皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

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1、皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)2.3.6.1 目的 檢測消毒劑重復(fù)接觸后,實(shí)驗(yàn)動物產(chǎn)生皮膚變態(tài)反應(yīng)的可能性及其強(qiáng)度。2.3.6.2 實(shí)驗(yàn)動物 選用皮膚完好的健康白色豚鼠,雌雄各半,體重 200g300g。2.3.6.3 試驗(yàn)分組 將豚鼠隨機(jī)分為試驗(yàn)組、陰性對照組和陽性對照組,每組動物至少 16 只。2.3.6.4 操作程序 (1)對試驗(yàn)組豚鼠,給予受試物誘導(dǎo)和激發(fā)處理。陽性對照組給予陽性致敏物(如:2,4-二硝基氯苯)誘導(dǎo)和激發(fā)處理。陰性對照組僅給以受試物激發(fā)處理。(2)誘導(dǎo)處理濃度允許引起皮膚輕度刺激反應(yīng)。激發(fā)濃度低于誘導(dǎo)濃度,不得引起原發(fā)性刺激反應(yīng)。如果原液不引起皮膚刺激反應(yīng),誘導(dǎo)和激發(fā)

2、均使用原液。(3)于試驗(yàn)前 24h 將豚鼠背部左側(cè) 3cm3cm 范圍內(nèi)去毛。取誘導(dǎo)濃度的消毒劑溶液(或原液)0.5ml(g),直接涂在 2cm2cm 左側(cè)去毛皮膚上或滴于同樣大小的 2 層4 層紗布上,再將其敷貼在左側(cè)去毛區(qū)。用一層無刺激塑料膜或油紙復(fù)蓋,再以無刺激膠布固定,持續(xù) 6h。第 7d 和第 14d 以同樣方法重復(fù)一次。(4)在末次誘導(dǎo)后 14d,將激發(fā)濃度的消毒劑溶液 0.5ml(g)直接涂在 2cm2cm 右側(cè)脫毛皮膚上或滴于同樣大小的 2 層4 層紗布上,敷貼于豚鼠背部右側(cè) 3cm3cm 去毛區(qū)。然后,用一層塑料膜或油紙和無刺激膠布固定,6h 后將敷貼的受試物洗去。24h 和

3、 48h 后觀察皮膚反應(yīng),按表 2-17 對皮膚反應(yīng)評分。(5)實(shí)驗(yàn)室開展皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)初期,或使用新的動物種屬或品系時(shí),需同時(shí)設(shè)陽性對照組,陽性對照物可使用 2,4-二硝基氯代苯。為保證試驗(yàn)方法的可靠性,在進(jìn)行該類試驗(yàn)時(shí),每隔半年應(yīng)使用陽性對照物檢查一次。若檢測報(bào)告中需用非本次陽性對照組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)時(shí),應(yīng)注明其實(shí)驗(yàn)日期。陽性對照組的操作程序同試驗(yàn)組,以陽性致敏物替代受試物。(6)陰性對照組,僅對動物給予受試物的激發(fā)接觸,每次試驗(yàn)必須設(shè)置。2.3.6.5 評價(jià)規(guī)定 化學(xué)物質(zhì)引起的過敏性接觸性皮炎,屬遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。對于動物,僅見皮膚紅斑和水腫。根據(jù)表 2-18 標(biāo)準(zhǔn),將出現(xiàn)皮膚反應(yīng)(評分1)的動物數(shù)除以該組實(shí)驗(yàn)動物數(shù),求得致敏率(%),按表 2-19 評定致敏強(qiáng)度。表2-18 皮膚反應(yīng)的評分標(biāo)準(zhǔn) 皮膚反應(yīng) 評分 A 紅斑形成:無紅斑 0 輕微紅斑 1 中度紅斑 2 嚴(yán)重紅斑 3 水腫性紅斑 4 B 水腫形成:無水腫 0 輕度水腫 1 中度水腫 2 嚴(yán)重水腫 3 表 2-19 致敏強(qiáng)度分級標(biāo)準(zhǔn) 致敏率(%)致敏強(qiáng)度 08 極輕度 928 輕度 2964 中度 6580 強(qiáng)度 81100 極強(qiáng)度 注:致敏率為 0%時(shí),可判為未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。

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