（浙江專版）2017-2018學(xué)年高中生物 課時跟蹤檢測（一）大腸桿菌的培養(yǎng)和分離（含解析）浙科版選修1

課時跟蹤檢測（一） 大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)條件的敘述，錯誤的是()A分離微生物常用固體培養(yǎng)基，擴大培養(yǎng)常用液體培養(yǎng)基B“細菌喜葷，霉菌喜素”，培養(yǎng)基中成分的含量和配比因培養(yǎng)物而異C培養(yǎng)基的滅菌均采用高壓蒸汽法D制作固體培養(yǎng)基時常常加入瓊脂解析：選C培養(yǎng)基的滅菌通常是采用高壓蒸汽法，但因培養(yǎng)基的成分而異。如培養(yǎng)基中有葡萄糖，高壓蒸汽條件下會導(dǎo)致葡萄糖分解碳化，而采用500 g/cm2壓力滅菌30 min。2獲得純凈培養(yǎng)物的最關(guān)鍵環(huán)節(jié)是()A將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌B接種純種細菌C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D防止外來雜菌的入侵解析：選D純凈培養(yǎng)物是單一、純種菌的菌落。因此，確保無其他雜菌的入侵是關(guān)鍵。3金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒。下述有關(guān)接種金黃色葡萄球菌的實驗敘述錯誤的是()A將灼燒的接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長菌多的部位B取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌C對接種環(huán)進行灼燒處理D接種后還要將試管口滅菌加塞解析：選A接種環(huán)伸入試管后應(yīng)先接觸未長菌的部位，待接種環(huán)冷卻后再接觸長菌部位。4下列劃線分離的圖解中，正確的是()解析：選C劃線分離的劃線有許多要求。A的劃線方法不對，而B錯在劃線2的起點，D項錯在4與1交叉了。5要獲得遺傳特性單一的大腸桿菌菌種，一般必須對原有的大腸桿菌菌種進行擴大培養(yǎng)、并利用純化技術(shù)得到單菌落。請回答下列有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)和分離實驗的相關(guān)問題：(1)對買回來的大腸桿菌菌種進行擴大培養(yǎng)，一般用LB培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中為微生物提供碳源、氮源和能源的物質(zhì)主要是_，為調(diào)節(jié)滲透壓，要加入一定量的_。為進行大腸桿菌的分離，還要加入瓊脂配制成固體培養(yǎng)基，并進行倒平板的操作。(2)獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_，為此，必須對培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基進行嚴(yán)格滅菌。培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用_法滅菌，接種環(huán)采用灼燒法滅菌。同時在接種或倒平板操作時，除了在超凈臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴(yán)格清潔和消毒外，還必須_以防止空氣中的雜菌污染。(3)大腸桿菌菌種的擴大培養(yǎng)一般采用液體培養(yǎng)基，接種后將培養(yǎng)基置于37 搖床振蕩條件下培養(yǎng)12小時。菌種的分離一般在固體培養(yǎng)基上采用_法，并將培養(yǎng)皿以_狀態(tài)放置于適宜溫度的恒溫箱中，培養(yǎng)1224小時后，_，接種于固體斜面培養(yǎng)基上，37 培養(yǎng)24小時后，得到的純化菌種在_條件下保存。解析：(1)LB培養(yǎng)基的主要成分有蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉、水、瓊脂，其中蛋白胨和酵母提取物為微生物提供碳源、氮源和能源，氯化鈉可以調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，瓊脂作為凝固劑。(2)微生物純培養(yǎng)的關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染，因此操作過程中要嚴(yán)格滅菌，培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，而接種時要在酒精燈火焰旁進行。(3)大腸桿菌菌種分離采用劃線分離法，接種后將培養(yǎng)皿置于恒溫箱中倒置培養(yǎng)，以防培養(yǎng)過程中被污染；培養(yǎng)后菌種的保藏方法是：用接種環(huán)將單菌落挑出，接種于斜面培養(yǎng)基上，37 培養(yǎng)24小時后置于4 條件下保存。答案：(1)蛋白胨和酵母提取物氯化鈉(2)防止外來雜菌的侵入高壓蒸汽滅菌保證操作過程在酒精燈火焰旁進行(3)劃線分離倒置將單菌落用接種環(huán)取出4 6大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群，每克糞便中含有109個，且能夠與致病菌混雜生長。如果食品和飲用水中出現(xiàn)大腸桿菌，就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌，因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測指標(biāo)之一。請據(jù)此回答下列問題：(1)測定街邊出售的奶茶中大腸桿菌的數(shù)目，常用涂布分離法。該方法首先配制LB_培養(yǎng)基，進行高壓蒸汽滅菌后冷卻至60 ，在_旁倒在培養(yǎng)皿中形成平板；對奶茶樣品進行一定倍數(shù)的稀釋，取0.1 mL奶茶稀釋液，加在培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基上，用_涂布在培養(yǎng)基平面上，然后進行培養(yǎng)；觀察統(tǒng)計培養(yǎng)皿中_數(shù)目；該數(shù)據(jù)比實際數(shù)值要_(填“高”或“低”)，原因是_。實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行_處理，然后才能倒掉。(2)若要對上述培養(yǎng)基中的菌種進行擴大培養(yǎng)，則需配制LB_培養(yǎng)基，滅菌后，將_在酒精燈火焰上燒紅后冷卻，然后蘸取單菌落中的菌體接種到新的培養(yǎng)基中，在適宜環(huán)境中培養(yǎng)_h即可。解析：(1)微生物的分離通常用固體培養(yǎng)基。為防止雜菌污染，要在酒精燈火焰旁倒平板。在用涂布分離法分離細菌時，為了使細菌均勻涂布在固體培養(yǎng)基上，常用玻璃刮刀把菌液涂布在培養(yǎng)基上。通過觀察菌落數(shù)推算細菌數(shù)目。培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起，共同形成一個菌落，因此觀察到的菌落數(shù)可能比實際菌落數(shù)低。為了防止實驗菌污染環(huán)境，實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行滅菌處理，然后才能倒掉。(2)對微生物進行擴大培養(yǎng)，通常使用LB液體培養(yǎng)基。一般用接種環(huán)轉(zhuǎn)移帶菌的培養(yǎng)物。接種時，先將接種環(huán)在酒精燈火焰上燒紅后冷卻，然后蘸取帶菌的培養(yǎng)物，放到新的培養(yǎng)基中。在液體培養(yǎng)基中，只要接種培養(yǎng)12 h，每毫升培養(yǎng)基中就有幾億個細菌。答案：(1)固體酒精燈火焰玻璃刮刀(涂布棒)菌落低培養(yǎng)基中可能有兩個或多個細菌緊挨在一起，共同形成一個菌落滅菌(2)液體接種環(huán)127據(jù)所學(xué)知識，回答下列問題：(1)菌落是由微生物在適宜_培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞的群體。適宜的培養(yǎng)基，除了含微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要考慮_、_等。(2)_、_這兩種分離方法都能使培養(yǎng)基的表面形成由_形成的單個菌落，其中_還可用于對菌液中的菌體進行計數(shù)。解析：微生物在液體培養(yǎng)基中能較快繁殖，但不能形成子細胞的集群。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面接種的菌密度足夠低時，菌落就是從單個菌體分裂形成的。答案：(1)固體酸堿度滲透壓(2)劃線分離法涂布分離法單個菌體涂布分離法- 3 -