白血病分子生物學(xué)PPT課件

白血病分子生物學(xué),白血病分子生物學(xué),白血病的分子機(jī)制白血病的分子檢測白血病分子檢測的臨床應(yīng)用,白血病的分子機(jī)制,基因(gene)：合成有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA所必需的全部核酸序列。癌基因(oncogene)：細(xì)胞或病毒中存在的，能誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化并使之獲得新生物特征的基因。癌基因活化的方式： 點(diǎn)突變 染色體重排 基因擴(kuò)增抑癌基因(tumor suppressor genes)：指一類基因，其產(chǎn)物對細(xì)胞生長增殖起負(fù)調(diào)控的作用，并能潛在抑制細(xì)胞的惡變。,白血病的分子機(jī)制,白血病的分子機(jī)制,增殖過度分化阻斷凋亡受抑,“二次打擊”學(xué)說,D.Gary Gilliland Best Practice 16:409-417,白血病的分子檢測,Southern blotNorthern blotWestern blotFISHPCR測序芯片,白血病的分子檢測,PCR反應(yīng)原理,N = N0 x (1+E)n N：擴(kuò)增子數(shù)量N0：起始模板數(shù)量E：擴(kuò)增效率n：循環(huán)數(shù),白血病的分子檢測,PCR理論方程,白血病的分子檢測,PCR方法優(yōu)點(diǎn) 快速 靈敏 特異PCR方法缺點(diǎn) 假陽性 假陰性,白血病的分子檢測,PCR：僅適用于染色體斷裂點(diǎn)叢集于相對小的范圍內(nèi)（<2kb），如T-ALL中SIL-TAL1。 RT-PCR：可用于染色體斷裂點(diǎn)跨越很大的區(qū)域的融合基因。 巢式RT-PCR：可顯著提高反應(yīng)的特異性，增加擴(kuò)增效率。RQ-PCR：可定量擴(kuò)增產(chǎn)物。,白血病的分子檢測,RQ-PCR（Real-time Quantitative PCR） 熒光標(biāo)記擴(kuò)增產(chǎn)物 熒光標(biāo)記引物 特異性熒光標(biāo)記探針 TaqMan探針、分子信標(biāo)、雜交雙探針 熒光染料直接結(jié)合擴(kuò)增產(chǎn)物 SYBR Green I與DNA雙鏈結(jié)合 動態(tài)監(jiān)測熒光信號變化,TaqMan探針法,特異性高多重基因定量成本較高,SYBR Green I 法,成本低最適合初步篩查熔解曲線功能無法多重檢測無模板特異性靈敏度低,白血病的分子檢測,CT值：熒光信號有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著增長（穿過閾值線）時的循環(huán)次數(shù)CT值與起始模板量成反比,白血病的分子檢測,RQ-PCR的檢測系統(tǒng)：該系統(tǒng)內(nèi)置了96孔PCR儀，且在每個反應(yīng)孔上均有一個監(jiān)測探頭用于檢測PCR反應(yīng)管中的熒光強(qiáng)度。平均每8-12秒就檢測一次，以達(dá)到實(shí)時檢測的目的。系統(tǒng)中的電腦系統(tǒng)同時不斷地分析來自檢測系統(tǒng)的信息，不斷計(jì)算每個反應(yīng)管中的熒光強(qiáng)度，并最終得到CT值。該系統(tǒng)可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的CT值和拷貝數(shù)自動繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算未知樣品中的目的基因拷貝數(shù)。