福建省高中生物 專題2 2.2動物細胞工程課件 新人教版選修3

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1、2.2動物細胞工程考綱要求考綱要求四年考情四年考情1.1.動物的細胞培養(yǎng)與體細胞動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆克隆 2.2.細胞融合與單克隆抗體細胞融合與單克隆抗體 20122012福建福建非選擇題非選擇題T32,T32,20112011福建福建非選擇題非選擇題T32,T32,20102010福建福建非選擇題非選擇題T32T32一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)動物細胞工程技術的基礎動物細胞工程技術的基礎1.1.動物細胞的培養(yǎng)過程動物細胞的培養(yǎng)過程胰蛋白酶胰蛋白酶原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶胰蛋白酶2.2.培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件(1)(1)無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境: :對對_和所有培養(yǎng)

2、用具進行無菌處和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理理, ,添加添加_,_,定期更換培養(yǎng)液以清除定期更換培養(yǎng)液以清除_。(2)(2)營養(yǎng)營養(yǎng): :除正常的有機和無機營養(yǎng)外除正常的有機和無機營養(yǎng)外, ,加入加入_等一些等一些天然成分。天然成分。培養(yǎng)液培養(yǎng)液抗生素抗生素代謝產(chǎn)物代謝產(chǎn)物血清、血漿血清、血漿(3)(3)適宜的溫度和適宜的溫度和pH:pH:溫度為溫度為_(_(哺乳動物哺乳動物),pH),pH為為_。(4)(4)氣體環(huán)境氣體環(huán)境: :含含95%95%空氣加空氣加_的混合氣體的混合氣體, ,其中后者的作用其中后者的作用是是_。3.3.應用應用生物制品的生產(chǎn)、檢測生物制品的生產(chǎn)、檢測_、醫(yī)學研究。、醫(yī)學

3、研究。36.536.50.50.57.27.27.47.45%CO5%CO2 2維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pHpH有毒物質(zhì)有毒物質(zhì)二、動物體細胞核移植技術和克隆動物二、動物體細胞核移植技術和克隆動物1.1.動物體細胞核移植技術的過程動物體細胞核移植技術的過程細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)去核去核重組細胞重組細胞供體供體2.2.原理原理:_:_3.3.結(jié)果結(jié)果:_:_4.4.應用應用(1)(1)加速家畜加速家畜_進程進程, ,促進優(yōu)良畜群繁育。促進優(yōu)良畜群繁育。(2)(2)保護保護_。(3)(3)生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。(4)(4)作為異種移植的作為異種移植的_。(5)(5)用于組織器官的用于組織器官的_。

4、動物體細胞核具有全能性動物體細胞核具有全能性產(chǎn)生新個體產(chǎn)生新個體遺傳改良遺傳改良瀕危物種瀕危物種供體供體移植移植三、動物細胞融合與單克隆抗體三、動物細胞融合與單克隆抗體1.1.動物細胞融合動物細胞融合(1)(1)原理原理:_:_。(2)(2)融合方法融合方法: :聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(PEG)、_、電激等。、電激等。(3)(3)意義意義: :突破了突破了_的局限的局限, ,使使_成為可能成為可能, ,也為制造也為制造_開辟了新途徑。開辟了新途徑。細胞膜的流動性細胞膜的流動性滅活的病毒滅活的病毒有性雜交方法有性雜交方法遠緣雜交遠緣雜交單克隆抗體單克隆抗體2.2.單克隆抗體單克隆抗體(1)(

5、1)制備過程制備過程: :雜交瘤細胞雜交瘤細胞能產(chǎn)生所需能產(chǎn)生所需抗體抗體(2)(2)優(yōu)點優(yōu)點: :特異性強、特異性強、_,_,可大量制備?？纱罅恐苽洹?3)(3)用途用途: :作為作為_;_;用于治療疾病和用于治療疾病和_。靈敏度高靈敏度高診斷試劑診斷試劑運載藥物運載藥物1.1.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞。培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞。( )( )【分析【分析】由于接觸抑制由于接觸抑制, ,動物細胞培養(yǎng)時只能形成單層細胞。動物細胞培養(yǎng)時只能形成單層細胞。2.2.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的。二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的。( )( )【

6、分析【分析】二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的, ,只有少數(shù)只有少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變, ,才能無限增殖。才能無限增殖。3.3.動物細胞培養(yǎng)技術可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育。動物細胞培養(yǎng)技術可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育。( )( )【分析【分析】目的基因?qū)胧荏w細胞后需通過動物細胞培養(yǎng)技術獲目的基因?qū)胧荏w細胞后需通過動物細胞培養(yǎng)技術獲得早期胚胎得早期胚胎, ,才能進一步培育成轉(zhuǎn)基因動物。才能進一步培育成轉(zhuǎn)基因動物。4.4.哺乳動物細胞體外培養(yǎng)時乳腺癌細胞易于乳腺細胞哺乳動物細胞體外培養(yǎng)時乳腺癌細胞易于乳腺細胞; ;胚胎細胚胎細胞易于脂肪細胞。胞

7、易于脂肪細胞。( )( )【分析【分析】哺乳動物的乳腺細胞和脂肪細胞都是高度分化的細胞哺乳動物的乳腺細胞和脂肪細胞都是高度分化的細胞, ,體外培養(yǎng)難度大。乳腺癌細胞能夠無限增殖體外培養(yǎng)難度大。乳腺癌細胞能夠無限增殖, ,容易進行體外培容易進行體外培養(yǎng)養(yǎng); ;胚胎細胞具有很強的分裂增殖能力胚胎細胞具有很強的分裂增殖能力, ,容易進行體外培養(yǎng)。容易進行體外培養(yǎng)。5.5.動物細胞核移植的受體細胞是卵細胞。動物細胞核移植的受體細胞是卵細胞。( )( )【分析【分析】動物細胞核移植的受體細胞是去核的卵母細胞。動物細胞核移植的受體細胞是去核的卵母細胞。6.6.克隆動物的性狀與供體動物完全相同。克隆動物的性

