高考生物一輪總復習 第五十課時 動物細胞工程課件 新人教版選修3
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1、第五十課時第五十課時 動物細胞工程動物細胞工程組織組織 單個細胞單個細胞 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 生長和增殖生長和增殖 胰蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶 單個細胞單個細胞 細胞懸液細胞懸液 原代原代 傳代傳代 貼附在瓶壁上貼附在瓶壁上 細胞貼壁細胞貼壁 相互接觸相互接觸 停止分裂增殖停止分裂增殖 細胞的接觸抑制細胞的接觸抑制 無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境 無菌無菌 抗生素抗生素 代謝產物積累對細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害自身造成危害 營養(yǎng)營養(yǎng) 血清、血漿血清、血漿 溫度和溫度和pH 36.50.5 7.27.4 氣體環(huán)境氣體環(huán)境 空氣空氣 CO2 細胞代謝細胞代謝 維持培養(yǎng)液的維持培養(yǎng)
2、液的pH C 【解析解析】考查動物細胞的非克隆條件下的培養(yǎng),動物細考查動物細胞的非克隆條件下的培養(yǎng),動物細胞培養(yǎng)要求在無菌條件下,因此,需要對實驗小鼠進行胞培養(yǎng)要求在無菌條件下,因此,需要對實驗小鼠進行消毒獲得皮膚組織。加入胰蛋白酶消化組織中的膠原纖消毒獲得皮膚組織。加入胰蛋白酶消化組織中的膠原纖維和細胞外的其他成分,可獲得單個皮膚細胞。皮膚細維和細胞外的其他成分,可獲得單個皮膚細胞。皮膚細胞原代培養(yǎng)時胞原代培養(yǎng)時(丙過程丙過程)遺傳物質不發(fā)生變化,細胞能保遺傳物質不發(fā)生變化,細胞能保持正常的二倍體核型;皮膚細胞傳代培養(yǎng)時持正常的二倍體核型;皮膚細胞傳代培養(yǎng)時(丁過程丁過程),從原代培養(yǎng)物或細
3、胞系中可獲得具有特殊性質的細胞,從原代培養(yǎng)物或細胞系中可獲得具有特殊性質的細胞,具有異質性。具有異質性??键c二動物體細胞核移植技術考點二動物體細胞核移植技術【回扣教材回扣教材】1動物核移植是將動物的一個細胞的動物核移植是將動物的一個細胞的_,移入,移入一個已經去掉細胞核的一個已經去掉細胞核的_中,使其重組并中,使其重組并發(fā)育成一個新的發(fā)育成一個新的_,這個新的胚胎最終發(fā)育為,這個新的胚胎最終發(fā)育為_。用核移植的方法得到的是。用核移植的方法得到的是_。2動物細胞核移植可以分為動物細胞核移植可以分為_核移植核移植(比較容比較容易易)和和_核移植核移植(比較難比較難)。動物體細胞。動物體細胞核移植選
4、用去核卵核移植選用去核卵(母母)細胞的原因:卵細胞的原因:卵(母母)細胞細胞_;卵;卵(母母)細胞細胞_。細胞核細胞核卵母細胞卵母細胞胚胎胚胎動物個體動物個體克隆動物克隆動物胚胎細胞胚胎細胞體細胞體細胞比較大,容易操作比較大,容易操作細胞質多,營養(yǎng)豐富細胞質多,營養(yǎng)豐富良種動物良種動物 醫(yī)用蛋白醫(yī)用蛋白 細胞細胞 組織組織 器官器官 【知識拓展知識拓展】動物體細胞移植的特點:動物體細胞移植的特點:動物體細胞移植依據(jù)的原理是細胞核的全能性,與植物組動物體細胞移植依據(jù)的原理是細胞核的全能性,與植物組織培養(yǎng)一樣屬于無性生殖。雖然細胞核內具有發(fā)展成為一織培養(yǎng)一樣屬于無性生殖。雖然細胞核內具有發(fā)展成為一
5、個完整個體所需的全套基因,但動物體細胞分化程度較高,個完整個體所需的全套基因,但動物體細胞分化程度較高,因此很難表達全能性。卵細胞體積大,易于操作,含有促因此很難表達全能性。卵細胞體積大,易于操作,含有促使細胞核表達全能性的物質和營養(yǎng)條件。將體細胞核移植使細胞核表達全能性的物質和營養(yǎng)條件。將體細胞核移植入去核卵細胞內,既保證了重組細胞的完整性,又能刺激入去核卵細胞內,既保證了重組細胞的完整性,又能刺激體細胞核表達其全能性,發(fā)展成為一個新的個體。動物體體細胞核表達其全能性,發(fā)展成為一個新的個體。動物體細胞核移植產生的新個體的親本有三個:體細胞核供體、細胞核移植產生的新個體的親本有三個:體細胞核供
