高考生物大二輪總復(fù)習(xí) 增分策略 專題十二 必考點(diǎn)29基因工程和細(xì)胞工程課件.ppt

必考點(diǎn)29基因工程和細(xì)胞工程 專題十二現(xiàn)代生物科技專題 依綱排查 1 基因工程的誕生 基因工程的理論基礎(chǔ)是什么 2 基因工程的原理 技術(shù)及應(yīng)用 1 基因工程的操作工具是什么 有哪些特點(diǎn) 2 基因工程操作的 四步曲 分別是什么 3 基因工程在農(nóng)業(yè) 醫(yī)學(xué)等方面有哪些應(yīng)用 3 蛋白質(zhì)工程 1 蛋白質(zhì)工程操作的基本原理和設(shè)計(jì)思路是什么 2 蛋白質(zhì)工程和基因工程的關(guān)系是什么 4 植物組織培養(yǎng) 1 植物組織培養(yǎng)的基本原理和一般操作流程是怎樣的 2 植物組織培養(yǎng)有哪些應(yīng)用 5 動物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆 1 動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本操作過程和條件分別是什么 2 體細(xì)胞克隆的操作流程及應(yīng)用是什么 6 細(xì)胞融合與單克隆抗體 1 單克隆抗體制備的操作流程是怎樣的 2 單克隆抗體的特點(diǎn)是什么 有哪些應(yīng)用 核心提煉夯實(shí)基礎(chǔ)突破要點(diǎn) 題組突破剖析題型提煉方法 欄目索引 考點(diǎn)整合體系重建 1 理清基因工程3種操作工具的作用與特點(diǎn) 核心提煉 2 掌握獲取目的基因的3種途徑 1 直接分離 從自然界已有的物種中分離 如從 中獲取 2 人工合成目的基因 常用方法如下 化學(xué)合成法 已知核苷酸序列的基因 直接利用用化學(xué)方法合成 不需要模板 人工合成法 以 為模板 在 作用下人工合成 利用技術(shù)擴(kuò)增 基因文庫 較小 DNA合成儀 RNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 PCR 3 牢記基因表達(dá)載體的構(gòu)建 1 基因表達(dá)載體的組成 目的基因 啟動子 終止子 復(fù)制原點(diǎn) 2 啟動子和終止子 啟動子是結(jié)合的位點(diǎn) 啟動轉(zhuǎn)錄 終止子是的位點(diǎn) 標(biāo)記基因 RNA聚合酶 終止轉(zhuǎn)錄 3 基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程 同一種限制酶切割 DNA連接酶 4 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 顯微注射 感受態(tài)細(xì)胞 5 理清目的基因的檢測與鑒定 1 導(dǎo)入檢測 雜交技術(shù) 使用DNA探針 2 表達(dá)檢測 3 個體生物學(xué)水平鑒定 如對轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行抗蟲或抗病等的接種實(shí)驗(yàn) DNA分子 分子雜交 抗原 抗體 6 理清植物細(xì)胞工程兩大技術(shù) 全能性 膜的流動性和 植物細(xì)胞全能性 愈傷組織 再 分化 雜種細(xì)胞 7 理清動物細(xì)胞培養(yǎng)的成分 過程及相關(guān)酶 1 培養(yǎng)基的特有成分 2 培養(yǎng)過程 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 3 制備懸液的酶 動物血清 胰蛋白酶或膠原蛋白酶 8 完善下面克隆動物培育流程圖 細(xì)胞質(zhì) 胚胎移植 細(xì)胞核 核移植 9 把握動物細(xì)胞融合的原理 方法及應(yīng)用 1 原理 2 促融方法 滅活的病毒 物理法 化學(xué)法 3 應(yīng)用 制備單克隆抗體 細(xì)胞膜的流動性 10 理清單克隆抗體制備的過程 1 基因工程的相關(guān)判斷 1 攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選必須通過分子檢測 2014 天津 4A 2 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定必須通過分子檢測 2014 天津 4C 3 一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列 2007 全國 4A 題組一聚焦基因工程 題組突破 4 用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸 2010 浙江 2A 5 每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點(diǎn) 2011 浙江 6B 6 自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上 屬于基因工程 2010 大綱全國 5D 7 轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物 不會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加 2010 江蘇 18B 8 重組質(zhì)粒與探針能進(jìn)行分子雜交是因?yàn)镈NA分子脫氧核糖和磷酸交替連接 2013 安徽 6C 9 應(yīng)用DNA探針技術(shù) 可以檢測轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá) 2011 四川 5D 10 動物的生長激素基因轉(zhuǎn)入植物后不能表達(dá) 2010 江蘇 18C 2 2015 重慶 6 下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述 正確的是 A 表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B 表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原 起 點(diǎn)C 借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D 啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用 解析人肝細(xì)胞不能合成胰島素 則人肝細(xì)胞中不含有胰島素的mRNA 