8、狀與供體動物完全相同。( )( )【分析【分析】克隆動物的性狀主要由提供細胞核的供體動物決定克隆動物的性狀主要由提供細胞核的供體動物決定, ,但由細胞質(zhì)基因決定的性狀則由受體細胞決定。但由細胞質(zhì)基因決定的性狀則由受體細胞決定?？键c考點 一一 植物組織培養(yǎng)、動物細胞培養(yǎng)和細胞核移植比較植物組織培養(yǎng)、動物細胞培養(yǎng)和細胞核移植比較 項目項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)細胞核移植細胞核移植結(jié)果結(jié)果與外植體相同與外植體相同的個體的個體相同分化程度相同分化程度的細胞群的細胞群獲得克隆動物獲得克隆動物關鍵關鍵環(huán)節(jié)環(huán)節(jié)細胞的脫分化細胞的脫分化和再分化和再分化細胞增殖和癌細胞增殖和癌變變細胞

9、核融合、細細胞核融合、細胞分化胞分化項項目目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培動物細胞培養(yǎng)養(yǎng)細胞核移植細胞核移植應應用用植株快速繁殖植株快速繁殖脫毒作物的培養(yǎng)脫毒作物的培養(yǎng)人工種子人工種子工廠化生產(chǎn)工廠化生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)生產(chǎn)生物生產(chǎn)生物制品制品基因工程基因工程檢測有毒檢測有毒物質(zhì)物質(zhì)加速良種繁育加速良種繁育保護瀕危物種保護瀕危物種生產(chǎn)醫(yī)用蛋白生產(chǎn)醫(yī)用蛋白提供克隆器官、提供克隆器官、組織等組織等【高考警示【高考警示】(1)(1)植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)過程都存在細胞的培養(yǎng)過程植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)過程都存在細胞的培養(yǎng)過程, ,但植物細胞可以先分裂再分化但植物細胞可以先分

10、裂再分化, ,而動物細胞不分化只分裂。而動物細胞不分化只分裂。(2)(2)克隆動物的起點是經(jīng)過核移植后形成的重組細胞克隆動物的起點是經(jīng)過核移植后形成的重組細胞, ,其遺傳物其遺傳物質(zhì)主要來自供體質(zhì)主要來自供體, ,因此形成的個體性狀主要同供體因此形成的個體性狀主要同供體, ,但也有部分但也有部分性狀同受體。性狀同受體?！镜淅镜淅? 1】科學家通過轉(zhuǎn)基因技術獲得了含有人生長激素基科學家通過轉(zhuǎn)基因技術獲得了含有人生長激素基因的奶牛因的奶牛, ,如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育, ,可以對此轉(zhuǎn)基因奶可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進行克隆牛進行克隆( (如下圖所示如下圖所示) )。請結(jié)合圖示

11、回答下列問題。請結(jié)合圖示回答下列問題: :(1)(1)在進行細胞培養(yǎng)時在進行細胞培養(yǎng)時, ,要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細胞進行分要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細胞進行分散處理散處理, ,形成單個細胞形成單個細胞, ,這個過程中需要利用這個過程中需要利用_酶處理。酶處理。(2)(2)用于核移植的供體細胞用于核移植的供體細胞, ,一般都選用傳代一般都選用傳代1010代以內(nèi)的細胞代以內(nèi)的細胞, ,原因是原因是_。(3)(3)在進行原代培養(yǎng)時在進行原代培養(yǎng)時, ,細胞增殖的方式是細胞增殖的方式是_,_,此外此外, ,細胞增殖還表現(xiàn)出細胞增殖還表現(xiàn)出_和接觸抑制等和接觸抑制等特點。特點。(4)(4)將進行培養(yǎng)的

12、供體細胞注入去核的卵母細胞中將進行培養(yǎng)的供體細胞注入去核的卵母細胞中, ,去除卵母細去除卵母細胞細胞核的目的是胞細胞核的目的是。(5)(5)將重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后將重組細胞在培養(yǎng)液中培養(yǎng)成的重組胚胎移入受體母牛后, ,該母牛就會生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢該母牛就會生出與供體奶牛遺傳物質(zhì)相同的牛犢, ,但也不是但也不是100%100%地復制地復制, ,原因最可能是原因最可能是。(6)(6)上述動物細胞工程中涉及的技術有上述動物細胞工程中涉及的技術有。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功, ,說明了動物的說明了動物的具有具有全能性。全能性。【解析【解析】(1)

13、(1)實踐中常用胰蛋白酶處理動物組織細胞使其分離實踐中常用胰蛋白酶處理動物組織細胞使其分離開來。開來。(2)(2)傳代傳代1010代以內(nèi)的細胞代謝旺盛、分裂能力強代以內(nèi)的細胞代謝旺盛、分裂能力強, ,遺傳物質(zhì)沒有遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變發(fā)生改變, ,適于作為核移植的供體細胞。適于作為核移植的供體細胞。(3)(3)在進行原代培養(yǎng)時在進行原代培養(yǎng)時, ,細胞以有絲分裂的方式進行增殖細胞以有絲分裂的方式進行增殖, ,同時同時表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象。表現(xiàn)出貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象。(4)(4)去除卵母細胞細胞核的目的是使克隆出的動物個體的遺傳去除卵母細胞細胞核的目的是使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾

14、乎全部來自供體細胞。物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞。(5)(5)生物的性狀是細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果生物的性狀是細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果, ,同同時時, ,生物的性狀還受環(huán)境因素的影響生物的性狀還受環(huán)境因素的影響, ,因此因此, ,克隆動物不可能是克隆動物不可能是供體奶牛供體奶牛100%100%的復制品。的復制品。(6)(6)該克隆動物的培育過程中涉及核移植、細胞培養(yǎng)和胚胎移該克隆動物的培育過程中涉及核移植、細胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術植等技術, ,說明了高度分化的哺乳動物體細胞的細胞核仍具有說明了高度分化的哺乳動物體細胞的細胞核仍具有全能性。全能性。答案答案: :(1)(1)胰

