2019-2020年高考生物 第43講 微生物的培養(yǎng)與應用限時規(guī)范特訓.doc

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2019-2020年高考生物 第43講 微生物的培養(yǎng)與應用限時規(guī)范特訓 1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作中，不正確的是(　　) A．操作流程是計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板 B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙 C．滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂，并使其溶解 D．將培養(yǎng)基冷卻到約50℃時，在酒精燈火焰附近倒平板 解析：瓊脂加入到牛肉膏蛋白胨溶液中，溶化后再滅菌。 答案：C 2．平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列描述正確的是(　　) A．都要將菌液進行一系列的梯度稀釋 B．平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作 C．稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng) D．都會在培養(yǎng)基表面形成單個菌落 解析：平板劃線法不需要進行梯度稀釋；稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液滴加到固體培養(yǎng)基的表面；平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 答案：D 3．某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是(　　) A．利用平板劃線法對細菌進行計數(shù) B．用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選 C．采用稀釋涂布平板法分離菌種 D．稱取和稀釋土壤樣品時應在火焰旁 解析：分離細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，但平板劃線法不能對細菌進行計數(shù)；篩選能分解石油的細菌，要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源； 篩選細菌的整個操作過程都需要在無菌條件下進行，所以應在火焰旁進行。 答案：A 4．在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時，甲組實驗用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，乙組實驗的培養(yǎng)基中的氮源除尿素外還含硝酸鹽，其他成分都相同，在相同條件下操作，培養(yǎng)觀察，則乙組實驗屬于(　　) A．空白對照 　　　　　　 B．標準對照 C．相互對照 D．條件對照 解析：乙組和甲組實驗的培養(yǎng)條件不同，形成了條件對照。 答案：D 5．某同學學習完微生物的實驗室培養(yǎng)后，要利用所學知識研究水中微生物的情況。該同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關的問題： (1)該同學所用培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌培養(yǎng)提供了________和________。 (2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是________。 (3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)、培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種________作為對照進行實驗。 解析：蛋白胨是源于動物的原料，含有維生素、糖和有機氮等營養(yǎng)物質，在培養(yǎng)基中主要作為氮源。實驗室的滅菌方法一般有：灼燒滅菌(適用于接種工具的滅菌)、干熱滅菌(適用于耐高溫的、需要保持干燥的物品的滅菌)、高壓蒸汽滅菌(適用于培養(yǎng)基等物品的滅菌)。要想使微生物快速地繁殖，就要置于適宜的條件下，特別是適宜的溫度下，所以要置于恒溫培養(yǎng)箱中。對照實驗就是要設置一個用無菌水接種的平板進行觀察比較。 答案：(1)氮源 　 碳源 　 (2)高壓蒸汽滅菌 　 (3)恒溫培養(yǎng)箱 　無菌水 6．大腸桿菌是“明星菌”，在生物技術上常用作“工程菌”。某生物小組的同學利用實驗室提供的某品系大腸桿菌及其他必需材料，對該品系大腸桿菌進行了培養(yǎng)、計數(shù)。 (1)大腸桿菌在生長過程中對各種營養(yǎng)成分所需的量不同，故制備培養(yǎng)基時各營養(yǎng)成分要有合適的________。 (2)在制備固體培養(yǎng)基進行倒平板操作時，平板冷凝后，甲同學將平板倒置，其原因是____________________________________。 (3)乙同學采用平板劃線法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選，在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，其目的是_____________________。 (4)丙、丁同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)。在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結果：丙同學在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；丁同學在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，然后取其平均值163作為統(tǒng)計結果。請評價這兩位同學的實驗結果的有效性： ①丙同學的結果________，原因是________________。 ②丁同學的結果________，原因是________________。 (5)戊同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落，由此他判斷該品系大腸桿菌被污染了。他的判斷是否確切？為什么？ ________________________________________________________________________________________________________________。 