血氧脈搏儀設計含4張CAD圖及程序
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抗菌劑和化療,1992年 2月,473-476頁 。36卷,第2 號
0066-4804/92/020473-04$02.0 /0
版權(quán)所有? 1992年,美國社會微生物學
利用脈搏測量儀研究小鼠抗病毒藥物對流感病毒的抑制效應的
羅伯特· W· 西德維爾, 約翰· 霍夫曼,約翰· 吉爾伯特,BRET MOSCON,戈登·彼得森羅杰· 漢堡和 里德 P. 沃利
抗病毒藥物研究所研究,猶他州州立大學,洛根,猶他州84322-5600
從1991年7月 9 日至1991年11月 22日
誘導小鼠肺疾病流感病毒監(jiān)測可通過血氧飽和度儀測量血液中血氧飽和度(SaO 2)來實現(xiàn)。血氧濃度與接種病毒量成反比。已知的抗病毒藥物利巴韋林抑制血氧飽和度下降,避免死亡,降低肺癌合并,并降低了一級可收回病毒。脈搏血氧儀是監(jiān)測小鼠流感病毒性疾病的一種有效的手段,可用于研究潛在的抗病毒藥物。
在醫(yī)院照顧存在潛在的呼吸窘迫的患者進行不斷監(jiān)測呼吸情況已成為標準的做法,可通過血氧探測儀器測量手指,腳趾,腳,或耳垂來檢測。動脈血紅蛋白的血氧飽和度(SaO2)的測量是根據(jù)脈沖光吸收(1)。
存在一個需要改進的手段來監(jiān)測小鼠感染劑流感病毒呼吸狀況,就不必通過讓動物在不同階段患疾病來觀測。抑制肺泡音(5)和體重減輕(4,7)已很少使用在實驗來滿足這種需要。在本報告中描述的使用脈沖血氧飽和度的研究小鼠流感病毒性疾病和應用這種方法補充常用死亡的參數(shù),肺癌形成,和病毒滴度評價抗病毒化合物在肺部的抑制作用,利巴(1-p-d-ribofuranosyl-1,2,4-tri-azole-3-carboxamide)(6,9),對流感病毒病。年輕的成年雄性和雌性小鼠和C57 BL / 6小鼠(西蒙森實驗室,吉爾羅伊,加利福尼亞州),這是保持飲用水含有0.006% oxytetracy-cline(輝瑞,紐約,紐約)控制可能中等程度細菌感染,使用了這項研究。小鼠輕輕乙醚麻醉,并在指定的研究。他們被感染鼻腔(中)與一個追隨荷蘭病毒:流感/創(chuàng)建/ 33( H1N1型),從K . W·科克倫(密歇根大學,安阿伯);流感/日本/ 305/ 57(抗體),由F . M .沙波爾,Jr .(南院,伯明翰,阿拉巴馬州);和流感/港口查/ 1/ 73(H3N 2)和乙/香港/ 5/ 72,無論從美國典型培養(yǎng)物保藏(羅克維爾,馬里蘭州)。所有的病毒傳多次通過開發(fā)特定病原體使小鼠致死。這些動物,每個傳代分別與其他病毒在該地區(qū)隔開避免重組。病毒池準備和滴定合流單層Madin - darby犬腎(MDCK)細胞。
病毒感染監(jiān)測使用光學應用3740脈搏血氧飽和度儀(歐美達,路易斯維爾,俄亥俄州)。同時測量手指和耳探針伴隨儀器中使用了獨立研究。該數(shù)字顯示儀表在使用時,儀器在“慢”模式。最初的實驗證明,血氧飽和度值的確定與脈搏血氧儀基本上是重復的,直接的測量血氧飽和度在肝素血液進行一個OSM-3血氧濃度測量儀和ABL-2血液氣體分析儀(Radiometer股份有限公司,哥本哈根,丹麥)。
比較確定的小鼠脈搏血氧飽和度儀的方法。下面的方法被認為是最有效的在獲取有用的脈搏血氧儀血氧飽和度讀數(shù):(ⅰ)插入整個老鼠,尾巴,采取手指探頭方式,發(fā)光二極管和光電二極管互相對立的跨中段的動物,(ⅱ)將耳探針放在動物的大腿內(nèi)側(cè)肌肉使發(fā)光二極管和光電二極管在兩側(cè)的大腿肌肉測量。手指探針的方法取得較低(2- 4%)讀數(shù);然而,健康的動物往往變得興奮和更緊張當他們被安置在手指探針,我們的措施都必須保持他們在探針的足夠的時間來獲得一個準確的血氧飽和度測量。在腹腔注射無菌生理鹽水稀釋的1 : 80的94毫克三溴乙醇(1.5克三溴乙醇1毫升異戊酯酒精;奧德里奇化工有限,密爾瓦基,威斯康星州。)每公斤體重管理前5分鐘的血氧飽和度測定成功地消除了動物的斗爭,不影響血氧飽和度值測定。
這種穩(wěn)定是沒有必要的時候采取的測量,采用耳探針的大腿。它是發(fā)現(xiàn),然而,護理已被接受將耳朵探頭之間的距離大約等于髖關(guān)節(jié)和膝關(guān)節(jié)。確定了髖關(guān)節(jié)附近經(jīng)常變化+10%,顯然是因為阻塞的骨盆骨的光傳輸通過血管床。當探針搬到太靠近膝蓋,血管床明顯太小,和外部光線偶爾干擾的又決定,造成了很大的變化。