不能通過反轉(zhuǎn)錄獲得人胰島素基因 A錯誤 表達(dá)載體的復(fù)制啟動于復(fù)制起點(diǎn) 胰島素基因的表達(dá)啟動于啟動子 B錯誤 抗生素抗性基因是標(biāo)記基因 可用于篩選含胰島素基因的受體細(xì)胞 C正確 啟動子在轉(zhuǎn)錄過程中起作用 終止密碼子在翻譯過程中起作用 D錯誤 答案C 3 2015 全國 40 已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì) P 該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 由305個氨基酸組成 如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸 240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸 改變后的蛋白質(zhì) P1 不但保留P的功能 而且具有了酶的催化活性 回答下列問題 1 從上述資料可知 若要改變蛋白質(zhì)的功能 可以考慮對蛋白質(zhì)的 進(jìn)行改造 解析對蛋白質(zhì)的氨基酸序列 或結(jié)構(gòu) 進(jìn)行改造 可達(dá)到改變蛋白質(zhì)功能的目的 氨基酸序列 或結(jié)構(gòu) 其他答案合理也可 2 以P基因序列為基礎(chǔ) 獲得P1基因的途徑有修飾 基因或合成 基因 所獲得的基因表達(dá)時是遵循中心法則的 中心法則的全部內(nèi)容包括 的復(fù)制 以及遺傳信息在不同分子之間的流動 即 解析以P基因序列為基礎(chǔ) 獲得P1基因 可以對P基因進(jìn)行修飾改造 也可以用人工方法合成P1基因 中心法則的全部內(nèi)容包括 即 DNA RNA的復(fù)制 DNA RNA RNA DNA RNA 蛋白質(zhì) 或轉(zhuǎn)錄 逆轉(zhuǎn)錄 翻譯 P P1 DNA和RNA 或遺傳物質(zhì) DNA RNA RNA DNA RNA 蛋白質(zhì) 或轉(zhuǎn)錄 逆轉(zhuǎn)錄 翻譯 3 蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程 其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā) 通過 和 進(jìn)而確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列 據(jù)此獲得基因 再經(jīng)表達(dá) 純化獲得蛋白質(zhì) 之后還需要對蛋白質(zhì)的生物 進(jìn)行鑒定 解析蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā) 通過設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和推測應(yīng)有的氨基酸序列 推測相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列 并獲取基因 經(jīng)表達(dá)的蛋白質(zhì) 要對其進(jìn)行生物功能鑒定 設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 推測應(yīng)有的氨基酸序列 功能 4 2013 新課標(biāo) 40節(jié)選 閱讀如下資料 材料甲科學(xué)家將牛生長激素基因?qū)胄∈笫芫阎?得到了體型巨大的 超級小鼠 科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草 材料乙T4溶菌酶在溫度較高時易失去活性 科學(xué)家對編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造 使其表達(dá)的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個二硫鍵 提高了T4溶菌酶的耐熱性 回答下列問題 1 材料甲屬于基因工程的范疇 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用 法 構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有 和 在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時 常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 農(nóng)桿菌的作用是 解析將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動物受精卵常用的方法是顯微注射法 構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 在培育轉(zhuǎn)基因植物時常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 因?yàn)檗r(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物 顯微注射 限制酶 DNA連接酶 農(nóng)桿菌可感染植物 將目的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中 2 材料乙中的技術(shù)屬于 工程范疇 該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ) 通過基因修飾或基因合成 對 進(jìn)行改造 或制造一種 的技術(shù) 在該實(shí)例中 引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的 序列發(fā)生了改變 解析蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ) 通過基因修飾或基因合成 對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造 或制造一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù) 該實(shí)例中 T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變 蛋白質(zhì) 現(xiàn)有的蛋白質(zhì) 新蛋白質(zhì) 氨基酸 5 為探究SHH基因與角化囊腫發(fā)生的相關(guān)性 