高考生物一輪復(fù)習 現(xiàn)代生物科技專題 第3課 動物細胞工程課件 新人教版選修3
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1、第3課動物細胞工程 考點一動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)考點一動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù) 【必備知識回顧【必備知識回顧】1.1.動動物細胞培養(yǎng)物細胞培養(yǎng)動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ):動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ):(1)(1)原理:原理:_。細胞增殖細胞增殖(2)(2)過程:過程:胰蛋白酶胰蛋白酶細胞懸液細胞懸液原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)胰蛋白酶胰蛋白酶傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)(3)(3)培養(yǎng)條件。培養(yǎng)條件。無菌、無毒的環(huán)境:無菌、無毒的環(huán)境:a.a.對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行_處理;處理;b.b.添加添加_,以防,以防_;c.c.定期更換定期更換_,以清除代謝產(chǎn)物,防止,以清除代謝產(chǎn)物,防止_對細胞自身造
2、成危害。對細胞自身造成危害。無菌無菌抗生素抗生素培養(yǎng)過程中的污染培養(yǎng)過程中的污染培養(yǎng)液培養(yǎng)液細胞代謝細胞代謝產(chǎn)物積累產(chǎn)物積累營養(yǎng):除正常的有機和無機營養(yǎng)外,需加入營養(yǎng):除正常的有機和無機營養(yǎng)外,需加入_等一些天然成分。等一些天然成分。適宜的溫度和適宜的溫度和pHpH:溫度為:溫度為_(_(哺乳動物哺乳動物) ),pHpH為為_。氣體環(huán)境:含氣體環(huán)境:含95%95%空氣加空氣加5%CO5%CO2 2的混合氣體,其中后的混合氣體,其中后者的作用是者的作用是_。血清、血清、血漿血漿36.536.50.50.57.27.27.47.4維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)液的pHpH(4)(4)應(yīng)用:生物制品的生產(chǎn)、檢
3、測應(yīng)用:生物制品的生產(chǎn)、檢測_、醫(yī)學、醫(yī)學研究。研究。有毒物質(zhì)有毒物質(zhì)2.2.動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物:動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物:(1)(1)原理:原理:_。(2)(2)動物體細胞核移植技術(shù)的過程:動物體細胞核移植技術(shù)的過程:動物體細胞核具有全能性動物體細胞核具有全能性細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng) 重組細胞重組細胞去核去核供體供體(3)(3)結(jié)果:獲得與供體結(jié)果:獲得與供體_基本相同的個體?;鞠嗤膫€體。(4)(4)應(yīng)用。應(yīng)用。加速家畜加速家畜_進程,促進優(yōu)良畜群繁育。進程,促進優(yōu)良畜群繁育。保護保護_。生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)遺傳改良遺傳改良瀕危物種瀕危物種作為異種移植
4、的供體。作為異種移植的供體。用于組織器官的移植。用于組織器官的移植。(5)(5)存在問題:存在問題:_、克隆動物存在健康問題、克隆動物存在健康問題、動物食品的安全性問題等。動物食品的安全性問題等。成功率低成功率低【特別提醒【特別提醒】動物細胞培養(yǎng)和核移植時注意的五個問題動物細胞培養(yǎng)和核移植時注意的五個問題(1)(1)在分散細胞時,需用胰蛋白酶分散細胞,不能用胃在分散細胞時,需用胰蛋白酶分散細胞,不能用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶作用的適宜蛋白酶,因為胃蛋白酶作用的適宜pHpH約為約為1.81.8,胰蛋白,胰蛋白酶作用的適宜酶作用的適宜pHpH為為7.27.27.87.8,而多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的,而多數(shù)
5、動物細胞培養(yǎng)的適宜適宜pHpH為為7.27.27.47.4。(2)(2)取供體動物的體細胞培養(yǎng),一般選用取供體動物的體細胞培養(yǎng),一般選用1010代以內(nèi)的細代以內(nèi)的細胞,因為胞,因為1010代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核代以內(nèi)的細胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)。型,保證了供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(3)(3)克隆動物是由重組的細胞經(jīng)培養(yǎng)而來的,該重組細克隆動物是由重組的細胞經(jīng)培養(yǎng)而來的,該重組細胞的細胞質(zhì)基因來源于受體細胞,細胞核基因來源于胞的細胞質(zhì)基因來源于受體細胞,細胞核基因來源于提供細胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個親本。提供細胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個親
6、本。(4)(4)克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同,少數(shù)性狀克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同,少數(shù)性狀與提供卵母細胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺與提供卵母細胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。傳關(guān)系。(5)(5)從生殖方式的角度看,動物體細胞核移植技術(shù)從生殖方式的角度看,動物體細胞核移植技術(shù)( (克克隆隆) )屬無性生殖,重組細胞相當于受精卵,需要動物細屬無性生殖,重組細胞相當于受精卵,需要動物細胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持?!竞诵乃仞B(yǎng)提升【核心素養(yǎng)提升】【典例示范【典例示范】(2016(2016全國卷全國卷)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某下圖表示通過核移
7、植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物種克隆哺乳動物( (二倍體二倍體) )的流程。的流程。回答下列問題:回答下列問題:(1)(1)圖中圖中A A表示正常細胞核,染色體數(shù)為表示正常細胞核,染色體數(shù)為2n2n,則其性染,則其性染色體的組成可為色體的組成可為_。過程。過程表示去除細胞表示去除細胞核,該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行,核,該過程一般要在卵母細胞培養(yǎng)至適當時期再進行,去核時常采用去核時常采用_的方法。的方法。代表的過程代表的過程是是_。(2)(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細胞中經(jīng)過多次傳代后,供體細胞中_的穩(wěn)定性的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。會降低。因此,選材時必須關(guān)注傳代