為了確定是否持有動物太緊會往往限制胸部和阻礙適當?shù)暮粑?,五只小鼠被緊緊握住頸部,來測量大腿上的血氧飽和度五次分別為每一種動物。他們很松散,然后舉行重復測量。平均血氧飽和度,緊緊握住的動物是86.3 +1;松散的動物是86.5+ 1.1。這些這些數(shù)據(jù)表明,胸部不在收縮足以影響讀數(shù)。
文獻伴隨歐美達用儀器這些實驗建議按摩皮膚區(qū)域該探測器將附在異丙醇(70%)墊或與發(fā)紅劑乳膏20至30秒的原因當?shù)氐难苁鎻埡?,因此,增加灌注。幾個實驗小鼠在皮膚最初是潮濕的發(fā)生與異丙醇表明增加約4% 血氧飽和度讀數(shù)與閱讀同一動物不暴露于酒精。還相對閱讀是最重要的抗病毒實驗,所以酒精預處理沒有在這些研究。
血氧飽和度測定在流感病毒感染小鼠。年輕的成年小鼠病毒感染在各0.5log10稀釋每個流感病毒。動脈血氧飽和中確定這些動物每天7至10天使用耳探針放在大腿上的死亡也每天記錄。防止數(shù)據(jù)傾斜,老鼠死了明顯的呼吸窘迫被任意指派一個血氧飽和度65%值直到所有動物死亡,當時沒有進一步值的記錄。
圖1 .影響流感病毒感染肺外SaO2鼠動脈脈搏血氧儀所決定的。滴定量的每個稀釋病毒,表示為50%感染劑量為每毫升組織培養(yǎng),如下:流感病毒A型(HlNl),107 - 5(A),流病毒A(H2N2)、108.5(B);流感病毒A型(H3N2),107 -(C);B型流感病毒,108 .5(D)。*,以稀釋病毒;0、10我- - 的病毒稀釋;,稀釋10病毒;*,稀釋10 - 4病毒:啊,正常對照組。年代
如圖1所示,三的流感病毒的高接種的小鼠致死。相比之下,只有40%的甲型流感病毒B照射小鼠死亡,這些死亡發(fā)生較晚(平均存活時間,6至7天)。在小鼠致命的感染,血氧濃度值下降的劑量反應的方式。在案件的型流感病毒感染,其中的病毒接種沒有造成死亡的大多數(shù)動物,血氧濃度下降是不太明顯。如圖2所示,大多數(shù)在死亡發(fā)生時,血氧飽和度值低于75%。線性相關(guān)系數(shù)(r)這些數(shù)據(jù)是0.908,顯示出強大的相關(guān)性血氧飽和度和死亡在動物??沽鞲胁《緦θ蚝塑兆饔?。小鼠出現(xiàn)了感染中有大約90%的致死劑量型流感病毒(H1N1型)(105 50%個細胞培養(yǎng)感染傳染性劑量每毫升)。利巴韋林(仁川藥品,Inc .,柯斯塔梅莎,加利福尼亞州),在劑量為75毫克/公斤/天(n=30),或鹽水(n=40)腹腔兩次每日5天開始4小時后,病毒暴露。十個感染,利巴韋林治療的小鼠和18病毒感染的地方被治療控制動物進行觀察,每日21天死亡;脈沖血氧計讀數(shù)確定這些小鼠每日7天的使用耳探針,如所述以上。從池剩余的感染,治療作用,五只小鼠隨機選擇了在天3,5,和
7病毒接觸后。肺部固結(jié)的視覺證據(jù)是得分盲目的基礎(chǔ)上,0正常和4是100%合并的指示。肺部當時均質(zhì)和檢測病毒滴度在狗腎傳代細胞(MDCK)測試各種對數(shù)稀釋一式三份,如以前所描述(8)。如圖3所示,利巴韋林治療預防死亡,減少抑郁癥的血氧飽和度,抑制肺癌合并,并在較小的程度上,減少病毒滴度在肺部??梢姺戊柟塘酥卸认嚓P(guān)(注冊商標=0.792)與血氧飽和度值的血氧飽和度;值下降速度超過了鞏固提高。
這之間的時間差,降低血氧飽和度值和發(fā)展可見肺鞏固表明,肺組織遇到足夠的損傷降低輸氣能力之前重大變化肺色。肺癌合并流感病毒感染的動物是由于結(jié)合導致。該病毒感染的肺泡損傷細胞和壞死病因毛細血管壁,導致出血肺部。肺泡滲出液通常由中性粒細胞和單核細胞(2)。增加的顏色出現(xiàn)在肺部后的感染表現(xiàn)可能導致血管現(xiàn)象從以后的免疫反應的感(3)。數(shù)據(jù)從抗病毒實驗,這表明早期表示嚴重肺損傷的血氧飽和度測量,說明了它另外的作用,使用脈搏血氧儀研究小鼠流感病毒感染。
這些數(shù)據(jù)表明一個明確的應用脈沖血氧儀方法實驗室動物,作為一種適當?shù)谋O(jiān)測手段中度到嚴重的呼吸系統(tǒng)疾病。出現(xiàn)的方法是具有特別的價值作為一個額外的參數(shù)研究藥物可能是抑制流感病毒。本研究的支持合同NO1-AI-I5097,抗病毒研究分支,微生物學和傳染病部門,國家過敏和傳染病研究所,國家衛(wèi)生研究院。
圖2。比較發(fā)生死亡和血氧飽和度下降流行性感冒(H3N 2)病毒感染的小鼠細胞。A,生死亡;0,血氧飽和度。線條表明標準誤差。
天post-virus接種
圖3。影響腹腔注射利巴韋林治療流感病毒型(甲1型)感染小鼠細胞。*,正常對照組;A,感染,生理鹽水處理的小鼠;0,感染,西藥小鼠。(A)動脈血氧飽和度;(B)肺鞏固;(C)肺病毒滴度。酒吧表明標準誤差。
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