2020版高考生物一輪復(fù)習(xí) 課堂互動(dòng)探究案2 細(xì)胞工程（含解析）

課堂互動(dòng)探究案2 細(xì)胞工程考點(diǎn)突破素養(yǎng)達(dá)成植物細(xì)胞工程(國考5年1考)(全國卷： 2013全國卷；地方卷：2018江蘇卷；2017海南、江蘇卷；2016江蘇卷；2015北京、天津、安徽、重慶卷；2014廣東、江蘇卷)【師說考問】考問1細(xì)胞工程的概念理解(1)原理和方法：細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)。(2)操作水平：細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。(3)工程目的：按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。(4)根據(jù)操作對(duì)象的不同分類：植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程。考問2植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)概念理解培養(yǎng)對(duì)象：離體的植物組織、器官或細(xì)胞。培養(yǎng)條件：無菌、人工配制的培養(yǎng)基、相關(guān)激素等人工控制條件。培養(yǎng)結(jié)果：產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。(2)操作流程外植體根、芽或胚狀體試管苗考問3植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)概念：將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(2)操作流程(3)流程分析過程a為去除細(xì)胞壁獲得具有活力的原生質(zhì)體，用到的酶是纖維素酶和果膠酶。過程b是原生質(zhì)體的融合，其原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。誘導(dǎo)b融合的兩種方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電激等；化學(xué)法一般用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。過程c是原生質(zhì)體融合后再生出新的細(xì)胞壁。過程d是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性。(4)意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙?？紗?植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑(2)作物新品種的培育(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：如人參皂甙干粉的生產(chǎn)。考問5植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別與聯(lián)系名稱植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性過程離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根、芽或胚狀體發(fā)育植物體選材選取根尖、莖尖、形成層部位最容易誘導(dǎo)脫分化不同種的植物體細(xì)胞融合后形成雜種細(xì)胞技術(shù)操作脫分化、再分化等除脫分化、再分化外，還要用酶解法去除細(xì)胞壁，用一定的方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合關(guān)系植物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，植物體細(xì)胞雜交所用的技術(shù)更復(fù)雜考問6單倍體育種和突變體的利用的不同點(diǎn)項(xiàng)目原理優(yōu)點(diǎn)成果單倍體育種染色體變異明顯縮短育種年限單育1號(hào)煙草品種、中花8號(hào)、11號(hào)水稻和京花1號(hào)小麥品種等突變體的利用基因突變產(chǎn)生新基因，大幅度改良某些性狀抗花葉病毒的甘蔗、抗鹽堿的野生煙草等【題組跟進(jìn)】高考題組研考向植物組織培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用12016·江蘇卷，9下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是()APEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂C骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來自供卵母體解析：PEG是促細(xì)胞融合劑，但植物細(xì)胞不能直接融合，需先去壁形成原生質(zhì)體后才能融合，A錯(cuò)誤；制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞，不需制備原生質(zhì)體，B錯(cuò)誤；骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤；核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體只來自卵細(xì)胞，即線粒體DNA來自供卵母體，D正確。答案：D22015·北京卷在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，不需要的是()A用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合D用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽解析：農(nóng)桿菌可通過侵染宿主細(xì)胞，從而將目的基因(Ti質(zhì)粒)轉(zhuǎn)入到宿主細(xì)胞中，A正確；通過對(duì)已經(jīng)導(dǎo)入目的基因并含有標(biāo)記基因的細(xì)胞進(jìn)行篩選，從而淘汰沒有成功導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞并保留導(dǎo)入了目的基因的細(xì)胞，B正確；進(jìn)一步對(duì)篩選出來的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，得到轉(zhuǎn)基因植株，這一過程需用到適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素以誘導(dǎo)愈傷組織生芽，D正確；聚乙二醇多用于植物體細(xì)胞融合，用于培養(yǎng)異源多倍體，與此處的基因工程的操作無關(guān)，C過程不需要。答案：C32012·全國卷，39為了探究6BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表：回答下列問題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為_和_兩類。上述培養(yǎng)基中，6BA屬于_類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是_，因變量是_，自變量的取值范圍是_。(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是_號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入_(填“6BA”或“IAA”)。解析：本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。(1)植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基，其中，無機(jī)鹽的元素可分為大量元素和微量元素兩類，前者如N、P、K、Ca、Mg、S等，后者如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo等。MS培養(yǎng)基中還常需要添加能誘導(dǎo)細(xì)胞分裂、脫分化、再分化的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。(2)該實(shí)驗(yàn)中，各組6BA濃度均為0.5 mg/L，IAA的濃度不相同，故自變量為IAA濃度，IAA濃度范圍為00.5 mg/L。