(浙江專用)高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題八 現(xiàn)代生物科技專題 第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件.ppt
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(浙江專用)高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題八 現(xiàn)代生物科技專題 第1講 基因工程和克隆技術(shù)課件.ppt
第1講基因工程和克隆技術(shù) 專題八現(xiàn)代生物科技專題 2016高考導(dǎo)航 專題八現(xiàn)代生物科技專題 專題八現(xiàn)代生物科技專題 1 基因工程的工具 1 限制性核酸內(nèi)切酶 來源 主要從原核生物中分離純化出來 作用a b 結(jié)果 產(chǎn)生 特異性識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列 切割兩個(gè)核苷酸之間的化學(xué)鍵 粘性末端 2 DNA連接酶作用 將具有 的兩個(gè)DNA片段連接在一起 3 質(zhì)粒 從存在位置看 在細(xì)菌中獨(dú)立于擬核之外 從化學(xué)成分上看 為雙鏈環(huán)狀DNA分子 從功能上看 能自主復(fù)制 從結(jié)構(gòu)上看 常含有抗生素抗性基因 相同粘性末端 基因文庫 較小基因 逆轉(zhuǎn)錄酶 3 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 Ca2 4 篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá) 篩選 用含 的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體細(xì)胞 選擇含 的受體細(xì)胞 表達(dá) 目的基因在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生人們需要的 抗生素 重組質(zhì)粒 功能物質(zhì) 3 幾種重要的克隆技術(shù)分析 1 植物細(xì)胞培養(yǎng) 器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系 愈傷組織 器官 單個(gè)細(xì)胞 除去細(xì)胞壁 機(jī)械消化或胰蛋白酶消化 原代 傳代 細(xì)胞系 單個(gè)細(xì)胞 血清 滋養(yǎng)細(xì)胞 仙臺(tái)病毒或聚乙二醇 5 動(dòng)物的克隆繁殖 命題點(diǎn)1基因工程及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性 目的基因的獲取 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測與鑒定 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 細(xì)胞質(zhì) 染色體DNA T DNA片段 內(nèi)部 植物組織培養(yǎng) 粘性 磷酸二酯鍵 1 目的基因應(yīng)插入啟動(dòng)子與終止子之間的部位 2 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象 3 原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn) 繁殖快 多為單細(xì)胞 遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等 4 一般情況下 用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的片段 但有時(shí)可用兩種限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因 以避免質(zhì)粒和質(zhì)粒之間 目的基因和目的基因之間的連接 5 標(biāo)記基因的作用 篩選 檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 6 受體細(xì)胞常用植物受精卵或體細(xì)胞 經(jīng)組織培養(yǎng) 動(dòng)物受精卵 一般不用體細(xì)胞 微生物 大腸桿菌 酵母菌 等 7 啟動(dòng)子 DNA片段 起始密碼子 RNA 終止子 DNA片段 終止密碼子 RNA 限制酶 DNA連接酶 Ca2 感受 重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞 脫分化 再分化 卡那霉素 顯微注射 動(dòng)物體細(xì)胞的全能性一般不能表現(xiàn) 性別鑒定 逆轉(zhuǎn)錄 限制酶 BamH 和Pst 經(jīng)研究發(fā)現(xiàn) 如果將該凝乳酶的第20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?則其催化能力將提高2倍 現(xiàn)已知通過蛋白質(zhì)工程可生產(chǎn)高效凝乳酶 請寫出有關(guān)制備步驟 找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列 定向改造凝乳酶基因 將改造后的凝乳酶基因?qū)胧荏w細(xì)胞等 答案合理即可 命題點(diǎn)2克隆技術(shù) 流動(dòng)性 獲能 減數(shù)第二次分裂中期 促性腺激素 細(xì)胞壁 纖維素酶和果膠 離心 振動(dòng) 電刺激 形成了新的細(xì)胞壁 植物組織培養(yǎng) 生長素 雜交瘤 特異性抗體 選擇 3 1 答題時(shí)不能混用的兩種細(xì)胞 重組細(xì)胞和雜交細(xì)胞 1 重組細(xì)胞 體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞之后形成的細(xì)胞叫重組細(xì)胞 2 雜交細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞 2 明確單克隆抗體制備過程中的兩次篩選第一次篩選 利用特定選擇培養(yǎng)基篩選 獲得雜交瘤細(xì)胞 即AB型細(xì)胞 A為效應(yīng)B細(xì)胞 B為骨髓瘤細(xì)胞 不需要A B AA BB型細(xì)胞 第二次篩選 利用多孔板法和抗原 抗體雜交法篩選 獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞分裂素 生長素 滅菌 愈傷組織 胚狀體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 灰 胚胎移植 冷凍 低溫 液氮 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 體 乳腺 高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性 藥物生產(chǎn) 答案合理即可 優(yōu)良種畜的培育與擴(kuò)大 治療性克隆 拯救瀕危動(dòng)物 答案合理 不與前一空答案重復(fù)即可 骨髓瘤細(xì)胞 抗原刺激過的B細(xì)胞 或效應(yīng)B細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 2 過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的 過程 與纖維母細(xì)胞相比 誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較 過程的實(shí)質(zhì)是 3 生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)效應(yīng)B細(xì)胞 主要原因是 脫分化 高 基因的選擇性表達(dá) 效應(yīng)B細(xì)胞高度分化 不能無限 或大量 增殖 4 處需要篩選 從而得到 細(xì)胞 且培養(yǎng)該細(xì)胞的氣體環(huán)境為 能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤 95 的空氣 5 的CO2