15、蛋白胰蛋白(2)(2)該種細胞代謝旺盛、分裂能力強該種細胞代謝旺盛、分裂能力強, ,且遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變且遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變(3)(3)有絲分裂貼壁生長有絲分裂貼壁生長(4)(4)使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞(5)(5)生物的性狀受細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同控制生物的性狀受細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同控制; ;生物生物的性狀還受環(huán)境因素的影響的性狀還受環(huán)境因素的影響(6)(6)核移植、細胞培養(yǎng)、胚胎移植技術核移植、細胞培養(yǎng)、胚胎移植技術體細胞的細胞核體細胞的細胞核【變式訓練】【變式訓練】不同類型的細胞表達不同的基因組合。那么

16、不同不同類型的細胞表達不同的基因組合。那么不同類型的動物細胞都具有全套基因嗎類型的動物細胞都具有全套基因嗎? ?科學家進行了如下圖所示科學家進行了如下圖所示的克隆研究。的克隆研究。代表有關過程代表有關過程,a,ah h代表有關結(jié)構(gòu)或個體。代表有關結(jié)構(gòu)或個體。(1)a(1)a細胞的名稱是細胞的名稱是。過程。過程取出的細胞取出的細胞f f是是, ,該細胞經(jīng)過該細胞經(jīng)過過程分化成何種過程分化成何種h h細胞取決于培養(yǎng)基中加入的細胞取決于培養(yǎng)基中加入的。(2)(2)對對b b的操作方法通常是的操作方法通常是。若。若g g是能是能產(chǎn)生人生長激素的羊產(chǎn)生人生長激素的羊, ,則培育則培育g g時時, ,應將

17、人的生長激素基因?qū)霊獙⑷说纳L激素基因?qū)? ,為了盡快獲得大量的生長激素為了盡快獲得大量的生長激素, ,但讓但讓g g進行有性生殖會丟失目的基因進行有性生殖會丟失目的基因, ,你將通過你將通過技術技術來實現(xiàn)。來實現(xiàn)。(3)(3)如果圖中的細胞均是人體細胞如果圖中的細胞均是人體細胞, ,則獲得的則獲得的h h細胞或器官可用細胞或器官可用于供體本人組織器官的移植于供體本人組織器官的移植, ,其優(yōu)點是其優(yōu)點是_。(4)(4)上述過程中用到的生物技術有上述過程中用到的生物技術有_ _ ( (列舉兩項列舉兩項) )?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}主要考查體細胞核移植技術的過程和應用前景。本題主要考查體細胞核移

18、植技術的過程和應用前景。(1)(1)圖中圖中a a細胞是去核卵母細胞。過程細胞是去核卵母細胞。過程取出的細胞取出的細胞f f是胚胎干是胚胎干細胞細胞( (內(nèi)細胞團內(nèi)細胞團),),胚胎干細胞具有分化的全能性胚胎干細胞具有分化的全能性, ,但經(jīng)過但經(jīng)過過程過程分化成何種分化成何種h h細胞取決于培養(yǎng)基中加入的不同的分化誘導因子。細胞取決于培養(yǎng)基中加入的不同的分化誘導因子。(2)(2)將供體細胞核注入去核的卵母細胞將供體細胞核注入去核的卵母細胞, ,通常進行顯微操作。若通常進行顯微操作。若g g是能產(chǎn)生人生長激素的羊是能產(chǎn)生人生長激素的羊, ,則培育則培育g g時時, ,應將人的生長激素基因應將人的

19、生長激素基因?qū)胍浦驳墓w細胞導入移植的供體細胞( (核核) )中。為了克服有性生殖會丟失目的基中。為了克服有性生殖會丟失目的基因的缺點因的缺點, ,可通過核移植技術來實現(xiàn)可通過核移植技術來實現(xiàn), ,即將即將g g羊的體細胞核或胚羊的體細胞核或胚胎細胞核移入去核的卵母細胞胎細胞核移入去核的卵母細胞, ,經(jīng)過圖示過程經(jīng)過圖示過程, ,再形成轉(zhuǎn)入人生再形成轉(zhuǎn)入人生長激素基因的克隆羊。長激素基因的克隆羊。(3)(3)如果圖中的細胞均是人體細胞如果圖中的細胞均是人體細胞, ,則獲得的則獲得的h h細胞或器官可用細胞或器官可用于病人組織器官的移植于病人組織器官的移植, ,由于是自身細胞克隆培養(yǎng)形成的器官

20、由于是自身細胞克隆培養(yǎng)形成的器官, ,不會發(fā)生免疫排斥反應。不會發(fā)生免疫排斥反應。(4)(4)上述過程中用到的生物技術有動物細胞培養(yǎng)、核移植、胚上述過程中用到的生物技術有動物細胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植、干細胞的誘導分化等。胎移植、干細胞的誘導分化等。答案答案: :(1)(1)(去核去核) )卵母細胞卵母細胞 胚胎干細胞胚胎干細胞不同的分化誘導因子不同的分化誘導因子(2)(2)顯微注射法顯微注射法 移植的供體細胞移植的供體細胞( (核核) )克隆克隆( (或核移植或核移植) )(3)(3)不會發(fā)生免疫排斥反應不會發(fā)生免疫排斥反應(4)(4)動物細胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植、干細胞的誘導分化等動物細

21、胞培養(yǎng)、核移植、胚胎移植、干細胞的誘導分化等( (列舉兩項即可列舉兩項即可) )考點考點 二二 動物細胞融合與單克隆抗體動物細胞融合與單克隆抗體 1.1.植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較比較比較項目項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合原理原理細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的細胞膜的流動性、細胞的增殖增殖融合前融合前處理處理先除去細胞壁先除去細胞壁先使細胞分散開先使細胞分散開使用使用的酶的酶纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶胰蛋白酶比較比較項目項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動