科研人員利用SHH基因的非模板鏈轉(zhuǎn)錄合成的RNA作為探針 進(jìn)行分子雜交實(shí)驗(yàn) 以檢測SHH基因在角化囊腫中的表達(dá)情況 其基本流程如下圖 Amp表示氨芐青霉素抗性基因 LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá) 請回答問題 1 重組載體中SHH基因轉(zhuǎn)錄合成RNA探針時 填 需要 或 不需要 啟動子 解析重組載體中SHH基因表達(dá)需要啟動子 需要 2 步驟 中 用Ca2 處理大腸桿菌 使之成為 細(xì)胞 然后導(dǎo)入重組載體 實(shí)驗(yàn)中 用添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌 未導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌將會死亡 原因是這些細(xì)菌不含有 基因 解析大腸桿菌細(xì)胞用Ca2 處理后就成為感受態(tài)細(xì)胞 能在添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存的細(xì)菌含有氨芐青霉素抗性基因 沒有氨芐青霉素抗性基因的細(xì)菌將會死亡 感受態(tài) Amp 或氨芐青霉素抗性或抗性 3 能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和X gal的培養(yǎng)基上會形成藍(lán)色菌落 易于識別 根據(jù)上述原理可以初步判斷 填 藍(lán)色 或 白色 菌落中的大腸桿菌為重組菌 解析能表達(dá)LacZ基因的大腸桿菌在含有IPTG和X gal的培養(yǎng)基上會形成藍(lán)色菌落 而重組菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表達(dá) 故重組菌在含有IPTG和X gal的培養(yǎng)基上會形成白色菌落 白色 4 將制備的探針加入角化囊腫切片中 探針將與 形成雜交帶 進(jìn)而判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況 解析判斷SHH基因的轉(zhuǎn)錄情況 也就是判斷SHH基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA SHH基因轉(zhuǎn)錄的mRNA 失分警示 鹽酸在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用 1 使用限制酶的注意點(diǎn) 1 一般用同種限制酶切割載體和目的基因 2 不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端 2 DNA連接酶 DNA聚合酶DNA連接酶連接兩個DNA片段 而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上 3 限制酶 DNA酶 解旋酶限制酶是切割某種特定的脫氧核苷酸序列 并使兩條鏈在特定的位置斷開 DNA酶是將DNA水解為組成單位 解旋酶是將DNA的兩條鏈間的氫鍵打開形成兩條單鏈 4 啟動子 終止子 1 啟動子 DNA片段 起始密碼子 RNA 1 終止子 DNA片段 終止密碼子 RNA 6 細(xì)胞工程的相關(guān)判斷 1 產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素 8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必須通過分子檢測 2014 天津 4B 2 21三體綜合征的診斷必須通過分子檢測 2014 天津 4D 3 培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是組織培養(yǎng) 2012 廣東 2A 題組二聚焦細(xì)胞工程 4 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動物組織分散成單個細(xì)胞均需酶處理 2008 全國 5B 5 乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng) 2015 江蘇 3A 6 培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞 2010 浙江 4A 7 動物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性 2012 江蘇 22C 8 體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體 2011 江蘇 14B 9 單克隆抗體技術(shù)可以用于治療老年癡呆癥 2010 江蘇 17C 10 細(xì)胞核移植主要在同種動物 同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行 2015 江蘇 3B 7 植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用下圖所示圖解簡單表示 1 培育胚狀體利用了 這一項(xiàng)生物技術(shù) 胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng) 則可培育出完整的植株 這體現(xiàn)了 培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外 還必須含有 等植物激素 還需要對培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的 解析離體植物細(xì)胞通過脫分化形成愈傷組織 通過再分化形成具有根和芽的胚狀體 再通過細(xì)胞分裂 分化發(fā)育成一個完整的植株 該技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng) 其原理為植物細(xì)胞的全能性 培養(yǎng)基的成分包括水 無機(jī)鹽 維生素 氨基酸 蔗糖 植物激素 生長素和細(xì)胞分裂素等 等 培養(yǎng)基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌 能性 植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞的全 細(xì)胞分裂 滅菌 素 生長素 2 如果愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的 