,白血病的分子檢測,RQ-PCR方法優(yōu)點(diǎn)： 靈敏而特異 起點(diǎn)定量 閉管化學(xué)（污染的風(fēng)險低） 沒有PCR后處理（無需走膠，拍照等） 高度自動化 定性：單數(shù)據(jù)點(diǎn)測定 定量：多數(shù)據(jù)點(diǎn)測定 能做基因分型及SNP鑒定,RQ-PCR的操作流程,從細(xì)胞或組織中抽提DNA或RNA,用PCR或RT-PCR擴(kuò)增特異片段,將PCR產(chǎn)物克隆到合適的載體上,純化，定量和系列稀釋質(zhì)粒DNA或RNA,體外轉(zhuǎn)錄成RNA片段（僅用于RNA樣品）,構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線（CT lgcopy）,樣品的定量檢測,校正樣品基因拷貝數(shù),白血病分子檢測的臨床應(yīng)用,白血病的分子生物學(xué)檢查對白血病診斷分型及預(yù)后判斷有以下幾方面意義： 補(bǔ)充MIC檢查的不足 發(fā)現(xiàn)新的亞型 監(jiān)測白血病的微小殘留病灶（MRD） 為研究白血病的發(fā)病機(jī)制打下基礎(chǔ),白血病分子檢測的臨床應(yīng)用,PCR方法檢測MRD常用的分子標(biāo)志,AML1-ETO,t(8;21)(q22;q22) 68%原發(fā)性AML，在M2中的陽性率為2040%，在M2b中陽性率為90% 少見于M4和M1，極少見于MDS和骨髓增生綜合癥 AML1-ETO+白血病細(xì)胞有一定程度的分化能力，能分化至較成熟的嗜中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，且對化療反應(yīng)較敏感 AML1-ETO+患者對大劑量阿糖胞苷治療效果好，具有較高的緩解率，無病生存期長，預(yù)后較其他AML亞型（M3除外）好,AML1-ETO,對初發(fā)患者進(jìn)行t(8;21)和AML1-ETO融合基因的檢測對其預(yù)后判斷及治療方案的制定相當(dāng)重要 AML1-ETO定性結(jié)果不能用于評價患者M(jìn)RD情況 RQ-PCR能實(shí)時反映體內(nèi)AML1-ETO水平。連續(xù)定量AML1-ETO轉(zhuǎn)錄本水平可判定有高復(fù)發(fā)風(fēng)險的患者，以便及早治療干預(yù)以防血液學(xué)復(fù)發(fā),AML1- 陰性 ETO+,C-KIT基因突變,C-KIT為III型受體酪氨酸激酶家族（還包括c-FMS，PDGFR和c-KIT）成員之一AML1-ETO可誘導(dǎo)性表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠，并不導(dǎo)致白血病發(fā)生C-KIT突變可見于伴inv(16)的M4以及伴t(8;21)的M2患者26/54例(48.1%) M2b患者中檢測到C-KIT基因突變57例不伴t(8;21)的其他類型血液腫瘤患者均未檢測到C-KIT基因突變以上結(jié)果提示C-KIT突變與M2b密切相關(guān)(R=0.94, P<0.01),C-KIT基因突變,C-KIT基因結(jié)構(gòu),JM,C-KIT基因突變,外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),C-KIT基因突變,生存曲線,PML-RAR,t(15;17)(q22;q21) 98%M3患者繼t(15;17)之后，又先后發(fā)現(xiàn)4種M3特異的累及RAR的變異性染色體易位：t(11;17)(q23;q21)，t(5;17)(q35;q21)，t(11;17)(q13;q21)以及dup(17)(q21.3;q23)，分別產(chǎn)生PLZF-RAR，NPM-RAR，NuMA-RAR和STAT5b-RAR融合基因臨床上，具有PLZF-RAR或STAT5b-RAR融合基因患者對ATRA治療不敏感，其余三種染色體易位患者經(jīng)ATRA治療可獲完全緩解,PML-RAR,APL累及的RAR基因及其伙伴基因結(jié)構(gòu)示意圖,PML-RAR,由于PML基因斷裂點(diǎn)不同產(chǎn)生3種不同的PML-RAR異構(gòu)體 約55%的M3患者為L型，40%為S型，5%為V型，且每位患者只表達(dá)一種PML-RAR融合蛋白形態(tài)學(xué)上S型白血病細(xì)胞常為低分化的并且這些患者可見繼發(fā)細(xì)胞遺傳學(xué)異常，V型APL患者的白血病細(xì)胞體外對ATRA的敏感度低,PML-RAR,RT-PCR檢測PML-RAR是敏感且特異的APL診斷方法，還能用于治療后MRD監(jiān)測。