高考生物總復(fù)習(xí) 第十一單元 生物技術(shù)實(shí)踐 1140 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用課件

第第40講講微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用考綱導(dǎo)航考綱導(dǎo)航 1.微生物的分離和培養(yǎng)。微生物的分離和培養(yǎng)。2.培培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用。養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用。3.某種微生物數(shù)某種微生物數(shù)量的測(cè)定。量的測(cè)定。4.微生物在其他方面的應(yīng)用。微生物在其他方面的應(yīng)用。 考點(diǎn)一考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1培養(yǎng)基培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對(duì)概念：人們按照微生物對(duì)_的不同需求，的不同需求，配制出供其配制出供其_的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)營(yíng)養(yǎng)組成：一般都含有營(yíng)養(yǎng)組成：一般都含有_和無(wú)機(jī)鹽。和無(wú)機(jī)鹽。此外，還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)此外，還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)_、氧氣以及、氧氣以及_的要求。的要求。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁殖生長(zhǎng)繁殖水、碳源、氮源水、碳源、氮源pH特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(3)種類(lèi)種類(lèi)按照物理性質(zhì)可分為按照物理性質(zhì)可分為_(kāi)培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基。按照成分的來(lái)源可分為天然培養(yǎng)基和按照成分的來(lái)源可分為天然培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。按照功能用途可分為選擇培養(yǎng)基、按照功能用途可分為選擇培養(yǎng)基、_培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基等。2無(wú)菌技術(shù)無(wú)菌技術(shù)(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止_ 的方法。的方法。(2)關(guān)鍵：防止關(guān)鍵：防止_的入侵。的入侵。液體液體合成合成鑒別鑒別雜菌污染雜菌污染外來(lái)雜菌外來(lái)雜菌(3)不同對(duì)象的無(wú)菌操作方法：不同對(duì)象的無(wú)菌操作方法：3大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(2)純化大腸桿菌的方法純化大腸桿菌的方法平板劃線(xiàn)法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表平板劃線(xiàn)法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面面_的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。散到培養(yǎng)基的表面。【特別提醒特別提醒】 1.操作第一步即取菌種之前及每次操作第一步即取菌種之前及每次劃線(xiàn)之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)劃線(xiàn)之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：連續(xù)劃線(xiàn)連續(xù)劃線(xiàn)第一次操作每次劃線(xiàn)之前劃線(xiàn)結(jié)束目的殺死接種環(huán)上原有的微生物殺死上次劃線(xiàn)后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線(xiàn)的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，使每次劃線(xiàn)菌種數(shù)目減少殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者2.灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。殺死菌種。3第二次及其以后的劃線(xiàn)操作總是從上一次劃線(xiàn)末端開(kāi)第二次及其以后的劃線(xiàn)操作總是從上一次劃線(xiàn)末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐漸減少，最終始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。4劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。5劃線(xiàn)用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。劃線(xiàn)用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的_，然后將不同稀釋度的菌液分別，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。梯度稀釋梯度稀釋(3)菌種的保存方法菌種的保存方法對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用_的方法。的方法。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用_的方法。的方法?！九袛嗯c思考判斷與思考】1判斷下列說(shuō)法的正誤。判斷下列說(shuō)法的正誤。(1)培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，有時(shí)還需培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，有時(shí)還需要加入一些特殊的物質(zhì)。要加入一些特殊的物質(zhì)。()(2)倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上。皿蓋上。()臨時(shí)保藏臨時(shí)保藏甘油管藏甘油管藏(3)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害。，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害。()(4)為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落。趁熱快速挑取菌落。()(5)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。個(gè)菌落。()2根據(jù)題圖，回答問(wèn)題。根據(jù)題圖，回答問(wèn)題。如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)思考：法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)思考：(1)獲得圖獲得圖A效果和圖效果和圖B效果的接種方法分別是什么？效果的接種方法分別是什么？【提示提示】 獲得效果獲得效果A的接種方法為稀釋涂布平板法，的接種方法為稀釋涂布平板法，獲得效果獲得效果B的接種方法為平板劃線(xiàn)法。的接種方法為平板劃線(xiàn)法。(2)某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？【提示提示】 最可能的原因是菌液濃度過(guò)高最可能的原因是菌液濃度過(guò)高或劃線(xiàn)時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅或劃線(xiàn)時(shí)在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。(3)接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？【提示提示】 火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域?；鹧娓浇嬖谥鵁o(wú)菌區(qū)域?？挤挤?培養(yǎng)基及其制備方法分析培養(yǎng)基及其制備方法分析1(2018云南民族大學(xué)附屬中學(xué)高三月考云南民族大學(xué)附屬中學(xué)高三月考)下表為某培下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是() 成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)青霉素瓊脂蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1萬(wàn)單位適量1 000 mLA.能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，擬核能在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因上有抗青霉素的基因B此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基C此培養(yǎng)基可以用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中細(xì)菌此培養(yǎng)基可以用來(lái)檢測(cè)自來(lái)水中細(xì)菌含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)含量是否符合飲用水標(biāo)準(zhǔn)D此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過(guò)程中菌菌種的基因工程的操作過(guò)程中【解析】 本題考查培養(yǎng)基的類(lèi)型和作用，要求考生能根據(jù)培養(yǎng)基的配方，確定其中的青霉素、伊紅和美藍(lán)的應(yīng)用，進(jìn)而分析、判斷各選項(xiàng)。