6、體、卵細胞細胞質供體、代孕母體。新個體細胞核基因型與體卵細胞細胞質供體、代孕母體。新個體細胞核基因型與體細胞核供體完全一樣,因此新個體性狀與體細胞核供體基細胞核供體完全一樣,因此新個體性狀與體細胞核供體基本相同。卵細胞細胞質中也有少量的本相同。卵細胞細胞質中也有少量的DNA,新個體性狀與,新個體性狀與卵細胞細胞質供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個卵細胞細胞質供體有一些地方相同。代孕母體沒有為新個體提供遺傳物質,新個體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。體提供遺傳物質,新個體性狀與代孕母體基本沒有聯(lián)系。D (2)小羊小羊a、小羊、小羊b、小羊、小羊c的性狀表現(xiàn)相同,原因是的性狀表現(xiàn)相同,原因是_。(
7、3)要檢測產奶羊要檢測產奶羊N的細胞中染色體的細胞中染色體DNA上是否插入了牛上是否插入了牛乳蛋白基因,通常采用乳蛋白基因,通常采用_技術。技術。(4)當重組細胞發(fā)育至形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚時,方可當重組細胞發(fā)育至形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚時,方可進行胚胎分割,原因是進行胚胎分割,原因是_。若小羊。若小羊a為雌性,可采用體外受精的方為雌性,可采用體外受精的方法使小羊法使小羊a在一年內繁殖數(shù)千頭自己的后代,該方法主要在一年內繁殖數(shù)千頭自己的后代,該方法主要包括包括_、_、受精等幾、受精等幾個主要步驟。個主要步驟。三只小羊是由同一個重組細胞發(fā)育而成的三只小羊是由同一個重組細胞發(fā)育而成的DNA分子雜交分
8、子雜交(基因探針基因探針)全能性高全能性高該時期的細胞分化程度低,該時期的細胞分化程度低,卵母細胞的采集卵母細胞的采集精子的獲取精子的獲取【考查類型考查類型】本題主要考查了動物細胞核移植技術。本題主要考查了動物細胞核移植技術。【解析解析】該圖涉及的生物技術有基因工程、動物體細胞該圖涉及的生物技術有基因工程、動物體細胞核移植及胚胎移植等,由于小羊核移植及胚胎移植等,由于小羊a、小羊、小羊b、小羊、小羊c是由是由胚胎分割而來的,具有相同的遺傳物質,性狀表現(xiàn)也相胚胎分割而來的,具有相同的遺傳物質,性狀表現(xiàn)也相同。同?!痉椒w納方法歸納】本題有較強的綜合性,包括了基因工程、本題有較強的綜合性,包括了基
9、因工程、動物體細胞核移植及胚胎移植等現(xiàn)代生物技術,在復習動物體細胞核移植及胚胎移植等現(xiàn)代生物技術,在復習時要有意識地找出有聯(lián)系的知識點,通過比較學習才能時要有意識地找出有聯(lián)系的知識點,通過比較學習才能對知識有進一步的鞏固。對知識有進一步的鞏固??键c三動物細胞融合與單克隆抗體考點三動物細胞融合與單克隆抗體【回扣教材回扣教材】1動物細胞融合動物細胞融合(1)動物細胞融合也稱動物細胞融合也稱_,是指兩個或多個動物,是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來細胞結合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來_細胞遺傳信息的單核細胞,稱為細胞遺傳信息的單核細胞,稱為_。(2)動物細
10、胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同,動物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同,誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法類誘導動物細胞融合的方法與植物原生質體融合的方法類似,常用的誘導因素有似,常用的誘導因素有_等。等。細胞雜交細胞雜交兩個或多個兩個或多個雜交細胞雜交細胞、電激、電激聚乙二醇聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、滅活的病毒(3)動物細胞融合的意義:突破了有性雜交方法的局限,動物細胞融合的意義:突破了有性雜交方法的局限,克服了克服了_,成為研究細胞遺,成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。2單克隆抗體單克隆
11、抗體(1)單克隆抗體:一個單克隆抗體:一個B淋巴細胞只分泌一種淋巴細胞只分泌一種_。要想獲得大量的單一抗體,必須克隆單一的要想獲得大量的單一抗體,必須克隆單一的B淋巴細胞,淋巴細胞,形成細胞群,其產生的抗體就是單克隆抗體。傳統(tǒng)方法形成細胞群,其產生的抗體就是單克隆抗體。傳統(tǒng)方法從血清中分離出的抗體從血清中分離出的抗體_。(2)雜交瘤細胞的特點:既能大量雜交瘤細胞的特點:既能大量_,又能產生,又能產生_。(3)單克隆抗體的優(yōu)點:單克隆抗體的優(yōu)點:_。 不同生物遠緣雜交的障礙不同生物遠緣雜交的障礙特異性抗體特異性抗體特異性差特異性差產量低、純度低、產量低、純度低、繁殖繁殖專一的抗體專一的抗體能大量