PML-RAR陽性提示的分子復(fù)發(fā)常早于臨床復(fù)發(fā)3-6個月，為臨床采取進(jìn)一步治療措施提供了保障 RQ-PCR能有效反映患者在發(fā)病、治療、緩解、復(fù)發(fā)整個過程的白血病細(xì)胞負(fù)荷，在MRD監(jiān)測中比RT-PCR具有更高價值,L+ 陰性 S+,FLT3基因突變,Fms-related tyrosine kinase 3FLT3為III型受體酪氨酸激酶家族（還包括c-FMS，PDGFR和c-KIT）成員之一，該類受體因在造血過程中造血細(xì)胞的增殖和存活中發(fā)揮重要調(diào)控作用綜合國外各研究報道， FLT3-ITD和D835突變在AML中陽性率分別為24%(385/1585)和7%(30/429)，總陽性率超過30%，使其成為AML中最普遍發(fā)生突變的靶基因許多臨床研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)LT3突變還與臨床預(yù)后密切相關(guān)，尤對60歲以下的AML患者，F(xiàn)LT3突變患者預(yù)后較差，且可獨(dú)立于核型之外,FLT3基因突變,FLT3基因突變,FLT3基因主要突變類型,FLT3基因突變,mut-FLT3信號通路,FLT3基因突變,外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù),CBF-MYH11,inv(16)(p13;q22)及t(16;16)(p13;q22) 主要見于M4Eo，10%不伴異常嗜酸細(xì)胞M4，少見于M2CBF-MYH11融合蛋白通過干擾核心結(jié)合因子（core binding factor,CBF）的轉(zhuǎn)錄激活作用而致病 具有CBF-MYH11的患者對化療敏感，預(yù)后較好，故提高檢測率尤具臨床意義,CBF-MYH11,CBF-MYH11具有多種變異型，其中最常見的為A型，占80%RT-PCR檢測CBF-MYH11進(jìn)行MRD監(jiān)測顯示，大部分患者在完全緩解時PCR轉(zhuǎn)陰，但仍有小部分長期存活者PCR仍為陽性最新研究采用RQ-PCR檢測CBF-MYH11轉(zhuǎn)錄本水平來評價M4Eo患者M(jìn)RD情況，預(yù)示復(fù)發(fā),NPM基因突變,Nucleophosmin，為核-漿穿梭蛋白，調(diào)控p53-ARF通路見于50%核型正常的AML患者，而在伴低危/高危核型患者中極少見主要見于M4/M5中第12號外顯子的插入/缺失伴此突變患者WBC計(jì)數(shù)高目前，此突變的預(yù)后價值各研究組報道不一，尚待進(jìn)一步證實(shí),DEK-CAN,t(6;9)(p23;q34) 主要見于M2或M4，也見于M1，MDS-RAEB伴DEK-CAN的患者年齡一般較輕，且預(yù)后較差此類患者進(jìn)行分子監(jiān)測有助于判斷患者預(yù)后，調(diào)整治療方案,N-RAS基因突變,為RAS基因家族成員之一，染色體定位于1p32.2。具有GTP/GDP結(jié)合和GTPase活性，調(diào)控正常細(xì)胞的生長此基因突變存在于11-30%AML突變熱點(diǎn)位于codon12,13和61在inv(16)/t(16;16),inv(3)/t(3;3)中突變率較高，而在t(15;17)中低伴此突變患者外周血WBC計(jì)數(shù)低該突變預(yù)后意義尚不明,WT-1基因高表達(dá),Wilms tumor 1是無特異分子異常的急性白血病患者理想的MRD檢測指標(biāo)伴此基因高表達(dá)者預(yù)后差，且表達(dá)程度與預(yù)后相關(guān),BCR-ABL,t(9;22)(q34;q11) 1530%成人ALL及35%兒童ALL 9號染色體的斷裂點(diǎn)與CML相同，但22號染色體斷裂點(diǎn)具有異質(zhì)性 此融合蛋白p190刺激細(xì)胞增殖的能力比p210要強(qiáng)。