若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物 則只需要培養(yǎng)到 若為了獲得三七的人工種子 則需要培養(yǎng)到 如果愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生的 通過基因工程要獲取抗蟲棉 目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是 法 解析三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物 將三七葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織即可 獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體 棉花為雙子葉植物 導(dǎo)入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 愈傷組織 胚狀體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 3 從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中 必須要經(jīng)過 無絲分裂 有絲分裂 減數(shù)分裂 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 植物體細(xì)胞雜交 細(xì)胞融合 脫分化 再分化解析離體葉肉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織 再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體 8 甲 乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物 甲含有效成分A 乙含有效成分B 某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物 回答下列問題 1 為了培育該新型藥用植物 可取甲和乙的葉片 先用 酶和 酶去除細(xì)胞壁 獲得具有活力的 再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合 形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成 組織 然后經(jīng)過 形成完整的雜種植株 這種培育技術(shù)稱為 解析該新型藥用植物是通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的 要獲得有活力的原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交 因此首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細(xì)胞壁 然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑 物理方法 離心 振動等 誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合 然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株 植物組織培養(yǎng)的主要過程是 先脫分化形成愈傷組織 然后再分化形成植物體 利用了植物細(xì)胞的全能性 答案纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化 分化 植物體細(xì)胞雜交技術(shù) 2 上述雜種植株屬于多倍體 多倍體是指 假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的 而上述雜種植株是可育的 造成這種差異的原因是 解析如果植物甲 乙是兩個物種 二者不能通過有性雜交產(chǎn)生可育后代 原因是甲 乙有性雜交所產(chǎn)生的后代在減數(shù)分裂過程中同源染色體聯(lián)會異常 也就是存在著生殖隔離 但植物甲 乙通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生的后代卻是可育的 因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正 常的聯(lián)會 產(chǎn)生正常的配子 由于甲 乙都是二倍體 因此 植物體細(xì)胞雜交得到的后代是異源多倍體 四倍體 答案體細(xì)胞中含有三個或三個以上染色體組的個體在減數(shù)分裂過程中 前者染色體聯(lián)會異常 而后者染色體聯(lián)會正常 3 這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖 經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的 等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子 解析人工種子生產(chǎn)不受氣候 季節(jié)和地域等因素限制 而且可以避免后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn) 因此 植物細(xì)胞工程重要的應(yīng)用之一是制備人工種子 用到的核心技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù) 將植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體 不定芽 頂芽 腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子 胚狀體 不定芽 頂芽 腋芽 9 美國科學(xué)家已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中成功培育出膀胱 并順利移植到7名患者體內(nèi) 培育過程如圖所示 據(jù)圖回答下列問題 1 a過程屬于細(xì)胞工程中的 其培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含有 解析圖中a過程為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程 動物細(xì)胞培養(yǎng)基成分與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含動物血清 動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物血清 2 b過程由數(shù)萬個細(xì)胞繁殖到15億個細(xì)胞是 的結(jié)果 上述過程中不但需要無菌 無毒的環(huán)境 適宜的營養(yǎng) 還需要適宜的 環(huán)境 解析動物細(xì)胞培養(yǎng)時 不但需要無菌 無毒的環(huán)境 適宜的營養(yǎng) 還需要適宜的溫度 pH及氣體環(huán)境 有絲分裂 細(xì)胞 分裂 溫度和pH 氣體 3 新器官與老器官的 重組 選填 是 或 不是 基因重組 因?yàn)樾缕鞴倥c老器官的 相同 解析由于新器官與老器官的遺傳物質(zhì)相同 新器官與老器官的 重組 不是基因重組 不是 遺傳物質(zhì) 4 新膀胱 移植后 選填 會 或 不會 成為抗原 因?yàn)樾吕掀鞴倬哂?