高中生物第一輪復習 專題五 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 專題六 植物有效成分的提取課件

專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)專題六植物有效成分的提取 知識排查 考點詮解 一、DNA的粗提取與鑒定 1基本原理 (1)DNA在不同濃度的 NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/L的 NaCl溶液中的溶解度最低； (2)DNA不溶于酒精溶液； (3)DNA不被蛋白酶所水解； (4)DNA可被二苯胺染成藍色。 2方法目的方法目的溶于 NaCl溶液中并稀釋NaCl濃度為2 mol/L時，DNA溶解，而部分蛋白質(zhì)發(fā)生鹽析而生成沉淀，通過過濾可除去部分蛋白質(zhì)及不溶于 NaCl溶液的雜質(zhì)當 NaCl溶液稀釋至 0.14 mol/L時，DNA析出，過濾可除去溶于 NaCl中的部分蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)方法目的加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白質(zhì)加入冷卻酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白質(zhì)加入二苯胺，并沸水浴鑒定DNA 特點提醒：哺乳動物成熟的紅細胞中不含細胞核，也沒有DNA，不適于作DNA提取的材料，但卻是提取血紅蛋白的理想材料。 實驗過程中兩次用到蒸餾水，第一次目的是使成熟的雞血細胞漲破釋放出DNA；第二次目的是稀釋 NaCl溶液。 二、多聚酶鏈式反應(PCR)擴增DNA片段 1實驗原理 DNA分子復制。 2實驗材料 引物、PCR儀(自動調(diào)控溫度)、 TaqDNA聚合酶、DNA模板、原料(四種脫氧核苷酸)。 (1)模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94 左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應作準備。 (2)模板DNA與引物的復性：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55 左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合。 (3)引物的延伸：DNA模板引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以4種脫氧核苷酸為反應原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復制原則，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。 重復循環(huán)變性復性延伸過程，就可獲得更多的半保留復制鏈，而且這種新鏈又成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需24 min,23 h就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。其具體實驗操作步驟如下： (1)按照PCR反應體系的配方將所需試劑擺放在實驗桌上； (2)用微量移液器按照配方在微量試管中依次加入各組分； (3)蓋嚴離心管口的蓋子，用手指輕輕彈擊管壁； (4)將微量離心管放在離心機上，離心約10 s。 (5)將離心管放入PCR儀上，設置好PCR儀的循環(huán)程序。以上過程可概括為準備、移液、混合、離心、反應五步。 特別提示：體內(nèi)復制PCR反應時期細胞有絲分裂間期或減數(shù)第一次分裂間期體外隨時進行場所細胞內(nèi)微量離心管內(nèi)解旋在解旋酶作用下，細胞提供能量，部分解開加熱至90 ，雙鏈全部解開，不需解旋酶引物一小段RNA可以是RNA或單鏈DNA分子片段合成子鏈在引物基礎上，一條鏈連續(xù)合成，另一條鏈不連續(xù)合成分別從兩條鏈的引物端開始，都是連續(xù)合成，控制溫度72 特點邊解旋邊復制，半保留復制體外迅速擴增TaqDNA聚合酶不需要需要循環(huán)次數(shù)受生物體自身控制30多次相同點生物體內(nèi)的DNA和PCR體外DNA擴增都需要模板、四種脫氧核苷酸，且都需要在一定的緩沖溶液中進行 三、血紅蛋白的提取和分離 1方法及原理方法原理凝膠色譜法根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)電泳法各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同 2.