在轉(zhuǎn)基因試驗(yàn)中觀察到p190誘發(fā)的白血病具有起病早、發(fā)展快和惡性程度高的特點(diǎn)BCR-ABL+ALL患者預(yù)后差，5年存活率<20%，因此這些患者在緩解后需進(jìn)行骨髓移植治療,BCR-ABL,對于自體或異體移植ALL患者，移植前后BCR-ABL的有無以及BCR-ABL的轉(zhuǎn)錄本類型與預(yù)后有關(guān),e1a2+ 陰性,E2A-PBX1,t(1;19)(q23;p13) 56%兒童ALL和3%成人ALL 此類患者具有高的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，高的血清乳酸脫氫酶及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，預(yù)后差，平均無病生存期（DFS）僅6個月，3年DFS為20%，需給予這些患者強(qiáng)化治療才能獲得較好的預(yù)后核型和E2A-PBX1檢測對此類患者的診斷和治療方案的選擇至關(guān)重要E2A-PBX1的預(yù)后價值需更多的臨床研究證實(shí),TEL-AML1,t(12;21)(p13;q22) 25%兒童ALL，是兒童ALL中最常見的分子異常 目前為止尚未在T-ALL，AML或NHL中發(fā)現(xiàn)t(12;21)，在嬰兒白血病中極少報道，在成人白血病患者中頻率很低（<2%）此類患者發(fā)病年齡?。?歲10歲），WBC計(jì)數(shù)低（<50 000/L），免疫表型為前B-ALL此類患者對治療反應(yīng)佳，完全緩解時間長，預(yù)后好,TEL-AML1,由于12p和21q末端在常規(guī)顯帶中很相似，因此常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)方法檢出率僅0.05%，需應(yīng)用FISH或RT-PCR方法提高檢測陽性率TEL基因重排是獨(dú)立預(yù)后因素，RT-PCR檢測TEL-AML1融合基因能將低危險度與高危險度的ALL患者區(qū)分開來。因此早期檢測TEL-AML1融合基因?qū)εR床預(yù)后，確定合適的治療方案都有重要意義,MLL相關(guān)融合基因,累及MLL基因的分子異常見于5.2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，還可見于治療相關(guān)白血病，尤接受topoisomerase II抑制劑治療的患者 MLL基因涉及五十余種染色體易位，產(chǎn)生不同的融合蛋白，且每種融合蛋白都與特定的白血病表型相關(guān)。最常見的有： t(4;11)(q21;q23) MLL-AF4融合基因 ALL t(9;11)(p22;q23) MLL-AF9融合基因 AML t(11;19)(p13;q23) MLL-ENL融合基因 AML及ALL,MLL相關(guān)融合基因,至今，MLL相關(guān)融合蛋白的致病性還不清楚，推測其可能具有雙重作用： 融合蛋白可能獲得新的功能，促使細(xì)胞轉(zhuǎn)化 MLL發(fā)生斷裂后，缺失鋅指結(jié)構(gòu)域的MLL不能與DNA結(jié)合，失去其轉(zhuǎn)錄活化功能，使受MLL調(diào)節(jié)的靶基因（HOX基因）表達(dá)異常，也影響造血細(xì)胞的發(fā)育,MLL-AF4,t(4;11)(q21;q23)t(4;11)的發(fā)生率在不同年齡段是不同的，在嬰兒ALL中最多見，為5070%，而在兒童和成人中較低，分別為2%和36%此類患者發(fā)病年齡低（通常<2歲），白細(xì)胞計(jì)數(shù)高，常伴有內(nèi)臟巨大并累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)此類患者病情兇險，預(yù)后差。患者對標(biāo)準(zhǔn)治療方案很可能無效，需給予強(qiáng)化治療。目前應(yīng)用高劑量Ara-C治療，使這些患者預(yù)后有所提高,MLL-AF4,對2歲的嬰幼兒急性白血病患者應(yīng)常規(guī)進(jìn)行MLL-AF4融合基因的檢測以篩選出高?；颊撸o予強(qiáng)化治療提高生存率RT-PCR可在所有t(4;11)患者初發(fā)時檢測到MLL-AF4融合基因。