2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐

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1、2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐12018河北武邑高三質檢為解決塑料袋造成的“白色污染”問題，某同學試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解的目的菌，請根據(jù)有關知識回答下列問題：(1)為培養(yǎng)該目的菌，需要配制出供其_所需的營養(yǎng)基質培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。在接種前需要檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，方法是_。(2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，我們可在接種之前進行_培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度。實驗室常用的接種方法有_和_。(3)該同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)分別為24、23、25，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是_個

2、(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)。用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目_?！窘馕觥繜o菌操作技術有消毒和滅菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學藥劑消毒法，滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養(yǎng)基及容器的滅菌。接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(1)培養(yǎng)基可以為目的菌的生長繁殖提供營養(yǎng)物質，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37(或適宜溫度)恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成。(2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，在接種之前用以聚乙烯塑料為

3、唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度；實驗室常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)根據(jù)題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)平板上菌落數(shù)的平均值體積稀釋倍數(shù)(242325)0.21041.2106個；由于細菌會相互重疊，因此用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少?！敬鸢浮?1)生長繁殖高壓蒸汽滅菌法將未接種的培養(yǎng)基在37(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間(或12天)，觀察是否有菌落生成(2)選擇平板劃線法稀釋涂布平板法(3)1.2106少22018安徽滁州高三期末科學家篩選培育良種纖維素分解菌對玉米芯進行降解，并進一步利用酵母菌發(fā)酵制備乙醇?；卮鹣铝袉栴}：(1)篩選纖維

4、素分解菌時，一般在以_為唯一碳源的培養(yǎng)基中添加_染料，通過是否產(chǎn)生_來篩選纖維素分解菌。(2)請用文字敘述圖1中分解玉米芯絲菌用量與還原糖濃度的關系_。(3)圖2表示酵母菌量與酒精產(chǎn)生量的關系，酵母菌接種量超過40mL后，酒精產(chǎn)量反而減少的原因是_。為確定發(fā)酵罐內酵母菌的數(shù)量，常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量，統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小的原因是_?！窘馕觥繐?jù)圖分析，圖1中，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，菌用量為30時還原糖濃度最大；圖2中，隨著酵母菌量的增加，酒精產(chǎn)率先增加后降低，酵母菌量為40時，酒精產(chǎn)率最高。(1)纖維素分解菌具有分解纖維素的能力，因此其培養(yǎng)基中一般添加纖維素

5、作為唯一碳源；剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復合物就無法合成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(2)根據(jù)圖1中的曲線變化分析，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，即在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原糖含量下降。(3)圖2顯示，酵母菌接種量超過40 mL后，酒精產(chǎn)量反而減少，其主要原因是酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動。稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量時，由于兩個或多個細菌形成一個菌落，所

6、以統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小?！敬鸢浮?1)纖維素剛果紅透明圈(2)在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原糖含量下降(3)酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動兩個或多個細菌形成一個菌落32018山東淄博高三一模以下是在推進生態(tài)文明建設過程中，合理利用微生物的實例。農(nóng)作物秸稈可用于還田、造紙、養(yǎng)殖蘑菇、生產(chǎn)乙醇等，既能解決集中焚燒污染環(huán)境問題，又能變廢為寶。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤，可選育降解該除草劑的細菌修復被污染的土壤。請回答：(1)用于生物工程的目的菌大多是從自然環(huán)境中篩選純化出來

7、的。在選育能分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌時，應將土壤浸出液接種在以_為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上。對固體培養(yǎng)基進行滅菌處理常用的方法是_，為檢測滅菌效果可對培養(yǎng)基進行_。(2)稻稈還田以及利用秸稈生產(chǎn)乙醇的過程都需要以纖維素為_的微生物。分離該類微生物時應用含纖維素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，并加入_形成紅色復合物進行篩選，目的菌應從周圍有_的菌落中選取。(3)生產(chǎn)乙醇過程中常用的微生物是_，發(fā)酵過程中檢測該微生物數(shù)量可采用的方法有顯微直接計數(shù)(或血球計數(shù)板)法和_，后者統(tǒng)計得到的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目_?！窘馕觥?1)根據(jù)題意分析，實驗的目的是選育分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌，因此應

8、該將土壤浸出液接種在以除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上；固體培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，以不接種培養(yǎng)(或空白培養(yǎng))為對照，檢測滅菌效果。(2)秸稈還田提高土壤肥力以及利用秸稈生產(chǎn)乙醇的過程的原理主要是土壤中微生物以纖維素等有機物為碳源，合成自己需要的有機物；剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈，進而可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)乙醇是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物；酵母菌的計數(shù)方法有顯微直接計數(shù)(或血球計數(shù)板)法和稀釋涂布平板法，后者觀察

