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1、交叉配血,交叉配血的目的,交叉配血試驗是輸血前必要的步驟,主要是檢查受血者血清中有無能破壞供血者紅細胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應。 盡可能確保對人和一個病人來說,輸了供血者的血不會引起有害反應,并且使紅細胞在輸注后能保持最長的存活時間。,概念:交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù),兩側(cè)均不凝集可輸血。將獻血人的紅細胞和血清分別與受血人的血清和紅細胞混合,觀察有無凝集反應的方法稱為交叉配血法。交叉配血法一般包括主試驗和副試驗主試驗用受血者血清與供血者紅細胞懸液作試驗以發(fā)現(xiàn)受血者血清中是否含有與供血者紅細胞反應的抗體。又稱直接配合或主側(cè)配合副試驗則用供血者血清與受血者紅細胞作試驗以
2、發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體,又稱間接配合,試劑與器材:生理鹽水、小試管、尖滴管、離心機、顯微鏡、記號筆凝聚胺試劑盒 (由三部分組成, 低離子強度溶液、凝聚胺液和解聚液) 、加樣器 (0-200l) 、微柱凝膠孵育器,主側(cè)配血:用患者血清1滴與供者紅細胞懸液1滴,次側(cè)配血:供血者血清1滴與患者紅細胞懸液1滴,分別混勻,1000r/min離心約1分鐘,輕輕搖勻,觀察結(jié)果,1、鹽水介質(zhì)法:受血者與供血者血液各2,分離血清,加入有生理鹽水的試管中,制成5紅細胞生理鹽水懸液,主側(cè)配血要求:絕對不可以有凝集或溶血現(xiàn)象,次側(cè)配血要求:供血者血清加受血者紅細胞在允許范圍內(nèi),可以有凝集現(xiàn)象,但不可以有溶血。
3、,交叉配血實驗結(jié)果,1.配血不合:主側(cè)凝集絕對不能輸血 2.配血相合:主側(cè)、次側(cè)均不凝集可以輸血(同型輸血) 3.配血基本相和:主側(cè)不凝集,次側(cè)凝集緊急情況下可少量、緩慢輸血(異型輸血),交叉配血不能只進行鹽水介質(zhì)交叉配血,在條件差的實驗室也應該進行膠體介質(zhì)配血,以盡量消除不完全抗體存在的危害,減少輸血引起的不良反應。,2、微柱凝膠法(1)在凝膠卡上標記主、次側(cè), 用加樣器分別吸取受、供血者5%的紅細胞懸液50l, 受、供者血清25l置相應微管腔上端, 于37孵育15 min取出, 以1 500 r/min離心3 min后肉眼觀察結(jié)果 (2) 紅細胞均勻沉于凝膠管底部為陰性, 懸浮于微柱凝膠表
4、面或凝膠中為陽性。優(yōu)點:檢測項目齊全、應用廣;靈敏度高;特異性強;重復性好;客觀性好;可節(jié)省樣品檢測,結(jié)果可以較長時間保存;操作方式可以采用手工、半自動及全自動模式, 靈活方便,3、凝聚胺法(1) 取小試管2支, 分別標明主、次側(cè), 在主側(cè)管中分別加受血者血清和供血者5%的紅細胞懸液各1滴, 混勻, 次側(cè)管反之 (2) 在主、次側(cè)管中分別加入低離子強度溶液0.6 ml, 混勻后再加凝聚胺液2滴,混勻,15s后以1000 r/min離心1min, 棄去上清液, 觀察試管底部紅細胞聚集情況, 若2管中的反應物全部不出現(xiàn)凝集,則必須重做 (3) 最后在2管中分別加入解聚液2滴,輕輕轉(zhuǎn)動試管混勻并及時觀察結(jié)果。如果在30-60s內(nèi)凝集散開,代表是由解聚液引起的非特異性凝集,配血結(jié)果相符;如凝集不散開,則為紅細胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應,配血結(jié)果不相合。如反應可疑,可進一步在玻片上用顯微鏡觀察,目前微柱凝膠法雖具有操作簡單、結(jié)果準確等優(yōu)點, 但仍不能完全替代鹽水介質(zhì)法和凝聚胺法, 三者各有優(yōu)點。在日常工作中, 急診受血者的標本用鹽水介質(zhì)法配合凝聚胺法進行交叉配血, 用微柱凝膠法進行交叉配血復查, 發(fā)現(xiàn)有陽性結(jié)果的標本再用兩種方法同時測定, 這樣既保證了臨床及時用血, 又能減少輸血反應的發(fā)生, 提高了臨床輸血安全。,謝謝觀看,