《人教版高二生物選修一教學(xué)設(shè)計:專題五課題1《DNA的粗提取與鑒定》(共1課時)含答案》由會員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《人教版高二生物選修一教學(xué)設(shè)計:專題五課題1《DNA的粗提取與鑒定》(共1課時)含答案(6頁珍藏版)》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、DNA勺粗提取與鑒定教學(xué)設(shè)計教學(xué)目標(biāo)(一)知識與技能1、通過嘗試對植物或動物組織中的 DNA!行粗提取,了解DNA勺物理化學(xué)性質(zhì)。2、理解DNAfi提取與鑒定的原理(二)過程與方法掌握DN做口提取計數(shù),能利用DNA勺性質(zhì)進(jìn)行實驗設(shè)計和操作(三)情感、態(tài)度與價值觀通過對DNA勺粗提取的實驗過程的設(shè)計及操作,鍛煉科學(xué)的思維方法,培養(yǎng)實事求是的科學(xué)態(tài)度。教學(xué)重難點【課題重點】DNA勺粗提取和鑒定方法【課題難點】DNA勺粗提取和鑒定方法教學(xué)工具多媒體教學(xué)過程(一)引入新課無論是果膠酶還是加酶洗衣粉中的酶制劑, 都是從細(xì)胞中提取出來的。 從今天開始,我們學(xué)習(xí)生物化學(xué)成分的提取與改造技術(shù)。(二)進(jìn)行新課1
2、基礎(chǔ)知識1. 1DNA1提取的原理提取DNA勺原理包括DNA勺溶解性和耐受性兩個方面。問:提取 DNA勺溶解性原理 包括哪些方面?DNAft不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNAR容于酒精。1.1.1 分析圖51。DNAft不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使 DNA容 解,需要使用什么濃度?要使 DN晰出,又需要使用什么濃度?在0.14mol/L時溶解度最小;較高濃度可使 DNA容解;0.14mol/L可使DNAf出。1.1.2 在溶解細(xì)胞中的DNA寸,人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析 出的方法是向溶有DNA勺NaCl溶液中緩慢注入蒸儲水,以稀釋 NaCl溶液。酒
3、精是 一種常用有機(jī)溶劑,但 DNA不能溶于酒精(特別是95%冷卻酒精),但細(xì)胞中蛋 白質(zhì)可溶于酒精。問:采用 DNM溶于酒精的原理,可以達(dá)到什么目的? 將DNAffi蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。1. 1. 3提取DNA可以利用DNA寸酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?蛋白酶,因為酶具有專一性,蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNAT生影響。溫度值為6080C,因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀,而DNA會變性。補(bǔ)充:DNA勺變性是指DNA子在高溫下解螺旋,其溫度在 80 c以上,如在PCFRi 術(shù)中DN尬性溫度在95Co思考:觀察圖5-2,洗滌劑在提取DNA有何作用?洗滌劑將細(xì)
4、胞膜上的蛋白質(zhì),從而瓦解細(xì)胞膜。2. 2DNA勺鑒定原理當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是 DNA寸,需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定?在沸水浴條件下,DNA二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。原理總結(jié)。 通過利用不同濃度NaCl 溶液溶解或析出DNA, 可以從細(xì)胞中提取和提純DNA再利用酒精進(jìn)一步將 DNA與蛋白質(zhì)分離開來,達(dá)到提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。2實驗設(shè)計3. 1 實驗材料3.1.1 不同生物的組織中DNAt量不同。在選取材料時,應(yīng)本著 DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。你認(rèn)為教材提供的材料中哪些不適合提取DNA?哺乳動物的血液和液體培養(yǎng)基中的大腸桿菌。3.1.2 從核DN徽目來看
5、,豬38條,雞78條,哺乳動物血0條,彳彌猴桃58條,洋蔥 16 條,豌豆 14 條,菠菜 12 條,大腸桿菌1 條。請選擇動植物材料各一種。雞血、獼猴桃。2. 2破碎細(xì)胞,獲取含DNA勺濾液若選用雞血和洋蔥作實驗材料,則怎樣獲取含DNA勺濾液?在雞血細(xì)胞液中加入一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。在以上實驗中, 加入蒸餾水、 洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時應(yīng)當(dāng)選用 (濾紙、尼龍布) 。血細(xì)胞在蒸儲水中大量吸水而張裂;洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;食鹽溶解DNAW質(zhì);選用 尼龍布進(jìn)行過濾。在處理植物組織時需要進(jìn)行研磨,其目的是什么?研