9、到的菌落往往有重疊現(xiàn)象，因此得到的值一般偏小?！敬鸢浮?1)除草劑高壓蒸汽滅菌法不接種培養(yǎng)(或空白培養(yǎng))(2)碳源剛果紅(CR)較大透明圈(3)酵母菌稀釋涂布平板法少42018山東煙臺高三診斷為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離和培養(yǎng)等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，_；然后，將1 mL水樣稀釋1 000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板

10、劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過_滅菌，為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落，在第二次及以后的劃線時，一定要_。示意圖A和B中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。通常，對獲得的純菌種可以依據(jù)_對細菌進行初步的鑒定和分類。(3)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率?！窘馕觥?1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，通過隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用

11、來進行對照。由題意知1 ml水樣中的菌落數(shù)是(393837)30.11 0003.8105個，每升水樣中的活菌數(shù)為3.81051033.8108個。(2)接種環(huán)用灼燒法進行滅菌。在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，將聚集的菌體逐漸稀釋分散，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便獲得由單個細胞繁殖而來的單個菌落。圖A是平板劃線法，圖B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果?？梢砸罁?jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定和分類。(3)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進好氧型微生物的生長；同時還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營

12、養(yǎng)物質的利用率?！敬鸢浮?1)隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間3.8108(2)灼燒從上一次劃線的末端開始劃線B菌落的形狀、大小等菌落特征(3)溶解氧營養(yǎng)物質52018山東濟南章丘區(qū)高三模擬請回答下列問題：(1)制作果醋和葡萄酒使用微生物在結構上有所不同，主要表現(xiàn)在前者_。果酒發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀溶液進行檢驗，酒精與重鉻酸鉀在酸性條件下反應呈_色。(2)腐乳制作過程中，豆腐發(fā)酵主要利用微生物產(chǎn)生的_等，將豆腐中的營養(yǎng)物質分解成易于消化和吸收的小分子物質。(3)測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生_反應后，再與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結

13、合形成_染料。(4)從土壤中分離及篩選高效分解尿素的細菌時，首先要將選取的一定量的土壤溶解在無菌水中進行_后，才能夠接種到培養(yǎng)基表面。(5)生姜精油是傳統(tǒng)的保健良方，調和在洗發(fā)露中，可去頭風、止頭痛。提取生姜精油的流程如下：植物體生姜油水混合物初級精油除水、過濾生姜精油。提取生姜精油時，采用_法獲得油水混合物，然后在其中加入_試劑，分層后可獲得初級精油?！窘馕觥?1)制作果醋和葡萄酒使用的菌種分別是醋酸菌和酵母菌，分別是原核生物和真核生物，兩者的主要區(qū)別是前者沒有核膜包被的成形的細胞核；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應，變成灰綠色。(2)腐乳發(fā)酵主要利用微生物產(chǎn)生的蛋

14、白酶和脂肪酶等，其中蛋白酶能將蛋白質水解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸。(3)制作泡菜時常用比色法測定其中的亞硝酸鹽含量，該方法的原理是在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。(4)從土壤中分離及篩選高效分解尿素的細菌時，為防止土壤浸出液濃度過高，不能獲得單菌落，應先將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋。(5)提取生姜精油時，采用水蒸氣蒸餾法獲得油水混合物，然后在其中加入氯化鈉試劑，增加鹽的濃度，就會出現(xiàn)明顯的分層，分層后可獲得初

15、級精油，再加入無水硫酸鈉吸水，放置過夜，再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到生姜精油?！敬鸢浮?1)無成形的細胞核灰綠(2)蛋白酶和脂肪酶(3)重氮化玫瑰紅色(4)梯度稀釋(5)水蒸氣蒸餾氯化鈉62018山東濟寧高三一模已知微生物A可以產(chǎn)生脂肪酶，微生物B可以產(chǎn)生油脂。這兩種物質可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關問題：(1)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物單一菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以油脂為唯一_的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(2)顯微觀察時，微生物B菌體中的油脂通?？捎胈染色。微生物B產(chǎn)生的油脂易揮發(fā)，可選用_(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(3)若要測定培

