2019高考生物大一輪復(fù)習(xí) 現(xiàn)代生物科技專題 第1講 基因工程課后提能演練 新人教版選修3.doc
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第1講 基因工程1(2018年天津一中月考)chlL基因是藍藻DNA上控制葉綠素合成的基因,為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失chlL基因的變異株細胞。技術(shù)路線如圖甲所示,請據(jù)圖分析回答:(1)與真菌相比較,藍藻在結(jié)構(gòu)上最主要的特點是_,在功能上最主要的特點是_。(2)過程中均使用的工具酶有_。(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒B在整個操作過程中的目的是_。(4)若含有chlL基因的DNA片段和選用的質(zhì)粒上的限制酶切割位點如圖乙所示。請回答:構(gòu)建含chlL基因的重組質(zhì)粒A時,應(yīng)選用的限制酶是_,對_進行切割。同時用酶1和酶4切割圖乙中的質(zhì)粒,則產(chǎn)生含有1 800對堿基和8 200對堿基的兩種片段;用圖中四種酶同時切割此質(zhì)粒,則產(chǎn)生含有600對堿基和8 200對堿基的兩種片段;若換用酶1和酶3同時切割此質(zhì)粒,則產(chǎn)生的片段是_。【答案】(1)無以核膜為界限的細胞核能夠進行光合作用(2)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(3)破壞chlL基因,操作成功后篩選出該變異株細胞(4)酶1和酶3質(zhì)粒和含chlL基因的DNA含有1 200對堿基和8 800對堿基的兩種片段【解析】(1)藍藻為原核生物,無以核膜為界限的細胞核,其體內(nèi)含有光合色素及與光合作用有關(guān)的酶,能進行光合作用。(2)表達載體構(gòu)建時需限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)和DNA連接酶等工具酶。(3)由題干信息“構(gòu)建該種生物缺失chlL基因的變異株細胞”可知,構(gòu)建重組質(zhì)粒B的目的在于破壞chlL基因并篩選出變異株細胞。(4)由圖乙知,獲得chlL基因需酶1和酶3對此基因所在的DNA進行切割,同時對質(zhì)粒也要用同種酶切割處理,以便構(gòu)建重組質(zhì)粒A。由題意知四種酶同時切割時含600對堿基的片段共有3個。若用酶1和酶3同時切割時,產(chǎn)生的片段有8 2006008 800(對)堿基;另一片段為60021 200(對)堿基。2我國科學(xué)家張道遠先生通過從耐旱灌木白花檉柳中克隆得到TSOD基因,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化到棉花中,獲得了具備更強抗旱性的T4代轉(zhuǎn)基因棉花株系。下圖為轉(zhuǎn)基因抗旱棉花的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:(1)過程表示用_擴增目的基因的方法。過程用到的工具酶有_。步驟一般用_處理農(nóng)桿菌,使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細胞除步驟所示的方法外,還可采用_。如果受體細胞是動物的受精卵,則一般采用的方法是_。(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了_技術(shù),利用了_的原理,步驟表示_。(4)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素標記的_作探針進行分子水平鑒定,再_進行個體水平鑒定棉花植株的抗旱性?!敬鸢浮?1)PCR技術(shù)限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)和DNA連接酶Ca2(或CaCl2)(2)花粉管通道法(基因槍法)顯微注射法(3)植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性脫分化、再分化(4)抗旱基因(TSOD基因、目的基因)移栽到干旱土地中【解析】(1)過程表示用PCR技術(shù)擴增目的基因。過程用到的工具酶有限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶)和DNA連接酶。步驟一般用Ca2(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌,使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細胞除步驟所示的方法外,還可采用花粉管通道法(基因槍法)。如果受體細胞是動物的受精卵,則一般采用的方法是顯微注射法。(3)外植體培養(yǎng)成為試管苗的過程采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù),利用了植物細胞的全能性的原理,步驟表示脫分化、再分化。(4)為了確定抗旱轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功,可先用放射性同位素標記的抗旱基因(TSOD基因、目的基因)作探針進行分子水平鑒定,再移栽到干旱土地中進行個體水平鑒定棉花植株的抗旱性。3GDNF蛋白是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子,對損傷的神經(jīng)細胞具有營養(yǎng)和保護作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的基因表達載體(如圖所示),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細胞,用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療。請回答下列相關(guān)問題:(1)在培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細胞時,常先用_把組織分離,獲得單個細胞。