8、次數(shù)。(3)(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。(4)(4)與克隆羊與克隆羊“多莉多莉( (利利)”)”培育成功一樣,其他克隆動培育成功一樣,其他克隆動物的成功獲得也證明了物的成功獲得也證明了_。【素養(yǎng)解讀【素養(yǎng)解讀】本題主要考查的核心素養(yǎng)是科學思維,本題主要考查的核心素養(yǎng)是科學思維,具體表現(xiàn)在兩個角度:具體表現(xiàn)在兩個角度:素養(yǎng)角度素養(yǎng)角度具體表現(xiàn)具體表現(xiàn)模型構(gòu)建模型構(gòu)建借助流程圖分析克隆問題借助流程圖分析克隆問題分析與綜合分析與綜合題干題干(2)(2)對選材時必須關(guān)注傳代次對選材
9、時必須關(guān)注傳代次數(shù)原因的考查,數(shù)原因的考查,(3)(3)若獲得的克隆若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因的考從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因的考查,查,(4)(4)中與克隆羊中與克隆羊“多莉多莉( (利利)”)”培育成功一樣,其他克隆動物的成培育成功一樣,其他克隆動物的成功獲得也證明問題的考查等功獲得也證明問題的考查等【解析【解析】(1)(1)流程圖中沒有說明該哺乳動物的供體是雄流程圖中沒有說明該哺乳動物的供體是雄性還是雌性,故性染色體組成有性還是雌性,故性染色體組成有XXXX或或XYXY兩種可能。兩種可能。過程表示去核過程,通常做法是將
10、培養(yǎng)至過程表示去核過程,通常做法是將培養(yǎng)至MM期的卵母期的卵母細胞利用顯微操作法去除細胞核。重組細胞在體外培細胞利用顯微操作法去除細胞核。重組細胞在體外培養(yǎng)至囊胚或桑椹胚時,需通過胚胎移植轉(zhuǎn)入代孕母體養(yǎng)至囊胚或桑椹胚時,需通過胚胎移植轉(zhuǎn)入代孕母體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。內(nèi)繼續(xù)發(fā)育。(2)(2)傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至1010代后就不易培養(yǎng)下去了,代后就不易培養(yǎng)下去了,在傳到在傳到10105050代左右時,細胞增殖就會逐漸緩慢,以代左右時,細胞增殖就會逐漸緩慢,以至于完全停止,這時部分細胞的核型至于完全停止,這時部分細胞的核型( (遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)) )會發(fā)會發(fā)生變化。故選擇細胞時一般選
11、用生變化。故選擇細胞時一般選用1010代以內(nèi)的細胞,以代以內(nèi)的細胞,以保證正常的二倍體核型保證正常的二倍體核型( (遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)) )。(3)(3)動物性狀的表現(xiàn)是細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同作動物性狀的表現(xiàn)是細胞核基因和細胞質(zhì)基因共同作用的結(jié)果,克隆動物的細胞核基因全部來自供體,而用的結(jié)果,克隆動物的細胞核基因全部來自供體,而細胞質(zhì)基因則來自卵母細胞,所以克隆動物與供體動細胞質(zhì)基因則來自卵母細胞,所以克隆動物與供體動物的性狀會有所差異。物的性狀會有所差異。(4)(4)克隆動物的成功培育說明了動物高度分化的體細胞克隆動物的成功培育說明了動物高度分化的體細胞的細胞核仍具有全能性。的細胞核仍具有
12、全能性。答案:答案:(1)XX(1)XX或或XYXY顯微操作胚胎移植顯微操作胚胎移植(2)(2)遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)(3)(3)卵母細胞的細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性卵母細胞的細胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響狀產(chǎn)生影響(4)(4)動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性動物已分化的體細胞的細胞核具有全能性【母題變式【母題變式】變式變式1 1生物體染色體的組成生物體染色體的組成供體供體( (二二倍體倍體) )含有含有1616條染色體,若為雌性則其染色條染色體,若為雌性則其染色體的形態(tài)應(yīng)有體的形態(tài)應(yīng)有_種;若為雄性則其染色體的形態(tài)應(yīng)種;若為雄性則其染色體的形態(tài)應(yīng)有有_種。種。8 89 9
13、變式變式2 2遺傳物質(zhì)的來源遺傳物質(zhì)的來源重組細胞的核遺傳物質(zhì)來源于供體體細胞,而重組細重組細胞的核遺傳物質(zhì)來源于供體體細胞,而重組細胞的遺傳物質(zhì)來源于供體體細胞和胞的遺傳物質(zhì)來源于供體體細胞和_細胞的細胞的細胞質(zhì)。細胞質(zhì)。去核的卵母去核的卵母【高考角度全練【高考角度全練】角度一動物細胞培養(yǎng)過程角度一動物細胞培養(yǎng)過程1.(20181.(2018武漢模擬武漢模擬) )如圖為動物細胞培養(yǎng)的基本過程如圖為動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。示意圖。請回答:請回答:(1)(1)容器容器A A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,原中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,原因是其細胞因是其細胞_,易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先
14、要剪碎,易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎,然后用然后用_分散細胞,制成分散細胞,制成B B瓶中的細胞懸液。將瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉(zhuǎn)入細胞懸液轉(zhuǎn)入C C瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為_。(2)(2)細胞正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死細胞正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死亡,只有極少數(shù)細胞存活,這是因為存活的細胞發(fā)生亡,只有極少數(shù)細胞存活,這是因為存活的細胞發(fā)生了了_,可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的,可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為正常細胞通常為_代以內(nèi)的細胞,以保持細胞代以內(nèi)的細胞,以保持細胞正常的正常的_核型。核型。(3)C(3)C、D D瓶中的