16、養(yǎng)液中微生物A的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用_直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用_法進行計數(shù)。(4)加酶洗衣粉是含有酶制劑的洗衣粉，除脂肪酶之外，常用的酶制劑還有_等。(至少寫出兩種)【解析】(1)篩選能產(chǎn)生脂肪酶的微生物A時，應該使用只有目的菌能夠生存的，而其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中應該添加油脂作為唯一碳源。(2)油脂通?？杀惶K丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)；由于微生物B產(chǎn)生的油脂易揮發(fā)，所以可選用水蒸氣蒸餾法從菌體中提取。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物A的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)(該種方法測定的菌體包括活菌和死菌)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用稀釋涂布

17、平板法進行計數(shù)。(4)加酶洗衣粉中除脂肪酶之外，常用的酶制劑還有蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶等?！敬鸢浮?1)碳源(2)蘇丹(或者蘇丹)水蒸氣蒸餾法(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(4)蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶72018河南濮陽高三二模生物技術實踐在實際生產(chǎn)生活中有著多種應用。請回答下列有關問題：(1)泡菜發(fā)酵過程會產(chǎn)生少量的亞硝酸鹽，若泡菜中的亞硝酸鹽總量達到一定值，則會引起中毒，故需要檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量，測定亞硝酸鹽含量的常用方法是_。(2)微生物的接種方法有多種，常用于統(tǒng)計活菌數(shù)目的接種方法是_，使用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏低，原因是_。統(tǒng)計微生物數(shù)目的方法除利用菌落進行

18、活菌計數(shù)外，還有_法。(3)精油在日常生活中有著廣泛的應用，不同精油的制備過程不同，這與其原料的性質等有關。柚皮在水中蒸餾時容易焦糊，宜采用_法提取柚皮精油；玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，常選擇_法進行提取。(4)天然胡蘿卜素具有使癌細胞恢復成正常細胞的功能。根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機溶劑的特點，常采用_法提取胡蘿卜素；提取的胡蘿卜素粗產(chǎn)品可通過_法進行鑒定?！窘馕觥?1)亞硝酸鹽與某些化學物質發(fā)生反應后形成玫瑰色染料。先將泡菜樣品及一系列已知濃度的亞硝酸鹽溶液分別與化學物質發(fā)生顯色反應，然后通過對比，可以估測出泡菜液樣品亞硝酸鹽的含量。(2)微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，

19、其中稀釋涂布平板法常用于統(tǒng)計活菌數(shù)目；使用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；除了活菌計數(shù)法外，顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量常用的方法。(3)柚皮在水中蒸餾時容易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油；玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，常選擇水蒸氣蒸餾法進行提取。(4)根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機溶劑的特點，常采用萃取法提取胡蘿卜素；提取的胡蘿卜素粗產(chǎn)品可通過紙層析法進行鑒定?！敬鸢浮?1)比色法(2)稀釋涂布平板法當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落顯微鏡直接計數(shù)(3)壓榨(水蒸氣)蒸餾(4)(有機溶劑)萃取紙

20、層析82018 河南八市學評高三測評影響醬油衛(wèi)生指標的細菌主要有耐熱的芽孢桿菌和耐鹽菌。某生物興趣小組欲從釀制的醬油中篩選出耐鹽菌。請回答：(1)在篩選過程中，應將醬油接種于含有適量_的固體培養(yǎng)基上：從功能上講，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基；對該培養(yǎng)基滅菌的方法是_。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)了一些菌落?？瞻着囵B(yǎng)基上出現(xiàn)菌落的原因是：_；_。(2)在篩選耐鹽菌的過程中，必須在無菌條件下完成的操作是_(多選)。配制培養(yǎng)基倒平板接種培養(yǎng)(3)若要統(tǒng)計活的耐鹽菌的數(shù)目，把醬油接種到培養(yǎng)基上常采用的方法為_；統(tǒng)計結果一般用菌落來表示，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實

21、際數(shù)目_，原因是_。(4)在純化耐鹽菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_，避免出現(xiàn)此種現(xiàn)象應該采取的措施是_?！窘馕觥?1)欲從釀制的醬油中篩選出耐鹽菌，應將醬油接種于含有適量NaCl(食鹽)的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。常采用高壓蒸汽滅菌的方法對培養(yǎng)基進行滅菌。培養(yǎng)的空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落的原因可能是：對培養(yǎng)基的滅菌不徹底；倒平板時培養(yǎng)基被污染。(2)配制培養(yǎng)基的步驟包括計算、稱量、溶化，培養(yǎng)基配制完成后需依次調節(jié)pH、滅菌，然后在酒精燈火焰旁進行倒平板；為了避免雜菌污染，接種和培養(yǎng)都需要在無菌條件下完成。綜上所述，在篩選耐鹽菌的過程中，必須在無菌條件

