（江蘇專用）2019高考生物二輪復習 專題十一 生物技術實踐 考點32 酶的應用、DNA的粗提取與鑒定課件.ppt

考點32酶的應用、DNA的粗提取與鑒定,第一篇專題十一生物技術實踐,靜悟提綱,1.構建酶的應用網絡,核心點撥,(1)直接使用酶、固定化酶和固定化細胞的比較,(2)制備固定化酵母菌細胞的2點說明 實驗注意事項 a.海藻酸鈉溶化時要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊。 b.將溶化好的海藻酸鈉溶液先冷卻至室溫，再與酵母菌細胞混合，避免高溫殺死酵母菌細胞。 c.制備固定化酵母菌細胞時，應將配制好的混合液用注射器緩慢滴加到CaC12溶液中，而不是注射，以免影響凝膠珠的形成。 海藻酸鈉溶液的濃度對包埋酵母菌細胞數量的影響 a.濃度過高，將很難形成凝膠珠。 b.濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母菌細胞的數量少。,2.DNA的粗提取與鑒定操作流程 材料的選取：選用DNA含量相對較高的生物組織 破碎細胞(以雞血為例)：雞血細胞加蒸餾水用玻璃棒 攪拌用紗布過濾收集濾液 去除雜質：利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過控制 NaCl溶液的濃度去除雜質 ,DNA的析出：將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的體 積分數為95%的酒精溶液 DNA的鑒定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑，混合均勻后將試管 置于沸水中加熱5 min，溶液變成藍色,DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、4、4”,題組特訓,題組一酶的應用,1,2,3,4,5,1.(2018江蘇七市三模)下表是某校興趣小組以某品牌洗衣粉為材料進行的實驗探究，相關敘述正確的是(多選),A.各組實驗中洗滌物、水量相同可防止無關變量差異影響實驗結果 B.本研究的課題之一是探究某品牌加酶洗衣粉的最適洗滌溫度 C.在觀察污漬是否洗凈時，要先將洗滌物用清水漂洗幾次，晾干后再觀察 D.實驗結果表明添加酶制劑和適當升高洗滌溫度有利于提高去污效果,解析,1,2,3,4,5,答案,解析分析表格信息可知，該實驗的自變量為洗滌溫度、加酶洗衣粉和普通洗衣粉，其他變量如水量、洗滌物等為無關變量，無關變量的變化會影響實驗結果，A正確，B錯誤； 洗滌物用清水漂洗后可洗去附著在洗滌物上的污漬，晾干后更易觀察比較，C正確； 從表中信息可知添加酶制劑和適當升高洗滌溫度有利于提高去污效果，D正確。,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,2.(2018江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)三模)下列關于酶制劑和固定化酵母細胞的敘述，正確的是 A.從酶的固定方式看，吸附法比交聯法對酶活性影響大 B.可用海藻酸鈉包埋消化酶制成多酶片用于緩解消化不良癥狀 C.將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗，主要目的是防止雜菌污染 D.探究不同加酶洗衣粉洗滌效果實驗中，水溫和浸泡時間都屬于無關 變量,解析,答案,解析交聯法是將酶相互連接起來，而吸附法是將酶吸附在載體表面上，可見交聯法對酶活性影響較大，A錯誤； 消化酶分子較小，易從包埋材料中漏出，因此一般不用包埋法固定消化酶，B錯誤； 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗，主要目的是洗去CaCl2，C錯誤； 探究不同加酶洗衣粉洗滌效果實驗中，不同加酶洗衣粉是實驗的自變量，而水溫和浸泡時間等都屬于無關變量，D正確。,1,2,3,4,5,3.(2018南通考前卷)某科研小組采用80 水浴溶化海藻酸鈉，固定黑曲霉孢子(含-葡萄糖苷酶)，并進行相關催化實驗，請分析回答問題： (1)此實驗過程中采用80 水浴代替小火或者間斷加熱法溶化海藻酸鈉，其優(yōu)點是_ _。溶化的海藻酸鈉加入黑曲霉孢子懸浮液前一定要進行_處理，海藻酸鈉的最終質量分數需控制在3%，原因是_ _。,1,2,3,4,5,答案,解析,80 水浴加熱能準確控制溫度，溶化過程不會出現焦糊，且溶化時間短,冷卻,海藻酸鈉濃度太高,不易形成凝膠珠，濃度太低包埋的黑曲霉孢子少,解析此實驗過程中采用80 水浴代替小火或者間斷加熱法溶化海藻酸鈉，其優(yōu)點是80 水浴加熱能準確控制溫度，溶化過程不會出現焦糊，且溶化時間短。溶化的海藻酸鈉加入黑曲霉孢子懸浮液前一定要進行冷卻處理，以免殺死黑曲霉孢子。海藻酸鈉的最終質量分數需控制在3%的原因是海藻酸鈉濃度太高不易形成凝膠珠，濃度太低包埋的黑曲霉孢子少。,1,2,3,4,5,(2)實驗過程中，初形成的凝膠珠放在CaCl2溶液中靜置30 min，目的是_。,形成穩(wěn)定的網狀凝膠結構,解析實驗過程中，初形成的凝膠珠放在CaCl2溶液中靜置30 min的目的是形成穩(wěn)定的網狀凝膠結構。,答案,解析,1,2,3,4,5,(3)-葡萄糖苷酶能催化大豆苷水解為大豆苷元，pH和溫度對游離孢子和固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶活性影響的結果如圖表所示，由圖表可知：研究pH和溫度對葡萄糖苷酶活性影響時，溫度和pH應分別控制為_、_；與游離孢子相比，固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶的pH適宜范圍_，熱穩(wěn)定性_。