12、制備能大量制備特異性強,靈敏度高,并特異性強,靈敏度高,并(4)單克隆抗體的應用:單克隆抗體的應用:作為診斷試劑,具備作為診斷試劑,具備_的優(yōu)點;的優(yōu)點;用于治療疾用于治療疾病和運載藥物,如用于癌癥的治療。單抗藥物可單獨病和運載藥物,如用于癌癥的治療。單抗藥物可單獨使用,也可與使用,也可與_、藥物結合使用,制、藥物結合使用,制成成“生物導彈生物導彈”。準確、高效、簡易、快速準確、高效、簡易、快速同位素、毒素同位素、毒素【知識拓展知識拓展】植物體細胞雜交和動物細胞融合的拓展分析植物體細胞雜交和動物細胞融合的拓展分析(1)植物植物A、B是二倍體,體細胞中的染色體數(shù)是是二倍體,體細胞中的染色體數(shù)是2
13、n,則,則雜種細胞雜種細胞C就是就是4n,稱為異源四倍體。,稱為異源四倍體。(2)利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種的過程中,利用植物體細胞雜交的方法培育作物新品種的過程中,其遺傳物質的傳遞不遵循孟德爾的遺傳規(guī)律,因為生物其遺傳物質的傳遞不遵循孟德爾的遺傳規(guī)律,因為生物在進行有性生殖時才遵循孟德爾的遺傳規(guī)律,而植物體在進行有性生殖時才遵循孟德爾的遺傳規(guī)律,而植物體細胞雜交的過程不屬于有性生殖。細胞雜交的過程不屬于有性生殖。(3)動物細胞融合后獲得的雜種細胞,目前還沒有辦法讓動物細胞融合后獲得的雜種細胞,目前還沒有辦法讓其發(fā)育成一個個體,它不同于其發(fā)育成一個個體,它不同于“克隆克隆”,也不同
14、于植物,也不同于植物體細胞雜交。體細胞雜交。(4)兩者在融合過程中都會發(fā)生多種融合方式,如兩者在融合過程中都會發(fā)生多種融合方式,如AA、BB、AB,因此要進行篩選。,因此要進行篩選。(5)兩者都要用到細胞融合和細胞培養(yǎng)兩個技術手段。兩者都要用到細胞融合和細胞培養(yǎng)兩個技術手段。(6)動物細胞培養(yǎng)中用選擇性培養(yǎng)基先后選擇出雜交瘤細動物細胞培養(yǎng)中用選擇性培養(yǎng)基先后選擇出雜交瘤細胞和能產生特定抗體的細胞群。胞和能產生特定抗體的細胞群。(7)植物體細胞雜交的終點不是雜種細胞,而是雜種植株,植物體細胞雜交的終點不是雜種細胞,而是雜種植株,所以其原理有兩個:一是細胞的全能性;二是細胞膜的所以其原理有兩個:一
15、是細胞的全能性;二是細胞膜的流動性。動物細胞融合是形成雜交瘤細胞,不是形成新流動性。動物細胞融合是形成雜交瘤細胞,不是形成新個體,所以其原理只有一個,即體現(xiàn)細胞膜的流動性。個體,所以其原理只有一個,即體現(xiàn)細胞膜的流動性。 【典例精析典例精析】【例例3】(2013重慶重慶)下圖是單克隆抗體制備流程的簡下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關敘述,正確的是明示意圖。下列有關敘述,正確的是( )DA是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應T淋巴細胞淋巴細胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性同時
16、具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D是經篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群是經篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群【解析解析】是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細胞;淋巴細胞;胰蛋白酶可用于動物組織細胞的分離,胰蛋白酶可用于動物組織細胞的分離,中使用胰蛋白中使用胰蛋白酶則不利于雜交細胞的融合;酶則不利于雜交細胞的融合;為雜交融合細胞,其中為雜交融合細胞,其中包括包括B淋巴細胞與淋巴細胞與B淋巴細胞的融合細胞,鼠骨髓瘤細淋巴細胞的融合細胞,鼠骨髓瘤細胞與鼠骨髓瘤細胞的融合細胞,而這兩類細胞不可能同胞與鼠骨髓瘤細胞的融合細胞,而這兩類細胞不可能同時具有脾臟細胞和鼠骨