15、培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境,需要瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境,需要添加一定量的添加一定量的_。培養(yǎng)過程中還需要提供。培養(yǎng)過程中還需要提供O O2 2和和COCO2 2等氣體環(huán)境,等氣體環(huán)境,COCO2 2的作用主要是的作用主要是_。(4)(4)動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖可知,培養(yǎng)養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖可知,培養(yǎng)_細胞一細胞一定要添加血清。定要添加血清?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)動物細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊動物
16、細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊( (或或動物胚胎或幼齡動物的器官動物胚胎或幼齡動物的器官) )剪碎剪碎用胰蛋白酶或膠用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞原蛋白酶處理分散成單個細胞制成細胞懸液制成細胞懸液轉(zhuǎn)入轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(4)(4)據(jù)圖可知,培養(yǎng)癌細胞時有無血清影響不大,而培據(jù)圖可知,培養(yǎng)癌細胞時有無血清影響不大,而培養(yǎng)正常細胞時,有血清時的細胞數(shù)遠大于無血清時的養(yǎng)正常細胞時,有血清時的細胞數(shù)遠大于無血清時的細胞數(shù),故培
17、養(yǎng)正常細胞必須要添加血清。細胞數(shù),故培養(yǎng)正常細胞必須要添加血清。答案:答案:(1)(1)分裂能力強胰蛋白酶分裂能力強胰蛋白酶( (或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶) )原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)(2)(2)基因突變基因突變1010二倍體二倍體(3)(3)抗生素維持培養(yǎng)液的抗生素維持培養(yǎng)液的pHpH(4)(4)正常正常角度二細胞核移植技術(shù)角度二細胞核移植技術(shù)2.(20182.(2018濰坊模擬濰坊模擬) )下面是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治下面是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病療遺傳性糖尿病( (基因缺陷導(dǎo)致胰島基因缺陷導(dǎo)致胰島B B細胞不能正常合細胞不能正常合成胰島素成胰島素) )的過程設(shè)計圖解,請據(jù)圖回答下列問
18、題:的過程設(shè)計圖解,請據(jù)圖回答下列問題:(1)(1)圖中圖中所示的結(jié)構(gòu)分別是所示的結(jié)構(gòu)分別是_、_。(2)(2)圖中圖中所示的生物工程技術(shù)分別是所示的生物工程技術(shù)分別是_、_,此外圖示過程還應(yīng)用的工程技術(shù)有,此外圖示過程還應(yīng)用的工程技術(shù)有_(_(只需寫一種只需寫一種) )。(3)(3)過程過程通常用去核卵母細胞作受體細胞的原因除了通常用去核卵母細胞作受體細胞的原因除了它體積大、易操作外,還因為它體積大、易操作外,還因為_ _。(4)(4)過程過程通常用通常用作受體細胞的原因是這些細胞沒有作受體細胞的原因是這些細胞沒有分化,具有分化,具有_,可以定向誘導(dǎo)分化成各類細胞、,可以定向誘導(dǎo)分化成各類細
19、胞、組織和器官。組織和器官。(5)(5)過程過程的完成需要用到的基因操作工具有的完成需要用到的基因操作工具有_。(6)(6)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點是圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點是_ _ _。【解析【解析】(1)(1)圖中圖中依次為細胞核、內(nèi)細胞團、核依次為細胞核、內(nèi)細胞團、核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)。(2)(2)圖中涉及的技術(shù)包括核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)圖中涉及的技術(shù)包括核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)( (動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)) )、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎干細胞移植等。、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎干細胞移植等。(3)(3)用去核卵母細胞作受體細胞的原因除了它體積大、用
20、去核卵母細胞作受體細胞的原因除了它體積大、易操作外,還因為其營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進細胞核易操作外,還因為其營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)。全能性表達的物質(zhì)。(4)(4)囊胚的內(nèi)細胞團細胞和受精卵一樣具有全能性,常囊胚的內(nèi)細胞團細胞和受精卵一樣具有全能性,常用作基因工程的受體細胞。用作基因工程的受體細胞。(5)(5)基因工程需要用到的工具包括限制酶、基因工程需要用到的工具包括限制酶、DNADNA連接酶連接酶和載體。和載體。(6)(6)圖示方法是用患者的體細胞進行克隆,然后導(dǎo)入健圖示方法是用患者的體細胞進行克隆,然后導(dǎo)入健康基因,與異體移植相比,一般不會發(fā)生免疫排斥反康基因,與異體移
21、植相比,一般不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。應(yīng)。答案:答案:(1)(1)細胞核內(nèi)細胞團細胞核內(nèi)細胞團(2)(2)核移植技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)細胞培養(yǎng)核移植技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)細胞培養(yǎng)( (早期胚胎培早期胚胎培養(yǎng)、胚胎干細胞移植、顯微操作技術(shù)等養(yǎng)、胚胎干細胞移植、顯微操作技術(shù)等) )(3)(3)營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)(4)(4)全能性全能性(5)(5)限制酶、限制酶、DNADNA連接酶和載體連接酶和載體(6)(6)一般不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)一般不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】1.1.動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病動物器官的體外培養(yǎng)技