22、物細胞融合誘導誘導手段手段物理法物理法: :離心、電激、離心、電激、振動振動化學法化學法: :聚乙二醇等試聚乙二醇等試劑誘導劑誘導除物理法和化學法外除物理法和化學法外, ,也可也可用滅活的病毒誘導用滅活的病毒誘導結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細胞雜交細胞應用應用培育植物新品種培育植物新品種主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體意義意義突破遠緣雜交不親和的障礙突破遠緣雜交不親和的障礙, ,打破了生殖隔離打破了生殖隔離, ,擴展擴展了雜交的親本組合了雜交的親本組合相同點相同點原生質(zhì)體融合原理相同原生質(zhì)體融合原理相同; ;原生質(zhì)體融合的方法相似原生質(zhì)體融合的方法相似2.2.單克隆抗體的制備單克隆

23、抗體的制備(1)(1)取相應取相應B B淋巴細胞前必須先注射相應抗原蛋白淋巴細胞前必須先注射相應抗原蛋白, ,否則不能獲否則不能獲得單克隆抗體。得單克隆抗體。(2)(2)細胞融合后需經(jīng)二次篩選細胞融合后需經(jīng)二次篩選: :第一次第一次: :在特定的選擇性培養(yǎng)基上在特定的選擇性培養(yǎng)基上, ,未融合的親本細胞未融合的親本細胞(B(B淋巴淋巴細胞和骨髓瘤細胞細胞和骨髓瘤細胞) )和融合的具有同種核的細胞和融合的具有同種核的細胞(BB(BB融合細胞、融合細胞、瘤瘤融合細胞瘤瘤融合細胞) )都會死亡都會死亡, ,只有融合的雜交細胞只有融合的雜交細胞( (雜交瘤細胞雜交瘤細胞) )才才能生長。這種雜交細胞的

24、特點是既能迅速大量繁殖能生長。這種雜交細胞的特點是既能迅速大量繁殖, ,又能產(chǎn)生又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。單一的特異性抗體。第二次第二次: :經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞體的細胞( (很多種雜交瘤細胞很多種雜交瘤細胞),),需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測, ,經(jīng)經(jīng)篩選后才可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。篩選后才可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。【高考警示【高考警示】(1)(1)植物體細胞雜交與動物細胞融合中酶的作用對象不同植物體細胞雜交與動物細胞融合中酶的作用對象不同, ,纖維纖維素酶和果膠酶作用于

25、細胞壁素酶和果膠酶作用于細胞壁, ,而胰蛋白酶等作用于細胞間的蛋而胰蛋白酶等作用于細胞間的蛋白質(zhì)。白質(zhì)。(2)(2)滅活的病毒保持了其抗原性滅活的病毒保持了其抗原性, ,但毒性消失。但毒性消失。(3)(3)植物雜交細胞在激素誘導下能表達出全能性植物雜交細胞在激素誘導下能表達出全能性, ,但動物雜交細但動物雜交細胞的全能性不能表達。胞的全能性不能表達?！镜淅镜淅? 2】科學家已分離出科學家已分離出H1N1H1N1病毒病毒( (一種一種RNARNA病毒病毒) )。某制藥廠。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預防和治療甲流的抗體根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預防和治療甲流的抗體, ,請據(jù)圖回答有關請據(jù)圖回答有關問題問

26、題: :(1)(1)若若A A細胞是小鼠骨髓瘤細胞細胞是小鼠骨髓瘤細胞, ,則則B B細胞是取自感染病毒的人體細胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的內(nèi)的_細胞細胞, ,促進促進d d過程的常用誘導劑是過程的常用誘導劑是_。(2)(2)假設僅考慮某兩個細胞的融合假設僅考慮某兩個細胞的融合, ,則可形成則可形成_種類型的種類型的C C細胞細胞, ,因此需用培養(yǎng)基篩選出因此需用培養(yǎng)基篩選出_(_(填特點填特點) )的的D D細胞用于細胞用于培養(yǎng)。培養(yǎng)。D D細胞的名稱是細胞的名稱是_。(3)(3)理論上理論上, ,注射了該抗體的人群不能長期對甲流免疫注射了該抗體的人群不能長期對甲流免疫, ,試分析試分析原因原

27、因: :。(4)(4)不同種動物的體細胞融合不同種動物的體細胞融合, ,相比誘變育種和雜交育種方法相比誘變育種和雜交育種方法, ,具有具有等突出的特點。等突出的特點。(5)(5)請說明單克隆抗體的主要作用請說明單克隆抗體的主要作用: :?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)由于本題的目的是制備用于預防和治療甲流的單由于本題的目的是制備用于預防和治療甲流的單克隆抗體克隆抗體, ,所以所以B B細胞只能是取自感染細胞只能是取自感染H1N1H1N1病毒的動物或人體內(nèi)病毒的動物或人體內(nèi)的的B B淋巴細胞淋巴細胞, ,經(jīng)誘導劑聚乙二醇經(jīng)誘導劑聚乙二醇(PEG)(PEG)或滅活的病毒等誘導融或滅活的病毒等誘導融合合

28、, ,得到的雜交瘤細胞才能用于生產(chǎn)預防和治療甲流的單克隆得到的雜交瘤細胞才能用于生產(chǎn)預防和治療甲流的單克隆抗體?？贵w。(2)(2)僅考慮兩個細胞的融合僅考慮兩個細胞的融合, ,則可形成則可形成A A細胞細胞A A細胞、細胞、B B細胞細胞B B細胞、細胞、A A細胞細胞B B細胞細胞3 3種類型的種類型的C C細胞細胞, ,為了從中篩選出為了從中篩選出A A細胞細胞B B細胞細胞, ,必須用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選必須用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選, ,篩選出的篩選出的D D細胞細胞( (雜雜交瘤細胞交瘤細胞) )既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體。既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體。(3)(3)因為單鏈