17、髓瘤細胞的特性;時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性;是經篩選培是經篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群,養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群,D對。對。課時練習五十課時練習五十一、選擇題一、選擇題(每小題只有一個正確選項每小題只有一個正確選項)1下列敘述中,正確的是下列敘述中,正確的是( )A培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞細胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變變C二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)惡性細胞系的
18、細胞可進行傳代培養(yǎng)D【解析解析】培養(yǎng)的細胞在培養(yǎng)瓶壁上發(fā)生接觸抑制時只培養(yǎng)的細胞在培養(yǎng)瓶壁上發(fā)生接觸抑制時只有單層細胞,此時若要繼續(xù)培養(yǎng),則需用胰蛋白酶處有單層細胞,此時若要繼續(xù)培養(yǎng),則需用胰蛋白酶處理后進行傳代培養(yǎng),理后進行傳代培養(yǎng),A錯誤;克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中錯誤;克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的增殖會停止,只有部分細胞的基因型會發(fā)多數(shù)細胞的增殖會停止,只有部分細胞的基因型會發(fā)生改變,生改變,B、C錯誤;惡性細胞系的細胞已經發(fā)生突錯誤;惡性細胞系的細胞已經發(fā)生突變,獲得不死性,可進行傳代培養(yǎng)。變,獲得不死性,可進行傳代培養(yǎng)。2下列人體細胞中分化程度最低的是下列人體細胞中分化程度最低的是( )
19、A胚胎干細胞胚胎干細胞 B造血干細胞造血干細胞C胰腺細胞胰腺細胞 D肌肉細胞肌肉細胞【解析解析】 胰腺細胞和肌肉細胞都是高度分化的細胞,分胰腺細胞和肌肉細胞都是高度分化的細胞,分化程度越高的,全能性越低;胚胎干細胞和造血干細胞化程度越高的,全能性越低;胚胎干細胞和造血干細胞都是可以進行分裂分化的細胞,但胚胎干細胞分化程度都是可以進行分裂分化的細胞,但胚胎干細胞分化程度比造血干細胞低。比造血干細胞低。A3下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( )A培養(yǎng)中的人效應培養(yǎng)中的人效應T細胞能產生單克隆抗體細胞能產生單克隆抗體B培養(yǎng)中的人培養(yǎng)中的人B細胞能夠無限增殖細胞
20、能夠無限增殖C人的成熟紅細胞經過培養(yǎng)能形成細胞群人的成熟紅細胞經過培養(yǎng)能形成細胞群D用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞【解析解析】 效應效應B細胞與骨髓瘤細胞融合后可以產生單克細胞與骨髓瘤細胞融合后可以產生單克隆抗體,單獨的隆抗體,單獨的B細胞是不能無限增殖的,細胞是不能無限增殖的,A、B錯誤;錯誤;人的成熟紅細胞沒有細胞核,不能繼續(xù)增殖培養(yǎng),人的成熟紅細胞沒有細胞核,不能繼續(xù)增殖培養(yǎng),C錯錯誤。誤。DC C C進行細胞核移植時,受體細胞宜采用進行細胞核移植時,受體細胞宜采用M期的卵母細期的卵母細胞胞D在在過程培養(yǎng)重組細胞時需添加動物血清、抗生素等過程培養(yǎng)
21、重組細胞時需添加動物血清、抗生素等物質物質【解析解析】A正確,正確,PCR技術是一項在生物體外復制特定技術是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術;片段的核酸合成技術;B正確,正確,過程是構建重組過程是構建重組DNA分子,通常用同一種限制性內切酶切割目的基因和分子,通常用同一種限制性內切酶切割目的基因和運載體;運載體;C錯誤,細胞核移植技術中,受體卵母細胞處于錯誤,細胞核移植技術中,受體卵母細胞處于M期期(減數(shù)第二次分裂中期減數(shù)第二次分裂中期);D正確,進行動物細胞培正確,進行動物細胞培養(yǎng)時,加入動物血清為細胞提供必須的營養(yǎng),加入抗生素養(yǎng)時,加入動物血清為細胞提供必須的營養(yǎng),加入抗生素