22、術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請回答下列問題。臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請回答下列問題。(1)(1)肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細胞肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細胞_。(2)(2)培養(yǎng)液中的葡萄糖和氨基酸的主要作用分別是培養(yǎng)液中的葡萄糖和氨基酸的主要作用分別是_、_。(3)(3)氣室中充入氣室中充入O O2 2的主要作用是的主要作用是_。(4)(4)培養(yǎng)液中添加抗生素,能否抑制病毒的侵染?培養(yǎng)液中添加抗生素,能否抑制病毒的侵染?_。(5)(5)有機物有機物X X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用
23、上圖所有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對有機示裝置和提供的下列材料用具,探究肝臟小塊對有機物物X X是否具有解毒作用。是否具有解毒作用。材料用具:肝臟小塊,外周血淋巴細胞,淋巴細胞培材料用具:肝臟小塊,外周血淋巴細胞,淋巴細胞培養(yǎng)液,植物凝集素養(yǎng)液,植物凝集素( (刺激淋巴細胞分裂刺激淋巴細胞分裂) );顯微鏡,載;顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液玻片,蓋玻片,玻璃皿,滴管;吉姆薩染液( (使染色體使染色體著色著色) ),有機物,有機物X X溶液等。溶液等。實驗過程:實驗過程:在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞,在淋巴細胞培
24、養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞,取取4 4等份,備用。等份,備用。利用甲、乙、丙、丁利用甲、乙、丙、丁4 4組上圖所示裝置,按下表步驟組上圖所示裝置,按下表步驟操作操作(“”(“”表示已完成的步驟表示已完成的步驟) )。組別組別甲甲乙乙丙丙丁丁步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟一:加入肝臟培養(yǎng)液步驟二:加入有機物步驟二:加入有機物X X溶液溶液步驟三:放置肝臟小塊步驟三:放置肝臟小塊上表中還需進行的操作是上表中還需進行的操作是_。培養(yǎng)一段時間后,取培養(yǎng)一段時間后,取4 4組裝置中的等量培養(yǎng)液,分別組裝置中的等量培養(yǎng)液,分別添加到添加到4 4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼
25、續(xù)培養(yǎng)。一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察下觀察_,并對,并對比分析。若丙組淋巴細胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋巴細比分析。若丙組淋巴細胞出現(xiàn)異常,而甲組的淋巴細胞正常,則說明胞正常,則說明_。【解析【解析】本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識。本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識。(1)(1)把肝臟切成小薄片,有利于肝臟細胞的呼吸代謝,把肝臟切成小薄片,有利于肝臟細胞的呼吸代謝,即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。即吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物。(2)(2)培養(yǎng)液中葡萄糖的主要作用是作為細胞的能源物質(zhì),培養(yǎng)液中葡萄糖的主要作用是作為細胞的能源物質(zhì),
26、氨基酸的主要作用是參與細胞中蛋白質(zhì)的合成。氨基酸的主要作用是參與細胞中蛋白質(zhì)的合成。(3)(3)氣室中充入氣室中充入O O2 2的主要作用是滿足細胞有氧呼吸的需的主要作用是滿足細胞有氧呼吸的需要。要。(4)(4)抗生素能抑制細菌生長,但不能抑制病毒侵染??股啬芤种萍毦L,但不能抑制病毒侵染。(5)(5)向乙向乙( (或丁或丁) )組裝置中放置肝臟小塊作為對照實驗;組裝置中放置肝臟小塊作為對照實驗;有機物有機物X X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂,所以要觀察淋巴有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂,所以要觀察淋巴細胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否發(fā)生變化。甲組添加肝細胞的染色體形態(tài)和數(shù)量是否發(fā)生變化。甲組添加肝臟小塊
27、,淋巴細胞染色體正常,丙組沒有添加肝臟小臟小塊,淋巴細胞染色體正常,丙組沒有添加肝臟小塊,出現(xiàn)染色體異常,說明肝臟小塊對有機物塊,出現(xiàn)染色體異常,說明肝臟小塊對有機物X X具有解具有解毒作用。毒作用。答案:答案:(1)(1)吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物 (2)(2)作為細胞的能源物質(zhì)參與細胞中蛋白質(zhì)的合成作為細胞的能源物質(zhì)參與細胞中蛋白質(zhì)的合成 (3)(3)滿足細胞有氧呼吸的需要滿足細胞有氧呼吸的需要(4)(4)不能不能 (5)(5)向乙向乙( (或丁或丁) )組裝置中放置肝臟小塊組裝置中放置肝臟小塊染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對有機物染色體形態(tài)和數(shù)量肝臟小塊對
28、有機物X X具有解毒作具有解毒作用用2.(20182.(2018濟南模擬濟南模擬) )回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題:題:(1)(1)在動物細胞培養(yǎng)過程中,當貼壁細胞分裂生長到細在動物細胞培養(yǎng)過程中,當貼壁細胞分裂生長到細胞表面胞表面_時,細胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象時,細胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞的稱為細胞的_。此時,瓶壁上形成的細胞是。此時,瓶壁上形成的細胞是_層的。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來,層的。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是需要用酶處理,可用的酶是_。(2)(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細胞分裂停止,隨著細胞傳