22、下完成的操作是。(3)若要統(tǒng)計活的耐鹽菌的數(shù)目，常采用稀釋涂布平板法將醬油接種到培養(yǎng)基上。由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。(4)在純化耐鹽菌的過程中，若醬油中耐鹽菌濃度過高，則會出現(xiàn)菌落在培養(yǎng)基上連成一片的現(xiàn)象。為了避免出現(xiàn)此種現(xiàn)象，應對醬油進行梯度稀釋(或“加大稀釋倍數(shù)”)。【答案】(1)NaCl(食鹽)選擇高壓蒸汽滅菌對培養(yǎng)基的滅菌不徹底倒平板時培養(yǎng)基被污染(2)(3)稀釋涂布平板法低兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落(4)醬油中耐鹽菌濃度過高對醬油進行梯度稀釋(或“加大稀釋倍數(shù)”)重點選做題12018河北唐

23、山高三一模有人認為，鮮榨果汁比盒裝或瓶裝的果汁更新鮮健康。食品監(jiān)督人員發(fā)現(xiàn)鮮榨果汁若不能做到無菌生產(chǎn)，更容易滋生細菌。研究過程如下：(1)純化培養(yǎng)細菌的方法：平板劃線法可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離，但不能_；使用稀釋涂布平板法，在稀釋度足夠高時，一個菌落代表_。(2)對細菌計數(shù)時往往會產(chǎn)生實驗誤差，稀釋涂布平板法計數(shù)的值比實際值_，原因是_；顯微計數(shù)法計數(shù)的結果比實際值_，原因是_。(3)接種結束后，將一個未接種的培養(yǎng)基和一個接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)的目的是_。未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長很關鍵，如果有菌落生長，說明_。【解析】(1)平板劃線法可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離，但不

24、能計數(shù)；使用稀釋涂布平板法，在稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物將分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，即一個菌落代表單個細胞。(2)用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目偏小；若用顯微計數(shù)法計數(shù)時，由于顯微鏡下無法區(qū)分細胞的死活，計數(shù)時包括了死細胞，所以計數(shù)的結果會比實際值偏大。(3)接種結束后，將一個未接種的培養(yǎng)基和一個接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)的目的是作對照，未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長很關鍵。如果有菌落生長，則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底(或培養(yǎng)基被污染了或需要重新制備)?！敬鸢浮?1)計數(shù)單個

25、細胞(2)偏小當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落偏大顯微鏡下無法區(qū)分細胞的死活，計數(shù)時包括了死細胞(3)對照培養(yǎng)基滅菌不徹底(或培養(yǎng)基被污染了或需要重新制備)22018廣東汕頭高三模擬塑料的生物降解，是一個世界性的難題。北京航天航空大學趙軍教授帶領的團隊所進行的研究，引人矚目。他們從一種吃塑料(聚乙烯)的蠟蟲腸道內容物中分離出8個菌株，并對其中的2個菌株進行了深入研究。蠟蟲腸道內容物接種、培養(yǎng)、分離菌種鑒定菌種保藏(1)塑料的生物降解，主要是利用某些生物分泌特定的_的作用。(2)上述步驟中“培養(yǎng)”是為了_，其培養(yǎng)基應以聚乙烯為_、并加入水和_等制作而成。培養(yǎng)一定時間后，根據(jù)

26、_對菌種進行初步分離。(3)研究人員將其中兩個菌株YT1、YP1分別接種到含有聚乙烯膜的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)，部分結果如下圖一、二所示。圖一顯示，兩個菌株在實驗條件下，增殖能力更強的是_。圖中缺少對照組的數(shù)據(jù)，根據(jù)實驗設計的意圖，對照組的細胞密度應該為_。圖二是對兩個菌株進行聚乙烯減重分析的實驗結果，可以得出的主要結論是_?！窘馕觥?1)某些生物分泌特定的酶，能夠降解塑料。(2)接種、培養(yǎng)、分離中的培養(yǎng)，是為了增加目的菌株數(shù)量。本操作是為了篩選能分解聚乙烯的菌種，其培養(yǎng)基應以聚乙烯為唯一碳源、并加入水和無機鹽等制作而成。培養(yǎng)一定時間后，根據(jù)菌落特征(或菌落的形態(tài)、菌落的顏色)對菌種進行初步分離。(