實驗操作程序 (1)樣品處理： 紅細胞的洗滌：除去血漿蛋白等雜質(zhì)，有利于后續(xù)步驟的分離純化； 血紅蛋白的釋放：使紅細胞漲破，血紅蛋白釋放出來； 分離血紅蛋白溶液：經(jīng)過離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來，便于下一步對血紅蛋白的純化。 (2)粗分離透析：除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。 (3)純化：一般采用凝膠色譜法對血紅蛋白進行分離和純化。 (4)純度鑒定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳方法，來測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量，即對血紅蛋白進行純度鑒定。 四、植物芳香油的基本知識 1植物芳香油的基本知識 (1)成分：組成較復雜主要包括萜類化合物及其衍生物。 (2)特點：具有很強的揮發(fā)性，易溶于有機溶劑。 (3)應用：玫瑰精油是制作高級香水的主要成分，能使人產(chǎn)生愉快感；橘皮精油的主要成分是檸檬烯，具有誘人的橘香味，是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料。 4水中蒸餾、水上蒸餾、水氣蒸餾的區(qū)別 (1)這三種方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。 水中蒸餾：原料放在蒸餾容器的水中，水要完全浸沒原料。 水上蒸餾：容器中水的上方有篩板，原料放在篩板上，水量以沸騰時不浸濕原料為宜。 水氣蒸餾：蒸餾容器下方有一排氣孔，連接外源水蒸氣，上方有篩板，上面放原料。 (2)各自特點：水中蒸餾設備簡單，成本低，易操作；而水上蒸餾和水氣蒸餾時間短，出油率高。 5植物芳香油的提取方法的比較提取方法水蒸氣蒸餾壓榨法有機溶劑萃取實驗原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來通過機械加壓，壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油方法步驟1.水蒸氣蒸餾2.分離油層3.除水過濾1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過濾、靜置3.再次過濾1.粉碎、干燥2.萃取、過濾3.濃縮適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細小，能充分浸泡在有機溶液中優(yōu)點簡單易行，便于分離生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高，易分離局限性水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難，出油率相對較低使用的有機溶劑處理不當會影響芳香油的質(zhì)量 6.玫瑰精油的提取操作關(guān)鍵 (1)安裝裝置順序：從左到右，自下而上； (2)溫度計位置：溫度計水銀球的上限與蒸餾瓶側(cè)管的下限處在同一水平線上； (3)冷凝管中的水流向：從下方進水，上方出水，與蒸氣流向相反； (4)加熱時防暴沸：墊石棉網(wǎng)，向液體中加入幾粒沸石或瓷片； (5)燒瓶內(nèi)液體量：燒瓶容積的1/32/3； (6)除水：加入無水 Na2SO4后，放置時間可適當延長些； (7)溫度及時間：為提高產(chǎn)品質(zhì)量，要嚴格控制蒸餾溫度，可適當延長蒸餾時間。 7橘皮精油提取操作的關(guān)鍵 (1)橘皮的處理：干燥后一定要用石灰水浸透，時間至少10 h以上。 (2)壓榨液的處理：可在壓榨液中加入明礬，使其沉淀變清；分離離心液的油層(用分液漏斗)，經(jīng)靜置、過濾、離心后得到的油澄清而透明，但仍有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì)，應在510 條件下靜置57 d，使水分與雜質(zhì)下沉，然后用吸管吸出上層澄清的油層，再通過墊有濾紙或石棉紙的漏斗進行減壓抽濾，得到黃色油狀的橘皮精油。 