薄層色譜中展開劑的選擇【教資類別】

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1、薄層色譜中展開劑的選擇2007-04-05 02:03（一）有機(jī)合成中展開劑的選擇 做有機(jī)合成時(shí)走板子是常有的事，展開劑的選擇就至關(guān)重要了。選擇適當(dāng)?shù)恼归_劑是首要任務(wù).一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷己烷苯乙醚THF乙酸乙酯丙酮乙醇氯仿，因此在氯仿：甲醇：氨水 （10:1:0.6）這個(gè)展開劑中，如果極性略大，可適當(dāng)降低甲醇比例；如極性太小，可適當(dāng)增大甲醇比例。氯仿：甲醇：氨水 10:1:0.6 和20：2：1.2 極性肯定是相同的，這有問題嗎？另外還有一個(gè)問題，這個(gè)展開劑中，甲醇用量較小，而甲醇又易揮發(fā)，容易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，要特別注意展開劑的平衡和層析缸的密封。不同的展開系統(tǒng)

2、意思是其中至少應(yīng)該有一種溶劑不同（最好是不同分類組的溶劑），而不是比例不同?；蛘呤褂貌煌墓潭ㄏ?。關(guān)于展開：TLC中樣品拖尾現(xiàn)象是什么原因?該如何解決?2.TLC中樣品跑成幾乎為一條線,斑點(diǎn)沒有清晰的分離,想請教一下這是什么原因造成的?一般情況下該如何解決?造成問題1的原因基本相同：a、對于一些具有酸堿性的化學(xué)成分，在溶液中部分電離，事實(shí)上展開時(shí)存在分子、離子兩種狀態(tài)，以中性的有機(jī)試劑展開必然會出現(xiàn)兩種層析行為，造成脫尾甚至是一條線。b、展開劑選擇不當(dāng)c、點(diǎn)樣量過大，樣品超載解決辦法：a、在展開劑中加幾滴甲酸或冰醋酸；b、展開時(shí)以氨水飽和c、減少點(diǎn)樣量d、參考文獻(xiàn)，調(diào)整展開劑種類、比例我想問問

3、，關(guān)于TLC二次展開，是在第一次展開顯色后再在繼續(xù)第二次展開，還是在第一次展開后，換另一種展開劑接著展開啊？請哪位大俠指點(diǎn)一下關(guān)于TLC的二次展開。二次展開是依據(jù)樣品定的，但肯定要在第一次展開后，將板晾干或吹干，再放入另一種展開劑中展開，有的樣品二次展開還要換展開方向，和原方向垂直。所以要以實(shí)際分離樣品需要而定。一般是因?yàn)闃悠烦煞侄?，極性差別有的大，有的關(guān)于顯色：在工作中研究過用硫酸乙醇顯色作定量分析的品種，但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，后改用不加CMC輔的水板來作，就不會有烘糊現(xiàn)象，故也可推論CMC易于與硫酸起糊化反應(yīng)。感覺輔水板關(guān)鍵是硅膠G與水的比例要達(dá)1：3.5左

4、右，而且研磨后要盡快涂布，不能易于凝固而難于涂布，我是百思不得其解，難道CMC還有類似穩(wěn)定劑的作用2. “0.5%的板加熱時(shí)間長了就會黑”，是在層析完，顯色后吧，我也遇到過同樣的情況，這只有嚴(yán)格控制加熱顯色的時(shí)間。這個(gè)問題應(yīng)該是這樣回答：但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，若改用不加CMC輔的水板來作，就不會有烘糊現(xiàn)象，但不加CMC輔的板又太軟，點(diǎn)樣時(shí)容易點(diǎn)出洞，有個(gè)好辦法是將CMC的濃度調(diào)至0.1%，這樣就不易烘黑的。不信你試試，我們這邊藥檢所都這樣做的3. 關(guān)于薄層板加熱變黑的問題，其實(shí)很容易解決：當(dāng)噴完顯色劑后不用在放烘箱里烘了，可以用電吹風(fēng)在板子背面吹吹就能顯色了我們

5、實(shí)驗(yàn)室里一般都采用此法，簡便、快潔如果一非想使用烘箱烘的話，一定要用帶玻璃窗的，當(dāng)看到顯色了就取出，不然不好控制顯色時(shí)間，時(shí)間過長，容易碳化變黑4各位樓主真是經(jīng)驗(yàn)豐富，我鋪的0.5%的板加熱時(shí)間長了就會黑，有什么好著嗎？根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，薄層版變黑與CMCNa的濃度過大有關(guān)，如果你留意的話，你會發(fā)現(xiàn)，當(dāng)顯色劑中有濃硫酸時(shí)，加熱時(shí)間稍長就會變黑（其他顯色劑是沒事的），我老師說這是因?yàn)闈饬蛩岚袰MCNa炭化了，其實(shí)color=blue=這種情況你只要適當(dāng)降低CMC-Na的濃度/color就可以了，當(dāng)然如果不加CMC-Na的話容易把板弄破。一般我都是顯色后用電吹風(fēng)吹的，要均勻吹，電吹風(fēng)離板的距離要遠(yuǎn)些，

