蛙坐骨神經干動作電位實驗報告.doc

一、實驗目的：1. 學習蛙坐骨神經干標本的制備2. 觀察坐骨神經干的雙相動作電位波形，并測定最大刺激強度3. 測定坐骨神經干雙相動作電位的傳導速度4. 學習絕對不應期和相對不應期的測定方法5. 觀察機械損傷或局麻藥對神經興奮和傳導的影響二、實驗材料1. 實驗對象：牛蛙2. 實驗藥品和器材：任氏液，2%普魯卡因，各種帶USB接口或插頭的連接導線，神經屏蔽盒，蛙板，玻璃分針，粗剪刀，眼科剪，眼科鑷，培養(yǎng)皿，燒杯，滴管，蛙毀髓探針，BL-420N系統(tǒng)三、主要方法和步驟：1. 搗毀腦脊髓2. 分離坐骨神經3. 安放引導電極4. 安放刺激電極5. 啟動試驗系統(tǒng)6. 觀察記錄7. 保存8. 編輯輸出四、實驗結果和討論1. 觀察神經干雙相動作電位引導（單通道，單刺激）如圖，觀察到一個雙相動作電位波形。2. 神經干雙相動作電位傳導速度測定（雙通道，單刺激）（1） 選擇“神經骨骼肌實驗”“傳導速度測定”（2） 改變單刺激強度（3） 傳導速度 = 傳導距離(R1-R2-)/傳導時間(t2-t1)如圖所示，兩個波峰之間的傳導時間 t = (t2-t1) = 0.66ms實驗中，我們設定在引導電極1和3之間的距離 R = (R1-R2-) = 1cm故傳導速度v = R/t = 1cm / 0.66ms = 15.2 m/s3. 神經干雙相動作電位不應期觀察由上圖可知，當刺激間隔時間為4.61ms時，兩雙相動作電位開始融合，此時為總不應期；當刺激間隔時間為1.05ms時，雙相動作電位完全融合，此時為絕對不應期。故相對不應期 = 總不應期 絕對不應期 = 4.61ms 1.05ms = 3.56ms4. 普魯卡因對神經沖動傳導的阻滯作用如圖所示，在兩通道之間滴加普魯卡因后，兩雙相電位間的波峰間隔時間為1.03ms，由引導電極之間的間隔距離1cm，得此時傳導速度：V1 = 1cm/1.03ms = 9.71 m/s5. 機械損傷對坐骨神經干雙向動作電位的影響由圖可知，當剪斷兩引導電極之間的神經干時，第二通道的雙相動作電位消失。故機械損傷對神經動作電位傳導的阻滯作用比局麻藥強。6. 實驗注意事項a) 牛蛙腓腸肌后的神經干分支較難找，可以適當剪開周圍軟組織輔助找到。b) 每隔一段時間，記得給神經干（及未分離時的周圍軟組織）滴加任氏液以盡量保持組織的活性。c) 分離出的神經要盡量長，以保證實驗數據的完整性。d) 滴加普魯卡因時，液滴可能會垂在神經干上的兩個引導電極之間，此時可以用滴管將其引流到神經干末端無引導電極的地方，滴到神經屏蔽盒底部。e) 實驗前先熟悉即將使用的機能學實驗系統(tǒng)。