分析培養(yǎng)基的配方可知，培養(yǎng)基中含有牛肉膏和葡萄糖，能為微生物提供碳源、氮源和能源，培養(yǎng)基中還含有青霉素(是一種抗生素)和伊紅、美藍(lán)，由于大腸桿菌對(duì)青霉素敏感，因此自然環(huán)境中的大腸桿菌無(wú)法在該培養(yǎng)基中生活，故不能在此培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌，且大腸桿菌的擬核上不含有抗青霉素的基因，A錯(cuò)誤；此培養(yǎng)基中的青霉素對(duì)細(xì)菌有選擇作用，此培養(yǎng)基中的青霉素對(duì)細(xì)菌有選擇作用，故該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，故該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；細(xì)菌對(duì)抗錯(cuò)誤；細(xì)菌對(duì)抗生素敏感，此培養(yǎng)基中含有青霉素，細(xì)菌不生素敏感，此培養(yǎng)基中含有青霉素，細(xì)菌不可以在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，可以在此培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，C錯(cuò)誤；由于錯(cuò)誤；由于轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)基因(運(yùn)載體中含有青霉素抗性基因運(yùn)載體中含有青霉素抗性基因)的大腸的大腸桿菌菌種可以在含有青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)桿菌菌種可以在含有青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，且大腸桿菌在含有伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基繁殖，且大腸桿菌在含有伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基中形成的菌落呈黑色，因此該培養(yǎng)基可以用中形成的菌落呈黑色，因此該培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過(guò)程中，作過(guò)程中，D正確。正確。【答案答案】 D2(2018廣東省肇慶市高中畢業(yè)班第一次廣東省肇慶市高中畢業(yè)班第一次統(tǒng)一檢測(cè)統(tǒng)一檢測(cè))絕大多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)、動(dòng)物及植絕大多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)、動(dòng)物及植物都是有益的，而且都是必需的，在醫(yī)學(xué)工物都是有益的，而且都是必需的，在醫(yī)學(xué)工業(yè)方面和日常生活中，我們都是利用微生物業(yè)方面和日常生活中，我們都是利用微生物的發(fā)酵法制造出來(lái)相應(yīng)的制品。自然界中的的發(fā)酵法制造出來(lái)相應(yīng)的制品。自然界中的各種微生物是混合生存在一起的，因此在進(jìn)各種微生物是混合生存在一起的，因此在進(jìn)行某項(xiàng)具體生產(chǎn)時(shí)首先要純化微生物。行某項(xiàng)具體生產(chǎn)時(shí)首先要純化微生物。(1)分離提純微生物常用分離提純微生物常用_法和法和_法。法。(2)用接種環(huán)進(jìn)行微生物接種時(shí)，操作的第用接種環(huán)進(jìn)行微生物接種時(shí)，操作的第一步及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)，目的一步及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對(duì)接種環(huán)是對(duì)接種環(huán)_。(3)配制培養(yǎng)基的操作步驟：配制培養(yǎng)基的操作步驟：_(用字母順序回答用字母順序回答)。 a倒平板倒平板b計(jì)算計(jì)算c溶化溶化d稱(chēng)量稱(chēng)量e滅菌滅菌(4)在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，應(yīng)在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒置，目的是將平板倒置，目的是_。(5)要確定培養(yǎng)液中某種微生物的含量，常用要確定培養(yǎng)液中某種微生物的含量，常用_法法和和_法進(jìn)行計(jì)數(shù)。某同學(xué)涂布了四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌法進(jìn)行計(jì)數(shù)。某同學(xué)涂布了四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是落數(shù)是21、212、231和和256，則應(yīng)該取值為，則應(yīng)該取值為_(kāi)?！窘馕鼋馕觥?本題考查培養(yǎng)基的配制、微生物培養(yǎng)與計(jì)數(shù)本題考查培養(yǎng)基的配制、微生物培養(yǎng)與計(jì)數(shù)等知識(shí)，要求考生掌握微生物培養(yǎng)與計(jì)數(shù)的方法，能熟練等知識(shí)，要求考生掌握微生物培養(yǎng)與計(jì)數(shù)的方法，能熟練進(jìn)行相關(guān)的操作，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和進(jìn)行相關(guān)的操作，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行正確的處理和分析。分析。(1)分離提純微生物的常用方法有稀釋涂布平板法和平分離提純微生物的常用方法有稀釋涂布平板法和平板劃線(xiàn)法。板劃線(xiàn)法。(2)平板劃線(xiàn)操作的第一步之前要灼燒接種環(huán)，是為了平板劃線(xiàn)操作的第一步之前要灼燒接種環(huán)，是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基；以后的每次避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基；以后的每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對(duì)接種環(huán)滅菌，保證后劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對(duì)接種環(huán)滅菌，保證后一次劃線(xiàn)的菌種僅來(lái)自于前一次劃線(xiàn)的末端。一次劃線(xiàn)的菌種僅來(lái)自于前一次劃線(xiàn)的末端。(3)配制培養(yǎng)基的操作步驟是：計(jì)算稱(chēng)量溶化滅菌倒平板。(4)要確定培養(yǎng)液中某種微生物的含量，常用稀釋涂布平板法和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法(顯微鏡直接計(jì)數(shù)法)進(jìn)行計(jì)數(shù)。該同學(xué)涂布了四個(gè)平板，但其中一個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn)，說(shuō)明操作過(guò)程出現(xiàn)錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏正確性。應(yīng)該去除統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)21，得到菌落數(shù)為(212231235)/3233。【答案】 (1)平板劃線(xiàn)稀釋涂布平板(2)滅菌(3)BDCEA(4)防止培養(yǎng)皿內(nèi)壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基(5)稀釋涂布平板顯微鏡直接計(jì)數(shù)/血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)233【總結(jié)歸納】 1.培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確：配制時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類(lèi)、培養(yǎng)目的等確定配制的培養(yǎng)基種類(lèi)。(2)營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。(3)PH要適宜：細(xì)菌為6.57.5，放線(xiàn)菌為7.58.5，真菌為5.06.0，培養(yǎng)不同微生物所需的PH不同。2微生物對(duì)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求特點(diǎn)微生物對(duì)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求特點(diǎn)(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)自養(yǎng)型微生物所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是無(wú)機(jī)鹽，碳源可來(lái)自大氣中的機(jī)鹽，碳源可來(lái)自大氣中的CO2，氮源可由，氮源可由含氮無(wú)機(jī)鹽提供。含氮無(wú)機(jī)鹽提供。