29、因為單鏈RNARNA容易發(fā)生變異容易發(fā)生變異, ,一旦變異后體內(nèi)的記憶細胞和一旦變異后體內(nèi)的記憶細胞和抗體就不能對其發(fā)揮作用?？贵w就不能對其發(fā)揮作用。(4)(4)不同種動物的體細胞融合不同種動物的體細胞融合, ,相比誘變育種和雜交育種方法相比誘變育種和雜交育種方法, ,具有目的性強具有目的性強, ,克服遠緣雜交不親和性克服遠緣雜交不親和性( (能有效地打破物種的生能有效地打破物種的生殖隔離界限殖隔離界限) )等突出特點。等突出特點。(5)(5)單克隆抗體可用于診斷疾病、藥物導向治療等方面。單克隆抗體可用于診斷疾病、藥物導向治療等方面。答案答案: :(1)B(1)B淋巴淋巴聚乙二醇聚乙二醇(PE

30、G)(PEG)(滅活的病毒滅活的病毒) )(2)3(2)3既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體雜交瘤細胞雜交瘤細胞( (雜交細胞雜交細胞) )(3)(3)引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異引起甲流的病毒不斷發(fā)生變異( (意思相同即可意思相同即可) )(4)(4)目的性強目的性強, ,克服遠緣雜交不親和性克服遠緣雜交不親和性( (能有效地打破物種的生能有效地打破物種的生殖隔離界限殖隔離界限)()(意思相同即可意思相同即可) )(5)(5)作為診斷試劑作為診斷試劑; ;用于治療疾病和運載藥物用于治療疾病和運載藥物( (意思相同即可意思相同即可) )【互動探究【互動探究】(1)(1)

31、若圖中若圖中ABAB細胞是植物細胞細胞是植物細胞, ,則融合前需要進行什么處理則融合前需要進行什么處理? ?提示提示: :利用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁。因為細胞融合利用利用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁。因為細胞融合利用了細胞膜具有流動性的原理了細胞膜具有流動性的原理, ,細胞壁是細胞融合的障礙。細胞壁是細胞融合的障礙。(2)(2)體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)最后如何才能提取到單克隆抗體體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)最后如何才能提取到單克隆抗體? ?提示提示: :體外培養(yǎng)時從細胞培養(yǎng)液中提取體外培養(yǎng)時從細胞培養(yǎng)液中提取, ,體內(nèi)培養(yǎng)則從小鼠腹水體內(nèi)培養(yǎng)則從小鼠腹水中提取。中提取。1.(20131.(2013南昌模擬南

32、昌模擬) )回答下列與細胞工程有關的問題回答下列與細胞工程有關的問題: :(1)(1)細胞工程是指應用細胞工程是指應用和分子生物學的原理和方法和分子生物學的原理和方法, ,通通過細胞水平或過細胞水平或水平上的操作水平上的操作, ,按照人的意愿來改按照人的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術。變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術。(2)(2)植物體的根、莖、葉細胞一般都具有全能性植物體的根、莖、葉細胞一般都具有全能性, ,在一定的營養(yǎng)在一定的營養(yǎng)和激素等條件下和激素等條件下, ,可以可以形成愈傷組織。將愈傷組織形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)接到的培養(yǎng)基上的培

33、養(yǎng)基上, ,就可以誘導其再分化就可以誘導其再分化生成胚狀體或叢芽生成胚狀體或叢芽, ,進而發(fā)育成完整的小植株。進而發(fā)育成完整的小植株。(3)(3)動物細胞工程中動物細胞工程中技術是其他動物細胞工程技術技術是其他動物細胞工程技術的基礎。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為的基礎。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為_代代以內(nèi)以內(nèi), ,以保持細胞正常的二倍體核型。在培養(yǎng)動物細胞時以保持細胞正常的二倍體核型。在培養(yǎng)動物細胞時, ,從從健康動物體內(nèi)取出組織塊剪碎后健康動物體內(nèi)取出組織塊剪碎后, ,用胰蛋白酶處理的原因是用胰蛋白酶處理的原因是: :。(4)(4)動物細胞核移植是將動物的一個體細胞的細胞核

34、動物細胞核移植是將動物的一個體細胞的細胞核, ,移入一個移入一個_中中, ,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎, ,這個新的胚胎最終這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為動動物。動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植的原因物。動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植的原因是動物體細胞是動物體細胞?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)細胞工程是指應用細胞生物學和分子生物學的細胞工程是指應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法原理和方法, ,通過細胞水平或細胞器水平上的操作通過細胞水平或細胞器水平上的操作, ,按

35、照人的按照人的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術。學技術。(2)(2)植物體的根、莖、葉細胞一般都具有全能性植物體的根、莖、葉細胞一般都具有全能性, ,在一定的營在一定的營養(yǎng)和激素等條件下養(yǎng)和激素等條件下, ,可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上, ,就可以誘導其再分化就可以誘導其再分化生成胚狀體或叢芽生成胚狀體或叢芽, ,進而發(fā)育成完整的小植株。進而發(fā)育成完整的小植株。(3)(3)動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基

36、礎。目前動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為使用的或冷凍保存的正常細胞通常為1010代以內(nèi)代以內(nèi), ,以保持細胞正以保持細胞正常的二倍體核型。在培養(yǎng)動物細胞時常的二倍體核型。在培養(yǎng)動物細胞時, ,從健康動物體內(nèi)取出組從健康動物體內(nèi)取出組織塊剪碎后織塊剪碎后, ,用胰蛋白酶處理的原因是為了使組織分散成單個用胰蛋白酶處理的原因是為了使組織分散成單個細胞。細胞。(4)(4)動物細胞核移植是將動物的一個體細胞的細胞核動物細胞核移植是將動物的一個體細胞的細胞核, ,移入一個移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中, ,使其重組并發(fā)育成一個