6、磨不充分產(chǎn)生什么結(jié)果?破碎細(xì)胞壁,使核物質(zhì)容易溶解在 NaCl溶液中;研磨不充分會使 DNA勺提取量減 少。具體做法。10mL5|血+ 20mL蒸儲水-同方向攪拌f3層尼龍布過濾f濾液2 3 去除濾液中的雜質(zhì)最初獲得的DNA濾液含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì),需要進(jìn)一步提純 DNA閱讀教材提 供的三種方法,分析其中的原理。方案一的原理是DNAS不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶 分解蛋白質(zhì),不分解DNA方案三的原理是蛋白質(zhì)和 DNA勺變性溫度不同。具體做法。方案一:30mL濾液+35gNaClH同方向攪拌,DNA容解-加入蒸儲水-DNAff出-過 濾得到過濾物放到2mol/LNaC
7、l溶液中溶解-DNA-NaC溶解液方案二:30mL濾液+嫩肉粉(木瓜蛋白酶)-靜置 1015分鐘-DNASe方案三:30濾液-6067c處理-過濾獲得 DNAS液2. 4DNAff出與鑒定在濾液中仍然含有一些雜質(zhì),怎樣除去這些雜質(zhì)呢?得到的DNAg何顏色?濾液與等體積的冷卻酒精混合均勻,靜置 23分鐘,析出的白色絲狀物就是 DNA DNAg白色。怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是 DNAI ?閱讀教材。閱讀。簡述DNA勺鑒定過程。具體做法。試管2支,編號甲乙-各加等量5mLNaC熔液-甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解-各加4m苯胺,混合土勻-沸水浴5min-觀察顏色變化3實驗操作制備雞血細(xì)胞液加檸檬
8、酸鈉,靜置或離心破碎細(xì)胞,釋放DNA加蒸儲水,同一方向快速通方向攪拌過濾,除去細(xì)胞壁、細(xì)胞膜等。溶解核內(nèi)DNA- 加入NaCl至2mol/L ,同一方向緩慢攪拌DN晰出加蒸儲水至0.14mol/L ,過濾,在溶解到2mol/L溶液中J 除去細(xì)胞質(zhì)中的大部分物質(zhì)DNA0步純化 與等體積95%冷卻酒精混合,析出白色絲狀物,一除去核蛋白、RNA多糖等。DNA1定 二苯胺,沸水浴,呈現(xiàn)藍(lán)色 其它注意事項:在雞血中加入檸檬酸鈉防止凝固;雞血靜置或離心以提高細(xì)胞懸液 濃度;使用塑料燒杯;使用尼龍布過濾;玻棒沿同一方向攪拌;玻棒攪拌要緩慢(細(xì) 胞破裂快速攪拌);玻棒不要碰到燒杯壁;二苯胺試劑要現(xiàn)用現(xiàn)配等。為
9、了提高 DNA 純度,在科學(xué)實驗中通常使用的洗滌劑有十六烷基三甲基澳化?。?CTAB、十二烷 基硫酸鈉(SDS。課后小結(jié)DNA的粗提取與堇正土DNA在不同粒度bfaCl容中溶解度不同, DMA與其他細(xì)胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和顰白質(zhì)對65.高潟和洗滌劑耐受性不同 DNA與二木胺呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)口破碎細(xì)胞T DNA粗提取i 選擇適宜可科川DNA的溶解和析出,與二基胺混合,錦水浴,呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng).DN屋的純優(yōu)口課后習(xí)題1 .在研究DNA勺基因樣本前,采集來的血樣需要蛋白水解酶處理,然后用有機(jī)溶劑 除去蛋白質(zhì)。用蛋白水解酶處理血樣的目的是()A.除去血漿中的蛋白質(zhì)B.除去染色體上的蛋白質(zhì)C.除去血
10、細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)D.除去血細(xì)胞中的所有的蛋白質(zhì),使 DN麻放,便于進(jìn)一步提純2 .與析出DNA占稠物有關(guān)的敘述,不正確的是()A.操作時緩緩滴加蒸儲水,降低DNA勺溶解度B.在操作A時,用玻璃棒輕緩攪拌,以保證 DN的子完整C.加蒸儲水可同時降低DNAffi蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D.當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時,此時 NaCl的濃度相當(dāng)于0.14mol/L3 .洗滌劑能夠瓦解(),但對DNAS有影響。A.細(xì)胞壁B.細(xì)胞膜 C.細(xì)胞核 D.細(xì)胞質(zhì)4 .在沸水浴的條件下,DNA ()會被染成藍(lán)色。A.斐林試劑 B.蘇丹田染液 C.雙縮月尿試劑 D.二苯胺5 .在DNAI取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是(A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA勺損失C.增加DNA勺含量D.容易洗刷參考答案: DCBDB板書課題 1 DNA 的粗提取與鑒定1基礎(chǔ)知識1. 1DNA1提取的原理2. 2DNA勺鑒定原理2實驗設(shè)計3. 1 實驗材料2. 2破碎細(xì)胞,獲取含DNA勺濾液2 3 去除濾液中的雜質(zhì)2. 4DNAW出與鑒定