(2)異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有異養(yǎng)型微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要是有機(jī)物，即碳源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源機(jī)物，即碳源必須由含碳有機(jī)物提供，氮源也主要是由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也主要是由有機(jī)物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無(wú)機(jī)氮源。也可以利用無(wú)機(jī)氮源?？挤挤?無(wú)菌技術(shù)的操作無(wú)菌技術(shù)的操作3(2018華大新高考聯(lián)盟高三教學(xué)質(zhì)量測(cè)評(píng)華大新高考聯(lián)盟高三教學(xué)質(zhì)量測(cè)評(píng))我國(guó)乳制我國(guó)乳制品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中，原奶細(xì)菌數(shù)允許最大值為每毫升品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中，原奶細(xì)菌數(shù)允許最大值為每毫升200萬(wàn)個(gè)萬(wàn)個(gè)。下圖是某高中生物興趣小組進(jìn)行的牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)。下圖是某高中生物興趣小組進(jìn)行的牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程圖。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：實(shí)驗(yàn)的過(guò)程圖。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題： ( 1 ) 圖 示 過(guò) 程圖 示 過(guò) 程 采 用 的 方 法 是采 用 的 方 法 是_，對(duì)從富含纖維素的，對(duì)從富含纖維素的土壤中分離分解纖維素的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)前一土壤中分離分解纖維素的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)前一般般_(填填“需要需要”或或“不需要不需要”)進(jìn)行過(guò)進(jìn)行過(guò)程程，理由是，理由是_。(2)過(guò)程過(guò)程是采用是采用_法接種培養(yǎng)得到法接種培養(yǎng)得到的結(jié)果，該統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般情況下的結(jié)果，該統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般情況下_(填填“低于低于”或或“高于高于”)實(shí)際值。實(shí)際值。(3)過(guò)程過(guò)程后應(yīng)將培養(yǎng)基放入后應(yīng)將培養(yǎng)基放入_中，中，一段時(shí)間后取出，統(tǒng)計(jì)一段時(shí)間后取出，統(tǒng)計(jì)4個(gè)平板上的菌落數(shù)分個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是別是16、82、126和和167。經(jīng)過(guò)消毒后的牛奶。經(jīng)過(guò)消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是中，細(xì)菌數(shù)大約是_個(gè)個(gè)/mL。(4)小明用下圖所示的方法在培養(yǎng)基上接種小明用下圖所示的方法在培養(yǎng)基上接種牛奶中的細(xì)菌，在圖中牛奶中的細(xì)菌，在圖中_(填圖中字母填圖中字母)區(qū)域更易獲得單菌落。區(qū)域更易獲得單菌落?！窘馕鼋馕觥?據(jù)圖分析，圖中據(jù)圖分析，圖中表示用巴士消毒法對(duì)牛奶表示用巴士消毒法對(duì)牛奶進(jìn)行消毒，步驟進(jìn)行消毒，步驟表示對(duì)牛奶進(jìn)行系列稀釋?zhuān)襟E表示對(duì)牛奶進(jìn)行系列稀釋?zhuān)襟E表示表示利用稀釋涂布平板法對(duì)牛奶中細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)。利用稀釋涂布平板法對(duì)牛奶中細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)。(1)根據(jù)以上分析已知，圖中根據(jù)以上分析已知，圖中表示用巴士消毒法對(duì)牛表示用巴士消毒法對(duì)牛奶進(jìn)行消毒；富含纖維素的土壤中的分解纖維素的微生物奶進(jìn)行消毒；富含纖維素的土壤中的分解纖維素的微生物數(shù)目較多，在進(jìn)行計(jì)數(shù)前要進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)虼诵枰M(jìn)行數(shù)目較多，在進(jìn)行計(jì)數(shù)前要進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)虼诵枰M(jìn)行過(guò)程。過(guò)程。(2)步驟步驟表示利用稀釋涂布平板法對(duì)牛奶中細(xì)菌進(jìn)行表示利用稀釋涂布平板法對(duì)牛奶中細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)，由于細(xì)菌的菌落會(huì)重疊，所以該統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般培養(yǎng)計(jì)數(shù)，由于細(xì)菌的菌落會(huì)重疊，所以該統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般情況下低于實(shí)際值。情況下低于實(shí)際值。(3)將過(guò)程接種后的培養(yǎng)基放入37 恒溫培養(yǎng)箱中，一段時(shí)間后取出，統(tǒng)計(jì)4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是16、82、126和167，由于16數(shù)值偏差太大，不予計(jì)算，又因?yàn)閳D中稀釋倍數(shù)為103，因此，經(jīng)過(guò)消毒后的牛奶中，細(xì)菌數(shù)大約是(82126167)31031.25105104個(gè)/ML。(4)如題圖所示的方法為平板劃線(xiàn)法，劃線(xiàn)的次數(shù)越多，菌落越少，所以圖中C區(qū)更容易獲得單菌落?！敬鸢浮?(1)巴氏滅菌法(或巴氏消毒法)需要富含纖維素的土壤中的分解纖維素的微生物數(shù)目較多，在進(jìn)行計(jì)數(shù)前要進(jìn)行梯度稀釋(2)稀釋涂布平板低于(3)恒溫培養(yǎng)箱1.25105(4)C4(2018寧夏育才中學(xué)高三上學(xué)期第二次寧夏育才中學(xué)高三上學(xué)期第二次月考月考)豆?jié){是人們喜愛(ài)的食品之一，很多家庭豆?jié){是人們喜愛(ài)的食品之一，很多家庭自制豆?jié){作早餐食品，為了檢測(cè)自制豆?jié){中自制豆?jié){作早餐食品，為了檢測(cè)自制豆?jié){中細(xì)菌含量，做如下圖所示操作?；卮鹣铝杏屑?xì)菌含量，做如下圖所示操作?；卮鹣铝杏嘘P(guān)問(wèn)題：關(guān)問(wèn)題：(1)在接種前，常常隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行在接種前，常常隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是_。(2)為了對(duì)自制豆?jié){中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用的接種方為了對(duì)自制豆?jié){中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用的接種方法是法是_。采用這種方法接種培養(yǎng)時(shí)，取最終的豆?jié){。采用這種方法接種培養(yǎng)時(shí)，取最終的豆?jié){稀釋液稀釋液0.1 mL滴在平板培養(yǎng)基上，操作前一般用滴在平板培養(yǎng)基上，操作前一般用_法對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌。法對(duì)接種工具進(jìn)行滅菌。(3)用上述方法接種、培養(yǎng)后統(tǒng)計(jì)用上述方法接種、培養(yǎng)后統(tǒng)計(jì)4個(gè)培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分個(gè)培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為別為25個(gè)、個(gè)、31個(gè)、個(gè)、33個(gè)、個(gè)、35個(gè)，則可以推測(cè)每毫升自制豆個(gè)，則可以推測(cè)每毫升自制豆?jié){中含細(xì)菌數(shù)為漿中含細(xì)菌數(shù)為_(kāi)個(gè)。該結(jié)果往往較實(shí)際值偏小，個(gè)。該結(jié)果往往較實(shí)際值偏小，原因是原因是_。【解析解析】 分析圖示操作過(guò)程可知，分析圖示操作過(guò)程可知，10 mL豆?jié){中加豆?jié){中加90 mL無(wú)菌水，表示對(duì)豆?jié){稀釋了無(wú)菌水，表示對(duì)豆?jié){稀釋了10倍，之后每取出倍，之后每取出1 mL稀釋后的豆?jié){液加稀釋后的豆?jié){液加9 mL無(wú)菌水，再稀釋無(wú)菌水，再稀釋3個(gè)個(gè)10倍，累計(jì)可得倍，累計(jì)可得10 mL豆?jié){最后被稀釋了豆?jié){最后被稀釋了104倍，再取最后的稀倍，再取最后的稀釋豆?jié){進(jìn)行涂布平板培養(yǎng)，觀(guān)察、統(tǒng)計(jì)菌落釋豆?jié){進(jìn)行涂布平板培養(yǎng)，觀(guān)察、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)。數(shù)。(1)在接種前，培養(yǎng)滅菌后的空白平板的目在接種前，培養(yǎng)滅菌后的空白平板的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基是否感染雜菌或是否徹底滅的是檢測(cè)培養(yǎng)基是否感染雜菌或是否徹底滅菌。