解析：(1)從培養(yǎng)基制備的重要原則入手分析，制備培養(yǎng)基時要注意控制各種營養(yǎng)物質的比例。(2)平板冷凝后培養(yǎng)皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(3)灼燒接種環(huán)的目的是殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種，以免對實驗結果造成影響。(4)實驗時，至少要涂布3個平板作為重復組，才能增強實驗的說服力和準確性，丁同學雖然涂布了3個平板，但其中一個平板上的菌落數(shù)與另外兩個平板上的菌落數(shù)相差甚遠，故不能取這3個平板上的菌落的平均值作為統(tǒng)計結果。(5)判斷雜菌的來源時，只有排除其他可能的情況才能得出確切的結論。 答案：(1)比例 　 (2)培養(yǎng)皿蓋上會凝結有水珠，平板倒置可防止水珠落入培養(yǎng)皿中而造成污染，還可使培養(yǎng)皿表面的水分更好地揮發(fā) 　 (3)殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種　 (4)①不合理　 沒有設置重復組，結果不具有說服力　 ②不合理 　 一個平板上的計數(shù)結果與另外兩個相差太遠(或在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，或只簡單地計算了平均值)　(5)不確切。因為不能確定雜菌是來自培養(yǎng)基還是來自培養(yǎng)過程 7．從自然菌樣中篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適宜的環(huán)境中采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。篩選嗜鹽菌的菌樣應從________環(huán)境中采集。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇________的培養(yǎng)基，并在________條件下培養(yǎng)。 (3)如圖甲、乙是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。 獲得圖甲效果的接種方法是______________，獲得圖乙效果的接種方法是____________。 (4)配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進行________，接種前要進行________。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在________條件下進行。 解析：采集菌樣時必須考慮所分離的微生物的生理特性和相應的土壤特點。培養(yǎng)微生物時則要考慮它對營養(yǎng)的需要和對氧氣、pH的不同要求。分析圖甲和圖乙不難得出相應的接種方法。配制培養(yǎng)基的步驟包括計算、稱量、溶化、調節(jié)pH、分裝、包扎、滅菌、倒平板等。 答案：(1)海灘等高鹽 　(2)以淀粉為唯一碳源 　高溫 (3)稀釋涂布平板法 　 平板劃線法 　 (4)pH調整　高壓蒸汽滅菌 　 無菌 8．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題： (1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？ _____________________________________________________， 理由是_______________________________________________。 (2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是______________，這種培養(yǎng)基屬于________________培養(yǎng)基。 (3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的________和________，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是____________________________________________________。 (4)轉為固體培養(yǎng)時，常采用______________________(方法)接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。 (5)下列材料或用具中：①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實驗操作者的雙手。 需要滅菌的是________；需要消毒的是________。(填序號) (6)在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的實驗結果產(chǎn)生的原因可能有________(填序號)。 ①由于土樣不同 　 ②由于培養(yǎng)基污染　 ③由于操作失誤 　 ④沒有設置對照 (7)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________，細菌合成的________將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變紅色。 解析：(1)微生物與植物生長所需的營養(yǎng)不完全相同，培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不能用于組織培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中加入尿素作唯一氮源，分解尿素的微生物可生長，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自尿素和葡萄糖。實驗需要振蕩培養(yǎng)增加溶氧量。(4)在固體培養(yǎng)基上接種用稀釋涂布平板法或平板劃線法。(5)滅菌要徹底消滅微生物及其芽孢，如①或②。實驗操作者的雙手要消毒。(6)A同學從培養(yǎng)基上篩選出的菌落數(shù)與其他組相比偏多，原因可能是土樣不同、培養(yǎng)基污染、操作失誤等，與是否設置對照無關。(7)由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑將變紅。 答案：(1)不能 　 缺少植物激素(或缺少植物需要的各種營養(yǎng)) 　(2)篩選目的菌 　 選擇 　 (3)尿素 　 葡萄糖 為目的菌提供氧氣 　 (4)稀釋涂布平板法(平板劃線法) (5)①②　 ③　 (6)①②③ 　(7)酚紅指示劑　 脲酶