交結(jié)果表現(xiàn)型數(shù)量紅長(zhǎng)直（+ + +）52白小卷（w m sn）29白小直（w m +）0紅長(zhǎng)卷（+ + sn）0紅小直（+ m +）7白長(zhǎng)卷（w + sn）4白長(zhǎng)直（w + +）4紅小卷（+ m sn）0合計(jì)96通過觀察反交的結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)白小直（w m +）和紅長(zhǎng)卷（+ + sn）兩種果蠅數(shù)量為0，可以判斷這兩種性狀是雙交換結(jié)果。因此可知，剛毛性狀基因位于三者的中間，三種基因在染色體上的順序?yàn)椋簃 sn w。下一步為了確定三種基因在染色體上的圖距，我們進(jìn)行了重組值的計(jì)算。結(jié)果如下表：表十：重組值計(jì)算結(jié)果（1）本組實(shí)驗(yàn)理論值 重組值圖距Rf（w-m）15.625%+0%*2=15.625%15.62534.6Rf（sn-m）4.167%4.16715.1Rf（w-sn）11.458%11.45819.5并發(fā)率0干擾1由Rf值可得sn-m間的圖距是4.167cM，w-sn間的圖距是11.458cM，因此三種基因在染色體上的排列順序如下：m sn w4.167 11.45815.625理論連鎖圖：m sn w15.1 19.634.6和理論值相比，我們發(fā)現(xiàn)差距相當(dāng)大，我們首先考慮可能是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)過少的原因。因此我們搜集了全班多組數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。結(jié)果如下：表十一：重組值計(jì)算結(jié)果（2）各組實(shí)驗(yàn)理論值重組值圖距Rf（w-m）23.675%+1.413%*2=%26.50134.6Rf（sn-m）10.601%10.60115.1Rf（w-sn）15.901%15.90119.5并發(fā)率0.838干擾0.162根據(jù)計(jì)算出的重組值繪制出連鎖圖：m sn w15.901 10.60126.501對(duì)比全班數(shù)據(jù)和我們一個(gè)組的數(shù)據(jù)，我們發(fā)現(xiàn)：隨著果蠅數(shù)據(jù)樣本的增多，最后的結(jié)果也越來越接近理論圖距值，但是仍舊和理論值有一定的差距。綜合分析，我認(rèn)為存在差距的原因可能有：1、實(shí)驗(yàn)室中果蠅數(shù)目有限，這使引起的誤差的影響力加大，也是導(dǎo)致結(jié)果與理論值有偏差的一大原因。2、性狀判斷時(shí)存在誤判，在進(jìn)行F2計(jì)數(shù)時(shí)經(jīng)常不小心把果蠅給麻醉死了，在鏡下觀察翅型的時(shí)候，看到的果蠅都是翻翅的，會(huì)存在長(zhǎng)翅與小翅在觀察過程中有誤判的情況。而且有時(shí)候有的果蠅沒有完全羽化，特征不是非常明顯，也會(huì)導(dǎo)致誤判。從而導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)存在一些問題而影響結(jié)果。3、在統(tǒng)計(jì)果蠅數(shù)據(jù)時(shí)，由于操作不當(dāng)存在丟失或者是混淆果蠅的情況。4、三隱果蠅的個(gè)體生存能力較弱，在密度交高的幼蟲群體中，容易死亡而被淘汰。因此可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)誤差有影響。5、果蠅的生活史與溫度密切相關(guān)，但是由于本次實(shí)驗(yàn)是全班人一起做的。由于每組的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)間不同，導(dǎo)致很多人做的時(shí)候把全班的果蠅取出來就沒有再放回溫箱中。做實(shí)驗(yàn)的時(shí)間持續(xù)了近一個(gè)月，溫度不可能一直保持在25不變。所以溫度對(duì)果蠅的生長(zhǎng)可能有一定的影響。6、通過查閱文獻(xiàn)2，我們得知，在三隱性性狀分析的三點(diǎn)測(cè)交實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)2代會(huì)變異產(chǎn)生一種新性狀叫做小皺翅（如圖2）。在我們組統(tǒng)計(jì)F2代果蠅的時(shí)候，確實(shí)有出現(xiàn)過這樣的果蠅。但是由于我們不知道這種性狀和小翅不一樣，因此都把它當(dāng)做了小翅來計(jì)算。在那篇文獻(xiàn)中，研究者通過計(jì)算發(fā)現(xiàn)，如果將小皺翅忽略，則對(duì)最后的結(jié)果無顯著性影響，但如果把小皺翅算作殘翅或小翅，都會(huì)使結(jié)果產(chǎn)生顯著性差異。4. 