菌。(2)為了對(duì)豆?jié){中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，常采用稀釋涂布平板法。對(duì)接種工具涂布器滅菌常采用灼燒滅菌。(3)若用上述方法培養(yǎng)設(shè)置4個(gè)培養(yǎng)皿，其中一個(gè)平板的菌落數(shù)只有25個(gè)，沒(méi)有達(dá)到計(jì)數(shù)菌落數(shù)要求的范圍(30300個(gè))，應(yīng)舍去；其余三個(gè)平板菌落數(shù)分別為31個(gè)、33個(gè)、35個(gè)用于求平均值計(jì)數(shù)。根據(jù)題干信息，豆?jié){被稀釋了104倍，因此可以推測(cè)豆?jié){中每毫升含細(xì)菌數(shù)(313335)30.11043.3106個(gè)。由于個(gè)別菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成，因此運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏小?！敬鸢浮?(1)檢測(cè)培養(yǎng)基是否感染雜菌或是否徹底滅菌(2)稀釋涂布平板法灼燒(3)3.3106少數(shù)菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)細(xì)菌形成【易錯(cuò)警示易錯(cuò)警示】 消毒和滅菌消毒和滅菌考法考法3大腸桿菌的純化方法及過(guò)程分析大腸桿菌的純化方法及過(guò)程分析5下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線(xiàn)法的操作結(jié)果。板劃線(xiàn)法的操作結(jié)果。下列敘述中錯(cuò)誤的是下列敘述中錯(cuò)誤的是()A甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能取菌液才能取菌液B對(duì)于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋對(duì)于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為倍數(shù)僅為102，則所得的菌落不一定是由單一，則所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成的細(xì)胞或孢子繁殖而成C乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都符合要求D乙中連續(xù)劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的乙中連續(xù)劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端末端【解析解析】 灼燒后的涂布器如果沒(méi)有冷卻灼燒后的涂布器如果沒(méi)有冷卻就接觸菌種，會(huì)將菌體殺死，就接觸菌種，會(huì)將菌體殺死，A正確；稀釋正確；稀釋倍數(shù)過(guò)低會(huì)導(dǎo)致多個(gè)菌體聚集在一起繁殖成倍數(shù)過(guò)低會(huì)導(dǎo)致多個(gè)菌體聚集在一起繁殖成菌落，菌落，B正確；平板劃線(xiàn)法中最后一次劃線(xiàn)的正確；平板劃線(xiàn)法中最后一次劃線(xiàn)的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，這種菌落才符合要求，繁殖而成，這種菌落才符合要求，C錯(cuò)誤；錯(cuò)誤；連續(xù)劃線(xiàn)中，除了第一次劃線(xiàn)外，每一次劃連續(xù)劃線(xiàn)中，除了第一次劃線(xiàn)外，每一次劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端，目的是使得線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端，目的是使得菌體的密度越來(lái)越小，保證最后劃線(xiàn)末端處菌體的密度越來(lái)越小，保證最后劃線(xiàn)末端處的菌落是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，的菌落是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖而成，D正確。正確?！敬鸢复鸢浮?C6下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。(1)圖甲是利用圖甲是利用_法進(jìn)行微生物接種法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用，圖乙是利用_法進(jìn)行微生物接種。法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是這兩種方法所用的接種工具分別是_和和_；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是消毒的方法依次是_和酒精消毒。和酒精消毒。(2)接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？_。(3)接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？_。(4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是效果圖解，其接種方法是_(填填“圖甲圖甲”或或“圖乙圖乙”)?！窘馕鼋馕觥?圖甲和圖乙分別是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平圖甲和圖乙分別是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。【答案答案】 (1)平板劃線(xiàn)平板劃線(xiàn)稀釋涂布平板稀釋涂布平板接種環(huán)接種環(huán)涂布涂布器器灼燒滅菌灼燒滅菌(2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域(3)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng)(4)圖乙圖乙【歸納總結(jié)歸納總結(jié)】 兩種純化細(xì)菌方法的比較兩種純化細(xì)菌方法的比較考點(diǎn)二考點(diǎn)二微生物的篩選和計(jì)數(shù)微生物的篩選和計(jì)數(shù)1土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣蔀樗鼈兡芎铣蒧，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到的過(guò)程中起到_作用。作用。脲酶脲酶催化催化( 2 ) 統(tǒng) 計(jì) 菌 落 數(shù) 目 一 般 用統(tǒng) 計(jì) 菌 落 數(shù) 目 一 般 用_法。法。稀釋涂布平板稀釋涂布平板統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的1個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中_個(gè)活菌。個(gè)活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在_的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)的計(jì)算方法是菌落數(shù)的計(jì)算方法是_。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是恰當(dāng)?shù)牡年P(guān)鍵是恰當(dāng)?shù)腳。130300(平均菌落數(shù)平均菌落數(shù)涂布的稀釋液體積涂布的稀釋液體積)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)稀釋度稀釋度【特別提醒特別提醒】 用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)榫鋽?shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落。的只是一個(gè)菌落。( 3 ) 實(shí) 驗(yàn) 流 程 ： 土 壤 取 樣實(shí) 驗(yàn) 流 程 ： 土 壤 取 樣_微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察細(xì)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。菌的計(jì)數(shù)。樣品的稀釋樣品的稀釋【知識(shí)拓展知識(shí)拓展】 用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法(1)結(jié)構(gòu)：常用的是1 MM1 MM0.1 MM方格的計(jì)數(shù)板(如圖)。每個(gè)計(jì)數(shù)板上有兩個(gè)計(jì)數(shù)室，每個(gè)計(jì)數(shù)室上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的大方格為計(jì)數(shù)室，大方格的長(zhǎng)和寬各為1 MM，深度為0.1 MM，其容積為0.1 MM3；大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格，即大方格是由400個(gè)小方格組成。(2)操作：將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專(zhuān)用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的菌液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，充滿(mǎn)計(jì)數(shù)室。(3)計(jì)數(shù)：在顯微鏡下計(jì)數(shù)45個(gè)中方格內(nèi)的菌體數(shù)，求出每個(gè)小方格所含有的細(xì)菌的平均數(shù)，按照以下公式計(jì)算：每毫升原液含有的菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)400104原液被稀釋倍數(shù)。