,30 ,4.8,增大,提高,答案,1,2,3,4,5,解析,1,2,3,4,5,解析分析表格可知，當處理溫度為30 時，游離孢子和固定化凝膠珠的轉化率均最高，隨溫度的升高，游離孢子的轉化率降低的幅度較固定化凝膠珠的轉化率降低的幅度大；分析曲線圖可知，當pH為4.8時，游離孢子和固定化凝膠珠的轉化率均最高，pH高于或低于4.8時，游離孢子的轉化率降低的幅度較固定化凝膠珠的轉化率降低的幅度大?？梢?，研究pH和溫度對葡萄糖苷酶活性影響時，溫度和pH應分別控制為30 、4.8。與游離孢子相比，固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶的pH適宜范圍增大，熱穩(wěn)定性提高。,1,2,3,4,5,題組二DNA技術 4.某同學用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗，下列操作錯誤的是 A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱,1,2,3,4,5,解析破碎植物細胞時，加入洗滌劑后，動作要輕緩、柔和，否則容易產生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，A錯誤。,解析,答案,5.某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關探究活動，具體步驟如下。 材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 、另一組置于20 條件下保存24 h。 DNA粗提取：第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。 第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分數為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。,1,2,3,4,5,第三步：取6支試管，分別加入等量的質量濃度為2 molL1 NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水浴中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結果(如表)。,注：“”越多表示顏色越深。,1,2,3,4,5,分析上述實驗過程，回答下面的問題： (1)該探究性實驗的課題名稱是：_ _。,探究不同材料和不同保存溫度對DNA,提取量的影響,解析由表格可知，該實驗的自變量是不同材料和不同保存溫度，因此該探究性實驗課題的名稱是探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。,解析,答案,1,2,3,4,5,(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少_。,DNA斷裂,解析第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少DNA斷裂。,解析,答案,1,2,3,4,5,(3)表中的顏色為_色，顏色的深淺代表了_。,藍,DNA含量的多少,解析在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。因此，表中的顏色應該為藍色，顏色的深淺代表DNA含量的多少。,解析,答案,1,2,3,4,5,(4)DNA檢測時需在沸水浴中加熱的目的是_，同時說明DNA對高溫有較強的_。,加速顏色反應,耐受性,解析DNA檢測時需在沸水浴中加熱的目的是加速顏色反應，同時說明DNA對高溫有較強的耐受性。,解析,答案,1,2,3,4,5,(5)根據實驗結果，得出結論并分析。 結論1：與20 相比，相同實驗材料在20 條件下保存，DNA的提取量較多。 結論2：_ _。,等質量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多,解析根據實驗結果可知：等質量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃中提取的DNA量最多。,解析,答案,1,2,3,4,5,針對結論1，請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲 _。,低溫抑制了相關酶的活性，DNA降,解速度較慢,解析因為低溫抑制了相關酶的活性，使DNA降解速度減慢，所以與20 相比，相同實驗材料在20 條件下保存，DNA的提取量較多。,解析,答案,1,2,3,4,5,(6)氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度，依據氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎上繼續(xù)操作的步驟是：_ _，然后用體積分數為95%的冷酒精溶液使DNA析出。,將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液,解析氯仿密度大于水，能使蛋白質變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小，所以為了進一步提高DNA純度，可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液，然后用體積分數為95%的冷酒精溶液使DNA析出。,解析,答案,1,2,3,4,5,