27、3)由于在同一時間范圍內，YT1組的細胞密度較YP1更大，說明增殖能力更強的是YT1。對照組為未加入菌株的含有聚乙烯膜的培養(yǎng)基，其細胞密度應該為0。與對照組相比，YT1和YP1的聚乙烯減重較大，且YP1的聚乙烯減重較YT1大，說明YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解能力更強?！敬鸢浮?1)酶(2)增加目的菌株數(shù)量唯一碳源無機鹽(和氮源)菌落特征(或菌落的形態(tài)、菌落的顏色)(3)YT10YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解能力更強32018安徽蕪湖高三一模某研究小組對酸奶中乳酸菌數(shù)量進行了測定，取6支滅菌試管，分別加入9 mL滅菌水，標號為A1、A2、A3、A4、A5、A6，

28、吸取1 mL酸奶樣液加入試管A1中，混合均勻；然后從A1中吸取1 mL溶液，加入A2中，混合均勻；重復上述操作，最后從試管A6中取0.1 mL樣液進行涂布計數(shù)。涂布三個平板，其菌落數(shù)分別為251、265、276個。請回答下列問題：(1)該小組在取樣涂布前，隨機取若干滅菌后未接種平板先行培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是_。(2)在制備乳酸菌培養(yǎng)基過程中，倒平板時培養(yǎng)基溫度不能太低，原因是_；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是_。(3)根據(jù)三個平板中菌落數(shù)，可推測原酸奶中乳酸菌濃度為_個/mL，該方法測定的乳酸菌含量和實際值相比偏小的原因是_。(4)該小組在探究橘皮精油對乳酸菌抑制作用時，提取橘皮精

29、油采用_法而不用蒸餾法，原因是_。抑菌實驗時，在長滿乳酸菌平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈，可通過_來判斷抑菌效果?！窘馕觥?1)對滅菌后而未接種平板先培養(yǎng)一段時間的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(2)制備培養(yǎng)基過程中， 倒平板時溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻，因此倒平板時培養(yǎng)基的溫度不能太低；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染。(3)結合題意，根據(jù)操作步驟可推知得到了101、102、103、104、105、106倍的稀釋液。從試管A6中取0.1 mL樣液進行涂布計數(shù)，三個平板中菌落數(shù)分別為251、265、276個，可

30、推測原酸奶中乳酸菌的濃度為(251265276)3101062.64109個/mL。稀釋涂布平板法測定活菌數(shù)目時，因為相鄰的細菌可能形成一個菌落，因此測定值可能比實際值小。(4) 提取橘皮精油采用壓榨法而不用蒸餾法，原因是水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解。抑菌實驗時，在長滿乳酸菌平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈，可通過測定透明圈大小來判斷抑菌效果?！敬鸢浮?1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格(2)溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染(3)2.64109兩個或多個乳酸菌連在一起時，平板上只能觀察到1個菌落(4)壓榨

31、水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解測定透明圈大小(直徑)42018山東省聊城市高三一模以下是柿子醋制作的流程：柿果挑選清洗去皮去核脫澀處理切塊壓榨柿汁滅菌酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵滅菌陳釀淋醋過濾成品。請回答下列問題：(1)脫澀過程可以用成熟的蘋果、梨等水果釋放的_氣體促進柿子成熟。(2)將壓榨后的柿汁加熱到80保持1020分鐘的目的是_。酒精發(fā)酵時可添加活性干酵母進行，發(fā)酵的原理是_(寫反應式)。(3)若醋酸發(fā)酵時需擴大培養(yǎng)醋酸菌種，實驗室常用的接種方法是_和_；接種前應對培養(yǎng)皿、接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌，方法分別是_；接種后培養(yǎng)時需要設置空白培養(yǎng)基，目的是_?！窘馕觥?1)成熟的蘋果、梨等水果釋放的

32、乙烯可促進果實的成熟。(2)將壓榨后的柿汁加熱到80保持1020分鐘的目的是滅菌，防止雜菌污染。果酒發(fā)酵是利用酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理，其反應式是C6H12O62C2H5OH(酒精)2CO2少量能量。(3)純化培養(yǎng)微生物時常用的接種方法是：平板劃線法和稀釋涂布平板法；接種前對培養(yǎng)皿、接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌時所采用的方法分別是干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌；接種后培養(yǎng)時需要設置空白培養(yǎng)基，其目的是：檢測培養(yǎng)基是否合格(檢測培養(yǎng)基是否被污染)?！敬鸢浮?1)乙烯(2)防止雜菌污染C6H12O62C2H5OH2CO2能量(3)平板劃線法稀釋涂布平板法干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌檢測培養(yǎng)基是否合格(檢測培養(yǎng)基是否被污染)