37、新的胚使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎胎, ,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。由于動物體細胞分化程度高的動物稱為克隆動物。由于動物體細胞分化程度高, ,恢復其全恢復其全能性困難能性困難, ,因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。移植。答案答案: :(1)(1)細胞生物學細胞器細胞生物學細胞器(2)(2)脫分化含有不同激素成分脫分化含有不同激素成分(3)(3)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)1010為了使組織分散成單個細胞為了使組織分散成單個細胞(4)(4)已經(jīng)去掉

38、細胞核的卵母細胞克隆已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞克隆分化程度高分化程度高, ,恢復其全能性困難恢復其全能性困難2.(20132.(2013泉州模擬泉州模擬) )眼蟲眼蟲( (一種原生動物一種原生動物) )細胞中含有葉綠體細胞中含有葉綠體, ,該事實說明葉綠體可以在某些動物細胞中存活。某學習小組針該事實說明葉綠體可以在某些動物細胞中存活。某學習小組針對眼蟲的這一特性對眼蟲的這一特性, ,提出一個探究課題提出一個探究課題: :動物細胞與植物細胞之動物細胞與植物細胞之間可以實現(xiàn)雜交。并設計如下實驗方案。間可以實現(xiàn)雜交。并設計如下實驗方案。實驗原理實驗原理: :根據(jù)眼蟲的特點根據(jù)眼蟲的特點, ,動物細胞和

39、植物細胞之間在理論上動物細胞和植物細胞之間在理論上是可以實現(xiàn)雜交的。是可以實現(xiàn)雜交的。實驗步驟實驗步驟: :請回答請回答: :(1)(1)步驟步驟所選擇的植物材料細胞中所選擇的植物材料細胞中, ,必須有的細胞器是必須有的細胞器是。(2)(2)步驟步驟過程所用的酶是過程所用的酶是。(3)(3)步驟步驟除了用電激之外除了用電激之外, ,還可以用還可以用_等等做誘導因素。做誘導因素。(4)(4)如果讓動植物雜交種批量培養(yǎng)生產(chǎn)如果讓動植物雜交種批量培養(yǎng)生產(chǎn), ,可以用可以用_技術。技術?！窘馕觥窘馕觥靠疾榧毎こ讨R。考查細胞工程知識。(1)(1)本題要求培育含有葉綠體的眼蟲本題要求培育含有葉綠體的眼

40、蟲, ,所選用的植物細胞應含有所選用的植物細胞應含有葉綠體。葉綠體。(2)(2)植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠, ,去除細胞壁要用纖去除細胞壁要用纖維素酶和果膠酶。維素酶和果膠酶。(3)(3)識記誘導細胞融合的物理、化學及生物因素。識記誘導細胞融合的物理、化學及生物因素。(4)(4)通過動物細胞培養(yǎng)技術獲得大量的動植物雜交細胞通過動物細胞培養(yǎng)技術獲得大量的動植物雜交細胞, ,誘導發(fā)誘導發(fā)育成胚胎后育成胚胎后, ,再通過胚胎移植技術就可以產(chǎn)生很多這樣的動植再通過胚胎移植技術就可以產(chǎn)生很多這樣的動植物雜交種。物雜交種。答案答案: :(1)(1)葉綠體葉綠體(2

41、)(2)纖維素酶和果膠酶纖維素酶和果膠酶(3)(3)滅活的病毒、聚乙二醇滅活的病毒、聚乙二醇(4)(4)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)3.(20133.(2013咸陽模擬咸陽模擬) )科學家從某些能無限增殖的細胞的細胞質(zhì)科學家從某些能無限增殖的細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因中分離出無限增殖的調(diào)控基因(prC(prC),),該基因能激發(fā)許多動物細該基因能激發(fā)許多動物細胞分裂胞分裂, ,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答以下問題。答以下問題。(1)(1)利用細胞融合技術制備單克隆抗體利用細胞融合技術制備單克隆抗體, ,促進動物細胞融合常

42、用促進動物細胞融合常用的誘導劑是的誘導劑是。(2)(2)利用細胞融合技術制備單克隆抗體時有兩次篩選利用細胞融合技術制備單克隆抗體時有兩次篩選, ,第第1 1次篩次篩選的目的是選的目的是, ,第第2 2次篩選的目的是次篩選的目的是_。(3)(3)有人提出有人提出, ,可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因來制備單可以直接通過基因工程導入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體克隆抗體, ,其思路如下圖所示。請回答下列問題。其思路如下圖所示。請回答下列問題。酶酶A A是指是指, ,酶酶B B是指是指。對已導入重組質(zhì)粒的對已導入重組質(zhì)粒的進行進行“檢測檢測”的目的是的目的是; ;題目中題目中所指的細胞是所指的細胞是,

43、所指的細胞具有的特所指的細胞具有的特點是點是。(4)(4)也有人提出用細胞核移植技術構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆也有人提出用細胞核移植技術構(gòu)建重組細胞來生產(chǎn)單克隆抗體抗體, ,試用相關的圖示及文字在下圖中表示該過程試用相關的圖示及文字在下圖中表示該過程: :【解析【解析】(1)(1)誘導動物細胞融合的方法有三種誘導動物細胞融合的方法有三種, ,其中用滅活的病其中用滅活的病毒是常用的方法。毒是常用的方法。(2)(2)在單克隆抗體制備過程中在單克隆抗體制備過程中, ,融合的細胞共有融合的細胞共有3 3種類型種類型, ,第第1 1次次篩選的目的是選出雜交瘤細胞篩選的目的是選出雜交瘤細胞, ,但是雜交瘤細