由于該融合基因累及的2個基因的斷裂點(diǎn)變異性較大，因此PCR應(yīng)包括所有斷裂點(diǎn)以免產(chǎn)生假陰性結(jié)果,TAL1基因重排,t(1;14)(p32;q11)，TAL1-TCR融合基因 3%T-ALL 易位使TAL1基因與TCR位點(diǎn)并置，其5´端正常轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)被TCR 5´部分所取代，而后者在T細(xì)胞中有高表達(dá),TAL1基因重排,1p32缺失，SIL-TAL1融合基因 1626%T-ALL該重組僅見于T-ALL，是T-ALL的一個有用的克隆標(biāo)志缺失部分可能為TAL1基因的調(diào)控序列，使TAL1基因表達(dá)失控，導(dǎo)致與染色體易位相似的表型常規(guī)遺傳學(xué)方法檢測不到這一異常，而SIL-TAL1融合處特異的序列能作為這類患者特異的分子標(biāo)志用于PCR檢測,TAL1基因重排,TAL1異常僅見于T-ALL，尚未見于B-ALL，AML和T細(xì)胞NHL，是兒童T-ALL中最常見非隨機(jī)遺傳缺陷，是監(jiān)測大多數(shù)T-ALL的侯選基因伴TAL1異常的患者血象表現(xiàn)為高白細(xì)胞計(jì)數(shù)，高血紅蛋白含量，免疫表型為CD2+/CD10盡管在治療反應(yīng)上，有TAL1重排患者和無TAL1重排患者無顯著差異，但伴TAL1重排患者4年無事件生存率（EFS）高于不伴TAL1重排的患者，分別為59±11%和44±7%，提示伴TAL1重排患者預(yù)后較好,HOX11基因異常表達(dá),t(10;14)(q24;q11) ，t(7;10)(q34;q24) 7%的T-ALL 易位使HOX11基因受控于TCR和TCR基因調(diào)控序列，導(dǎo)致其異常表達(dá)另有部分HOX11高表達(dá)患者核型正常伴有此種異常的患者對聯(lián)合化療反應(yīng)好，預(yù)后也較其他T-ALL患者要好，完全緩解率為100%，平均無病生存期為46個月，3年無病生存率為75%,HOX11L2基因異常表達(dá),t(5;14)(q35;q32) 20%的兒童T-ALL 易位使HOX11L2基因處于CTIP2調(diào)控元件的控制下，而CTIP2基因在T淋巴細(xì)胞分化時高度表達(dá)在隨訪患者中檢測到高水平HOX11L2說明白血病細(xì)胞的存在，強(qiáng)烈預(yù)示復(fù)發(fā)，而完全緩解患者HOX11L2表達(dá)水平迅速降低，并維持在一個低水平?？梢奌OX11L2的表達(dá)水平可作為MRD檢測的標(biāo)志,NOTCH1基因突變,NOTCH1信號對CLP(common lymphoid progenitors)向T細(xì)胞定向以及前T細(xì)胞受體復(fù)合物組裝是必須的35-50% T-ALL患者存在此基因突變伴NOTCH1基因突變的成年T-ALL患者預(yù)后較差,NOTCH1基因突變,NOTCH1基因結(jié)構(gòu),NOTCH1基因突變,生存曲線,BCR-ABL,t(9;22)(q34;q11) >90% CML患者BCR-ABL融合蛋白（p210）的酪氨酸蛋白激酶活性較正常ABL高，可能是BCR對ABL激酶活性調(diào)節(jié)區(qū)的作用所致由于<5%CML患者為隱匿性Ph染色體，因此無Ph染色體CML患者還需使用更靈敏的分子檢測手段如FISH或RT-PCR檢測BCR-ABL融合基因RT-PCR還能區(qū)分e1-a2和b2-a2/b3-a2二種BCR-ABL轉(zhuǎn)錄本，從而區(qū)分ALL患者與CML急淋變患者，進(jìn)而分別對兩種不同患者采用不同的治療方案,BCR-ABL,巢式RT-PCR檢測BCR-ABL融合基因用于CML移植患者移植后MRD監(jiān)測?？稍诨颊哐簩W(xué)復(fù)發(fā)前的624個月骨髓檢測就呈陽性。 RQ-PCR還能動態(tài)觀察患者治療后BCR-ABL轉(zhuǎn)錄本水平變化情況，反映療效。