人教版高中生物選修一專題5課題2《多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段》優(yōu)秀課件共27張PPT)

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1、專題五專題五 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)ATGCAGCT5端端3端端5端端3端端-OH端為端為3磷酸基團(tuán)的末端為磷酸基團(tuán)的末端為5。體內(nèi)DNA復(fù)制DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)形成 能否在體外模擬體內(nèi)能否在體外模擬體內(nèi)DNA復(fù)制條件,進(jìn)行復(fù)制條件,進(jìn)行DNA擴(kuò)增?擴(kuò)增?1、 PCRPCR技術(shù)含義技術(shù)含義2 2、原理、原理 :DNADNA的半保留復(fù)制的半保留復(fù)制 DNADNA的熱變性的熱變性一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)(一)(一)PCRPCR原理:閱讀課本原理:閱讀課本P58-59P58-59 原料:模板:能量:3 3、PCRPCR反應(yīng)的條件反應(yīng)的條件4PCR 4PCR 循環(huán)過(guò)程循環(huán)過(guò)程 :

2、第一步加熱變性第一步加熱變性: :雙鏈雙鏈DNADNA解聚成為單鏈解聚成為單鏈PCR PCR 循環(huán)第二步循環(huán)第二步 :引物與模板引物與模板DNADNA單鏈單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合模板序列模板序列模板序列模板序列引物引物引物引物553 3555533553333Taq DNATaq DNA聚合酶聚合酶PCR PCR 循環(huán)第三步循環(huán)第三步 :引物延伸引物延伸: :合成新的合成新的DNADNA鏈鏈第第1 1個(gè)個(gè) PCR PCR 循環(huán)完成后循環(huán)完成后 :得到得到兩個(gè)兩個(gè)拷貝的靶序列拷貝的靶序列循環(huán)循環(huán)次數(shù)次數(shù)DNADNA數(shù)量數(shù)量1 12 22 24 43 38 820201,048,5

3、761,048,57630301,073,741,8241,073,741,8243030次循環(huán)后擴(kuò)增的數(shù)量次循環(huán)后擴(kuò)增的數(shù)量5 5、PCR PCR 循環(huán)的結(jié)果循環(huán)的結(jié)果 DNADNA聚合酶只能特異性地復(fù)制處于聚合酶只能特異性地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的兩個(gè)引物之間的DNADNA序列序列,使這段固,使這段固定長(zhǎng)度的序列定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增呈指數(shù)擴(kuò)增。從第二輪循環(huán)開(kāi)始,從第二輪循環(huán)開(kāi)始,上一次循環(huán)的上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng),并且由,并且由引引物物延伸而成的延伸而成的DNADNA單鏈會(huì)與引物單鏈會(huì)與引物(延伸而成的延伸而成的DNA單鏈)單鏈)結(jié)合結(jié)合,進(jìn)行,進(jìn)行DNA

4、DNA的延伸。的延伸。填空填空題題1.PCR儀加熱使(儀加熱使( )變性)變性, 復(fù)性使引物與模復(fù)性使引物與模板板DNA( ),延伸需將反應(yīng)溫度升至中溫延伸需將反應(yīng)溫度升至中溫( ),在(在( )的作用下)的作用下,以(以( )為原料合成新鏈。為原料合成新鏈。2.PCR經(jīng)(經(jīng)( )三個(gè)階段為一個(gè))三個(gè)階段為一個(gè)循環(huán)。循環(huán)。DNA互補(bǔ)互補(bǔ)72Tap酶酶4種種dNTP變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸PCR的基本原理是什么?用的基本原理是什么?用PCR擴(kuò)增某一基因,擴(kuò)增某一基因,必須預(yù)先得到什么樣的信息?必須預(yù)先得到什么樣的信息?。簡(jiǎn)答簡(jiǎn)答題題2006.廣東廣東 下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述,正確的是

5、(下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述,正確的是( )A基因治療就是把缺陷基因誘變成正?;蚧蛑委熅褪前讶毕莼蛘T變成正?;駼基因診斷的基本原理是基因診斷的基本原理是DNA分子雜交分子雜交C一種基因探針能檢測(cè)水體中的各種病毒一種基因探針能檢測(cè)水體中的各種病毒D原核基因不能用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良原核基因不能用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良B解析:解析: 基因治療是把健康的外源基因?qū)氲交蛑委熓前呀】档耐庠椿驅(qū)氲接腥毕莼虻募?xì)胞中;一種基因探針能檢有缺陷基因的細(xì)胞中;一種基因探針能檢測(cè)相應(yīng)的某一種特定的病毒;原核基因可測(cè)相應(yīng)的某一種特定的病毒;原核基因可以用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良,例如用以用來(lái)進(jìn)行真核生物的遺傳改良,例如用蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因改良棉花。蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因改良棉花。

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