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1、第五章 第一節(jié) 降低反應(yīng)活化能的酶
第五章 細(xì)胞的能量供應(yīng)和利用
第一節(jié) 降低反應(yīng)活化能的酶
一、細(xì)胞代謝與酶
1、細(xì)胞代謝的概念:細(xì)胞內(nèi)每時(shí)每刻進(jìn)行著許多化學(xué)反應(yīng),統(tǒng)稱(chēng)為細(xì)胞代謝。
細(xì)胞代謝的意義:細(xì)胞代謝是生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。
2、活化能:分子從常態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槿菀装l(fā)生化學(xué)反應(yīng)的活躍狀態(tài)所需要的能量。
3、酶在細(xì)胞代謝中的作用:降低化學(xué)反應(yīng)的活化能 。
4、使化學(xué)反應(yīng)加快的方法:
加熱:通過(guò)提高分子的能量來(lái)加快反應(yīng)速度;
加催化劑:通過(guò)降低化學(xué)反應(yīng)的活化能來(lái)加快反應(yīng)速度;同無(wú)機(jī)催化相比,酶能更顯著地降低化學(xué)反應(yīng)的活化能,因而催化效率更高。
5、酶的本
2、質(zhì): 關(guān)于酶的本質(zhì)的探索:
巴斯德之前,人們認(rèn)為:發(fā)酵是純化學(xué)反應(yīng),與生命活動(dòng)無(wú)關(guān)
巴斯德的觀點(diǎn):發(fā)酵與活細(xì)胞有關(guān),發(fā)酵是整個(gè)細(xì)胞而不是細(xì)胞中某些物質(zhì)起作用。
李比希的觀點(diǎn):引起發(fā)酵的是細(xì)胞中的某些物質(zhì),但這些物質(zhì)只有在酵母細(xì)胞死亡并裂解后才能發(fā)揮作用;
畢希納的觀點(diǎn):酵母細(xì)胞中的某些物質(zhì)能夠在酵母細(xì)胞破碎后繼續(xù)起催化作用,就像在活酵母細(xì)胞中一樣;
薩姆納提取酶,并證明酶是蛋白質(zhì);
切郝、奧特曼發(fā)現(xiàn):少數(shù)RNA也具有生物催化功能;
6、酶的概念:酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機(jī)物,絕大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA。
來(lái)源
一般來(lái)說(shuō),活細(xì)胞都能產(chǎn)生酶
化學(xué)本質(zhì)
絕大多數(shù)酶是
3、蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA
合成原料
氨基酸或核糖核苷酸
合成場(chǎng)所
主要是核糖體,也可在細(xì)胞核內(nèi)合成
生理作用
生物催化作用
作用機(jī)理
降低化學(xué)反應(yīng)的活化能
作用部位
生物體內(nèi)(細(xì)胞內(nèi)、外)、生物體外
7、酶的特性:
高效性:酶的催化效率是無(wú)機(jī)催化劑的107-1013 倍。
專(zhuān)一性:每一種酶只能催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)
酶的作用條件較溫和:酶在最適宜的溫度和PH條件下,活性最高。溫度過(guò)高,過(guò)酸或者過(guò)堿都會(huì)使酶變性失活,并且不可恢復(fù);低溫會(huì)使酶暫時(shí)失活,但適當(dāng)升溫活性可恢復(fù)。
二、影響酶促反應(yīng)的因素(難點(diǎn))
1、 底物濃度(反應(yīng)物濃度);酶濃度
2、 PH值:過(guò)酸
4、、過(guò)堿使酶失活
3、 溫度:高溫使酶失活。低溫降低酶的活性,在適宜溫度下酶活性可以恢復(fù)。
與酶有關(guān)的曲線(xiàn)
1、表示酶高效性的曲線(xiàn)
(1)催化劑可加快化學(xué)反應(yīng)速率,與無(wú)機(jī)催化劑相比,酶的催化效率更高。
(2)酶能縮短達(dá)到化學(xué)平衡所需時(shí)間,不改變化學(xué)反應(yīng)平衡點(diǎn)
2、表示酶具有專(zhuān)一性的曲線(xiàn)
(1)在A反應(yīng)物中加入酶A,反應(yīng)速率較未加酶時(shí)明顯加快,說(shuō)明酶A催化底物A參加反應(yīng)。
(2)在A反應(yīng)物中加入酶B,反應(yīng)速率和未加酶時(shí)相同,說(shuō)明酶B不催化底物A參加反應(yīng)。
3、影響酶活性的曲線(xiàn)
(1)上述兩條曲線(xiàn)的含義:在一定溫度(pH)范圍內(nèi),隨溫度(pH)的升高,酶的活性增強(qiáng);最
5、適溫度(pH)時(shí),酶的活性達(dá)到最強(qiáng);超過(guò)這一范圍酶的活性逐漸減弱。
(2)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫都破壞酶的空間結(jié)構(gòu),使酶永久性失活;而低溫只是抑制酶的活性,溫度升高可恢復(fù)活性。
3、底物濃度和酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)的影響
酶促反
應(yīng)
速
度
酶濃度
(底物量一定)