,b3a2+ b2a2+ 陰性,GATA2基因突變,調(diào)控早期造血干細(xì)胞增殖分化的轉(zhuǎn)錄因子，維持造血干祖細(xì)胞的增殖和自我更新能力CML急變患者中新發(fā)現(xiàn)GATA2基因突變， 而CML慢性期、加速期，AML（M1-M7），MDS，ALL，CLL，淋巴瘤和骨髓瘤患者，以及正常對照均未發(fā)現(xiàn)該突變，可見GATA2基因突變僅與CML急變相關(guān)，是CML疾病進(jìn)展過程中的獲得性突變?？偘l(fā)生率為12.5%（5/40），且均造成CML急粒單變GATA2基因突變與CML患者疾病進(jìn)展和預(yù)后的關(guān)系有待進(jìn)一步闡明,JAK2基因突變,Janus kinase 2此基因突變主要見于MPD和MDS，另可存在于部分AML尤M2突變?yōu)閂617F突變?nèi)コ薐AK2 JH2負(fù)性調(diào)控，導(dǎo)致該基因的持續(xù)活化，賦予細(xì)胞增殖存活優(yōu)勢JAK2可成為靶向治療的靶點(diǎn),MDS相關(guān)基因異常,Delta樣(Dlk)基因編碼Dlk蛋白在MDS明顯增高者55%，而AML僅10%，可能是MDS特異性基因，但作為診斷MDS的標(biāo)志基因尚待進(jìn)一步確定,MDS相關(guān)基因異常,RAS此原癌基因超家族編碼鳥苷三磷酸水解酶(GTPase)調(diào)節(jié)細(xì)胞生長相關(guān)信號ras癌基因的活化，尤其是N-ras的激活可在約35%的MDS患者中發(fā)生FMS為集落刺激因子1，控制單核-巨噬細(xì)胞生長、分化及功能fms基因的突變可在16%的MDS患者中發(fā)現(xiàn)ras和fms突變主要見于粒-單細(xì)胞分化的疾病，即MDS中的CMML，患者生存期短，轉(zhuǎn)AML多,MDS相關(guān)基因異常,p53在MDS時，p53突變較少見(<5%)，但在較為進(jìn)展的病例中可高達(dá)15%p53突變意味著化療耐藥和生存期縮短，因而是一種有意義的預(yù)后指標(biāo)FLT310%MDS有FLT3點(diǎn)突變，加快進(jìn)展為AML，但FLT3-ITD少見AML1(RUNX1)為MDS較常見的點(diǎn)突變，發(fā)生率25%，導(dǎo)致核心結(jié)合因子(CBF)亞單位正常功能缺失，易轉(zhuǎn)化AML,Ig/TCR基因重排,Ig/TCR基因重排檢測，對決定白血病的細(xì)胞來源系列乃至分化階段，有重大意義在B系A(chǔ)LL中分別有95%，54%，55%和33%的患者有IgH，TCR，TCR和TCR基因重排，在T-ALL中相應(yīng)的基因重排率分別為14%，68%，91%和89%由于重排的多樣性，重排的Ig和TCR基因連結(jié)區(qū)序列在各淋巴(前體)細(xì)胞中是不同的，因而每位患者有其各自特異的Ig/TCR基因重排序列，這一特定的Ig/TCR基因重排序列可作為該惡性克隆的分子標(biāo)志，在分子水平進(jìn)行診斷分型，還可通過PCR檢測緩解期患者有無初發(fā)時的Ig/TCR基因重排來追蹤殘余白血病細(xì)胞，用于預(yù)后判斷,Ig/TCR基因重排,Ig的基因由L，L和H三個基因組組成，分別編碼L鏈，L鏈和H鏈。L和H基因又由編碼Ig分子的V區(qū)和C區(qū)基因構(gòu)成。 B細(xì)胞分化： IgH重排 重排 IgH/表達(dá) IgH重排 重排 IgH/表達(dá) 錯誤重排/缺失,Ig/TCR基因重排,TCR由兩條肽鏈組成，鏈或鏈，不論是哪一種肽鏈，其胞膜外區(qū)均包括兩部分，即V區(qū)和C區(qū)。相應(yīng)的編碼基因?yàn)門CRA,TCRB, TCRG和TCRD。 T細(xì)胞分化： TCRD重排 TCRG重排 TCR表達(dá) TCRB重排 TCRA重排 TCR表達(dá) TCRD缺失,Ig/TCR基因重排,Ig/TCR基因多樣性的機(jī)制 組合造成的多樣性 2x106 Ig, 3x106 TCR, 5x103TCR 連接造成的多樣性 >1012 Ig和TCR 體細(xì)胞高頻突變造成的多樣性 僅限于成熟B淋巴細(xì)胞,Ig/TCR基因重排,V-D-J重排：IgH,TCRB,TCRDV-J重排：L,L,TCRA,TCRG,Ig/TCR基因重排,謝 謝！,