蛋白質(zhì)等物質(zhì) 解析因?yàn)樾吕掀鞴偌?xì)胞具有相同的表面抗原等物質(zhì) 新膀胱 移植后不會成為抗原 不會 相同的 5 除上述方法外 還可將患者的體細(xì)胞核移入去核的 中 這是利用體細(xì)胞 技術(shù) 形成相應(yīng)的組織 器官 解析利用體細(xì)胞核移植技術(shù)將患者的體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中 重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)也可形成相應(yīng)的組織 器官 卵母細(xì)胞 核移植 10 2014 新課標(biāo) 40 某研究者用抗原 A 分別免疫3只同種小鼠 X Y和Z 每只小鼠免疫5次 每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價 能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù) 結(jié)果如下圖所示 若要制備雜交瘤細(xì)胞 需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞 染色體數(shù)目為40條 并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞 染色體數(shù)目為60條 按一定比例加入試管中 再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合 經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測 得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞 回答下列問題 1 制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時 所用免疫小鼠的血清抗體效價需達(dá)到16000以上 則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的 達(dá)到要求后的X Y Z這3只免疫小鼠中 最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是 小鼠 理由是 解析據(jù)圖分析可知 第四次注射后X Y Z小鼠的血清抗體效價幾乎都達(dá)到16000以上 小鼠Y的血清抗體效價最高 最適合用于制備單克隆抗體 答案4YY小鼠的血清抗體效價最高 2 細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后 融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外 可能還有 體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是 解析融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外 還有骨髓瘤細(xì)胞的自身融合細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合細(xì)胞 細(xì)胞的融合是隨機(jī)的 并且不可能所有細(xì)胞都融合 故體系中會出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的 且融合率達(dá)不到100 3 雜交瘤細(xì)胞中有 個細(xì)胞核 染色體數(shù)目最多是 條 解析動物細(xì)胞融合后形成的是具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中的染色體數(shù)目最多為40 60 100 條 1 100 4 未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活 原因是 解析正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的 且經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞高度分化 不能無限增殖 而是經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后逐漸衰老死亡 不能無限增殖 易錯警示 1 雜種細(xì)胞 雜交細(xì)胞 1 雜種細(xì)胞 植物體細(xì)胞雜交過程中 融合的原生質(zhì)體出現(xiàn)細(xì)胞壁之后形成的細(xì)胞叫雜種細(xì)胞 2 雜交細(xì)胞 動物細(xì)胞融合形成的細(xì)胞常稱為雜交細(xì)胞 2 動物細(xì)胞培養(yǎng)的特殊的營養(yǎng)條件 1 液體培養(yǎng)基 2 加入動物血清 血漿等 3 通入氧氣以滿足代謝的需要 4 通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的pH 3 單克隆抗體制備中2次篩選的目的不同 1 第1次 得到既能分泌抗體又能大量增殖的雜交瘤細(xì)胞 2 第2次 篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞 考點(diǎn)整合體系重建 基因 DNA連接酶 細(xì)胞增殖 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動性 動物細(xì)胞核的全能性 給小鼠注射抗原 產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