據(jù)表可知，該實(shí)驗(yàn)因變量是再生叢芽外植體的比率(m)以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)。(3)由表格中的數(shù)據(jù)可知，1號(hào)培養(yǎng)基誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少。(4)生長(zhǎng)素常用于誘導(dǎo)細(xì)胞分裂和根的分化，6BA一般用于誘導(dǎo)植物的愈傷組織分化出叢芽，故誘導(dǎo)菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入6BA。答案：(1)大量元素微量元素細(xì)胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)00.5 mg·L1(3)1(4)6BA42017·海南卷，31甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。回答下列問題：(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是_。(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到_。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是_(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是_。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)_形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí)，_(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是_。解析：(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，細(xì)胞必須具有完整細(xì)胞核，才具有發(fā)育為個(gè)體的一整套遺傳信息。(3)影響植物組織培養(yǎng)的兩種主要激素是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)脫分化形成的。(4)由于花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株，導(dǎo)致不能保留親本性狀。答案：(1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整的植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核(3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素脫分化(4)不能對(duì)雜合體的植株來說，其體細(xì)胞的基因型相同，而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株植物體細(xì)胞雜交技術(shù)52018·江蘇卷，22如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述正確的是()A若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合Ba細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)Cc細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)Dc細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因解析：若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，應(yīng)該先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；無論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞，兩個(gè)細(xì)胞的融合都需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞，利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，C正確；c細(xì)胞同時(shí)具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因，但是基因是選擇性表達(dá)的，因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá)，D錯(cuò)誤。答案：BC62013·全國卷，40甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和_酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的_，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合，形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成_組織，然后經(jīng)過_形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為_。(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_，假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。解析：(1)利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育新品種的過程中，應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，獲得有活力的原生質(zhì)體，經(jīng)誘導(dǎo)融合后培養(yǎng)成為愈傷組織，再經(jīng)再分化形成完整植物體。(2)多倍體是指由受精卵發(fā)育來的、細(xì)胞內(nèi)含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體。(3)欲通過人工種子大量繁殖這種雜種植株，則可將經(jīng)再分化形成的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料經(jīng)人工薄膜包裝來獲得人工種子。答案：(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)由受精卵發(fā)育而來體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案也可)在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答案也可)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對(duì)其中一個(gè)即可)72015·天津卷DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本，利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類型生長(zhǎng)速率g/(L·天)固體培養(yǎng)基上藻落直徑DHA含量()A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無據(jù)表回答：(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻_和B藻_的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻，其目的是獲得_。(3)通過以下三步篩選融合藻，步驟_可淘汰B藻，步驟_可淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落，再通過步驟_獲取生產(chǎn)所需的融合藻。步驟a：觀察藻落的大小步驟b：用不含有機(jī)碳源(碳源生物生長(zhǎng)的碳素來源)的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)步驟c：測(cè)定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn)，結(jié)果如下圖：甲組條件下，融合藻產(chǎn)生H的細(xì)胞器是_；丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是_。