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反應(yīng)類型
反應(yīng)試劑
反應(yīng)特點(diǎn)
鑒別特點(diǎn)
Feigl反應(yīng)
碳酸鈉、甲醛、鄰二硝基苯
紫色
苯、萘、菲、蒽醌全有效
無色亞甲藍(lán)
無色亞甲藍(lán)溶液
藍(lán)色
苯、萘醌
Borntr?ge反應(yīng)
堿液
紅、紫紅
主要對羥基蒽醌類
Kesting– Craven反應(yīng)
活性亞甲基試劑
(乙酰乙酸酯)
藍(lán)綠、藍(lán)紫
苯、萘醌 醌環(huán)上有未被取代位置
與金屬離子
醋酸鎂(鉛)
橙黃、橙紅、紫紅、藍(lán)色
蒽醌(a-酚羥基、鄰二酚羥基)
對亞硝基二甲基苯胺
對亞硝基-二甲基苯胺
紫、綠、藍(lán)、灰色
蒽酮
醌類化合物不同顏色反應(yīng)鑒別特點(diǎn)
2、及意義
香豆素顯色反應(yīng)的鑒別特點(diǎn)和意義
反應(yīng)類型
反應(yīng)試劑
反應(yīng)特點(diǎn)
針對結(jié)構(gòu)
鑒別意義
異羥肟酸鐵反應(yīng)
鹽酸羥胺、Fe+
紅色絡(luò)合物
內(nèi)酯結(jié)構(gòu)
內(nèi)酯環(huán)有無
三氯化鐵反應(yīng)
Fe+ Cl3溶液
藍(lán)綠色
酚羥基
酚羥基有無
Gibb’s 反應(yīng)
2,6-二氯苯醌氯亞胺(OH—)
藍(lán)色
酚羥基對位無取代
6-有無取代
判斷香豆素的C-6位是否有取代基的存在,可先水解,使其內(nèi)酯環(huán)打開生成一個新的酚羥基,然后再用Gibbs或Emerson反應(yīng)加以鑒別,如為陽性反應(yīng)表示C-6位無取代。
木脂素沒有特征性的理化檢識方法,常用的檢識方法主要是針對木脂素結(jié)構(gòu)中的功能基
3、如酚羥基、亞甲二氧基及內(nèi)酯結(jié)構(gòu)等而進(jìn)行的檢識。
1.三氯化鐵反應(yīng)——檢查酚羥基
2.Labat反應(yīng)(沒食子酸、濃硫酸)——檢查亞甲二氧基(陽性呈藍(lán)綠色)
3.Ecgrine反應(yīng)(變色酸、濃硫酸)——檢查亞甲二氧基(陽性呈藍(lán)紫色)
表6-3 黃酮類化合物的還原顯色反應(yīng)
反應(yīng)類型
鑒別特征
鑒別意義
備注
鹽酸-鎂粉反應(yīng)
黃酮、二氫黃酮
橙紅~紫紅
黃酮類特征性鑒別反應(yīng)
假陽性(花色素)
黃酮醇、二氫黃酮醇
橙紅~紫紅
四氫硼鈉
針對二氫黃酮、二氫黃酮醇
紅~紫紅
二氫黃酮類特有
鋁鹽
黃色絡(luò)合物
定性定量分析
4、
鉛鹽
黃、紅色沉淀
堿式醋酸鉛
鋯鹽
3-或5-羥基存在時
黃色鋯絡(luò)合物
鎂鹽
二氫黃酮、二氫黃酮醇
天藍(lán)色熒光
二氫黃酮鑒別
氯化鍶
鄰二酚羥基
棕黑色沉淀
鄰二酚羥基
三氯化鐵
酚羥基
酚羥基有無
硼酸顯色反應(yīng)
5-羥基黃酮及2-羥基查耳酮類
亮黃色熒光
堿劑顯色反應(yīng)
見下文
鋯鹽:在實(shí)際應(yīng)用時,通常同時使用二氯氧鋯和枸櫞酸,以判斷黃酮類化合物3-OH、5-OH的存在。若有3-OH和(或)5-OH,加二氯氧鋯顯黃色。若只有5-OH,加枸櫞酸后黃色減褪,若有3-OH,則加枸櫞酸后黃色不變,因
5、此可用于區(qū)分黃酮和黃酮醇。用于鑒別3-OH的存在。
醋酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基、4-酮基結(jié)構(gòu)的化合物反應(yīng)生成沉淀。而堿式醋酸鉛的沉淀能力要大得多,一般酚類化合物均可與其發(fā)生沉淀反應(yīng)。
堿性試劑顯色反應(yīng)