29、代次數(shù)的增多,絕大部分細胞分裂停止,進而出現(xiàn)進而出現(xiàn)_現(xiàn)象;但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖,現(xiàn)象;但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖,其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細胞,該種細胞的黏著性細胞,該種細胞的黏著性_,細胞膜表面糖蛋,細胞膜表面糖蛋白的量白的量_。(3)(3)現(xiàn)用某種大分子染料對細胞進行染色時,觀察到死現(xiàn)用某種大分子染料對細胞進行染色時,觀察到死細胞被染色,而活細胞不被染色,原因是細胞被染色,而活細胞不被染色,原因是_。(4)(4)檢查某種有毒物質(zhì)是否能改變細胞染色體的數(shù)目,檢查某種有毒物質(zhì)是否能改變細胞染色體的數(shù)目,最好選用分裂最好選用分裂_期的細胞
30、在顯微鏡下進行觀察。期的細胞在顯微鏡下進行觀察。(5)(5)在細胞培養(yǎng)過程中,通常在在細胞培養(yǎng)過程中,通常在_條件下保存細條件下保存細胞。因為在這種條件下,細胞中胞。因為在這種條件下,細胞中_的活性降低,的活性降低,細胞細胞_的速率降低。的速率降低。(6)(6)給患者移植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生給患者移植經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因為機體把移植的皮膚組織當作了排斥現(xiàn)象,這是因為機體把移植的皮膚組織當作_進行攻擊。進行攻擊?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)在動物細胞培養(yǎng)過程中,細胞會表現(xiàn)出接在動物細胞培養(yǎng)過程中,細胞會表現(xiàn)出接觸抑制現(xiàn)象,此時瓶壁上是單層細胞。用胰蛋白酶可
31、觸抑制現(xiàn)象,此時瓶壁上是單層細胞。用胰蛋白酶可以使貼壁細胞從瓶壁上分離下來。以使貼壁細胞從瓶壁上分離下來。(2)(2)隨著細胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多,絕大部分細胞分裂隨著細胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多,絕大部分細胞分裂停止,進而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象,但有些細胞會停止,進而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象,但有些細胞會因遺傳物質(zhì)改變而獲得不死性,等同于癌細胞,細胞因遺傳物質(zhì)改變而獲得不死性,等同于癌細胞,細胞表面糖蛋白減少,細胞之間的黏著性降低。表面糖蛋白減少,細胞之間的黏著性降低。(3)(3)由于活細胞的細胞膜具有選擇透過性,大分子染料由于活細胞的細胞膜具有選擇透過性,大分子染料不能進入活細胞內(nèi),而死細胞的細胞膜
32、喪失選擇透過不能進入活細胞內(nèi),而死細胞的細胞膜喪失選擇透過性,大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而使其著色。性,大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而使其著色。(4)(4)由于中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰,因此檢測有由于中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰,因此檢測有毒物質(zhì)是否能改變細胞染色體數(shù)目,最好選用分裂中毒物質(zhì)是否能改變細胞染色體數(shù)目,最好選用分裂中期的細胞在顯微鏡下進行觀察。期的細胞在顯微鏡下進行觀察。(5)(5)由于在冷凍、超低溫或液氮環(huán)境下,細胞中酶的活由于在冷凍、超低溫或液氮環(huán)境下,細胞中酶的活性降低,細胞新陳代謝的速率降低,因此通常在此條性降低,細胞新陳代謝的速率降低,因此通常在此條件下保存細胞。件下
33、保存細胞。(6)(6)皮膚移植后,機體把移植的皮膚組織當作抗原進行皮膚移植后,機體把移植的皮膚組織當作抗原進行攻擊,發(fā)生排斥現(xiàn)象。攻擊,發(fā)生排斥現(xiàn)象。答案:答案:(1)(1)相互接觸接觸抑制單相互接觸接觸抑制單( (或一或一) )胰蛋白酶胰蛋白酶(2)(2)衰老甚至死亡不死性降低衰老甚至死亡不死性降低減少減少(3)(3)活細胞的細胞膜具有選擇透過性,大分子染活細胞的細胞膜具有選擇透過性,大分子染料不能進入活細胞內(nèi)料不能進入活細胞內(nèi)( (或死細胞的細胞膜喪失了選擇透或死細胞的細胞膜喪失了選擇透過性,大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而使其著色過性,大分子染料能夠進入死細胞內(nèi)而使其著色) )(4)(4)中
34、中(5)(5)冷凍冷凍( (或超低溫、液氮或超低溫、液氮) )酶新陳代謝酶新陳代謝(6)(6)抗原抗原【延伸探究【延伸探究】(1)(1)要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來,能否使用胃蛋白要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來,能否使用胃蛋白酶?為什么?酶?為什么?提示:提示:不能。胃蛋白酶適于在較強的酸性條件下發(fā)揮不能。胃蛋白酶適于在較強的酸性條件下發(fā)揮作用,而較強的酸性條件會對貼壁細胞造成傷害。作用,而較強的酸性條件會對貼壁細胞造成傷害。(2)(2)細胞培養(yǎng)過程中的極少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,細胞培養(yǎng)過程中的極少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,變成變成“不死不死”的細胞,與正常細胞相比,這些的細胞,與正常細胞相比,
35、這些“不死不死”的細胞具有什么特點?的細胞具有什么特點?提示:提示:失去貼壁生長、接觸抑制的特點。失去貼壁生長、接觸抑制的特點。 【易錯提醒【易錯提醒】動物細胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作動物細胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同用不同第一次用胰蛋白酶處理是使剪碎的組織分散成單個細第一次用胰蛋白酶處理是使剪碎的組織分散成單個細胞;第二次用胰蛋白酶處理是使貼壁細胞從瓶壁上脫胞;第二次用胰蛋白酶處理是使貼壁細胞從瓶壁上脫落下來。落下來。考點二動物細胞融合與單克隆抗體的制備考點二動物細胞融合與單克隆抗體的制備 【必備知識回顧【必備知識回顧】1.1.動物細胞融合:動物細胞融合:(1)(1)含義:在一定的條
36、件下含義:在一定的條件下將將_動物細胞結(jié)合動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。形成一個細胞的過程。兩個或多個兩個或多個(2)(2)誘導(dǎo)動物細胞融合的方法:誘導(dǎo)動物細胞融合的方法:物理法物理法離心、振動、電激等;離心、振動、電激等;化學法化學法_;生物法生物法_。聚乙二醇聚乙二醇滅活的病毒滅活的病毒2.2.單克隆抗體制備:單克隆抗體制備:(1)(1)單克隆抗體制備過程:單克隆抗體制備過程:雜交瘤細胞雜交瘤細胞能產(chǎn)生待定能產(chǎn)生待定抗體的雜交瘤細胞抗體的雜交瘤細胞專一抗體專一抗體培養(yǎng)液培養(yǎng)液小鼠腹水小鼠腹水(2)(2)單克隆抗體的優(yōu)點:單克隆抗體的優(yōu)點:_、靈敏度高、可大、靈敏度高、可大量制備。量制備。