與甲、丙兩組相比，乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快，原因是在該培養(yǎng)條件下_。甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高，但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件，其原因是_。解析：(1)根據(jù)表中兩種藻的特性可知，A藻具有產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性的優(yōu)點(diǎn)，B藻具有快速增長(zhǎng)的優(yōu)點(diǎn)，選育的融合藻應(yīng)該具有兩種藻的優(yōu)點(diǎn)。(2)由于植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁，影響了原生質(zhì)體的融合，所以在融合前，需用纖維素酶和果膠酶處理，以獲得原生質(zhì)體。(3)在篩選融合藻的過程中，要根據(jù)兩種藻及融合藻的特性進(jìn)行篩選。從信息可以看出，篩選過程是通過培養(yǎng)過程觀察或測(cè)定DHA含量進(jìn)行的，在培養(yǎng)過程中，最先觀察到不能生長(zhǎng)的是B藻，淘汰B藻，生長(zhǎng)比較慢的是A藻，最后再通過測(cè)定DHA含量獲得所需的融合藻。(4)甲組條件是光照下，培養(yǎng)基中含有無機(jī)物，該條件下融合藻既可以進(jìn)行呼吸作用也可以進(jìn)行光合作用，產(chǎn)生H的細(xì)胞器有線粒體和葉綠體；而在丙組條件下，黑暗中培養(yǎng)基中含有葡萄糖，該條件下融合藻只進(jìn)行呼吸作用，產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器只有線粒體。乙組條件既有光照，培養(yǎng)基中又含有有機(jī)物葡萄糖，融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)，所以融合藻生長(zhǎng)速度較快；甲組中不需要添加葡萄糖，可降低成本，同時(shí)甲組的培養(yǎng)基中不含有機(jī)物，雜菌無法生長(zhǎng)，所以在實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件。答案：(1)產(chǎn)生DHA，自養(yǎng)特性快速增長(zhǎng)(2)原生質(zhì)體(3)bac(4)線粒體、葉綠體線粒體融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無機(jī)物即能生長(zhǎng)，不需要添加葡萄糖，可降低成本，也可防止雜菌生長(zhǎng)模擬題組預(yù)趨勢(shì)植物組織培養(yǎng)的考查1經(jīng)典模擬傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和用種子播種，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們開始采用“組織培養(yǎng)繁殖蘭花”，如圖所示：(1)植物組織培養(yǎng)是在_和人工培養(yǎng)條件下，將_的植物組織、器官、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的_上，誘導(dǎo)其產(chǎn)生_、叢芽，最終發(fā)育成完整植株的過程。(2)蘭花的葉肉細(xì)胞之所以能培養(yǎng)為新個(gè)體，是因?yàn)榧?xì)胞中含有_，具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，這種潛能叫_。(3)請(qǐng)用簡(jiǎn)單的文字和箭頭，繪出之間的關(guān)系_。(4)有人想到利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)解決蘭花生根速度慢、幼苗生存能力弱的好辦法，但操作后得到的“韭菜蘭花”，并沒有預(yù)想中的“繁殖容易，香氣濃郁”，可能的原因是_。答案：(1)無菌離體培養(yǎng)基愈傷組織(2)本物種的全部遺傳信息細(xì)胞全能性(3)組織細(xì)胞愈傷組織胚狀體(4)兩個(gè)物種之間的基因相互影響，導(dǎo)致某些基因無法正常表達(dá)2經(jīng)典模擬植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用如圖所示圖解簡(jiǎn)單表示：(1)培育胚狀體利用了_這一項(xiàng)生物技術(shù)，胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了_。培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外，還必須含有_等植物激素，還需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的_。(2)如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需要培養(yǎng)到_；若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到_。如果愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，通過基因工程要獲取抗蟲棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是_法。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，必須要經(jīng)過_。無絲分裂有絲分裂減數(shù)分裂原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞融合脫分化再分化解析：(1)離體植物細(xì)胞通過脫分化形成愈傷組織，通過再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過細(xì)胞分裂、分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)，其原理為植物細(xì)胞的全能性。培養(yǎng)基的成分包括水、無機(jī)鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)等；培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。(2)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織即可；獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體階段；棉花為雙子葉植物，導(dǎo)入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。答案：(1)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素滅菌(2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)植物體細(xì)胞雜交的考查3原創(chuàng)選取A、B植株的細(xì)胞進(jìn)行如下圖操作，請(qǐng)回答問題：(1)實(shí)現(xiàn)圖中的過程最常用的方法是_。(2)過程的發(fā)生，必須進(jìn)行_，其方法有_法和_法。(3) 若細(xì)胞A內(nèi)含a個(gè)染色體，細(xì)胞B內(nèi)含b個(gè)染色體，則“雜種細(xì)胞”內(nèi)含_個(gè)染色體；若A、B植株采用常規(guī)雜交育種方法成功的話，得到的后代含_個(gè)染色體，必須用_來處理幼苗，才能得到可育的雜種植株，其中含有_個(gè)染色體。這兩種方法相比，體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是：_。(4)如果原生質(zhì)體A為小鼠的漿細(xì)胞，原生質(zhì)體B為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，誘導(dǎo)二者融合時(shí)，獨(dú)特的方法是用_處理。解析：(1)圖示表示植物體細(xì)胞雜交過程，是去壁過程，最常用的方法是酶解法，即用纖維素酶和果膠酶處理去除細(xì)胞壁。(2)表示誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程，方法有物理方法(離心、電刺激)和化學(xué)方法(聚乙二醇)。(3)“雜種細(xì)胞”具有兩個(gè)細(xì)胞的染色體，有ab條染色體。