44、胞不一定產(chǎn)生所但是雜交瘤細胞不一定產(chǎn)生所需抗體需抗體, ,所以還必須進行第所以還必須進行第2 2次篩選。次篩選。(3)(3)基因工程中用到的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和基因工程中用到的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNADNA連接酶連接酶, ,將將重組質(zhì)粒成功導入后重組質(zhì)粒成功導入后, ,進行檢測的目的是看目的基因是否表達。進行檢測的目的是看目的基因是否表達。題目中的題目中的所指的細胞是漿細胞所指的細胞是漿細胞, ,因為只有漿細胞才會產(chǎn)生抗因為只有漿細胞才會產(chǎn)生抗體體,所指的細胞是導入目的基因的漿細胞所指的細胞是導入目的基因的漿細胞, ,由于目的基因控制由于目的基因控制細胞無限增殖細胞無限增殖, ,所以可用

45、轉(zhuǎn)基因技術來生產(chǎn)單克隆抗體。所以可用轉(zhuǎn)基因技術來生產(chǎn)單克隆抗體。(4)(4)由題干可知由題干可知, ,從無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖的從無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出無限增殖的調(diào)控基因調(diào)控基因(prC(prC),),應采用核移植技術應采用核移植技術, ,將無限增殖細胞的細胞核將無限增殖細胞的細胞核除去除去, ,留下細胞質(zhì)留下細胞質(zhì), ,讓其與漿細胞的細胞核融合讓其與漿細胞的細胞核融合, ,則可產(chǎn)生單克則可產(chǎn)生單克隆抗體。隆抗體。答案答案: :(1)(1)滅活的病毒滅活的病毒(2)(2)篩選出雜交瘤細胞篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞篩選出雜交瘤細胞篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞(3)(

46、3)限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶DNADNA連接酶連接酶檢測目的基因在受體細胞中是否進行了表達檢測目的基因在受體細胞中是否進行了表達( (或檢測受體細或檢測受體細胞是否顯示出目的基因控制的性狀胞是否顯示出目的基因控制的性狀) )漿細胞既能無限增殖漿細胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體又能產(chǎn)生特定抗體(4)(4)如圖如圖: :4.4.有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用有性生殖的生物產(chǎn)生后代需進行受精作用, ,植物體細胞雜交植物體細胞雜交要進行原生質(zhì)體的融合要進行原生質(zhì)體的融合, ,單克隆抗體的制備需進行動物細胞融單克隆抗體的制備需進行動物細胞融合合, ,可見細胞的融合技術有著廣泛的應用。下列為

47、細胞融合的可見細胞的融合技術有著廣泛的應用。下列為細胞融合的簡略過程簡略過程, ,據(jù)圖回答相關問題據(jù)圖回答相關問題: :(1)(1)若若a a、b b分別是基因型為分別是基因型為HhrrHhrr、hhRrhhRr兩個煙草品種的花粉兩個煙草品種的花粉, ,且且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于受一對隱性純合這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于受一對隱性純合基因基因(rr(rr或或hhhh) )的作用的作用, ,在光照強度大于在光照強度大于800 lx800 lx時都不能生長。時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRrHhRr的雜種

48、細胞的雜種細胞, ,較為簡便的篩選方法是較為簡便的篩選方法是。(2)(2)若若a a、b b表示兩種植物體細胞表示兩種植物體細胞, ,則由則由d d細胞形成雜種植株的原細胞形成雜種植株的原理是理是, ,這種育種方法的優(yōu)點是這種育種方法的優(yōu)點是_。(3)(3)若若a a、b b分別為骨髓瘤細胞和分別為骨髓瘤細胞和B B淋巴細胞淋巴細胞, ,則則d d細胞的特點是細胞的特點是_。由。由d d細胞產(chǎn)生的抗體與普通細胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較血清抗體相比較, ,具有具有_的特點。生產(chǎn)上一般不能通過直接培養(yǎng)的特點。生產(chǎn)上一般不能通過直接培養(yǎng)B B淋巴細胞的方法生產(chǎn)淋巴細胞的方法生產(chǎn)單克隆抗體的主要

49、原因是單克隆抗體的主要原因是。(4)(4)下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解, ,請用箭頭請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)考查實質(zhì)考查實質(zhì): :植物體細胞雜交與單克隆抗體的制備。植物體細胞雜交與單克隆抗體的制備。(2)(2)解題關鍵解題關鍵: :hrhr是是a a、b b產(chǎn)生的配子中相同的配子產(chǎn)生的配子中相同的配子, ,另外兩種配子分別是另外兩種配子分別是HrHr、hRhR。兩個不同的細胞形成的雜種細胞發(fā)育成植株。兩個不同的細胞

50、形成的雜種細胞發(fā)育成植株。骨髓瘤細胞的特點、骨髓瘤細胞的特點、B B淋巴細胞的特點與融合后的細胞具備淋巴細胞的特點與融合后的細胞具備的特點之間的關系。的特點之間的關系。單克隆抗體產(chǎn)生的過程由細胞融合和雜交細胞的培養(yǎng)兩部分單克隆抗體產(chǎn)生的過程由細胞融合和雜交細胞的培養(yǎng)兩部分組成。組成?！窘馕觥窘馕觥?1)a(1)a的花粉基因型為的花粉基因型為HrHr和和hr,bhr,b的花粉基因型為的花粉基因型為hRhR和和hr,hr,只有只有HhRrHhRr的基因組合方式?jīng)]有隱性純合基因的基因組合方式?jīng)]有隱性純合基因, ,所以雜種細胞所以雜種細胞HhRrHhRr能在光照強度大于能在光照強度大于800 lx80

51、0 lx時生長。時生長。(2)(2)植物體細胞雜交形成植株植物體細胞雜交形成植株, ,是植物細胞全能性的表現(xiàn)是植物細胞全能性的表現(xiàn), ,克服克服了自然條件下物種之間的生殖隔離。了自然條件下物種之間的生殖隔離。(3)(3)在單克隆抗體產(chǎn)生過程中細胞在單克隆抗體產(chǎn)生過程中細胞d d是雜交瘤細胞是雜交瘤細胞, ,具備了融合具備了融合前兩種細胞的優(yōu)點前兩種細胞的優(yōu)點, ,能無限增殖且產(chǎn)生特定抗體。而且反復篩能無限增殖且產(chǎn)生特定抗體。而且反復篩選的細胞選的細胞d d產(chǎn)生的抗體品質(zhì)優(yōu)良。產(chǎn)生的抗體品質(zhì)優(yōu)良。B B淋巴細胞不能無限增殖淋巴細胞不能無限增殖, ,無無法得到大量的抗體。法得到大量的抗體。(4)(

