《組織胚胎學(xué)》實(shí)驗(yàn)4 結(jié)締組織

實(shí)驗(yàn)4 結(jié)締組織1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.1 掌握哺乳動物血液有形成分的特征；1.2 掌握各種結(jié)締組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)；1.3 熟記各種結(jié)締組織間的區(qū)別。2實(shí)驗(yàn)內(nèi)容2.1 固有結(jié)締組織2.1.1疏松結(jié)締組織 切片：腸系膜鋪片，HE染色及特殊的彈性纖維染色法復(fù)染。先用低倍鏡觀察，選擇較薄，纖維分布均勻、細(xì)胞不重疊、輪廓清楚的部位，換高倍鏡觀察。（1）辨認(rèn)細(xì)胞成分成纖維細(xì)胞：數(shù)目最多，胞體大，為多突起的扁平細(xì)胞。細(xì)胞質(zhì)染色淺，因此細(xì)胞輪廓不清。細(xì)胞核大呈橢圓形，可見到清楚的核仁。巨噬細(xì)胞：又名組織細(xì)胞，細(xì)胞形狀不一，亦為多突起的星形細(xì)胞，注意與成纖維細(xì)胞的區(qū)別，主要是細(xì)胞質(zhì)中含有吞噬的臺盼藍(lán)顆粒。細(xì)胞質(zhì)染色較深，細(xì)胞輪廓較明顯。細(xì)胞核較小，圓形或卵圓形，染色較深。肥大細(xì)胞：細(xì)胞常位于血管附近，細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞質(zhì)中充滿粗大的染成藍(lán)紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。細(xì)胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細(xì)胞中央。漿細(xì)胞：較小，橢圓形。細(xì)胞核在細(xì)胞的一端，核中的染色質(zhì)排列成車輪狀。近核處的胞質(zhì)中有一淡染區(qū)。胞質(zhì)嗜堿性，染成藍(lán)色。（2）觀察纖維膠原纖維：被伊紅染成粉紅色，為粗細(xì)不等的束狀結(jié)構(gòu)，交叉排列，有的較直或呈波浪形。彈性纖維：染成藍(lán)紫色，單條分布而不成束，纖維粗細(xì)不等，有分支，并交織成網(wǎng)。2.1.2 致密結(jié)締組織（示教）切片：動物肌腱，HE染色。肌腱為規(guī)則致密結(jié)締組織，顯微鏡下看到肌腱由許多平行而緊密排列的膠原纖維束（染成紅色）和腱細(xì)胞（藍(lán)染）構(gòu)成。注意腱細(xì)胞在纖維束間成行排列。切面上呈長梭形，核橢圓形或桿狀。2.2 軟骨和骨組織2.2.1 軟骨（1）透明軟骨 切片：劍狀軟骨切片，HE染色。軟骨膜：由致密的膠原纖維和梭形的成纖維細(xì)胞組成。軟骨膜以膠原纖維直接通入軟骨的基質(zhì)，與軟骨緊密連接。軟骨細(xì)胞：近軟骨膜的細(xì)胞還保留著梭形，單個分布，細(xì)胞長軸與軟骨膜平行。由軟骨邊緣至中部可以看到軟骨細(xì)胞的形態(tài)逐漸由梭形變?yōu)闄E圓形或圓形，核也是橢圓形或圓形。細(xì)胞2-4個成群分布，稱這些細(xì)胞為同源細(xì)胞群，因它們是由一個骨細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的。細(xì)胞存在的地方稱骨陷窩。在生活狀態(tài)下骨細(xì)胞充滿于骨陷窩（因軟骨細(xì)胞富有水分），在制片的過程中，細(xì)胞皺縮，因此切片上細(xì)胞周圍有清亮的裂隙。在軟骨深部，較大的軟骨細(xì)胞由于互相擠壓而呈多角形或半月狀?；|(zhì)：嗜堿性、均質(zhì)，靠近細(xì)胞周圍染色深藍(lán)，稱軟骨囊?；|(zhì)內(nèi)有許多膠原纖維，但它與軟骨基質(zhì)有相同的折光率，所以分辨不出。（2）彈性軟骨彈性軟骨的結(jié)構(gòu)基本上和透明軟骨相似，主要區(qū)別在于基質(zhì)中含有紫染的彈性纖維，并形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。