細(xì)胞A產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中含有a/2條染色體，細(xì)胞B產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中含有b/2條染色體，利用雜交育種獲得的后代體細(xì)胞中所含有的遺傳物質(zhì)各包含兩親本的一半，即(ab)/2，此植株是高度不育的，必須利用秋水仙素處理使其染色體數(shù)目加倍，即細(xì)胞中染色體數(shù)目為ab條，植株可育。說明體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是使用滅活的病毒。答案：(1)酶解法(纖維素酶、果膠酶)(2)誘導(dǎo)融合物理化學(xué)(3)ab(ab)/2秋水仙素ab克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(4)滅活的病毒動(dòng)物細(xì)胞工程(國考5年4考)(全國卷：2018全國卷、；2016全國卷；2014全國卷；地方卷：2017江蘇卷；2015山東、安徽、重慶、江蘇；2014浙江、北京卷；2013安徽、浙江、重慶、海南)【師說考問】考問1補(bǔ)充動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖，并填空 (1)與植物細(xì)胞培養(yǎng)相比，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程所用的培養(yǎng)基一般是液體培養(yǎng)基，并加入動(dòng)物血清。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶，第一次的作用是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；O2 的作用是促進(jìn)細(xì)胞有氧呼吸?？紗?探究動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的不同點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物體細(xì)胞核移植原理細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性過程動(dòng)物組織塊 細(xì)胞懸液 放入培養(yǎng)瓶原代培養(yǎng)(細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)) 接觸抑制胰蛋白酶處理，分瓶繼續(xù)培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 少數(shù)細(xì)胞獲得不死性(癌細(xì)胞)結(jié)果獲得細(xì)胞群獲得克隆動(dòng)物應(yīng)用生產(chǎn)生物制品用于基因工程檢測(cè)有毒物質(zhì)加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良種繁育保護(hù)瀕危物種生產(chǎn)醫(yī)用蛋白提供克隆器官、組織等易錯(cuò)警示細(xì)胞工程的兩個(gè)總結(jié)(1)植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過程，但植物細(xì)胞可以先分裂再分化，而動(dòng)物細(xì)胞不分化只分裂。(2)克隆動(dòng)物的起點(diǎn)是經(jīng)過核移植后形成的重組細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)主要來自供體，因此形成的個(gè)體性狀主要同供體，但也有部分性狀同受體?？紗?植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的不同點(diǎn)植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性過程細(xì)胞A、B 去壁原生質(zhì)體A、B 融合融合的原生質(zhì)體 再生壁雜種細(xì)胞 植物組織培養(yǎng)雜種植株細(xì)胞A、B融合雜交細(xì)胞 有絲分裂多個(gè)相同雜交細(xì)胞相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法物理法：離心、電激、振動(dòng)；化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外，還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞意義克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能考問4據(jù)圖完成下列各題圖1中，a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞，圖2為單克隆抗體制備流程(順序已被打亂)。 (1)由圖1分析：誘導(dǎo)a、b兩種細(xì)胞的融合方法有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等；a、b兩種細(xì)胞發(fā)生融合，融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；融合后形成圖中的d細(xì)胞，d細(xì)胞的特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體；由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備等特點(diǎn)。(2)圖2 B中小鼠注射的物質(zhì)是特定抗原，其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生效應(yīng)B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)。(3)在獲取C細(xì)胞時(shí)，被篩選淘汰的細(xì)胞類型有“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。(4)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來：【題組跟進(jìn)】高考題組研考向動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的考查1經(jīng)典高考下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀解析：連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞其核型已發(fā)生改變；一個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群才為一個(gè)克?。晃唇?jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞可能是不同細(xì)胞分裂形成的，其性狀可能不同。答案：B2經(jīng)典高考實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A甲過程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B乙過程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化C丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性解析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無毒無菌的環(huán)境，甲過程指從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織，該過程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒處理，A項(xiàng)正確；乙過程表示將得到的皮膚組織分散成單個(gè)細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理，B項(xiàng)正確；丙過程表示原代培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型，C項(xiàng)錯(cuò)誤；丁過程表示傳代培養(yǎng)，此時(shí)得到的細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變，正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展，D項(xiàng)正確。