22、殺菌以創(chuàng)設無菌環(huán)境。殺菌以創(chuàng)設無菌環(huán)境。6單克隆抗體與血清抗體相比,優(yōu)越之處主要在于單克隆抗體與血清抗體相比,優(yōu)越之處主要在于( )A單克隆抗體能夠制成單克隆抗體能夠制成“生物導彈生物導彈”B單克隆抗體可以在體外制備單克隆抗體可以在體外制備C單克隆抗體的特異性強、靈敏度高,產量也大大高單克隆抗體的特異性強、靈敏度高,產量也大大高于血清抗體于血清抗體D單克隆抗體的制備過程簡單單克隆抗體的制備過程簡單【解析解析】 血清抗體雖然容易獲得,但由于含有多種抗血清抗體雖然容易獲得,但由于含有多種抗體,所以應用范圍比較窄。體,所以應用范圍比較窄。C7關于動物細胞培養(yǎng)的敘述錯誤的是關于動物細胞培養(yǎng)的敘述錯誤的
23、是( )A用于培養(yǎng)的細胞最好取自健康動物體內的組織細胞用于培養(yǎng)的細胞最好取自健康動物體內的組織細胞B將所取的組織先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理將所取的組織先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理使其分散成單個細胞,再稀釋制成細胞懸液培養(yǎng)使其分散成單個細胞,再稀釋制成細胞懸液培養(yǎng)C在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細胞繼續(xù)增殖理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細胞繼續(xù)增殖D傳代培養(yǎng)的細胞在傳至傳代培養(yǎng)的細胞在傳至1050代左右時,增殖會逐代左右時,增殖會逐漸減慢,以至于完全停止,所培養(yǎng)的細胞全部衰老死亡漸減慢,以至于完全停止,所培養(yǎng)的
24、細胞全部衰老死亡【解析解析】D錯,細胞傳至錯,細胞傳至1050代時,部分細胞的細胞代時,部分細胞的細胞核型發(fā)生變化,當繼續(xù)傳代培養(yǎng)時,少部分細胞會克服核型發(fā)生變化,當繼續(xù)傳代培養(yǎng)時,少部分細胞會克服細胞壽命的極限獲得不死性,這些細胞已發(fā)生突變,朝細胞壽命的極限獲得不死性,這些細胞已發(fā)生突變,朝癌細胞方向發(fā)展。癌細胞方向發(fā)展。D8通過細胞工程生產單克隆抗體時,要涉及到以下三個通過細胞工程生產單克隆抗體時,要涉及到以下三個篩選過程,這三個過程的先后順序是篩選過程,這三個過程的先后順序是( )在特定培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞在特定培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞選出能產生抗體選出能產生抗體的的B淋巴細胞淋巴細
25、胞選出能產生特定抗體并能大量增殖的細選出能產生特定抗體并能大量增殖的細胞群胞群A B C D【解析解析】 生產單克隆抗體時,經抗原處理后,先選出能產生產單克隆抗體時,經抗原處理后,先選出能產生抗體的生抗體的B淋巴細胞,將這些淋巴細胞,將這些B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,融合的結果可能出現(xiàn)親本核相互融合的細胞和雜交瘤合,融合的結果可能出現(xiàn)親本核相互融合的細胞和雜交瘤細胞,所以先在特定培養(yǎng)基上選出雜交瘤細胞,再選出能細胞,所以先在特定培養(yǎng)基上選出雜交瘤細胞,再選出能產生特定抗體并能大量增殖的細胞群。產生特定抗體并能大量增殖的細胞群。C9動物細胞融合的目的中最重要的是動物細胞融合
26、的目的中最重要的是( )A克服遠緣雜交不親和克服遠緣雜交不親和B制備單克隆抗體制備單克隆抗體C培育新物種培育新物種D生產雜種細胞生產雜種細胞【解析解析】動物細胞融合獲得的是雜種細胞,目前還沒動物細胞融合獲得的是雜種細胞,目前還沒有辦法讓其發(fā)育成一個個體,它不同于克隆和植物體有辦法讓其發(fā)育成一個個體,它不同于克隆和植物體細胞雜交,所以動物細胞融合的最重要目的是生產雜細胞雜交,所以動物細胞融合的最重要目的是生產雜種細胞。種細胞。D10動物細胞體外培養(yǎng)一般需要滿足以下條件動物細胞體外培養(yǎng)一般需要滿足以下條件( )無毒的環(huán)境無毒的環(huán)境無菌的環(huán)境無菌的環(huán)境合成培養(yǎng)基需加血合成培養(yǎng)基需加血漿漿溫度與動物體
27、溫相近溫度與動物體溫相近需要需要O2,不需要,不需要CO2CO2能調節(jié)培養(yǎng)液能調節(jié)培養(yǎng)液pHA BC D【解析解析】中不需中不需CO2錯誤,細胞培養(yǎng)所需氣體環(huán)境錯誤,細胞培養(yǎng)所需氣體環(huán)境主要有主要有O2和和CO2,O2是細胞代謝必需的,是細胞代謝必需的,CO2能維持能維持培養(yǎng)液的培養(yǎng)液的pH。D11分化中的兩棲類細胞核中,分化中的兩棲類細胞核中,RNA的合成非常旺盛,的合成非常旺盛,但移植到去核卵細胞后,但移植到去核卵細胞后,RNA的合成立即停止。下列的合成立即停止。下列對這一實驗現(xiàn)象的分析中,合理的解釋是對這一實驗現(xiàn)象的分析中,合理的解釋是( )A移植的核基因結構改變了移植的核基因結構改變了
