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1、實驗4 結締組織1 實驗目的1.1 掌握哺乳動物血液有形成分的特征；1.2 掌握各種結締組織的結構特點；1.3 熟記各種結締組織間的區(qū)別。2實驗內(nèi)容2.1 固有結締組織2.1.1疏松結締組織 切片：腸系膜鋪片，HE染色及特殊的彈性纖維染色法復染。先用低倍鏡觀察，選擇較薄，纖維分布均勻、細胞不重疊、輪廓清楚的部位，換高倍鏡觀察。（1）辨認細胞成分成纖維細胞：數(shù)目最多，胞體大，為多突起的扁平細胞。細胞質(zhì)染色淺，因此細胞輪廓不清。細胞核大呈橢圓形，可見到清楚的核仁。巨噬細胞：又名組織細胞，細胞形狀不一，亦為多突起的星形細胞，注意與成纖維細胞的區(qū)別，主要是細胞質(zhì)中含有吞噬的臺盼藍顆粒。細胞質(zhì)染色較深，
2、細胞輪廓較明顯。細胞核較小，圓形或卵圓形，染色較深。肥大細胞：細胞常位于血管附近，細胞呈圓形或卵圓形，細胞質(zhì)中充滿粗大的染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞中央。漿細胞：較小，橢圓形。細胞核在細胞的一端，核中的染色質(zhì)排列成車輪狀。近核處的胞質(zhì)中有一淡染區(qū)。胞質(zhì)嗜堿性，染成藍色。（2）觀察纖維膠原纖維：被伊紅染成粉紅色，為粗細不等的束狀結構，交叉排列，有的較直或呈波浪形。彈性纖維：染成藍紫色，單條分布而不成束，纖維粗細不等，有分支，并交織成網(wǎng)。2.1.2 致密結締組織（示教）切片：動物肌腱，HE染色。肌腱為規(guī)則致密結締組織，顯微鏡下看到肌腱由許多平行而緊
3、密排列的膠原纖維束（染成紅色）和腱細胞（藍染）構成。注意腱細胞在纖維束間成行排列。切面上呈長梭形，核橢圓形或桿狀。2.2 軟骨和骨組織2.2.1 軟骨（1）透明軟骨 切片：劍狀軟骨切片，HE染色。軟骨膜：由致密的膠原纖維和梭形的成纖維細胞組成。軟骨膜以膠原纖維直接通入軟骨的基質(zhì)，與軟骨緊密連接。軟骨細胞：近軟骨膜的細胞還保留著梭形，單個分布，細胞長軸與軟骨膜平行。由軟骨邊緣至中部可以看到軟骨細胞的形態(tài)逐漸由梭形變?yōu)闄E圓形或圓形，核也是橢圓形或圓形。細胞2-4個成群分布，稱這些細胞為同源細胞群，因它們是由一個骨細胞經(jīng)有絲分裂形成的。細胞存在的地方稱骨陷窩。在生活狀態(tài)下骨細胞充滿于骨陷窩（因軟骨細
4、胞富有水分），在制片的過程中，細胞皺縮，因此切片上細胞周圍有清亮的裂隙。在軟骨深部，較大的軟骨細胞由于互相擠壓而呈多角形或半月狀。基質(zhì)：嗜堿性、均質(zhì)，靠近細胞周圍染色深藍，稱軟骨囊?；|(zhì)內(nèi)有許多膠原纖維，但它與軟骨基質(zhì)有相同的折光率，所以分辨不出。（2）彈性軟骨彈性軟骨的結構基本上和透明軟骨相似，主要區(qū)別在于基質(zhì)中含有紫染的彈性纖維，并形成網(wǎng)狀結構。（3）纖維軟骨基質(zhì)中的膠原纖維成束平行排列。軟骨細胞成行地夾在纖維束之間。2.2.2 骨 骨組織由細胞、纖維和基質(zhì)所組成。由于骨組織排列的緊密與疏松程度不同又可分為骨密質(zhì)和骨松質(zhì)，重點觀察骨密質(zhì)。制片：取長骨的骨干部鋸成薄片，然后磨成極薄的骨片，硫