答案：C 題后歸納(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因：幼齡動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低，增殖能力很強(qiáng)，更易于培養(yǎng)。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶：第一次是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來，目的是避免動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖一定時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。體細(xì)胞克隆技術(shù)及應(yīng)用3高考改編有關(guān)“治療性克隆”的說法錯(cuò)誤的是()A可解決臨床上供體器官不足和器官移植后免疫排斥問題B其核心技術(shù)是胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)C胚胎干細(xì)胞可以克隆出不同組織細(xì)胞的根本原因是基因的選擇性表達(dá)D中國政府既反對(duì)生殖性克隆人，也反對(duì)治療性克隆解析：用患者自身的胚胎干細(xì)胞克隆器官，可以克服供體器官不足，器官移植后又不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；治療性克隆的核心是胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)；胚胎干細(xì)胞克隆出不同組織細(xì)胞屬于細(xì)胞分化，細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；中國政府禁止生殖性克隆人，但不反對(duì)治療性克隆。答案：D42018·全國卷2018年細(xì)胞期刊報(bào)道，中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}：(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指_。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目_(填“減半”“加倍”或“不變”)。(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度_(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是_。(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目_(填“相同”或“不相同”)，性染色體組合_(填“相同”或“不同”)。解析：(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新胚胎，這個(gè)胚胎最后發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體；通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體，因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體一致。(2)胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植，其原因是動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。(3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞染色體中常染色體相同，性染色體前者是XX，后者是XY，因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同，性染色體組合不同。答案：(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易(3)相同不同52018·全國卷，38節(jié)選某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5末端，獲得了L1GFP融合基因(簡(jiǎn)稱為甲)，并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同?；卮鹣铝袉栴}：(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了_和_過程。(3)為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_移入牛的_中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。解析：(2)構(gòu)建的真核表達(dá)載體P1中含有GFP基因，而GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物“某種熒光蛋白(GFP)”在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達(dá)，基因的表達(dá)過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。(3)若要獲得含有甲的牛，可采用核移植技術(shù)，即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞，并將該重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)成重組胚胎，再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。答案：(2)轉(zhuǎn)錄翻譯(3)細(xì)胞核去核卵母細(xì)胞62016·全國卷，40下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。回答下列問題：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_。過程表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用_的方法。代表的過程是_。(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中_的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_。(4)與克隆羊“多莉(利)”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了_。解析：(1)提供體細(xì)胞的供體可能為雌性，也可能為雄性，因此圖中A(正常細(xì)胞核)的性染色體組成為XX或XY。常采用顯微操作去核法來去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。過程表示將早期胚胎移入受體，其過程為胚胎移植。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過10代繼續(xù)培養(yǎng)，則其遺傳物質(zhì)(或核型)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來自供體，因此大部分性狀與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體(或提供卵母細(xì)胞的個(gè)體)，即卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就決定了克隆動(dòng)物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)的原理是已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。答案：(1)XX或XY顯微操作(去核法)胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性題后反思(1)克隆技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(2)克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。(3)核移植技術(shù)獲得的動(dòng)物與供核動(dòng)物性狀不完全相同：克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自于供體細(xì)胞核，但其核外線粒體中的DNA主要來自于受體卵細(xì)胞。