28、B卵細胞內含有阻抑基因表達的物質卵細胞內含有阻抑基因表達的物質C卵細胞內缺少合成卵細胞內缺少合成RNA聚合酶的細胞器聚合酶的細胞器D實驗中丟失了實驗中丟失了RNA合成的模板合成的模板B12動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的主要區(qū)別是( )A動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同動物細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與植物的不同B動物細胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細胞,植物組織培養(yǎng)是培動物細胞培養(yǎng)是培養(yǎng)單個細胞,植物組織培養(yǎng)是培養(yǎng)組織養(yǎng)組織C動物細胞培養(yǎng)可以傳代培養(yǎng),而植物組織培養(yǎng)不能動物細胞培養(yǎng)可以傳代培養(yǎng),而植物組織培養(yǎng)不能傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)D動物細胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質的
29、改變,而植動物細胞培養(yǎng)過程中可發(fā)生遺傳物質的改變,而植物組織培養(yǎng)不能物組織培養(yǎng)不能【解析解析】 動物細胞的液體培養(yǎng)基中添加了葡萄糖和血動物細胞的液體培養(yǎng)基中添加了葡萄糖和血漿等,植物細胞的培養(yǎng)基添加的是蔗糖,并需要加入瓊漿等,植物細胞的培養(yǎng)基添加的是蔗糖,并需要加入瓊脂形成固態(tài)。脂形成固態(tài)。A13某小鼠生活過程中被多種病原體感染過,科學家某小鼠生活過程中被多種病原體感染過,科學家以該小鼠為實驗材料,利用單克隆抗體技術,獲得了以該小鼠為實驗材料,利用單克隆抗體技術,獲得了抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列敘述不正確抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列敘述不正確的是的是( )A被多種病原體感染過
30、的小鼠體內會產生多種效應被多種病原體感染過的小鼠體內會產生多種效應B細胞細胞B經細胞融合后形成的單個雜交瘤細胞可分泌多種經細胞融合后形成的單個雜交瘤細胞可分泌多種特異性抗體特異性抗體C用用“抗原抗原抗體檢測法抗體檢測法”可篩選出產生特定抗體的可篩選出產生特定抗體的雜交瘤細胞雜交瘤細胞D單克隆抗體的制備過程中使用了細胞培養(yǎng)和細胞單克隆抗體的制備過程中使用了細胞培養(yǎng)和細胞融合技術融合技術B動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 細胞核移植細胞核移植 腦垂體腦垂體(垂體垂體) F 具有全能性具有全能性 乳腺細胞的細胞核乳腺細胞的細胞核無性生殖無性生殖 (4)若若a、b分別是基因型為分別是基因型為Hhrr、hhRr
31、兩個煙草品種的兩個煙草品種的花粉,且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于花粉,且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于一對隱性純合基因一對隱性純合基因(rr或或hh)的作用,在光照強度大于的作用,在光照強度大于800 lx時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為因型為HhRr的雜種細胞,較為簡便的篩選方法是的雜種細胞,較為簡便的篩選方法是_。(5)若若a、b表示兩種植物體細胞,則由表示兩種植物體細胞,則由d細胞形成雜種植細胞形成雜種植株的原理是株的原理是_。(6)若若a、b分別為骨髓瘤細胞和分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞,則淋巴細胞