(2)纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選原理原理篩選方法：篩選方法：_染色法，即染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生通過(guò)是否產(chǎn)生_來(lái)篩選纖維素分解來(lái)篩選纖維素分解菌。菌。培養(yǎng)基：以培養(yǎng)基：以_為唯一碳源的選為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。擇培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣：富含土壤取樣：富含_的環(huán)境的環(huán)境選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)：用_培養(yǎng)，以增培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度加纖維素分解菌的濃度剛果紅剛果紅透明圈透明圈纖維素纖維素纖維素纖維素選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基_：制備系列稀釋液：制備系列稀釋液涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生挑選產(chǎn)生_的菌落的菌落 【判斷與思考判斷與思考】1判斷下列說(shuō)法的正誤。判斷下列說(shuō)法的正誤。(1)選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類(lèi)。選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類(lèi)。()(2)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線(xiàn)法。用平板劃線(xiàn)法。()梯度稀釋梯度稀釋透明圈透明圈(3)篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中，尿素是唯一的氮源。中，尿素是唯一的氮源。()(4)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。()(5)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素所以可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。分解菌。()2根據(jù)題圖，回答問(wèn)題。根據(jù)題圖，回答問(wèn)題。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落如圖幾株有透明降解圈的菌落如圖1所示，并用篩所示，并用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和和J4，在不同的溫，在不同的溫度和度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見(jiàn)圖性的結(jié)果見(jiàn)圖2，請(qǐng)分析：，請(qǐng)分析：(1)透明圈是如何形成的？透明圈是如何形成的？【提示提示】 剛果紅可以與纖維素形成紅色剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。細(xì)菌分泌的纖維素和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。細(xì)菌分泌的纖維素酶能將培養(yǎng)基中的纖維素降解成纖維二糖和酶能將培養(yǎng)基中的纖維素降解成纖維二糖和葡萄糖，形成透明圈。葡萄糖，形成透明圈。(2)圖圖1中透明圈大小代表什么？降解纖維中透明圈大小代表什么？降解纖維素能力最強(qiáng)的菌落是哪種？素能力最強(qiáng)的菌落是哪種？【提示提示】 透明圈大小與纖維素酶的量和透明圈大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)，降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落活性有關(guān)，降解纖維素能力最強(qiáng)的是菌落。(3)結(jié)合圖結(jié)合圖2推測(cè)哪種菌株更適合用于人工推測(cè)哪種菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵？瘤胃發(fā)酵？【提示提示】 J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。酶的活性更高，更適合用于人工瘤胃發(fā)酵?？挤挤?選擇培養(yǎng)基成分及配制方法的分析選擇培養(yǎng)基成分及配制方法的分析1(2016四川理綜改編四川理綜改編)下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程。菌的過(guò)程。(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_為唯一氮源；鑒別培為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加養(yǎng)基還需添加_作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周?chē)闹甘緞⒆兂缮仙L(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周?chē)闹甘緞⒆兂蒧色。色。(2)在在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土的土壤樣品溶液壤樣品溶液0.1 mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為菌落數(shù)分別為13、156、462、178和和191。該過(guò)程采取的接。該過(guò)程采取的接種方法是種方法是_，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 _108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較_。【解析解析】 (1)脲酶由分解尿素的細(xì)菌產(chǎn)生脲酶由分解尿素的細(xì)菌產(chǎn)生，故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該，故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該類(lèi)微生物。分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以類(lèi)微生物。分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，故培養(yǎng)基中加入酚紅指示將尿素分解成氨，故培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后，菌落周?chē)鷮⒊霈F(xiàn)紅色。劑后，菌落周?chē)鷮⒊霈F(xiàn)紅色。(2)稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活稀釋涂布平板法常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)，在計(jì)數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在菌數(shù)，在計(jì)數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在30300的的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。每克樣品中的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并取平均值。每克樣品中的菌株數(shù)菌株數(shù)(C/V)M。因培養(yǎng)基上兩個(gè)或多個(gè)。因培養(yǎng)基上兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落，故統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往較實(shí)際數(shù)目少；而用菌落，故統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往較實(shí)際數(shù)目少；而用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，死亡的、活的菌體都血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，死亡的、活的菌體都計(jì)數(shù)在內(nèi)。計(jì)數(shù)在內(nèi)?！敬鸢复鸢浮?(1)尿素尿素酚紅酚紅紅紅(2)稀釋涂稀釋涂布平板法布平板法1.75少少2苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠(chǎng)產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中廠(chǎng)產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，如圖所示，為土壤樣品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列為土壤樣品。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：?jiǎn)栴}：(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入入_作為碳源，作為碳源，中不同濃度碳源的中不同濃度碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)基_(填填“影響影響”或或“不影響不影響”)細(xì)細(xì)菌的數(shù)量，如果要測(cè)定菌的數(shù)量，如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量，常中活細(xì)菌數(shù)量，常采用采用_法。法。