性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果。供核動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其性狀也不可能和供核動(dòng)物完全相同。在個(gè)體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變，產(chǎn)生供核動(dòng)物沒有的性狀。 單克隆抗體的制備及應(yīng)用7. 2017·江蘇卷，11牛雄性胚胎中存在特異性HY 抗原，可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加HY 單克隆抗體，篩選胚胎進(jìn)行移植，以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是()AHY單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌B應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D用HY抗原免疫母牛可獲得相應(yīng)抗體解析：?jiǎn)慰寺】贵w由雜交瘤細(xì)胞分泌，A錯(cuò)誤；做雌雄性別鑒別應(yīng)選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞，B錯(cuò)誤；由于是利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥，則鑒別后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎沒有意義，C錯(cuò)誤；用HY抗原免疫母牛，使其體內(nèi)產(chǎn)生體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，從而獲得相應(yīng)抗體，D正確。答案：D82013·重慶卷下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是()A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群解析：是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞；中使用聚乙二醇或滅活的病毒等，有利于雜交瘤細(xì)胞的形成；同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性；是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。答案：D92014·全國卷，40某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞?；卮鹣铝袉栴}：(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是_小鼠，理由是_。(2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是_。(3)雜交瘤細(xì)胞中有_個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。解析：(1)據(jù)圖分析，第4次免疫后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16 000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)兩個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核融合成一個(gè)細(xì)胞核標(biāo)志著融合的完成，雜交瘤細(xì)胞中有一個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)量為兩者之和，即100條染色體。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的，最終不能存活。答案：(1)4YY小鼠的血清抗體效價(jià)最高(2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%(3)1100(4)正常細(xì)胞不能無限增殖題后反思比較制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞細(xì)胞特點(diǎn)漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生單一抗體，又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖模擬題組預(yù)趨勢(shì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程分析12019·武漢調(diào)研下圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請(qǐng)回答：(1)容器A中放置的一般是幼齡動(dòng)物的器官或組織，原因是其細(xì)胞_，易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)先要剪碎，然后用_分散細(xì)胞，制成B瓶中的細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為_。(2)細(xì)胞正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細(xì)胞存活，這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了_，可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為_代以內(nèi)的細(xì)胞，以保持細(xì)胞正常的_核型。(3)C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境，需要添加一定量的_。培養(yǎng)過程中還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是_。(4)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)圖可知，培養(yǎng)_細(xì)胞一定需要添加血清。解析：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊(或動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官)剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。(2)細(xì)胞正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞絕大部分死亡，只有極少數(shù)細(xì)胞存活，這是因?yàn)榇婊畹募?xì)胞發(fā)生了突變，可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境，需要添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過程中還需要提供O2和CO2等氣體環(huán)境，CO2的作用主要是維持培養(yǎng)液的pH值。(4)據(jù)圖可知，培養(yǎng)癌細(xì)胞有無血清影響不大，而培養(yǎng)正常細(xì)胞時(shí)，有血清時(shí)的細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)大于無血清時(shí)的細(xì)胞數(shù)，故培養(yǎng)正常細(xì)胞必須要添加血清。答案：(1)分裂能力強(qiáng)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)原代培養(yǎng)(2)突變10二倍體(3)抗生素維持培養(yǎng)液的pH(4)正常22019·遼寧盤錦模擬下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊培育過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是_。(2)圖甲中過程常在促融劑_誘導(dǎo)下完成，過程中至少涉及兩次篩選；第一次利用_進(jìn)行初步篩選，第二次利用_的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。