五、胡蘿卜素的提取 1胡蘿卜素的基本知識 (1)分類：胡蘿卜素的化學分子式中包含多個碳碳雙鍵，根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為、三類，胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。 (2)性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑。 (3)用途：治療因缺乏維生物A而導致的各種疾病，是常用的食品色素，還具有使癌變細胞恢復為正常細胞的作用。 (4)提取天然胡蘿卜素的方法：從植物中提??；從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得，利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。 2胡蘿卜素的提取方法 根據(jù)胡蘿卜素易溶于有機溶劑的特點，可以考慮有機溶劑萃取的方法。有機溶劑分為水溶性和水不溶性兩種。乙醇和丙酮能夠與水混溶，是水溶性有機溶劑；石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等不能與水混溶，稱為水不溶性有機溶劑。萃取胡蘿卜素的有機溶劑應該具有很高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶。因此最佳萃取劑為石油醚。 5萃取過程注意事項 (1)由于有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸，因此萃取過程中應避免使用明火加熱，采用水浴加熱。 (2)為防止加熱時有機溶劑揮發(fā)，還要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。 6用紙層析法鑒定時應注意的問題 (1)選擇干凈的濾紙，為防止操作時污染濾紙，應盡量避免用手直接接觸濾紙，可以戴手套進行操作。 (2)點樣時注意樣斑不能太大，如用吹風機吹干，溫度不宜過高，否則斑點會變黃。 (3)點好樣的濾紙卷成筒狀，卷紙時注意兩邊不能相互接觸，以免因毛細管現(xiàn)象而導致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。 熱點突破 題型一DNA的粗提取與鑒定 典例1DNA在 NaCl溶液中的溶解度有兩重性，隨著 NaCl溶液濃度的變化而變化。 (1)請在下列濃度的 NaCl溶液中，選出能使DNA析出最徹底的一種和溶解度最高的一種_。 A0.14 mol/L B2 mol/L C0.15 mol/L D0.3 mol/L (2)欲使溶有DNA的2 mol/L的 NaCl溶液中的DNA析出，需要降低 NaCl溶液的濃度，最有效的方法是_。 A加蒸餾水 B加礦泉水 C加清水 D加生理鹽水 (3)DNA不溶于酒精，但細胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液，利用這一原理可以_，可以推測溶于酒精中的可能有 _。 (4)利用DNA遇_呈藍色的特性，將該物質(zhì)作為鑒定_的試劑。其實驗過程要點是向放有_的試管中加入4 mL的_混合均勻后，將試管置于_5 min，待試管_，觀察試管中溶液顏色的變化。這個實驗也說明DNA耐_溫，前次溫度有利于_，后次溫度有利于DNA_。 解析：根據(jù)課本中DNA在 NaCl溶液中的溶解曲線可知，DNA在 0.14 mol/L的 NaCl溶液中溶解度最低，在2.0 mol/L的 NaCl溶液中溶解度最高，溶解度低時，DNA析出較徹底。染色體由DNA和蛋白質(zhì)組成，為了把DNA和蛋白質(zhì)分開，采取DNA不溶于酒精的辦法可將DNA和蛋白質(zhì)分開，利用DNA遇二苯胺(沸水浴)變藍的特性可鑒定DNA。 答案：(1)A、B (2)A (3)去除雜質(zhì)某些鹽類、蛋白質(zhì)、糖類或其他大分子物質(zhì) (4)二苯胺DNADNA二苯胺試劑沸水浴加熱冷卻后高加速染色的反應速度析出 題型二血紅蛋白的提取和分離 典例2凝膠色譜技術(shù)是20世紀60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術(shù)，由于設備簡單、操作方便，不需要有機溶劑，對高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已經(jīng)被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫(yī)學等有關(guān)領(lǐng)域廣泛應用，不但應用于科學實驗研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答問題： (1)a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是_，原因是_。 (2)自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結(jié)構(gòu)可由_替代。 (3)裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是_。 (4)若選用 SephadexG100，則“G”表示_，100表示_。 (5)洗脫用的液體應盡量與浸泡凝膠所用的液體_(填“相同”或“不同”)，洗脫時，對洗脫液的流速要求是_。 解析：本題主要考查蛋白質(zhì)分離的方法凝膠色譜法的原理及操作時的注意事項。(1)由于不同蛋白質(zhì)其相對分子質(zhì)量可能不同，相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不能進入凝膠內(nèi)部通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，可先洗脫下來，從而將a、b分離。(2)色譜柱底部橡皮塞的凹穴上覆蓋尼龍網(wǎng)和尼龍紗，相當于多孔板。(3)凝膠色譜柱的裝填是蛋白質(zhì)分離的一個關(guān)鍵，裝填時盡量緊密，不得有氣泡存在，因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果；也不能發(fā)生洗脫液流干的現(xiàn)象，一旦發(fā)生上述兩種情況，色譜柱需要重新裝填。(4)洗脫時和浸泡凝膠所用的液體都是20 mmol/L的磷酸緩沖液，洗脫時，對洗脫液的流速要求保持穩(wěn)定。 答案：(1)aa相對分子質(zhì)量大，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快 (2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗 (3)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果 (4)凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水10 g (5)相同保持穩(wěn)定 題型三PCR擴增DNA片段 典例3美國科學家莫里斯發(fā)明了PCR技術(shù)。PCR技術(shù)是一種DNA“復印機”，它可以在數(shù)小時內(nèi)將一個DNA分子復制出一千億個，解決了檢測樣本擴增的難題。在人類基因組計劃實施中，PCR技術(shù)使每個核苷酸的識別成本降低至510美元。莫里斯因發(fā)明PCR技術(shù)而榮獲了諾貝爾獎。請回答下列問題。 (1)DNA復制時需要大量的_作原料，在DNA聚合酶的催化下以解旋后的DNA單鏈為_進行生物合成。 (2)在DNA分子解旋時必須加熱，普通的酶容易_，莫里斯從溫泉中找到了耐95 高溫的_，解決了酶重復使 用 的 難 題 ， 使 鏈 式 反 應 成 為 可 能 。 每 次 循 環(huán) 中 分 為_、_、_三步。 (3)高溫酶的發(fā)現(xiàn)及應用說明了地球生物_的重要，大自然的_庫是人類的寶貴財富。 解析：考查了PCR技術(shù)的有關(guān)基礎知識，內(nèi)容比較簡單，可根據(jù)課本基本知識答題。 答案：(1)脫氧核苷酸模板 (2)變性(失活)TaqDNA聚合酶變性復性延伸 (3)多樣性基因 題型四植物芳香油的提取典例4閱讀以下材料，完成相關(guān)問題： 從玫瑰花中提取出的玫瑰精油稱為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)不可取代的原料，多用于制造高級香水、化妝品等。提取出的玫瑰精油不含有任何添加劑或化學原料，是純天然的護膚品，具有極好的抗衰老和止癢作用，能夠促進細胞再生、防止肌膚老化、撫平肌膚細紋，還具有使人放松、愉悅心情的功效。玫瑰精油的化學性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，揮發(fā)性較強。 (1)根據(jù)材料中介紹的玫瑰精油的性質(zhì)，要提取玫瑰精油可以用水中蒸餾和_法提取，但一般采用水中蒸餾的方法，其原因是該法具有_的優(yōu)點。 (2)某同學在實驗中設計了如圖所示裝置提取玫瑰精油，指出該裝置中的兩個錯誤，并予以改正。 錯誤1：_。 改正：_。 錯誤2：_。 改正：_。 解析：(1)應根據(jù)原料特點來選擇提取方法。根據(jù)玫瑰精油揮發(fā)性強，化學性質(zhì)穩(wěn)定，可以用蒸餾法，而玫瑰精油還不溶于水，易溶于有機溶劑，故對于玫瑰精油還可以用有機溶劑萃取的方法。 (2)蒸餾裝置中，溫度計測的是蒸氣溫度，應使水銀球與支管口下沿相平；冷凝管進水口在下，出水口在上，與蒸氣流向相反。 (3)蒸餾得到乳濁液，為促進其分層，可加入 NaCl，然后用分液漏斗將其分開，得到的油層中還含有少量的水分，可以用無水 Na2SO4吸去，然后過濾即可。 (4)要提高產(chǎn)品品質(zhì)，應嚴格控制蒸餾溫度，適當延長蒸餾時間。 答案：(1)萃取設備簡單、成本低、易操作 (2)溫度計位置太靠下溫度計的水銀球與蒸餾燒瓶的支管口下沿保持水平 冷凝器進水口、出水口接錯冷凝管進水口在下，出水口在上，與蒸氣流向相反 (3)NaCl無水 Na2SO4分液漏斗吸去油層中少量水分 (4)嚴格控制蒸餾溫度適當延長蒸餾時間 題型五胡蘿卜素的提取 典例5閱讀下列材料，完成相關(guān)問題。 從胡蘿卜中提取出的橘黃色物質(zhì)，包括多種結(jié)構(gòu)類似物，統(tǒng)稱為胡蘿卜素。胡蘿卜素通常是橘黃色結(jié)晶，化學性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑，它的化學分子式中包含多個碳碳雙鍵，根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為、三類，胡蘿卜素是其中最主要的成分。胡蘿卜素具有非常重要的作用：(1)可作為優(yōu)良的食用保鍵品。(2)可作為禽畜飼料添加劑。(3)可作為營養(yǎng)和著色兩用的食品添加劑等。因此胡蘿卜素的提取及鑒定引起人們很大的興趣。 (1)胡蘿卜素的萃取實驗流程為：胡蘿卜粉碎干燥萃取過濾濃縮胡蘿卜素，萃取過程中采用水浴加熱的原因是什么？ (2)萃取的效率主要取決于_。 (3)如下圖為胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖，請據(jù)圖回答下列問題。 胡蘿卜素粗品鑒定的方法名稱是_。 圖中b的名稱是_。a的作用是_。 e 為 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ， 對 于 e 實 驗 時 應 注 意_。 f為_，常用_。 如果層析液沒及e會導致_。 解析：(1)萃取過程應該避免明火加熱，采用水浴加熱，這是因為有機溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱，容易引起燃燒、爆炸。 (2)萃取的效率與萃取劑和原料有密切的關(guān)系，但其主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量，其次還受到原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件的影響。 (3)對胡蘿卜素提取的粗品進行鑒定采用的是紙層析法，其原理是濾紙對各有機成分的吸附力不同而導致隨層析液在濾紙上的運動速度不同，從而使各成分分開。因?qū)游鲆阂讚]發(fā)，故應在色譜器上方用玻璃蓋嚴。在進行點樣時，應注意點樣要快速細致，并保持濾紙干燥。層析液的深度不得超過濾紙基線，否則點樣處的有機成分會溶于層析液中，使實驗失敗。 答案：(1)有機溶劑遇明火易燃燒爆炸。 (2)萃取劑的性質(zhì)和使用量 (3)紙層析法色譜容器防止層析液揮發(fā) 樣品原點點樣應該快速細致并保持濾紙干燥 溶劑石油醚 胡蘿卜素溶解在層析液中，使實驗失敗 隨堂演練 1以花椰菜為實驗材料進行DNA的粗提取實驗，步驟如下： 準備材料：將新鮮花椰菜和體積分數(shù)為95%的酒精溶液放入冰箱冷凍24 h。 研磨細胞，獲取含DNA的濾液：向碎花椰菜中加入一定的洗滌劑和食鹽，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集濾液。 去除溶液中的雜質(zhì)，也就是DNA的純化。 DNA的析出與鑒定： 據(jù)課本有關(guān)知識回答下列問題： (1)加入洗滌劑的作用是什么？ (2)加入食鹽的作用是什么？ (3)如果研磨不充分，會對實驗結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響？ (4)第二步結(jié)束后，獲得的濾液中可能會有哪些細胞成分？ (5)常溫下酒精溶液也可使DNA析出，可實驗中一般要求采用體積分數(shù)為95%的冷卻的酒精，從理論上分析，預冷的酒精有什么特點？ (6)DNA鑒定的方法有哪些？ 解析：本題大多考查了課本旁欄思考題，屬于理解記憶內(nèi)容，(5)(6)兩小題考查學生的知識面和分析問題能力。 答案：(1)洗滌劑是一些離子去污劑，它能溶解細胞膜，有利于DNA的釋放。 (2)食鹽的主要成分是NaCl，適度的食鹽溶液有利于DNA的溶解。 (3)研磨不充分會使細胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響實驗結(jié)果，導致看不到絲狀沉淀物，用二苯胺鑒定不顯示藍色。 (4)可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。 (5)一是抑制DNA水解酶活性，防止DNA降解；二是降低分子運動，易于形成沉淀析出；三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性，減少斷裂。 (6)二苯胺法，紫外燈照射法，電泳法。 2蛋白質(zhì)是生命活動不可缺少的物質(zhì)，人類要對蛋白質(zhì)進行研究和應用，首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。回答下列有關(guān)問題： (1)蛋白質(zhì)各種特性的差異，如_、_、溶解度、_和對其他分子的親和力等等，可以用來分離不同的蛋白質(zhì)。 (2)_和_是兩種常用的電泳方法，在_時通常運用SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳。 (3)分離血紅蛋白溶液時，將混合液離心后可看到試管中的溶液分為4層，第1層為_的_，第2層為_固體，是_的沉淀層，第3層是_液體，是_的水溶液，第4層是其他雜質(zhì)的_沉淀物。 (4)在裝填凝膠色譜柱時應注意哪些問題？ (5)如何判斷血紅蛋白分離是否成功？ 解析：本題是對蛋白質(zhì)提取和分離的考查，屬于識記范疇，可從課本上找到答案。 答案：(1)分子的形狀和大小所帶電荷的性質(zhì)和多少吸附性質(zhì) (2)瓊脂糖凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量 (3)無色透明甲苯層白色薄層脂溶性物質(zhì)紅色透明血紅蛋白暗紅色 (4)在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密，以減小凝膠顆粒之間的空隙。在裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在，氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。 (5)如果凝膠色譜柱裝填得成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。 B準備要拷貝的DNA。如果要拷貝自己的DNA，可以用一牙簽輕刮口腔內(nèi)壁，將牙簽放入蒸餾水中搖動。加熱蒸餾水至沸騰，使細胞破碎放出DNA。用離心機離心后，去除蒸餾水中較大的細胞碎片。這時上清液中就有了較純的DNA。 第步：聚合酶鏈式反應 (1)將DNA“B”放入湯“A”中。 (2)水浴加熱。首先加熱至94 ，使DNA雙螺旋解旋，歷時1 min；然后降至55 ，使引物結(jié)合到DNA上，歷時90 s；最后升溫至72 ，與聚合酶共同作用使DNA拷貝，歷時90 s。 (3)重復步驟(2)。每重復一次，即完成一次拷貝。 回答下列問題： 以上材料可以說明() ADNA的復制必須在活細胞內(nèi)才能完成 BDNA能指導蛋白質(zhì)的合成 C在合適的條件下，非細胞環(huán)境也能進行DNA的復制 DPCR技術(shù)是一種無性生殖技術(shù) 若用人體細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)作PCR擴增，則擴增后的幾百億條DNA起碼可分為46種。要將之分開，可用電泳、染色的技術(shù)，用的試劑有溴化ethidium等。