32、,則d細胞特點細胞特點是是_。由。由d細細胞產生的抗體與普通血清抗體相比較,具有胞產生的抗體與普通血清抗體相比較,具有_的特點的特點(至少寫出兩點至少寫出兩點)。生產上一般。生產上一般不能通過直接培養(yǎng)不能通過直接培養(yǎng)B淋巴細胞的方法生產單克隆抗體的淋巴細胞的方法生產單克隆抗體的主要原因是主要原因是_。大于大于800 lx光照光照植物細胞的全能性植物細胞的全能性既能無限繁殖,又能產生特定的抗體既能無限繁殖,又能產生特定的抗體學性質單一、靈敏度高學性質單一、靈敏度高特異性強、化特異性強、化未經免疫的未經免疫的B淋巴細胞不能產生抗體淋巴細胞不能產生抗體動物細胞融合動物細胞融合 胰蛋白酶胰蛋白酶 (2
33、)A細胞的特點是細胞的特點是_,經選,經選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞,還需進行擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞,還需進行_和抗和抗體檢測,經多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體檢測,經多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞,進行體內或體外培養(yǎng)。體的細胞,進行體內或體外培養(yǎng)。(3)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,具有單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,具有_的特點。的特點。(4)過程優(yōu)質奶牛的培育過程需要進行胚胎移植,移植過程優(yōu)質奶牛的培育過程需要進行胚胎移植,移植后的胚胎能在受體子宮中存活,其生理基礎是后的胚胎能在受體子宮中存活,其生理基礎是_。(5)若要同時獲得多頭與此優(yōu)質奶牛相同的小牛,可對若要同時獲得多頭與此
34、優(yōu)質奶牛相同的小牛,可對中囊胚進行中囊胚進行_,操作過程需,操作過程需要特別注意的問題是:要特別注意的問題是:_。否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步。否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。發(fā)育。 無限增殖和產生特定抗體無限增殖和產生特定抗體克隆化培養(yǎng)克隆化培養(yǎng)特異性強,靈特異性強,靈敏度高敏度高受體對移受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應胚胎分割移植胚胎分割移植(或胚胎分割或胚胎分割) 注意將囊胚的內細胞團進行注意將囊胚的內細胞團進行均等分割均等分割漿細胞不能無限增殖漿細胞不能無限增殖 抗原抗原 (3)在單克隆抗體制備過程中之所以選用在單克
35、隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細胞和淋巴細胞和骨髓瘤細胞,是因為它們融合后的雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞,是因為它們融合后的雜交瘤細胞具有_、_的特性。的特性。(4)單克隆抗體制備過程運用了單克隆抗體制備過程運用了_和和_的動物細胞工程技術手段。的動物細胞工程技術手段。(5)動物細胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、動物細胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、抗生素、維生素等,與植物細胞培養(yǎng)基有所不無機鹽、抗生素、維生素等,與植物細胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有同的是,還含有_。(6)在動物細胞融合過程中,需要將所選取的組織細胞在動物細胞融合過程中,需要將所選取的組織細胞離散開,以利于細
36、胞融合,可用離散開,以利于細胞融合,可用_處理離體組織細胞使之分散開。處理離體組織細胞使之分散開。在體外大量繁殖在體外大量繁殖產生特異性抗體產生特異性抗體動物細胞融合動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物血清動物血清胰蛋白酶胰蛋白酶(或膠原或膠原蛋白酶蛋白酶) (7)鼠源雜交瘤抗體與普通血清抗體相比較,具有鼠源雜交瘤抗體與普通血清抗體相比較,具有_的特點。的特點。(8)改造鼠源雜交瘤抗體,生產鼠改造鼠源雜交瘤抗體,生產鼠人嵌合抗體,屬于人嵌合抗體,屬于_(生物工程生物工程)的范疇。圖示過程是根據(jù)預的范疇。圖示過程是根據(jù)預期的期的_,設計,設計_,最終必須對最終必須對_進行操作。進行操作。(9