過程與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是_。(3)單克隆抗體結(jié)合上抗癌藥物能定向攻擊癌細(xì)胞，這一應(yīng)用可形象地稱為_。(4)若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎？_。原因是_。(5)圖乙過程的技術(shù)具有多種用途，但是不能_。A有選擇地繁殖某一性別的家畜B繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體C用于保存物種D改變動(dòng)物的核基因(6)在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，你認(rèn)為原因最可能是_。A卵細(xì)胞大，便于操作B卵細(xì)胞含有的營養(yǎng)物質(zhì)多C卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)D重組細(xì)胞才具有全能性解析：(1)圖甲和圖乙所示的過程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(2)圖甲中過程常在促融劑聚乙二醇(或PEG)誘導(dǎo)下完成，過程中至少涉及兩次篩選；第一次利用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選，第二次利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。過程與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是不需要特定的培養(yǎng)基，不需要嚴(yán)格的外界環(huán)境條件。(3)單克隆抗體結(jié)合上抗癌藥物能定向攻擊癌細(xì)胞，這一應(yīng)用可形象地稱為生物導(dǎo)彈。(4)若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀不可能全像白面綿羊，原因是卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀。(5)圖乙過程的技術(shù)具有多種用途，可用于有選擇地繁殖某一性別的家畜、繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體、用于保存物種，但不能改變動(dòng)物的核基因。(6)在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，原因最可能是卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)。答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2)聚乙二醇(或PEG)選擇性培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)不需要特定的培養(yǎng)基，不需要嚴(yán)格的外界環(huán)境條件(3)生物導(dǎo)彈(4)不會(huì)卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀(5)D(6)C單克隆抗體制備過程分析3關(guān)于下面制備單克隆抗體過程示意圖的敘述，不正確的是()A表示已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的B促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)C中的篩選是通過抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的D可以無限增殖解析：已免疫的B淋巴細(xì)胞可以從小鼠的脾臟中提取，也可以從血漿中提取，骨髓瘤細(xì)胞是從小鼠的骨髓中提取的。單克隆抗體是利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞得到的，融合方法可以用化學(xué)方法聚乙二醇，生物方法滅活的病毒等。如果要篩選能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群，可以通過檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)，如果有反應(yīng)說明產(chǎn)生了抗體。融合細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn)，既能無限增殖又能產(chǎn)生單一抗體。答案：A42019·寧夏育才中學(xué)模擬甲型流感(H1N1)病毒在世界各地大面積蔓延，有些國家還出現(xiàn)了死亡病例?？茖W(xué)家已分離出甲型H1N1病毒(一種RNA病毒)。某制藥廠根據(jù)下面流程圖生產(chǎn)預(yù)防和治療甲型流感的抗體，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題。(1)進(jìn)行過程a之前，必須對(duì)小鼠注射_，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。若細(xì)胞甲是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則細(xì)胞乙是從小鼠體內(nèi)提取的_細(xì)胞。(2)促進(jìn)b過程常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是_。假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成_種類型的細(xì)胞丙，因此需要特定的選擇培養(yǎng)基篩選出_細(xì)胞用于培養(yǎng)。選出此細(xì)胞后，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。(3)理論上，注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期具有對(duì)甲型流感的免疫能力，試分析原因_(至少寫出兩點(diǎn))。解析：(1)在單克隆抗體的制備過程中，先要對(duì)小鼠進(jìn)行抗原注射，即用滅活的甲型流感(H1N1)病毒注射，使得小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，提取出來的細(xì)胞乙是已經(jīng)免疫的B細(xì)胞，即漿細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合，形成雜交瘤細(xì)胞。(2)b過程是誘導(dǎo)漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過程，常用PEG進(jìn)行誘導(dǎo)，一共可以形成三種兩兩融合的細(xì)胞，其中只有雜交瘤細(xì)胞是符合要求的，所以需要用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。選出此細(xì)胞后，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。(3)抗體在人體內(nèi)存留時(shí)間較短，且H1N1病毒是RNA病毒，容易發(fā)生變異，所以注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期具有對(duì)甲型流感的免疫能力。答案：(1)滅活的甲型流感(H1N1)病毒B淋巴(2)聚乙二醇三雜交瘤抗體(3)抗體存留時(shí)間較短、H1N1病毒變異頻繁課堂總結(jié)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)答題必備1植物組織培養(yǎng)的過程主要包括脫分化和再分化兩個(gè)階段，脫分化的結(jié)果是形成愈傷組織，再分化的結(jié)果是形成根和芽。2植物體細(xì)胞雜交需要用酶解法制備原生質(zhì)體，所用的酶包括纖維素酶和果膠酶。3無論是植物體細(xì)胞雜交還是動(dòng)物細(xì)胞融合，都需要誘導(dǎo)。4植物組織培養(yǎng)需要各種營養(yǎng)成分和植物激素，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)也需要各種營養(yǎng)成分及血清。5植物體細(xì)胞雜交可用于作物育種，動(dòng)物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。6產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，它既能產(chǎn)生單克隆抗體又能無限增殖。17