有些試劑毒性較強，因此應戴上化學實驗用手套作為防護措施，以免皮膚接觸。溴化ethidium是一種強烈的誘變物，若接觸皮膚活細胞，很可能會引起() A該個體產(chǎn)生變異較大的后代 B基因重組 C癌變 D皮膚外層是死細胞，該物質(zhì)接觸皮膚后對人體不會有影響 PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶，取自生長在溫泉中的一種細菌。就PCR技術(shù)來講，你認為使用這種細菌中提取的酶較普通的動植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的優(yōu)勢是_。 多聚酶鏈反應湯中“DNA單元”是指() ADNTPBDNA片段C基因DNTPERNA片段F染色體G引物H礦物油IDNA聚合酶J緩沖液K湯的所有組合 解析：本題考查PCR技術(shù)的具體操作程序。PCR技術(shù)與DNA細胞內(nèi)復制的區(qū)別是在細胞外進行，解旋過程是利用DNA熱變性原理，所以DNA聚合酶要用在較高溫度中不變性的DNA聚合酶，從反應湯的配方組成可以看出，DNTP是DNA的原料，即“DNA單元”。 答案：(3)CC耐高溫(在較高溫度中不變性)A 4請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題： (1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_和_。 (2)芳香油溶解性的特點是不溶于_，易溶于_，因此可用_作為提取劑來提取芳香油。 (3)橘子果實含有芳香油，通?？捎胈作為材料提取芳 香 油 ， 而 且 提 取 時 往 往 選 用 新 鮮 的 材 料 ， 理 由 是_ (4)對材料壓榨后可得到糊狀液體，為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是_。 (5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后，芳香油將分布于液體的_層，原因是_。加入氯化鈉的作用是_。 (6)從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉，此試劑的作用是_。 解析：植物芳香油(主要成分是有機物)不溶于水，易溶于有機物溶劑，可用壓榨法、蒸餾法和萃取法提取。選材時，為了提高產(chǎn)量，可選用新鮮材料，如新鮮的橘子皮。壓榨法提取芳香油，得到糊狀液體，可首先過濾得到乳狀液，再加入NaCl使其分層，因芳香油密度小，故上層即為芳香油，最后可用無水Na2SO4去除其間水分，使其純化 答案：(1)蒸餾法萃取法 (2)水有機溶劑有機溶劑 (3)橘子皮芳香油含量較高 (4)過濾 (5)上 油層的密度比水層小 增加水層密度，使油和水分層 (6)吸收芳香油中殘留的水分 5某同學做了胡蘿卜素的提取與鑒定實驗，下列操作中有失誤，請在失誤部分畫線并改正： (1)提取胡蘿卜素時，首先將胡蘿卜進行粉碎、干燥，為了提高干燥的速度和效果，可用火烘烤一下。 (2)通過萃取過程，使胡蘿卜素與水等雜質(zhì)分開，胡蘿卜素溶解在萃取劑中后，即可直接使用蒸餾裝置進行濃縮。 (3)對胡蘿卜素鑒定時，取18 cm30 cm濾紙，在其下端底邊1 cm處用圓珠筆畫一條橫線為基線，在基線上取A、B、C、D四點。 (4)用最細的注射器針頭分別吸取0.10.4 mL溶解在石油醚中的標準樣品和提取樣品，在A、B和C、D點上點樣。 (5)點樣完畢后，立即將濾紙卷成圓筒狀，置于裝有1 cm深的石油醚的密封玻璃瓶中。 (6)等各種色素完全分開后，取出濾紙，讓石油醚自然揮發(fā)后，觀察胡蘿卜素層析帶。 解析：(1)胡蘿卜在干燥時要注意控制溫度，溫度太高、干燥時間太長會導致胡蘿卜素分解。如果用火烘烤，不好把握溫度和時間。 (2)萃取液中除了有機溶劑、提取物外，還有雜質(zhì)。必須先過濾再進行蒸餾濃縮。 (3)(4)內(nèi)容參見課本P79頁 。 (5)點樣完畢可用吹風機吹干或自然揮發(fā)后再卷成圓筒，否則影響實驗效果。 (6)本實驗點樣是2 mm左右的圓點，不會出現(xiàn)胡蘿卜素層析帶。 答案：(1)可用火烘烤一下改正：可以用烘箱烘干，也可以用熱風吹干裝置進行濃縮 (2)即可直接使用蒸餾改正：濃縮之前進行過濾，除去萃取液中的不溶物，再使用蒸餾裝置進行濃縮 (3)1 cm改正：2 cm (4)A、B和C、D改正：A、D和B、C (5)立即改正：等濾紙上的點樣液自然風干后 (6)胡蘿卜素改正：標準樣品中位于展開劑前沿的為胡蘿卜素