①二氫黃酮易在堿液中開環(huán),轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的異構(gòu)體查耳酮,顯橙色至黃色。
②黃酮醇類在堿液中先呈黃色,通入空氣后變?yōu)樽厣?③分子結(jié)構(gòu)中有鄰二酚羥基或3,4’-二羥基取代時,在堿液中不穩(wěn)定,易被氧化,產(chǎn)生沉淀。
強(qiáng)心苷主要顯色反應(yīng) 1)、甾體母核的顯色反應(yīng)
反應(yīng)名稱
試 劑
現(xiàn) 象
Liebermann-Burchard
醋酐-濃硫酸反應(yīng)
濃硫酸
6、-醋酐(1:20)
黃、紅、藍(lán)、紫等顏色變化,最后退色
Salkowski反應(yīng)
氯仿-濃硫酸
硫酸層顯紅色或藍(lán)色,氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)
Tschugaeff反應(yīng)
冰醋酸、乙酰氯、氯化鋅
淡紅色、紫紅色
Kahlenberg反應(yīng)
三氯化銻反應(yīng)
三氯化銻的氯仿飽和液
可用于濾紙顯色,干燥后60-70℃加熱,顯藍(lán)色、灰藍(lán)色、灰紫色等
Rosen-Heimer反應(yīng)
三氯醋酸-氯胺T反應(yīng)
25%三氯乙酸乙醇液
洋地黃毒苷元--------黃色熒光 羥基洋地黃毒苷元—亮藍(lán)色 異羥基洋地黃毒苷元—藍(lán)色
作用于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)
1. Legal反應(yīng)
2. Kedde反應(yīng)
7、
3. Raymond反應(yīng)
4. Baljet反應(yīng)
用于甲型與乙型強(qiáng)心苷的鑒別
作用于甾核
1. 醋酐-濃硫酸(L-B)反應(yīng)
2. Salkowski(氯仿-濃硫酸)反應(yīng)
3. 三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反應(yīng)
4. 三氯化銻(五氯化銻)反應(yīng)
作用于a-去氧糖
1. Keller-Kiliani(K-K)反應(yīng)
2. 對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)
3. 占噸氫醇反應(yīng)
4. 過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)
用于 I型與 II、III型強(qiáng)心苷的鑒別
圖9-3 強(qiáng)心苷的顯色反應(yīng)
按作用部位分:
8、
反應(yīng)
試劑(共同試劑堿性醇溶液)
顏色反應(yīng)
考點(diǎn)
Legal反應(yīng)
吡啶+亞硝酰鐵氰化鈉+氫氧化鈉溶液
深紅色并逐漸退去
甲型強(qiáng)心苷的特征反應(yīng),強(qiáng)心苷類的檢識,區(qū)別甲型和乙型強(qiáng)心苷。
Raymond反應(yīng)
50%乙醇+間二硝基苯+氫氧化鈉溶液
紫紅
Kedde反應(yīng)
醇+3、5-二硝基苯甲酸+氫氧化鈉溶液。
紅色或紫紅
Baljet反應(yīng)
苦味酸+氫氧化鈉醇溶液
橙色或橙紅色
2)、C-17位不飽和內(nèi)酯環(huán)的顏色反應(yīng)
甲型強(qiáng)心苷的特征反應(yīng),因?yàn)槲逶伙柡蛢?nèi)酯環(huán)上的雙鍵位移產(chǎn)生C-22活性亞甲基乙型強(qiáng)心苷為六元不飽和內(nèi)酯環(huán),故不能反應(yīng)。
3)、α-去氧糖反
9、應(yīng)
反應(yīng)
試劑
顏色變化
考點(diǎn)
Keller-Kiliani(K-K)反應(yīng)
冰醋酸、濃硫酸和三氯化鐵
醋酸層漸呈藍(lán)色