37、)經過改造的鼠經過改造的鼠人嵌合抗體,與鼠源雜交瘤抗體相比人嵌合抗體,與鼠源雜交瘤抗體相比較,突出的優(yōu)點是較,突出的優(yōu)點是_。特異性強、靈敏度高特異性強、靈敏度高蛋白質工程蛋白質工程嵌合抗體功能嵌合抗體功能嵌合抗體的結構嵌合抗體的結構基因基因對人體的不良反應對人體的不良反應(或過敏反應或過敏反應等副作用等副作用)減少減少【解析解析】(1)由于漿細胞沒有無限增殖的能力,因此不能由于漿細胞沒有無限增殖的能力,因此不能通過培養(yǎng)漿細胞生產單克隆抗體;通過培養(yǎng)漿細胞生產單克隆抗體;(2)單克隆抗體制備時,單克隆抗體制備時,需要先把抗原注入小鼠的體內,刺激其產生漿細胞,然需要先把抗原注入小鼠的體內,刺激其
38、產生漿細胞,然后從小鼠的脾臟中把漿細胞分離出來,與骨髓瘤細胞融后從小鼠的脾臟中把漿細胞分離出來,與骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞;合成雜交瘤細胞;(3)雜交瘤細胞具有無限增殖的特性,雜交瘤細胞具有無限增殖的特性,也具有合成抗體的能力;也具有合成抗體的能力;(4)單克隆抗體制備過程中使用單克隆抗體制備過程中使用了動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)等技術;了動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)等技術;(5)動物細胞培動物細胞培養(yǎng)液中,必須有動物血清;養(yǎng)液中,必須有動物血清;(6)用胰蛋白酶用胰蛋白酶(膠原蛋白酶膠原蛋白酶)可以把動物組織分散成單個細胞;可以把動物組織分散成單個細胞;(7)單克隆抗體具有特單克隆抗體具有特
39、異性強、靈敏度高的特性;異性強、靈敏度高的特性;(8)從圖中看改造鼠源雜交瘤從圖中看改造鼠源雜交瘤抗體,生產鼠抗體,生產鼠人嵌合抗體,屬于蛋白質工程的范疇;人嵌合抗體,屬于蛋白質工程的范疇;(9)鼠鼠人嵌合抗體的優(yōu)點是副作用減少。人嵌合抗體的優(yōu)點是副作用減少。注射相應的抗原注射相應的抗原 (2)細胞細胞DNA合成一般有兩條途徑。主途徑是由糖和氨合成一般有兩條途徑。主途徑是由糖和氨基酸合成核苷酸,進而合成基酸合成核苷酸,進而合成DNA,葉酸作為重要的輔酶,葉酸作為重要的輔酶參與這一合成過程。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺參與這一合成過程。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經次黃
40、嘌呤磷酸核糖轉化酶嘧啶核苷存在的情況下,經次黃嘌呤磷酸核糖轉化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成的催化作用合成DNA。HAT培養(yǎng)基中有三種關鍵成分:次黃嘌呤培養(yǎng)基中有三種關鍵成分:次黃嘌呤(H)、氨甲蝶呤氨甲蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷和胸腺嘧啶核苷(T),氨甲蝶呤是葉酸的拮,氨甲蝶呤是葉酸的拮抗劑??箘?。在在HAT培養(yǎng)基中能將瘤細胞淘汰的物質是培養(yǎng)基中能將瘤細胞淘汰的物質是_。在在HAT培養(yǎng)基中脾細胞被淘汰的原因是培養(yǎng)基中脾細胞被淘汰的原因是_。第二次篩選出產生特定抗體的雜交瘤細胞所用的技術第二次篩選出產生特定抗體的雜交瘤細胞所用的技術是是_。 氨甲蝶呤氨
41、甲蝶呤不能無限增殖不能無限增殖抗原抗原抗體雜交抗體雜交(3)培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)基中需加入動物血清的原因培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)基中需加入動物血清的原因是是_。(4)雜交瘤細胞有氧呼吸過程中產生的雜交瘤細胞有氧呼吸過程中產生的H來自于反應物來自于反應物中的中的_,在,在_處與氧結合。處與氧結合。(5)雜交瘤細胞在增殖過程中能形成雜交瘤細胞在增殖過程中能形成_個四分體。個四分體。(6)雜交瘤細胞體外培養(yǎng)過程中,為避免毒害,常采取雜交瘤細胞體外培養(yǎng)過程中,為避免毒害,常采取的措施是的措施是_。(7)如果破壞雜交瘤細胞中的核仁,抗體合成將不能進如果破壞雜交瘤細胞中的核仁,抗體合成將不能進行,因為該結構與行,因為該結構與_的合成有關。的合成有關。血清中含有未知的促進細胞增殖的物質血清中含有未知的促進細胞增殖的物質葡萄糖和水葡萄糖和水線粒體內膜線粒體內膜0定期更換培養(yǎng)液定期更換培養(yǎng)液核仁核仁
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