當培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞相互接觸后停止分裂,通過分瓶培養(yǎng)可以使細胞繼續(xù)增殖,該過程稱為_。(2)除目的基因、啟動子外,基因表達載體通常還含有_,在構(gòu)建GDNF基因的表達載體時,需選擇圖中的_限制酶進行酶切。(3)根據(jù)上圖,酶切后的載體和GDNF基因經(jīng)_酶處理,可獲得_種含有目的基因的產(chǎn)物?!敬鸢浮?1)胰蛋白酶或膠原蛋白酶傳代培養(yǎng)(2)終止子和標記基因Xho(3)DNA連接兩【解析】(1)動物細胞培養(yǎng)時,需要先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織,使動物細胞彼此分離成單個細胞。動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象。(2)目的基因的表達載體除了含有目的基因、啟動子外,還要含有終止子和標記基因等。從圖中可以看出,目的基因的兩側(cè)含有限制酶Xho的切割位點,所以要用Xho對質(zhì)粒和目的基因進行切割。(3)目的基因與質(zhì)粒的結(jié)合要用DNA連接酶處理。從圖中可以看出,獲得的三種質(zhì)粒中,只有兩種含有目的基因。4(2018年海南模擬)糖尿病是近年來高發(fā)的“富貴病”,常見類型有遺傳型糖尿病和型糖尿病。遺傳型糖尿病的主要病因之一是胰島受損??蒲袡C構(gòu)作出如下設(shè)計:取糖尿病患者的細胞,將人的正常胰島素基因?qū)肫渲校缓筮M行細胞培養(yǎng),誘導(dǎo)產(chǎn)生胰島組織,重新植入患者的胰島,使胰島恢復(fù)功能。型糖尿病需要注射胰島素治療。目前臨床使用的胰島素制劑注射120 min后才出現(xiàn)高峰,與人體生理狀態(tài)不符。科研人員通過一定的工程技術(shù)手段,將胰島素B鏈的28號和29號氨基酸互換,獲得了速效胰島素,速效胰島素已通過臨床試驗。(1)對遺傳型糖尿病進行基因治療的方案中,胰島素基因稱為_,實驗室中要先對該基因利用_技術(shù)進行擴增。將該基因?qū)胝<毎玫姆椒ㄊ莀。(2)科研人員利用蛋白質(zhì)工程合成速效胰島素,該技術(shù)的實驗流程為:其中,流程A是_,流程B是_。(3)與基因工程相比,蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因_或基因_,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行_,制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)生活需要?!敬鸢浮?1)目的基因PCR顯微注射法(2)預(yù)期蛋白質(zhì)的功能相應(yīng)的氨基酸序列(3)修飾合成改造【解析】(1)根據(jù)題意,在進行基因治療時,胰島素基因是目的基因,在體外條件下可利用PCR技術(shù)對其進行擴增,在基因工程中將目的基因?qū)雱游锛毎某S梅椒ㄊ秋@微注射法。(2)根據(jù)蛋白質(zhì)工程的流程示意圖,可知整個流程是根據(jù)預(yù)期蛋白質(zhì)的功能設(shè)計蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu),然后推測相應(yīng)的氨基酸序列,并找到相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,最后合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(3)與基因工程相比,蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)生活需要。5請分析下圖回答問題:(1)圖甲中所示的生物工程為_。(2)圖甲中序號所示過程叫作_。(3)如圖乙,一個基因表達載體的組成,除了目的基因外,在基因尾端還必須有2_;圖中3_的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。(4)若預(yù)期蛋白質(zhì)欲通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn),則構(gòu)建基因表達載體時,圖乙中序號1代表的是_;且在圖甲中過程之前,要對精子進行篩選,保留含性染色體_的精子。(5)為獲得較多的受精卵進行研究,圖甲中過程一般用激素對供體做_處理;為提高培育成功率,進行過程之前,要對_動物做_處理。若圖甲中的卵母細胞來自從屠宰場收集的卵巢,則其在之前需進行體外培養(yǎng)到_期方能受精。(6)用_技術(shù)處理發(fā)育到_期或囊胚期的早期胚胎,可獲得同卵雙胎或多胎。若是對囊胚進行處理,要注意將_均等分割?!敬鸢浮?1)蛋白質(zhì)工程(2)反轉(zhuǎn)錄(3)終止子標記基因(4)乳腺蛋白基因的啟動子X(5)超數(shù)排卵供、受體同期發(fā)情減數(shù)第二次分裂中(或M中)(6)胚胎分割桑椹胚內(nèi)細胞團【解析】(1)蛋白質(zhì)工程的一般過程為:根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列:預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測應(yīng)有的氨基酸序列找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)。最終還是回到基因工程上來進行蛋白質(zhì)的合成。(2)據(jù)圖分析,圖甲中表示的是從細胞質(zhì)中獲取相關(guān)蛋白質(zhì)的核酸片段,即模板信使RNA,反轉(zhuǎn)錄形成目的基因。(3)基因表達載體的組成:目的基因啟動子終止子標記基因,其中在基因首端是1啟動子,在基因尾端是2終止子,3是標記基因,標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。(4)通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)預(yù)期蛋白質(zhì),構(gòu)建基因表達載體時,1代表的是乳腺蛋白基因的啟動子;將目的基因?qū)胧芫褧r,要篩選出含有X性染色體的精子進行體外受精,形成的轉(zhuǎn)基因動物在哺乳期才能表達出預(yù)期蛋白質(zhì)。