（3）纖維軟骨基質(zhì)中的膠原纖維成束平行排列。軟骨細(xì)胞成行地夾在纖維束之間。2.2.2 骨 骨組織由細(xì)胞、纖維和基質(zhì)所組成。由于骨組織排列的緊密與疏松程度不同又可分為骨密質(zhì)和骨松質(zhì)，重點(diǎn)觀察骨密質(zhì)。制片：取長骨的骨干部鋸成薄片，然后磨成極薄的骨片，硫堇（藍(lán)色）或品紅（紅色）煮染，加膠封藏。先用低倍鏡觀察骨磨片?？梢姽堑耐饷婧蛢?nèi)面都有平行于骨面的數(shù)層骨板。外面的稱外環(huán)骨板，內(nèi)面的稱內(nèi)環(huán)骨板。在內(nèi)、外環(huán)骨板之間，可見由許多骨板以同心圓形式排列成的哈氏系統(tǒng)（骨單位）。中央有一個管，稱哈氏管。每個哈氏系統(tǒng)外圍有空白的圓圈稱粘合線，并與周圍部分隔開。圓形的哈氏系統(tǒng)之間還存在著一些骨板，彼此也互相平行排列，但不成同心圓，稱間骨板。換高倍鏡觀察環(huán)繞哈氏管呈同心圓排列的骨板。其上有許多蒼耳籽形的空腔，稱骨陷窩，為生活時骨細(xì)胞在骨板中所占據(jù)的腔隙，骨陷窩有許多向各方向伸出的微細(xì)小管，稱骨小管。骨陷窩彼此借骨小管相通，這對骨細(xì)胞的營養(yǎng)有作用。再觀察骨的縱斷面。中央管和其周圍呈同心圓排列的骨板都被縱斷。2.3 血液 血液涂片的制備：取一小滴鮮血，立即滴在載玻片上，用另一載玻片傾斜成450角將血液推成薄薄一層。待涂片干燥后，滴加Wright氏染料甲醇溶液數(shù)滴，經(jīng)固定及染色1-2分鐘后，滴加等量蒸餾水，與染液混合，15分鐘后水洗，待干即可觀察。2.3.1 哺乳動物血涂片由低倍轉(zhuǎn)至高倍，找血細(xì)胞類型較多的區(qū)域，觀察血液中的三種有形成分紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。（1）紅細(xì)胞：數(shù)量多，小而圓，為雙面凹陷的盤狀結(jié)構(gòu)，因此中央著色較淺，沒有細(xì)胞核。（2）白細(xì)胞：慢慢移動血片，觀察各種白細(xì)胞，白細(xì)胞數(shù)目較少，尋找較困難。白細(xì)胞胞體大，細(xì)胞核明顯，極易與紅細(xì)胞區(qū)別開。粒細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中有特殊染色顆粒，根據(jù)顆粒對染料選擇性的不同可分為：中性粒細(xì)胞：是白細(xì)胞中數(shù)量較多的一種，呈圓形，胞質(zhì)淡紅色，內(nèi)含有多量的紫紅色微粒（不易看清）。胞核隨細(xì)胞成熟的程度而不同，幼稚型的呈桿狀或馬蹄形，成熟的呈分葉狀，3葉的較多見，老齡的有8-9葉或更多。嗜酸性粒細(xì)胞：數(shù)量少，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含深紅色大型顆粒。細(xì)胞核的形狀與中性粒細(xì)胞相似，通常有2-3葉。嗜堿性粒細(xì)胞：數(shù)量極少，大小與嗜酸性粒細(xì)胞基本相同。胞質(zhì)內(nèi)含有大的藍(lán)紫色顆粒，胞核也分葉。無粒白細(xì)胞淋巴細(xì)胞：血液中主要是小淋巴細(xì)胞和一定數(shù)量的中淋巴細(xì)胞。小淋巴細(xì)胞核相對較大，細(xì)胞質(zhì)極少，只有一薄層。核內(nèi)染色質(zhì)多，染色較深。核圓形，但亦可呈豆形，核周圍有亮環(huán)胞質(zhì)呈天藍(lán)色。中淋巴細(xì)胞，核也較大，圓形或卵圓形，位于細(xì)胞中部，也染成深藍(lán)紫色，細(xì)胞質(zhì)較小淋巴細(xì)胞稍多。單核細(xì)胞：體積大，胞質(zhì)豐富，染成灰藍(lán)色，胞核常呈腎形或馬蹄形，細(xì)胞形狀不一，有圓形，多角形等。血小板：體積小，形狀不規(guī)則，有星狀突起，血小板的邊緣呈淺藍(lán)色，中央有小藍(lán)紫色顆粒。血小板常成群分布在紅細(xì)胞之間。2.3.2 雞血涂片紅細(xì)胞橢圓形，有核。3 作業(yè)3.1 高倍鏡下繪圖，示軟骨一部分；3.2 繪圖：長骨磨片（橫切面）或血液涂片。