(1)底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)的影響(酶的量一定,其他條件適宜):在底物濃度較低時(shí),反應(yīng)速率隨著底物濃度增加而加快,反應(yīng)速率與底物濃度幾乎成正比;在底物濃度很大時(shí),且達(dá)到一定限度時(shí),反應(yīng)速率就達(dá)到一個(gè)最大值,此時(shí)受到酶的數(shù)量和活性的影響,即便再增加底物濃度反應(yīng)速率不變。
(2)酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)的影響:在底物足量的失活,其他條
6、件適宜的情況下,反應(yīng)系統(tǒng)不含有抑制酶活性的物質(zhì)及其他不利于酶發(fā)揮作用的因素時(shí),酶促反應(yīng)的速率與酶的濃度成正比;但底物量一定時(shí),受到底物量的影響,即便酶的濃度增加,反應(yīng)速率不變。
三、實(shí)驗(yàn)
控制變量法:變量、自變量(實(shí)驗(yàn)中人為控制改變的變量)、因變量(隨自變量而變化的變量)、無(wú)關(guān)變量的定義。
對(duì)照實(shí)驗(yàn):除一個(gè)因素外,其余因素都保持不變的實(shí)驗(yàn)。通常設(shè)置對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循的原則:對(duì)照原則、單一變量原則、等量原則。
1. 比較過(guò)氧化氫酶在不同條件下的分解
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
⑴由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過(guò)氧化氫酶,會(huì)影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性.
⑵為
7、何要用新鮮的肝臟?因?yàn)檫^(guò)氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過(guò)久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低。
⑶為何要有肝臟的研磨液?研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來(lái),增加酶與底物的接觸面積。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:酶具有催化作用,并且催化效率要比無(wú)機(jī)催化劑Fe3+高得多。
2. 驗(yàn)證唾液淀粉酶專(zhuān)一性的實(shí)驗(yàn)
已知:⑴ 滴加斐林試劑水浴后若出現(xiàn)磚紅色沉淀,證明還原糖的存在;
⑵ 唾液淀粉酶將淀粉水解成麥芽糖,但不能水解蔗糖成為葡萄糖和果糖。麥芽糖、果糖、葡萄糖具有還原性,淀粉和蔗糖不具有還原性。
問(wèn):在淀粉酶分解淀粉和蔗糖的實(shí)驗(yàn)中鑒定試劑只能用斐林試劑而不能用碘液?
答:⑴淀粉、蔗
8、糖和斐林試劑沸水浴都無(wú)磚紅色沉淀,淀粉、蔗糖的水解產(chǎn)物和斐林試劑沸水浴都有磚紅色沉淀,所以斐林試劑檢測(cè),只要有磚紅色沉淀就是發(fā)生水解的試管。所以用斐林試劑檢測(cè)既能確定淀粉有無(wú)水解,又能確定蔗糖有無(wú)水解。
⑵.因蔗糖和蔗糖的水解產(chǎn)物和碘液都不變藍(lán),所以用碘液不能確定蔗糖有無(wú)水解。
3. 影響酶活性的條件(要求用控制變量法,自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn))
建議用淀粉酶探究溫度對(duì)酶活性的影響,用過(guò)氧化氫酶探究PH對(duì)酶活性的影響。
探究溫度對(duì)酶活性的影響(注意操作順序不能錯(cuò))
實(shí)驗(yàn)原理:
1.淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過(guò)程中,不同階段的中間產(chǎn)
9、物遇碘后,會(huì)呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約600C
步驟順序
試管1
試管1’
試管2
試管2’
試管3
試管3’
3%淀粉液
2ml
2ml
2ml
2%α淀粉酶液
2ml
2ml
2ml
溫度預(yù)處理
0℃
60℃
100℃
反應(yīng)
混合
混合
混合
恒溫時(shí)間
5分鐘
5分鐘
5分鐘
加碘
1滴
1滴
1滴
預(yù)期現(xiàn)象
藍(lán)色
不變藍(lán)
藍(lán)色
問(wèn):在溫度影響酶的實(shí)驗(yàn)中鑒定試劑只能用碘液而不能用斐林試劑?
答:因?yàn)橛渺沉衷噭┬杷〖訜?,兩次加熱,不是單變量了,也?huì)對(duì)酶的活性產(chǎn)生影響,使實(shí)驗(yàn)驗(yàn)結(jié)果不可靠
探究PH值對(duì)酶活性的影響(注意操作順序不能錯(cuò))
⑴ 用過(guò)氧化氫酶探究PH對(duì)酶活性的影響
步驟順序
試管1
試管2
試管3
20%肝臟研磨液
1滴
1滴
1滴
調(diào)節(jié)pH
5%HCl 2ml
蒸餾水2ml
5%NaOH 2ml
2% H2O2液
2ml
2ml
2ml
預(yù)期現(xiàn)象
無(wú)氣泡
大量氣泡
無(wú)氣泡
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