(5)為獲得較多的受精卵,圖甲中過程用促性腺激素對供體做超數(shù)排卵處理;胚胎移植之前,要對供、受體動物做同期發(fā)情處理,使得供體與受體具有相同的生理變化,為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境。從屠宰場收集的卵巢中采集卵母細胞,要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟,即培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中(或M中)期,才能與獲能的精子受精。(6)進行胚胎分割時,應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚;對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內(nèi)細胞團均等分割,否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。6下圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗病小麥的過程。請據(jù)圖回答問題。(1)重組質(zhì)粒T除含有目的基因外,還必須有_、_和_等。(2)圖示中將基因表達載體構(gòu)建完成后沒有直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌,而是先將其導(dǎo)入大腸桿菌,目的是_。(3)在步驟中都需用_處理。為了確認目的基因通過導(dǎo)入植物細胞后是否轉(zhuǎn)錄,通常采用_法進行檢測;驗證目的基因?qū)胧荏w細胞后是否成功表達,通常采用_法從分子水平進行檢測。(4)假設(shè)該抗病基因D,通過基因工程導(dǎo)入小麥后連接到小麥的一條染色體上,則該小麥進行減數(shù)分裂的細胞在聯(lián)會時有_個D基因?!敬鸢浮?1)啟動子終止子標記基因(2)獲取大量重組質(zhì)粒(讓目的基因擴增)(3)Ca2分子雜交抗原抗體雜交(4)2【解析】(1)重組質(zhì)粒T除含有目的基因外,還必須有啟動子、終止子和標記基因等。(2)圖示中將基因表達載體構(gòu)建完成后沒有直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌,而是先將其導(dǎo)入大腸桿菌,目的是獲取大量重組質(zhì)粒(讓目的基因擴增)。(3)將目的基因?qū)爰毦毎麜r,需要用Ca2處理,使其成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA的感受態(tài)。因此步驟中都需用Ca2處理。從分子水平檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄,常采用分子雜交法;驗證目的基因是否表達,通常采用抗原抗體雜交法。(4)假設(shè)該抗病基因D,通過基因工程導(dǎo)入小麥后連接到小麥的一條染色體上,在減數(shù)第一次分裂間期小麥細胞中進行了DNA復(fù)制,因此聯(lián)會時細胞中有2個D基因。7PCR技術(shù)是分子生物學(xué)實驗室里的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA的半保留復(fù)制,在試管中進行DNA的人工復(fù)制(如圖所示),在很短的時間內(nèi),將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(1)PCR的全稱是_,94 高溫使DNA雙鏈打開,這一步是打開_鍵,稱為_。而這一過程在細胞內(nèi)是通過_酶實現(xiàn)的。(2)當溫度降低時,引物與模板_端結(jié)合,在_的作用下,引物沿模板延伸,此過程中原料是_,遵循的原則是_。(3)PCR技術(shù)的必要條件除模板、原料、ATP、酶以外,至少還需要三個條件,即液體環(huán)境、適宜的_和_,前者由PCR儀自動調(diào)控,后者則靠_來維持。(4)DNA的復(fù)制需要引物,其主要原因是_。引物的實質(zhì)是_,若將1個DNA分子拷貝10次,則需要在緩沖溶液中至少加入_個引物?!敬鸢浮?1)多聚酶鏈式反應(yīng)氫變性解旋(2)3熱穩(wěn)定DNA聚合酶四種脫氧核苷酸堿基互補配對(3)溫度pH緩沖液(4)DNA的復(fù)制不能從頭開始,DNA聚合酶只能從引物的3端延伸DNA鏈單鏈RNA或者單鏈DNA分子2112【解析】打開DNA雙鏈需破壞堿基對間的氫鍵;引物的游離端為5端,即合成DNA時從新鏈的53端延伸,故引物需與模板的3端結(jié)合;PCR所用液體環(huán)境需保證適宜的溫度和pH,其pH可借助緩沖液維持;DNA復(fù)制不能從頭開始,故必須提供引物。在DNA分子擴增時,需要2種引物,由于新合成的鏈都需要引物作為復(fù)制的起點,故所需的引物數(shù)目等于新合成的DNA鏈的數(shù)目,即221022112(個)。8在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作為標記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長。如圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答問題:(1)基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟:目的基因的獲取、_、將目的基因?qū)胧荏w細胞、_。(2)A過程需要的酶有_和_。(3)要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌,首先必須用_處理土壤農(nóng)桿菌,使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)開態(tài),然后將_在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。(4)含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后,將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過C_和E_。