37、(3)(3)單克隆抗體的應(yīng)用:作為單克隆抗體的應(yīng)用:作為_;制成;制成“生物生物導(dǎo)彈導(dǎo)彈”;用于治療疾病和;用于治療疾病和_。特異性強特異性強診斷試劑診斷試劑運載藥物運載藥物【特別提醒【特別提醒】單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)(1)對動物免疫的原因:對動物免疫的原因:B B淋巴細胞要經(jīng)過免疫過程,淋巴細胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的B B淋巴細淋巴細胞,才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,所以與骨髓瘤細胞融合的胞,才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,所以與骨髓瘤細胞融合的B B淋巴細胞實際上是漿細胞。淋巴細胞實際上是漿細胞。(
38、2)(2)雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細胞雜交瘤細胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細胞產(chǎn)生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤細胞在體外培產(chǎn)生特異性抗體的能力,還具有骨髓瘤細胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力,可以克服單純養(yǎng)條件下大量增殖的能力,可以克服單純B B淋巴細胞不淋巴細胞不能無限增殖的缺點,而大量生產(chǎn)單克隆抗體。能無限增殖的缺點,而大量生產(chǎn)單克隆抗體。【核心素養(yǎng)提升【核心素養(yǎng)提升】【典例示范【典例示范】(2014(2014全國卷全國卷)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)(A)分別免疫分別免疫3 3只同只同種小鼠種小鼠(X(X、Y Y和和Z)Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5 5次
39、,每次免疫次,每次免疫1 1周后周后測定各小鼠血清抗體的效價測定各小鼠血清抗體的效價( (能檢測出抗原抗體反應(yīng)的能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)血清最大稀釋倍數(shù)) ),結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤,結(jié)果如圖所示。若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的細胞,需取免疫后小鼠的B B淋巴細胞淋巴細胞( (染色體數(shù)目染色體數(shù)目4040條條) ),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞( (染色體數(shù)目染色體數(shù)目6060條條) )按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗胞融合,經(jīng)篩
40、選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A A抗抗體的雜交瘤細胞。體的雜交瘤細胞?;卮鹣铝袉栴}:回答下列問題:(1)(1)制備融合所需的制備融合所需的B B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到清抗體效價需達到16 00016 000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過以上,則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的的X X、Y Y、Z Z這這3 3只免疫小鼠中,最適合用于制備只免疫小鼠中,最適合用于制備B B淋巴細淋巴細胞的是胞的是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)(2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞融合實
41、驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外,可能還有細胞和雜交瘤細胞外,可能還有_,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是_。(3)(3)雜交瘤細胞中有雜交瘤細胞中有_個細胞核,染色體數(shù)目個細胞核,染色體數(shù)目最多是最多是_條。條。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是原因是_?!舅仞B(yǎng)解讀【素養(yǎng)解讀】本題主要考查的核心素養(yǎng)是科學思維和本題主要考查的核心素養(yǎng)是科學思維和科學探究,具體表現(xiàn)在兩個角度:科學探究,具體表現(xiàn)在兩個角度:核心素養(yǎng)核心素養(yǎng)素養(yǎng)角度素養(yǎng)角度具體表現(xiàn)具體表現(xiàn)科學思維科學思維
42、分析與分析與綜合綜合(1)(1)選擇最適合用于制備選擇最適合用于制備B B淋巴細胞淋巴細胞的小鼠的理由的考查;的小鼠的理由的考查;(2)(2)體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因的考查等因的考查等科學探究科學探究實驗結(jié)實驗結(jié)果交流果交流對雜交后的細胞進行分析對雜交后的細胞進行分析【解析【解析】本題考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識。本題考查制備單克隆抗體的相關(guān)知識。(1)(1)據(jù)圖中數(shù)據(jù)分析,第四次注射后據(jù)圖中數(shù)據(jù)分析,第四次注射后Y Y、Z Z小鼠的血清抗小鼠的血清抗體效價均達到體效價均達到16 00016 000以上,免疫后小鼠以上,免疫后小鼠Y Y的血清抗體效的血清抗體效價最
43、高,最適用于制備單克隆抗體。價最高,最適用于制備單克隆抗體。(2)B(2)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合在一起時,可能發(fā)生淋巴細胞與骨髓瘤細胞混合在一起時,可能發(fā)生B B淋巴細胞之間的融合、骨髓瘤細胞之間的融合及淋巴細胞之間的融合、骨髓瘤細胞之間的融合及B B淋巴淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合,故體系中會出現(xiàn)多種類型細胞與骨髓瘤細胞的融合,故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。的細胞。(3)(3)雜交瘤細胞形成后,小鼠的雜交瘤細胞形成后,小鼠的B B淋巴細胞核與骨髓瘤淋巴細胞核與骨髓瘤細胞核會融合形成細胞核會融合形成1 1個細胞核,個細胞核,1 1個細胞核中染色體數(shù)個細胞核中染色體數(shù)目最多可達目最多可達100
44、100條。條。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后,仍然不是能惡性增殖的細胞,分裂次數(shù)是有限的。能惡性增殖的細胞,分裂次數(shù)是有限的。答案:答案:(1)(1)四四Y YY Y小鼠的抗體效價最高小鼠的抗體效價最高(2)B(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的,沒有特異性且融合形成的細胞細胞融合是隨機的,沒有特異性且融合率達不到融合率達不到100%100%(3)1(3)1100100(4)(4)不能無限增殖不能無限增殖【母題變式【母題變式】變式變式1 1動物細胞