(2)為對(duì)照，微生物在為對(duì)照，微生物在中不生長(zhǎng)，在中不生長(zhǎng)，在中生長(zhǎng)，中生長(zhǎng)，與與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于_；使用使用_法可法可以在以在上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌 時(shí) 進(jìn) 行 倒 置 培 養(yǎng) 的 原 因 是 ：菌 時(shí) 進(jìn) 行 倒 置 培 養(yǎng) 的 原 因 是 ： _。(3)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何防止其他微生物的污染實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如何防止其他微生物的污染？_?！窘馕鼋馕觥?根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求，在根據(jù)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求，在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)目培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)目的菌生長(zhǎng)，抑制或阻止其他雜菌生長(zhǎng)的目的的菌生長(zhǎng)，抑制或阻止其他雜菌生長(zhǎng)的目的，然后再用稀釋涂布平板法、平板劃線(xiàn)法或，然后再用稀釋涂布平板法、平板劃線(xiàn)法或其他方法篩選出單個(gè)目的菌落，再進(jìn)行接種其他方法篩選出單個(gè)目的菌落，再進(jìn)行接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。為防止培養(yǎng)基中水培養(yǎng)即可獲得純目的菌。為防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生分蒸發(fā)形成的水珠落入培養(yǎng)基中影響菌體生長(zhǎng)，所以要將培養(yǎng)皿倒置。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)要長(zhǎng)，所以要將培養(yǎng)皿倒置。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意單一變量原則和對(duì)照原則，操作中要嚴(yán)注意單一變量原則和對(duì)照原則，操作中要嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作。格進(jìn)行無(wú)菌操作?！敬鸢浮?(1)苯酚影響稀釋涂布平板(2)的培養(yǎng)基中沒(méi)有加入苯酚作為碳源，的培養(yǎng)基中加入了苯酚作為碳源稀釋涂布平板法或平板劃線(xiàn)防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(3)培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過(guò)程進(jìn)行無(wú)菌操作【總結(jié)歸納總結(jié)歸納】 選擇培養(yǎng)基的制作方法選擇培養(yǎng)基的制作方法(1)在培養(yǎng)基全部營(yíng)養(yǎng)成分具備的前提下，在培養(yǎng)基全部營(yíng)養(yǎng)成分具備的前提下，加入物質(zhì)：依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗加入物質(zhì)：依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗性，在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)，以抑制不需性，在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，如培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽時(shí)可抑制多種，如培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽時(shí)可抑制多種細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生細(xì)菌的生長(zhǎng)，但不影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)，從而可將該菌分離出來(lái)；而在培養(yǎng)基中長(zhǎng)，從而可將該菌分離出來(lái)；而在培養(yǎng)基中加入青霉素時(shí)可抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)，加入青霉素時(shí)可抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)，從而分離得到酵母菌和霉菌。從而分離得到酵母菌和霉菌。(2)通過(guò)改變培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分達(dá)到分離微通過(guò)改變培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分達(dá)到分離微生物的目的：培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可分離生物的目的：培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí)，可分離自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而無(wú)法生存；培養(yǎng)基中若缺乏有機(jī)碳源氮源而無(wú)法生存；培養(yǎng)基中若缺乏有機(jī)碳源則異養(yǎng)微生物無(wú)法生存，而自養(yǎng)微生物可利則異養(yǎng)微生物無(wú)法生存，而自養(yǎng)微生物可利用空氣中的用空氣中的CO2制造有機(jī)物生存。制造有機(jī)物生存。(3)利用培養(yǎng)基的特定化學(xué)成分分離特定微利用培養(yǎng)基的特定化學(xué)成分分離特定微生物：如當(dāng)石油是唯一碳源時(shí)，可抑制不能生物：如當(dāng)石油是唯一碳源時(shí)，可抑制不能利用石油的微生物生長(zhǎng)，使能夠利用石油的利用石油的微生物生長(zhǎng)，使能夠利用石油的微生物生長(zhǎng)，從而分離出能消除石油污染的微生物生長(zhǎng)，從而分離出能消除石油污染的微生物。微生物。(4)通過(guò)某些特殊環(huán)境分離微生物：如在高通過(guò)某些特殊環(huán)境分離微生物：如在高鹽環(huán)境中可分離耐鹽菌，其他菌在鹽濃度高鹽環(huán)境中可分離耐鹽菌，其他菌在鹽濃度高時(shí)易失水而不能生存；在高溫環(huán)境中可分離時(shí)易失水而不能生存；在高溫環(huán)境中可分離得到耐高溫的微生物，其他微生物在高溫環(huán)得到耐高溫的微生物，其他微生物在高溫環(huán)境中因酶失活而無(wú)法生存。境中因酶失活而無(wú)法生存。考法考法2微生物的分離與計(jì)數(shù)微生物的分離與計(jì)數(shù)3(2018甘肅省會(huì)寧縣第一中學(xué)高三上學(xué)甘肅省會(huì)寧縣第一中學(xué)高三上學(xué)期月考期月考)甲、乙兩同學(xué)學(xué)習(xí)完微生物的實(shí)驗(yàn)室甲、乙兩同學(xué)學(xué)習(xí)完微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與分離后，要利用所學(xué)知識(shí)研究環(huán)境中培養(yǎng)與分離后，要利用所學(xué)知識(shí)研究環(huán)境中微生物的情況。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：微生物的情況。請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：.甲同學(xué)為了檢測(cè)飲用水中是否會(huì)有某種甲同學(xué)為了檢測(cè)飲用水中是否會(huì)有某種細(xì)菌，配制如下培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)：細(xì)菌，配制如下培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)：蛋白胨10 g乳糖5 g蔗糖5 gK2HPO42 g蒸餾水1 000 mL將pH調(diào)到7.2(1)該培養(yǎng)基所含有的碳源有該培養(yǎng)基所含有的碳源有_；培養(yǎng)基的制備包括；培養(yǎng)基的制備包括計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基冷卻計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基冷卻至至_左右時(shí)，在左右時(shí)，在_火焰附近倒平板?；鹧娓浇蛊桨濉?2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行_(“消毒消毒”或或“滅菌滅菌”)；操作者；操作者的雙手需進(jìn)行清潔和的雙手需進(jìn)行清潔和_(“消毒消毒”或或“滅菌滅菌”)。(3)對(duì)獲得的菌種可以依據(jù)菌落的對(duì)獲得的菌種可以依據(jù)菌落的_特特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。.乙同學(xué)從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的相乙同學(xué)從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。關(guān)實(shí)驗(yàn)。(1)在培養(yǎng)基中加入在培養(yǎng)基中加入_指示劑，可初指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌是否分解尿素。步鑒定出該種細(xì)菌是否分解尿素。