如要確保再生植株中含有抗蟲基因,可在C過程的培養(yǎng)基中加入_。(5)目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是_。這需要通過檢測才能知道,檢測采用的方法是_。【答案】(1)基因表達載體的構(gòu)建目的基因的檢測與鑒定(2)限制酶DNA連接酶(3)Ca2感受重組質(zhì)粒和感受態(tài)細胞(4)脫分化再分化卡那霉素(5)目的基因是否插入受體細胞的DNA分子上DNA分子雜交技術(shù)【解析】(1)基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟:目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。(2)基因表達載體構(gòu)建過程中,需要用同種限制酶切割目的基因和載體,使它們產(chǎn)生相同的黏性末端,再用DNA連接酶把這兩個DNA片段連接起來。(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因時,首先必須用Ca2處理土壤農(nóng)桿菌,使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài),然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。(4)植物組織培養(yǎng)過程的關(guān)鍵步驟是脫分化和再分化。因為只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長,故若要確保再生植株中含有抗蟲基因,可在C過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉素。(5)目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入受體細胞的DNA分子上,檢測采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)。9如圖是獲得轉(zhuǎn)基因動物和植物的流程圖,請據(jù)圖回答問題:(1)圖示獲得大量目的基因的方法是_。(2)圖中過程采用的方法是_。過程通常用_處理,為使過程中的受體生理狀況適宜,可用激素對受體進行_處理。(3)構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中需要用到的工具酶為_和DNA連接酶。(4)如果過程導(dǎo)入到萵苣的體細胞中,則需要通過_技術(shù)才能獲得轉(zhuǎn)基因萵苣,該技術(shù)的原理和首要條件分別是_和_。(5)檢測轉(zhuǎn)基因萵苣中目的基因是否表達,所采用的分子水平檢測方法是_。【答案】(1)PCR(2)顯微注射法促性腺激素同期發(fā)情(3)限制性核酸內(nèi)切酶(4)植物組織培養(yǎng)植物細胞具有全能性離體培養(yǎng)(5)抗原抗體雜交【解析】(1)通過PCR技術(shù)可以獲得大量目的基因。(2)過程常采用顯微注射法把重組DNA導(dǎo)入受精卵中,過程是采用促性腺激素對供體進行超數(shù)排卵處理,為保證受體和供體生理狀況相同,需要對受體進行同期發(fā)情處理。(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒時需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。(4)導(dǎo)入目的基因的受體細胞需處于離體條件通過植物組織培養(yǎng)才可以獲得轉(zhuǎn)基因植物,該過程的原理是植物細胞的全能性。(5)采用抗原抗體雜交法可以檢測目的基因是否表達。10圖示方案為人們獲得生物新品種的過程,請回答下列問題:方案:抗凍蛋白基因煙草細胞抗凍煙草方案:A基因免疫過的B細胞體外培養(yǎng)單克隆抗體方案:人的生長激素基因牛的受精卵早期胚胎受體母牛轉(zhuǎn)基因牛(1)基因工程的核心步驟是_。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中,根據(jù)農(nóng)桿菌的特點,如果將抗凍蛋白基因插入_上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因進入植物細胞,并將其插入植物細胞中_上。(2)推測方案中A基因所起的作用是_,請寫出該方案獲得的細胞中遺傳信息傳遞時所遵循的法則:_。(3)方案中的轉(zhuǎn)基因??梢酝ㄟ^分泌乳汁來生產(chǎn)人的生長激素。這需要將人的生長激素基因與_的啟動子等調(diào)控組件重組在一起。該方案中的早期胚胎在移植入受體母牛子宮之前,必須進行性別鑒定,一般是取處于_時期的_細胞進行檢測?!敬鸢浮?1)基因表達載體的構(gòu)建Ti質(zhì)粒的TDNA染色體DNA(2)調(diào)控細胞無限增殖(3)乳腺蛋白基因囊胚滋養(yǎng)層【解析】(1)基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中,將抗凍蛋白基因插入Ti質(zhì)粒的TDNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因插入植物細胞中染色體DNA上。(2)方案中將A基因?qū)朊庖哌^的B淋巴細胞生產(chǎn)單克隆抗體,說明A基因使得細胞無限增殖,即A基因能夠調(diào)控細胞無限增殖,該基因在受體細胞中能夠復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯。(3)方案中將人的生長激素基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,使得轉(zhuǎn)基因??梢酝ㄟ^分泌乳汁來生產(chǎn)人的生長激素。囊胚中的內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細胞發(fā)育成胎盤和胎膜,將早期胚胎移植入受體母牛子宮之前,一般取處于囊胚時期的滋養(yǎng)層細胞進行性別檢測。- 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