52、4)只能注射特定抗原后才能得到特定的只能注射特定抗原后才能得到特定的B B淋巴細胞淋巴細胞, ,再與骨髓再與骨髓瘤細胞融合瘤細胞融合, ,經(jīng)篩選后可體內(nèi)培養(yǎng)也可體外培養(yǎng)以得到大量單經(jīng)篩選后可體內(nèi)培養(yǎng)也可體外培養(yǎng)以得到大量單克隆抗體?？寺】贵w。答案答案: :(1)(1)給予大于給予大于800 lx800 lx的光照的光照(2)(2)植物細胞的全能性植物細胞的全能性克服了遠緣雜交不親和的障礙克服了遠緣雜交不親和的障礙(3)(3)既能無限增殖既能無限增殖, ,又能產(chǎn)生特定抗體又能產(chǎn)生特定抗體特異性強、靈敏度高、化學性質(zhì)單一特異性強、靈敏度高、化學性質(zhì)單一B B淋巴細胞不能無限增殖淋巴細胞不能無限增殖

53、(4)(4)5.(5.(能力挑戰(zhàn)題能力挑戰(zhàn)題) )運用動物體細胞雜交技術可實現(xiàn)基因定位。研運用動物體細胞雜交技術可實現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn)究發(fā)現(xiàn): :用人體細胞與小鼠體細胞進行雜交得到的雜種細胞含用人體細胞與小鼠體細胞進行雜交得到的雜種細胞含有雙方的染色體。雜種細胞在持續(xù)分裂過程中僅保留小鼠的染有雙方的染色體。雜種細胞在持續(xù)分裂過程中僅保留小鼠的染色體而人的染色體則逐漸丟失色體而人的染色體則逐漸丟失, ,最后只剩一條或幾條染色體。最后只剩一條或幾條染色體。下圖是人的缺乏下圖是人的缺乏HGPRTHGPRT酶的突變細胞株酶的突變細胞株(HGPRT-)(HGPRT-)和小鼠的缺乏和小鼠的缺乏TKTK酶

54、的細胞株酶的細胞株(TK-)(TK-)融合后在融合后在HATHAT培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程, ,結(jié)果表結(jié)果表明明, ,最終人的染色體在融合細胞中僅存有最終人的染色體在融合細胞中僅存有3 3號染色體或號染色體或1717號染色號染色體或兩者都有。已知只有同時具有體或兩者都有。已知只有同時具有HGPRTHGPRT酶和酶和TKTK酶的融合細胞酶的融合細胞才可在才可在HATHAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。(1)(1)體細胞雜交克服了體細胞雜交克服了的障礙的障礙, ,過程過程常用的生物常用的生物方法是方法是。(2)(2)過程過程中中, ,為了防止細菌的污染為了防止細菌的污

55、染, ,所用培養(yǎng)液應該添加一定所用培養(yǎng)液應該添加一定量的量的, ,此外此外, ,還要定期用還要定期用處理細胞處理細胞, ,使貼壁生長的細胞脫落使貼壁生長的細胞脫落, ,形成細胞懸液。形成細胞懸液。(3)(3)從培養(yǎng)過程看從培養(yǎng)過程看,HAT,HAT培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料, ,還起還起_作用。作用。(4)(4)從圖示結(jié)果看從圖示結(jié)果看, ,可以確定人的可以確定人的基因位于基因位于_號染色體上。號染色體上。【解析【解析】(1)(1)將不同種生物的體細胞進行融合將不同種生物的體細胞進行融合, ,可以打破生殖隔可以打破生殖隔離離, ,克服遠緣雜交不親和的障礙。動物體細胞融合過程中可以

56、克服遠緣雜交不親和的障礙。動物體細胞融合過程中可以用滅活的病毒作促融劑。用滅活的病毒作促融劑。(2)(2)在動物細胞培養(yǎng)過程中在動物細胞培養(yǎng)過程中, ,可以向培養(yǎng)液中添加抗生素可以向培養(yǎng)液中添加抗生素, ,防止防止細菌的污染。動物細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染。動物細胞培養(yǎng)過程中, ,細胞貼壁生長細胞貼壁生長, ,需用胰蛋白需用胰蛋白酶定期處理使細胞從瓶壁上脫落下來酶定期處理使細胞從瓶壁上脫落下來, ,制成細胞懸液制成細胞懸液, ,繼續(xù)培養(yǎng)。繼續(xù)培養(yǎng)。(3)(3)由題干由題干“只有同時具有只有同時具有HGPRTHGPRT酶和酶和TKTK酶的融合細胞才可在酶的融合細胞才可在HATHAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖培養(yǎng)液中長期存活與繁殖”可知可知,HAT,HAT培養(yǎng)液是一種特殊的培養(yǎng)液是一種特殊的選擇培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基。(4)(4)由圖示結(jié)果可知由圖示結(jié)果可知, ,只要含有人的只要含有人的1717號染色體的細胞就能夠正號染色體的細胞就能夠正常存活常存活, ,說明人的說明人的TKTK酶基因位于酶基因位于1717號染色體上。號染色體上。答案答案: :(1)(1)遠緣雜交不親和遠緣雜交不親和( (或生殖隔離或生殖隔離) )用滅活的用滅活的( (仙臺仙臺) )病毒誘導融合病毒誘導融合(2)(2)抗生素胰蛋白酶抗生素胰蛋白酶(3)(3)選擇選擇( (篩選篩選) )(4)TK(4)TK酶酶1717