討論4.1注意事項(xiàng)及改進(jìn)之處：（1）由于是第一次養(yǎng)果蠅，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過程中導(dǎo)致許多果蠅死亡，甚至有的全管霉變或無子代產(chǎn)出。（2）觀察果蠅的性狀時(shí)，盡量用肉眼直接觀察，不要長(zhǎng)時(shí)間放到解剖鏡下，會(huì)導(dǎo)致果蠅由于溫度過高而被烤死。解剖鏡可以作為輔助觀察一些難以確定的性狀。（3）果蠅的生活史與溫度密切相關(guān)，每次計(jì)數(shù)操作完都應(yīng)當(dāng)把果蠅放回到恒溫箱中培育。（4）果蠅要適度麻醉，挑蠅用毛筆，忌用鑷子和其他工具，以免影響果蠅生長(zhǎng)繁育。 （5）挑處女蠅時(shí)，每次只挑12小時(shí)內(nèi)羽化成蟲，超過12小時(shí)的成蟲已逐漸有交配能力,必須一只不留地倒出處死,才能進(jìn)行第二次挑選。 （6）剛羽化的果蠅色淡白，體軟綿，難辨，務(wù)必小心區(qū)別。 （7）使用毛筆和塑料板，要用酒精棉球消毒，同時(shí)必須晾干才能使用。 （8）每個(gè)雜交組合放果蠅23對(duì)，不能放的太多，太多會(huì)使培養(yǎng)瓶過密果蠅不能健康生長(zhǎng)。用毛筆把果蠅掃進(jìn)試管后，試管要平放，待蠅醒后，方能豎起，避免果蠅粘在培養(yǎng)基上被悶死。 （9）培養(yǎng)箱溫度保持在25，不要隨意更改或調(diào)整其他旋鈕，以免影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)。（10）兩周后停止對(duì)F2代的計(jì)數(shù)，此時(shí)可能已有F3代混入影響結(jié)果。（11）操作過程中注意無菌。（12）盡量避免由于操作不當(dāng)造成的果蠅的逃逸，這樣會(huì)對(duì)最后的結(jié)果產(chǎn)生影響。（13）因?yàn)楸敬螌?shí)驗(yàn)每組的數(shù)據(jù)有限，所以誤差較大。最好是將全班的結(jié)果統(tǒng)計(jì)起來一起分析，這樣誤差會(huì)減小一點(diǎn)。（14）因?yàn)榇舜螌?shí)驗(yàn)的連續(xù)性很強(qiáng)，所以一定要注意每一步的時(shí)間和操作，否則就會(huì)產(chǎn)生不可逆的后果，嚴(yán)重的要進(jìn)行重做。5. 感想本次實(shí)驗(yàn)持續(xù)了一個(gè)多月。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，并沒有非常理想的驗(yàn)證了孟德爾和摩爾根的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)結(jié)果。老師告訴我們做出那種完美的實(shí)驗(yàn)結(jié)果幾乎是不可能的。畢竟這是他們畢生的研究結(jié)果，通過大量的實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，再進(jìn)行猜想分析驗(yàn)證的出來的，必然不是我們隨意輕松的一個(gè)小小的雜交實(shí)驗(yàn)就能證明的。我們從中運(yùn)用了自己遺傳學(xué)課堂上學(xué)習(xí)的三點(diǎn)測(cè)交和染色體作圖的知識(shí)，并且還自主設(shè)計(jì)了整個(gè)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，鍛煉了我們的科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃季S。通過這次實(shí)驗(yàn)，我感受到了經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)結(jié)論的來之不易，稍有不慎便會(huì)滿盤皆輸。對(duì)于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)需要一個(gè)清晰的邏輯和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度來對(duì)待和處理。同時(shí)我也體會(huì)到了小組合作對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性，如此耗費(fèi)時(shí)間和大量的數(shù)據(jù)，如果一個(gè)人孤軍奮戰(zhàn)很可能就會(huì)弄的一團(tuán)糟。參考文獻(xiàn)1 孔令讓，董玉琛，張紅軍等. 普通小麥與粗山羊草正、反交的育性研究 J. 西北植物學(xué)報(bào), 2000, 4.2 劉佳璃，劉詩穎，楊云一等.黑腹果蠅品系純合體雜交后代翅型變異的遺傳分析J. 世界科技研究與發(fā)展, 2011, 33(3):380-383.3 劉祖洞、江紹慧.遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn).高等教育出版社4 楊大翔.遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)第二版.科學(xué)出版社