45、融合動物細胞融合在將小鼠的在將小鼠的B B淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞進行融合時,淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞進行融合時,若只考慮細胞的兩兩融合,則細胞融合后有哪些類型?若只考慮細胞的兩兩融合,則細胞融合后有哪些類型?提示:提示:小鼠的小鼠的B B淋巴細胞和小鼠的淋巴細胞和小鼠的B B淋巴細胞的融合細淋巴細胞的融合細胞、小鼠骨髓瘤細胞和小鼠骨髓瘤細胞的融合細胞、胞、小鼠骨髓瘤細胞和小鼠骨髓瘤細胞的融合細胞、小鼠的小鼠的B B淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞的融合細胞。淋巴細胞和小鼠骨髓瘤細胞的融合細胞。變式變式2 2單克隆抗體的制備單克隆抗體的制備單克隆抗體制備過程中最終篩選得到的雜交瘤細胞單克隆抗體制備過程
46、中最終篩選得到的雜交瘤細胞具有具有_的特點。的特點。無限增殖和產(chǎn)生特定抗體無限增殖和產(chǎn)生特定抗體【高考角度全練【高考角度全練】1.1.如圖為動物細胞融合示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:如圖為動物細胞融合示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)(1)圖中仙臺病毒的作用是圖中仙臺病毒的作用是_。(2)(2)若僅考慮兩兩融合,則若僅考慮兩兩融合,則A A細胞和細胞和B B細胞融合后共有細胞融合后共有_三種類型。三種類型。(3)(3)由雜種細胞形成無性系由雜種細胞形成無性系1 1、2 2、3 3的方法,可以稱為的方法,可以稱為_。(4)(4)此項技術(shù)最重要的應(yīng)用是此項技術(shù)最重要的應(yīng)用是_?!窘馕觥窘馕觥?1)(
47、1)誘導(dǎo)細胞融合需要有促融劑,如聚乙二醇、誘導(dǎo)細胞融合需要有促融劑,如聚乙二醇、仙臺病毒等。仙臺病毒等。(2)(2)若僅考慮兩兩融合,則若僅考慮兩兩融合,則A A細胞和細胞和B B細胞細胞融合后共有融合后共有A AA A、A AB B、B BB B三種類型。三種類型。(3)(3)無性繁殖無性繁殖可以稱之為克隆。可以稱之為克隆。(4)(4)細胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制細胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用是制備單克隆抗體。備單克隆抗體。答案:答案:(1)(1)促進細胞融合促進細胞融合( (作為促融劑作為促融劑) )(2)A(2)AA A、A AB B、B BB B(3)(3)克隆克隆(4)(4)制備單克隆抗體
48、制備單克隆抗體2.(20182.(2018長春模擬長春模擬) )如圖是單克隆抗體制備流程階段如圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。請根據(jù)示意圖回答下列問題:示意圖。請根據(jù)示意圖回答下列問題:(1)(1)單克隆抗體制備是單克隆抗體制備是_技術(shù)中最重要的用途。技術(shù)中最重要的用途。將特定的抗原注入小鼠體內(nèi),其目的是使小鼠產(chǎn)生將特定的抗原注入小鼠體內(nèi),其目的是使小鼠產(chǎn)生_細胞。細胞。(2)(2)單克隆抗體的化學本質(zhì)是單克隆抗體的化學本質(zhì)是_;合成與;合成與分泌單克隆抗體涉及的細胞器是分泌單克隆抗體涉及的細胞器是_、_、_、_。(3)(3)骨髓瘤細胞與某些淋巴細胞混合在一起,細胞骨髓瘤細胞與某些淋巴細胞混
49、合在一起,細胞融合完成后,在培養(yǎng)基中有融合完成后,在培養(yǎng)基中有_種兩兩融合的種兩兩融合的細胞,融合的方法除了電激外,還可以用化學誘導(dǎo)細胞,融合的方法除了電激外,還可以用化學誘導(dǎo)劑劑_或滅活的或滅活的_處理。處理?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)單克隆抗體制備是動物細胞融合技術(shù)中最單克隆抗體制備是動物細胞融合技術(shù)中最重要的用途。將特定的抗原注入小鼠體內(nèi),其目的是重要的用途。將特定的抗原注入小鼠體內(nèi),其目的是使小鼠產(chǎn)生漿細胞。使小鼠產(chǎn)生漿細胞。(2)(2)單克隆抗體的化學本質(zhì)是蛋白單克隆抗體的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì),屬于分泌蛋白,合成與分泌單克隆抗體涉及的細質(zhì),屬于分泌蛋白,合成與分泌單克隆抗體涉及的細胞器有
50、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體。胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體。(3)(3)骨髓骨髓瘤細胞與某些淋巴細胞混合在一起,細胞融合完成瘤細胞與某些淋巴細胞混合在一起,細胞融合完成后,在培養(yǎng)基中有三種兩兩融合的細胞,分別是瘤后,在培養(yǎng)基中有三種兩兩融合的細胞,分別是瘤瘤細胞,瘤細胞,B BB B細胞,瘤細胞,瘤B B細胞。動物細胞融合的方法細胞。動物細胞融合的方法除了電激外,還可以用化學誘導(dǎo)劑聚乙二醇除了電激外,還可以用化學誘導(dǎo)劑聚乙二醇(PEG)(PEG)或滅或滅活的病毒處理?;畹牟《咎幚?。答案:答案:(1)(1)動物細胞融合漿動物細胞融合漿(2)(2)球蛋白球蛋白( (或蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì))
51、 )核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體線粒體線粒體(3)(3)三聚乙二醇病毒三聚乙二醇病毒3.(20183.(2018武漢模擬武漢模擬) )如圖是某實驗室做的通過動物纖如圖是某實驗室做的通過動物纖維母細胞等獲得單克隆抗體的實驗研究。據(jù)圖回答相維母細胞等獲得單克隆抗體的實驗研究。據(jù)圖回答相關(guān)問題:關(guān)問題:(1)X(1)X、Y Y、Z Z細胞的名稱分別是細胞的名稱分別是_、_、_。(2)(2)過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的過程類似于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的_過程。過程。與纖維母細胞相比,誘導(dǎo)干細胞的全能性較與纖維母細胞相比,誘導(dǎo)干細胞的全能性較_。(3)(3)過程中需用到的化學誘導(dǎo)劑是過程中需用
52、到的化學誘導(dǎo)劑是_。(4)(4)處需要篩選,其目的是處需要篩選,其目的是_。(5)(5)用含用含3232P P標記的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)標記的脫氧核苷酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)Z Z細胞,細細胞,細胞質(zhì)中能測到胞質(zhì)中能測到3232P P的細胞器是的細胞器是_?!窘馕觥窘馕觥?1)X(1)X、Y Y、Z Z細胞的名稱分別是骨髓瘤細胞、細胞的名稱分別是骨髓瘤細胞、抗原刺激過的抗原刺激過的B B淋巴細胞淋巴細胞( (或漿細胞或漿細胞) )、雜交瘤細胞。、雜交瘤細胞。(2)(2)過程是將甲小鼠的纖維母細胞誘導(dǎo)成誘導(dǎo)干細過程是將甲小鼠的纖維母細胞誘導(dǎo)成誘導(dǎo)干細胞,相當于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過程。與纖胞,相當