只對游離的α-去氧糖或α-去氧糖與苷元連接的強(qiáng)心苷呈色,存在假陰性。
占噸氫醇反應(yīng)
冰醋酸、濃鹽酸和占噸氫醇。
紅色
只要分子中有α-去氧糖即可呈紅色,可用于定量分析
對-二甲氨基苯甲醛反應(yīng)
對-二甲氨基苯甲醛反應(yīng)
灰紅色
過碘酸-對硝基苯胺反應(yīng)
膽汁酸的鑒別反應(yīng)
反應(yīng)
試劑
反應(yīng)現(xiàn)象
考點(diǎn)
Pettenkofer反應(yīng)
蔗糖和濃硫酸
兩液面分界處出現(xiàn)紫色環(huán)
所有的膽汁酸均呈陽性反應(yīng)
Gregory Pascoe
10、反應(yīng)
45%硫酸和0.3%糠醛65℃加熱
紫色
定量檢測膽酸
Hammarsten反應(yīng)
20%鉻酸溶液
膽酸顯紫色,鵝去氧膽酸不顯色
鑒別膽酸和鵝去氧膽酸
改良Hammarsten反應(yīng)
20%鉻酸濃鹽酸液
溶液渾濁并變黃色,放置后變紫色
去氧膽酸和鵝去氧膽酸無變化。
皂苷的顯色反應(yīng)
試劑類型
鑒別特點(diǎn)
鑒別意義
Liebermann反應(yīng)
顏色變化呈黃-紅-藍(lán)-紫-綠最后退色
醋酐-濃硫酸反應(yīng)
Liebermann-Burchard
三萜皂苷 顯紅或紫色
甾體皂苷 顯藍(lán)綠色
用于兩類皂苷的區(qū)別
三氯乙酸反應(yīng)
甾體皂苷 加熱60℃顯色紅
11、—紫
三萜皂苷 100 ℃ 顯色 紅—紫
用于兩類皂苷的區(qū)別
氯仿濃硫酸反應(yīng)
硫酸層--紅、藍(lán)色,氯仿層-綠色熒
五氯化銻反應(yīng)
(60~70加熱)藍(lán)、灰藍(lán)、灰紫色
可在濾紙上進(jìn)行
茴香醛-硫酸
甾體皂苷顯色劑
可用于兩類皂苷區(qū)別
分離含有羰基的甾體皂苷元,常用季銨鹽型氨基乙酰肼類試劑,如吉拉爾T(Girard T)或吉拉爾P(Girard P)兩種試劑。借此與不含羰基的皂苷元分離。
氨基酸的顯色反應(yīng)
試劑
反應(yīng)現(xiàn)象
考點(diǎn)
茚三酮反應(yīng)
一般顯紫色,個別顯黃色
氨氣也有反應(yīng),應(yīng)避免氨氣的干擾
蛋白質(zhì)的顯色反應(yīng)
反應(yīng)
反應(yīng)現(xiàn)象
試劑
考點(diǎn)
雙縮脲
12、反應(yīng)
紫或紫紅色
溶于堿水中,少量硫酸銅液
兩個以上的肽鍵顯陽性
表10-3 生物堿沉淀反應(yīng)類型及特點(diǎn)
反應(yīng)類型
反應(yīng)試劑
反應(yīng)特點(diǎn)
沉淀反應(yīng)
碘化鉍鉀
橘紅色至黃色無定形沉淀
沉淀反應(yīng)
碘化汞鉀
類白色沉淀
沉淀反應(yīng)
碘—碘化鉀
紅棕色沉淀
沉淀反應(yīng)
硅鎢酸試劑
淡黃或灰白色沉淀
沉淀反應(yīng)
飽和苦味酸試劑
2-4-6三硝基苯酚----黃色沉淀或結(jié)晶
沉淀反應(yīng)
雷氏銨鹽(硫氰酸鉻胺)
紅色沉淀或結(jié)晶
顯色反應(yīng)
Mac試劑(甲醛)
嗎啡顯紫紅色
顯色反應(yīng)
草酚藍(lán)、草酚綠
假陽性:蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、鞣質(zhì)等可引起假陽性。
假陰性:麻黃堿、咖啡堿、嗎啡與多數(shù)生物堿沉淀試劑不能發(fā)生沉淀反應(yīng)。
表3-2 苷的顯色反應(yīng)
反應(yīng)類型
反應(yīng)試劑
顯色
意義
Molish反應(yīng)
濃硫酸和5%α-萘酚
紫色環(huán)
檢識各種存在形式的糖和苷,鑒別苷元和苷。
菲林反應(yīng)
Cu(OH)2
磚紅色沉淀
只檢識還原糖,非還原糖和苷呈陰性。
多倫反應(yīng)
新制銀氨溶液
銀鏡
專心---專注---專業(yè)