5、堇（藍色）或品紅（紅色）煮染，加膠封藏。先用低倍鏡觀察骨磨片。可見骨的外面和內(nèi)面都有平行于骨面的數(shù)層骨板。外面的稱外環(huán)骨板，內(nèi)面的稱內(nèi)環(huán)骨板。在內(nèi)、外環(huán)骨板之間，可見由許多骨板以同心圓形式排列成的哈氏系統(tǒng)（骨單位）。中央有一個管，稱哈氏管。每個哈氏系統(tǒng)外圍有空白的圓圈稱粘合線，并與周圍部分隔開。圓形的哈氏系統(tǒng)之間還存在著一些骨板，彼此也互相平行排列，但不成同心圓，稱間骨板。換高倍鏡觀察環(huán)繞哈氏管呈同心圓排列的骨板。其上有許多蒼耳籽形的空腔，稱骨陷窩，為生活時骨細胞在骨板中所占據(jù)的腔隙，骨陷窩有許多向各方向伸出的微細小管，稱骨小管。骨陷窩彼此借骨小管相通，這對骨細胞的營養(yǎng)有作用。再觀察骨的縱斷面
6、。中央管和其周圍呈同心圓排列的骨板都被縱斷。2.3 血液 血液涂片的制備：取一小滴鮮血，立即滴在載玻片上，用另一載玻片傾斜成450角將血液推成薄薄一層。待涂片干燥后，滴加Wright氏染料甲醇溶液數(shù)滴，經(jīng)固定及染色1-2分鐘后，滴加等量蒸餾水，與染液混合，15分鐘后水洗，待干即可觀察。2.3.1 哺乳動物血涂片由低倍轉至高倍，找血細胞類型較多的區(qū)域，觀察血液中的三種有形成分紅細胞、白細胞和血小板。（1）紅細胞：數(shù)量多，小而圓，為雙面凹陷的盤狀結構，因此中央著色較淺，沒有細胞核。（2）白細胞：慢慢移動血片，觀察各種白細胞，白細胞數(shù)目較少，尋找較困難。白細胞胞體大，細胞核明顯，極易與紅細胞區(qū)別開。
7、粒細胞細胞質(zhì)中有特殊染色顆粒，根據(jù)顆粒對染料選擇性的不同可分為：中性粒細胞：是白細胞中數(shù)量較多的一種，呈圓形，胞質(zhì)淡紅色，內(nèi)含有多量的紫紅色微粒（不易看清）。胞核隨細胞成熟的程度而不同，幼稚型的呈桿狀或馬蹄形，成熟的呈分葉狀，3葉的較多見，老齡的有8-9葉或更多。嗜酸性粒細胞：數(shù)量少，細胞質(zhì)內(nèi)含深紅色大型顆粒。細胞核的形狀與中性粒細胞相似，通常有2-3葉。嗜堿性粒細胞：數(shù)量極少，大小與嗜酸性粒細胞基本相同。胞質(zhì)內(nèi)含有大的藍紫色顆粒，胞核也分葉。無粒白細胞淋巴細胞：血液中主要是小淋巴細胞和一定數(shù)量的中淋巴細胞。小淋巴細胞核相對較大，細胞質(zhì)極少，只有一薄層。核內(nèi)染色質(zhì)多，染色較深。核圓形，但亦可呈豆形，核周圍有亮環(huán)胞質(zhì)呈天藍色。中淋巴細胞，核也較大，圓形或卵圓形，位于細胞中部，也染成深藍紫色，細胞質(zhì)較小淋巴細胞稍多。單核細胞：體積大，胞質(zhì)豐富，染成灰藍色，胞核常呈腎形或馬蹄形，細胞形狀不一，有圓形，多角形等。血小板：體積小，形狀不規(guī)則，有星狀突起，血小板的邊緣呈淺藍色，中央有小藍紫色顆粒。血小板常成群分布在紅細胞之間。2.3.2 雞血涂片紅細胞橢圓形，有核。3 作業(yè)3.1 高倍鏡下繪圖，示軟骨一部分；3.2 繪圖：長骨磨片（橫切面）或血液涂片。
《組織胚胎學》實驗4 結締組織