53、于植物組織培養(yǎng)技術(shù)中的脫分化過程。與纖維母細胞相比,誘導(dǎo)干細胞的全能性較高。維母細胞相比,誘導(dǎo)干細胞的全能性較高。(3)(3)誘導(dǎo)動誘導(dǎo)動物細胞融合,需用到的化學誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。物細胞融合,需用到的化學誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。(4)(4)將將Z Z細胞進行選擇培養(yǎng),才能篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞進行選擇培養(yǎng),才能篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。雜交瘤細胞。(5)(5)脫氧核苷酸是脫氧核苷酸是DNADNA的基本組成單位,的基本組成單位,動物細胞的線粒體中含有少量動物細胞的線粒體中含有少量DNADNA。答案:答案:(1)(1)骨髓瘤細胞抗原刺激過的骨髓瘤細胞抗原刺激過的B B淋巴細胞淋巴細胞(
54、(或漿或漿細胞細胞) )雜交瘤細胞雜交瘤細胞(2)(2)脫分化高脫分化高(3)(3)聚乙二醇聚乙二醇(4)(4)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞(5)(5)線粒體線粒體【知識總結(jié)【知識總結(jié)】制備單克隆抗體過程中的兩次篩選制備單克隆抗體過程中的兩次篩選項目項目篩選的對象篩選的對象方法方法第一次第一次篩選篩選雜交瘤細胞雜交瘤細胞利用特定的選擇培養(yǎng)基:在該培利用特定的選擇培養(yǎng)基:在該培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞能存活,養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞能存活,其他細胞其他細胞( (未融合的未融合的B B細胞和瘤細細胞和瘤細胞、融合后的胞、融合后的B BB B細胞和瘤細胞和瘤瘤瘤細胞細
55、胞) )均不能成活均不能成活第二次第二次篩選篩選能產(chǎn)生特異能產(chǎn)生特異性抗體的雜性抗體的雜交瘤細胞交瘤細胞利用特定抗原通過抗原利用特定抗原通過抗原抗體雜抗體雜交技術(shù)確認抗體性質(zhì)交技術(shù)確認抗體性質(zhì)【加固訓(xùn)練【加固訓(xùn)練】人絨毛膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素(HCG)(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白,制備抗胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCGHCG單克隆抗體可用于早單克隆抗體可用于早孕的診斷。下面是抗孕的診斷。下面是抗HCGHCG單克隆抗體制備流程示意圖,單克隆抗體制備流程示意圖,請分析回答問題:請分析回答問題:(1)(1)制備單克隆抗體過程中要用到制備單克隆抗
56、體過程中要用到_和和_技術(shù)。技術(shù)。(2)(2)制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的HCGHCG相當于相當于_,使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng),使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)_的的B B淋巴細胞,淋巴細胞,此過程屬于特異性免疫中的此過程屬于特異性免疫中的_免疫。免疫。(3)(3)在細胞內(nèi)在細胞內(nèi)DNADNA的合成一般有兩條途徑,主要途徑是的合成一般有兩條途徑,主要途徑是在細胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進而合成在細胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進而合成DNADNA,而,而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,
57、經(jīng)酶的催化作用合呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成成DNADNA,而骨髓瘤細胞的,而骨髓瘤細胞的DNADNA合成沒有此輔助途徑。合成沒有此輔助途徑。利用利用DNADNA合成途徑不同的特點配制的合成途徑不同的特點配制的HATHAT培養(yǎng)基含有培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的多種成分,其中添加的_具有篩選具有篩選 雜交瘤細胞雜交瘤細胞的作用。的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是_。(4)(4)此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與_特異性結(jié)特異性結(jié)合,從而診斷早孕。合,從而診斷早孕?!窘馕觥窘馕觥?1)(1)制備單克隆抗體過程中要用到
58、動物細胞培制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合技術(shù)。養(yǎng)和動物細胞融合技術(shù)。(2)(2)給小鼠注射給小鼠注射HCGHCG,使小鼠,使小鼠進行體液免疫,產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的進行體液免疫,產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的B B淋巴細胞。淋巴細胞。(3)(3)骨髓瘤細胞的骨髓瘤細胞的DNADNA合成只有一條途徑,在培養(yǎng)基中合成只有一條途徑,在培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤,阻斷了骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合加入氨基嘌呤,阻斷了骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合體的增殖。雜交瘤細胞有兩條體的增殖。雜交瘤細胞有兩條合成合成DNADNA的途徑,因此的途徑,因此在選擇培養(yǎng)基上雜交瘤細胞能生存并無限增殖。在選擇培養(yǎng)基上雜交瘤細
59、胞能生存并無限增殖。B B淋巴淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞既能無限增殖,細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜交瘤細胞既能無限增殖,又能產(chǎn)生單一抗體。又能產(chǎn)生單一抗體。(4)(4)此單克隆抗體是人絨毛膜促性此單克隆抗體是人絨毛膜促性腺激素腺激素(HCG)(HCG)作抗原刺激產(chǎn)生的,故可以與人絨毛膜促作抗原刺激產(chǎn)生的,故可以與人絨毛膜促性腺激素性腺激素(HCG)(HCG)特異性結(jié)合。特異性結(jié)合。答案:答案:(1)(1)動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合(2)(2)抗原抗體體液抗原抗體體液(3)(3)氨基嘌呤氨基嘌呤能無限增殖并分泌特異性抗體能無限增殖并分泌特異性抗體(4)(4)人絨毛膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素( (或或HCG)HCG)
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