(2)為了盡快觀(guān)察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為了盡快觀(guān)察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng) 將 接 種 后 的 培 養(yǎng) 基 倒 置 于應(yīng) 將 接 種 后 的 培 養(yǎng) 基 倒 置 于_中培養(yǎng)。要使該實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種等量的種等量的_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(3)該同學(xué)利用該同學(xué)利用_法統(tǒng)計(jì)土壤樣品中法統(tǒng)計(jì)土壤樣品中尿素分解菌的菌落數(shù)時(shí)，尿素分解菌的菌落數(shù)時(shí)，1g樣品被稀釋樣品被稀釋106倍后，每個(gè)嚴(yán)格倍后，每個(gè)嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)皿中用了滅菌的培養(yǎng)皿中用了0.5 mL稀釋液，最終所用的稀釋液，最終所用的5個(gè)培養(yǎng)個(gè)培養(yǎng)皿所得的菌落數(shù)分別是皿所得的菌落數(shù)分別是112、132、141、130、140，則每，則每克樣品中的菌株數(shù)為克樣品中的菌株數(shù)為_(kāi)?！窘馕鼋馕觥?本題考查微生物的培養(yǎng)和分離本題考查微生物的培養(yǎng)和分離計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)。題目比較簡(jiǎn)單，解題思路計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)。題目比較簡(jiǎn)單，解題思路是根據(jù)題意梳理相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，然后結(jié)合題是根據(jù)題意梳理相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)，然后結(jié)合題目要求分析作答即可。目要求分析作答即可。.(1)由表格內(nèi)容可知，該培養(yǎng)基的碳源主由表格內(nèi)容可知，該培養(yǎng)基的碳源主要是乳糖、蔗糖，蛋白胨作為主要的氮源也要是乳糖、蔗糖，蛋白胨作為主要的氮源也能提供碳源；培養(yǎng)基的制備包括計(jì)算、稱(chēng)量能提供碳源；培養(yǎng)基的制備包括計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基、溶化、滅菌、倒平板，最后一步待培養(yǎng)基冷卻至冷卻至50 左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板。板。(2)消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括不包括芽孢和孢子芽孢和孢子)。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜孢子。在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌；菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌；操作者的雙手需進(jìn)行清潔和消毒。操作者的雙手需進(jìn)行清潔和消毒。(3)當(dāng)單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，便會(huì)當(dāng)單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，便會(huì)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，稱(chēng)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，稱(chēng)為菌落。每種細(xì)菌在一定條件下形成的菌落，可以作為菌種為菌落。每種細(xì)菌在一定條件下形成的菌落，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。因此，對(duì)獲得的菌種可以依據(jù)菌落的形狀鑒定的重要依據(jù)。因此，對(duì)獲得的菌種可以依據(jù)菌落的形狀、大小、顏色和隆起程度等特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。、大小、顏色和隆起程度等特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。.(1)在細(xì)菌分解尿素的反應(yīng)中，細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶可將尿在細(xì)菌分解尿素的反應(yīng)中，細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶可將尿素分解成為氨。為證明分離得到的細(xì)菌是否可以分解尿素，素分解成為氨。為證明分離得到的細(xì)菌是否可以分解尿素，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若該指示劑變紅，則可初步可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若該指示劑變紅，則可初步鑒定該細(xì)菌可以分解尿素。鑒定該細(xì)菌可以分解尿素。(2)要想使微生物快速地繁殖，就要置于適宜的條件下，特別是溫度，所以要將接種后的培養(yǎng)基倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種等量的無(wú)菌水作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(3)常用稀釋涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)。每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，本實(shí)驗(yàn)中的C(112132141130140)5131，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積，本實(shí)驗(yàn)中的V0.5 ML，M代表稀釋倍數(shù)，本實(shí)驗(yàn)中的M106，因此，每克樣品中的菌株數(shù)為(1310.5)1062.62108?！敬鸢复鸢浮?.(1)蔗糖、乳糖和蛋白胨蔗糖、乳糖和蛋白胨50 酒精燈酒精燈(2)滅菌滅菌消毒消毒(3)形狀、大小、顏色和隆起程度等形狀、大小、顏色和隆起程度等.(1)酚紅酚紅(2)恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水無(wú)菌水(3)稀釋涂布平板稀釋涂布平板2.621084(2018江西省贛州市第四中學(xué)高三上學(xué)期月考江西省贛州市第四中學(xué)高三上學(xué)期月考)進(jìn)入進(jìn)入冬季，部分城市出現(xiàn)嚴(yán)重霧霾，與秸稈野外焚燒有一定關(guān)冬季，部分城市出現(xiàn)嚴(yán)重霧霾，與秸稈野外焚燒有一定關(guān)系。為破解秸稈處理瓶頸，微生物專(zhuān)家力圖通過(guò)微生物降系。為破解秸稈處理瓶頸，微生物專(zhuān)家力圖通過(guò)微生物降解技術(shù)使秸稈能盡快腐爛掉，增加土壤肥力，緩解環(huán)境污解技術(shù)使秸稈能盡快腐爛掉，增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。試分析并回答有關(guān)問(wèn)題：染。試分析并回答有關(guān)問(wèn)題：(1)專(zhuān)家研制的降解秸稈的催腐劑是十余種專(zhuān)家研制的降解秸稈的催腐劑是十余種能分解纖維素的霉菌、細(xì)菌和酵母菌的組合能分解纖維素的霉菌、細(xì)菌和酵母菌的組合。其中。其中_在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上與其他兩者在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上與其他兩者不同。不同。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可以將苷酶可以將_分解為分解為_(kāi)。(3)微生物專(zhuān)家為從發(fā)黑的樹(shù)干上分離出有微生物專(zhuān)家為從發(fā)黑的樹(shù)干上分離出有分解纖維素能力的高產(chǎn)菌株，制備了選擇培分解纖維素能力的高產(chǎn)菌株，制備了選擇培養(yǎng)基，將菌液進(jìn)行一系列養(yǎng)基，將菌液進(jìn)行一系列_，從而，從而得到單個(gè)菌落，得到單個(gè)菌落， 再采用再采用_方法進(jìn)方法進(jìn)行鑒定，得到上圖的菌落。那么，圖中降解行鑒定，得到上圖的菌落。那么，圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌落是纖維素能力最強(qiáng)的菌落是_(填圖中序號(hào)填圖中序號(hào))。(4)圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基?！窘馕鼋馕觥?本題主要考查分離土壤中能分解纖維素的微生物本題主要考查分離土壤中能分解纖維素的微生物的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記原核細(xì)胞與真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記原核細(xì)胞與真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的異同點(diǎn)，識(shí)記纖維素酶的種類(lèi)及其專(zhuān)一性，掌握微生物分離異同點(diǎn)，識(shí)記纖維素酶的種類(lèi)及其專(zhuān)一性，掌握微生物分離與培養(yǎng)的一般步驟。與培養(yǎng)的一般步驟。纖維素的單體是葡萄糖，纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡纖維素的單體是葡萄糖，纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖。纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括萄糖。纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、酶、Cx酶和葡萄糖苷酶和葡萄糖苷酶。纖維素分解菌可以用剛果紅染液進(jìn)行鑒別，剛果紅可以酶。纖維素分解菌可以用剛果紅染液進(jìn)行鑒別，剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無(wú)法形成，會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈色復(fù)合物無(wú)法形成，會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。(1)霉菌和酵母菌屬于真核生物中的真菌，細(xì)菌屬于原核霉菌和酵母菌屬于真核生物中的真菌，細(xì)菌屬于原核生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是原核細(xì)生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是原核細(xì)胞沒(méi)有核膜包被的成形的細(xì)胞核。胞沒(méi)有核膜包被的成形的細(xì)胞核。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可以將纖纖維素酶是一種復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可以將纖維二糖分解為葡萄糖。維二糖分解為葡萄糖。(3)微生物專(zhuān)家為從發(fā)黑的樹(shù)干上分離出有分解纖維素能微生物專(zhuān)家為從發(fā)黑的樹(shù)干上分離出有分解纖維素能力的高產(chǎn)菌株，制備了選擇培養(yǎng)基，將菌液進(jìn)行一系列梯度力的高產(chǎn)菌株，制備了選擇培養(yǎng)基，將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)瑥亩玫絾蝹€(gè)菌落，再采用剛果紅染色方法進(jìn)行鑒定稀釋?zhuān)瑥亩玫絾蝹€(gè)菌落，再采用剛果紅染色方法進(jìn)行鑒定；纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明；纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是。(4)圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基。圖中所示培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基?！敬鸢复鸢浮?(1)細(xì)菌細(xì)菌(2)纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖(3)梯度稀釋梯度稀釋剛果紅染色剛果紅染色(4)固體固體【歸納總結(jié)歸納總結(jié)】 兩種微生物篩選方法的比兩種微生物篩選方法的比較較項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離方法使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)1(2018海淀中學(xué)高三第一學(xué)期期中練習(xí)海淀中學(xué)高三第一學(xué)期期中練習(xí))在微生物培在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，需要通過(guò)選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來(lái)篩選養(yǎng)的過(guò)程中，需要通過(guò)選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來(lái)篩選出目標(biāo)菌種，下列與之相關(guān)的敘述中不正確的是出目標(biāo)菌種，下列與之相關(guān)的敘述中不正確的是()A纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料，從而使菌落周纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料，從而使菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈圍出現(xiàn)透明圈B尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘保瑥亩狗蛹t指示尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，從而使酚紅指示劑變紅劑變紅C在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株有相應(yīng)抗性的菌株D在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的乳酸在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的乳酸菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)“溶鈣圈溶鈣圈”【解析解析】 纖維素分解菌能夠分解纖維素纖維素分解菌能夠分解纖維素，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的，在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，纖維素分解菌為中心的透明圈，A錯(cuò)誤；尿錯(cuò)誤；尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使培養(yǎng)基呈素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使培養(yǎng)基呈堿性，從而使酚紅指示劑變紅，堿性，從而使酚紅指示劑變紅，B正確；在培正確；在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株，的菌株，C正確；在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上正確；在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的乳酸菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)的乳酸菌菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)“溶鈣圈溶鈣圈”，D正確。正確?！敬鸢复鸢浮?A2(2018北京海淀首師大附中高三月考北京海淀首師大附中高三月考)硝化細(xì)菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，硝化細(xì)菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，下列關(guān)于其代謝敘述正確的是下列關(guān)于其代謝敘述正確的是()A碳源為葡萄糖碳源為葡萄糖B培養(yǎng)時(shí)需隔絕空氣培養(yǎng)時(shí)需隔絕空氣 C氮源是氮?dú)獾词堑獨(dú)?D培養(yǎng)時(shí)需適宜的溫度培養(yǎng)時(shí)需適宜的溫度【解析解析】 硝化細(xì)菌可以利用氨氧化過(guò)程產(chǎn)生的化學(xué)能將硝化細(xì)菌可以利用氨氧化過(guò)程產(chǎn)生的化學(xué)能將二氧化碳和水轉(zhuǎn)變成有機(jī)物，屬于化能自養(yǎng)型生物，所以培二氧化碳和水轉(zhuǎn)變成有機(jī)物，屬于化能自養(yǎng)型生物，所以培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)培養(yǎng)基成分不需要有機(jī)碳源，其碳源為二氧化養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)培養(yǎng)基成分不需要有機(jī)碳源，其碳源為二氧化碳，碳，A項(xiàng)錯(cuò)誤；由題干中項(xiàng)錯(cuò)誤；由題干中“硝化細(xì)菌廣泛存在于通氣性較好硝化細(xì)菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中的土壤中”可知，硝化細(xì)菌應(yīng)屬于需氧型生物，所以培養(yǎng)時(shí)可知，硝化細(xì)菌應(yīng)屬于需氧型生物，所以培養(yǎng)時(shí)不需要隔絕空氣，不需要隔絕空氣，B項(xiàng)錯(cuò)誤；固氮微生物的氮源是氮?dú)?，而?xiàng)錯(cuò)誤；固氮微生物的氮源是氮?dú)?，而硝化?xì)菌不能直接利用氮?dú)庾龅矗趸?xì)菌不能直接利用氮?dú)庾龅?，C項(xiàng)錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌能項(xiàng)錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌能利用利用NH3氧化釋放的能量把二氧化碳和水合成有機(jī)物，需要氧化釋放的能量把二氧化碳和水合成有機(jī)物，需要酶的催化作用，所以培養(yǎng)時(shí)需要適宜的溫度，酶的催化作用，所以培養(yǎng)時(shí)需要適宜的溫度，D項(xiàng)正確。項(xiàng)正確。【答案答案】 D3(2018山東省濱州博興三中高三期末山東省濱州博興三中高三期末)下面有關(guān)倒平板的操作，錯(cuò)誤的是下面有關(guān)倒平板的操作，錯(cuò)誤的是()A將滅過(guò)菌的空培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌將滅過(guò)菌的空培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上面上B使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰C等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)等待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置放置D把培養(yǎng)皿打開(kāi)，將培養(yǎng)皿蓋倒放在桌把培養(yǎng)皿打