6、防止部分會黑。另還要注意顯色劑，如果顯色劑中含有硫酸，加熱時(shí)間一定要掌握好，不可太長。5CP2000中277頁蘇氨酸的TLC的其它氨基酸檢查似乎有問題: .以正丁醇丁酮濃氨溶液水為展開劑, 展開后,晾干,噴以茚三酮的丙酮溶液(1-50),.茚三酮與濃氨溶液起顯色反應(yīng), 弄得整塊板都有色,茚三酮氧化蘇氨酸后再與釋放出的氨氣起反應(yīng)生成的點(diǎn)在整塊板中尚能看到,其它氨基酸就別想看了.氨基酸類的薄層鑒別過程中，顯色前先將展完的板子在烘箱內(nèi)烘一段時(shí)間，從而確保展開劑揮干凈，效果不錯(cuò)關(guān)于裂板：板子會裂口，一則可能是因?yàn)楣枘z的比例太大，二則可能是，板子要在常溫下晾干后，再在烘箱中活化。如果鋪完不久就在較高溫度

7、下，裂口的幾率就比較高的?！傲栏傻陌遄臃旁诤嫦淅镌趺慈蚜?，有什么方法可以避免板子炸裂?！?你的板沒有完全干透，表面看是干了，但是最中間的沒有干，所以你直接放入105度的烘箱烘，當(dāng)然會炸裂了，所以應(yīng)該先用低溫大約40度左右烘30分鐘左右，再用105度活化，就可以解決這個(gè)問題了。關(guān)于活化出現(xiàn)裂板、爆板的問題。我從沒有遇上過?；罨沂沁@樣處理不要等到溫度達(dá)到100度，而是設(shè)好溫度后就將板子放在干燥箱，然后再通電加熱，達(dá)到最高溫度后停留5分鐘左右即可。這樣水分是慢慢由內(nèi)而外散發(fā)，而不是由外向內(nèi)散發(fā)，避免了表面成膜，里面還在散發(fā)水氣，豈有不裂、不爆的道理！。關(guān)于點(diǎn)樣：1. 點(diǎn)樣我本人沒有什么技巧，導(dǎo)

8、師教了我一招挺好用，寫出來大家分享，就是在點(diǎn)樣時(shí)食指放在點(diǎn)樣管的上端，當(dāng)點(diǎn)樣管的下端與硅膠板接觸的瞬間輕輕松動上端的食指，溶液自然從點(diǎn)樣管出來，迅速提起點(diǎn)樣管，就這樣反復(fù)操作點(diǎn)出的斑點(diǎn)既小又均勻。但要提出樣品溶液不能太濃，濃度太大，點(diǎn)下的樣品不能被硅膠很好的吸收，不利于分離。2. 關(guān)于點(diǎn)樣，我上學(xué)的時(shí)候，老師用比較便宜的進(jìn)樣器（大約10幾塊錢吧，10l即可），將針尖打磨圓滑，老師好像是用銼一點(diǎn)一點(diǎn)銼的，這樣點(diǎn)樣的時(shí)候樣品溶液不容易沿針尖上行（甲醇溶液都這樣），并且針尖不會刺破已經(jīng)鋪好的薄層板。現(xiàn)在，我和師兄都是實(shí)行的這個(gè)辦法，還是比較實(shí)用的，點(diǎn)樣量可以精確到0.5l。當(dāng)然，點(diǎn)樣的時(shí)候手不能抖動

9、，動作要輕，這些要領(lǐng)在于意會，逐漸鍛煉，相信你會體會到其中的快感。3. 要磨平微量進(jìn)樣器的針尖，簡單的方法就是，在展缸的蓋子上輕磨（當(dāng)然是靠近中間部分），就很快能解決問題 ，且很平滑。薄層色譜小知識1、 怎樣提高點(diǎn)樣效率? 點(diǎn)樣是造成TLC定量誤差的主要來源。實(shí)驗(yàn)證明：定量毛細(xì)管更適合較小體積的點(diǎn)樣；微量注射器更適合較大體積的點(diǎn)樣。這主要是因?yàn)槲⒘孔⑸淦魇苄馀荨⑷芤夯嘏垃F(xiàn)象的影響較大。為避免不同定量毛細(xì)管間的點(diǎn)樣誤差、建議一塊薄層板上最好用同一只定量毛細(xì)管。但應(yīng)注意更換樣品時(shí)，應(yīng)將毛細(xì)管用超聲波或不同極性溶劑清洗干凈。在制備樣品時(shí)，溶樣溶劑黏度不能過高，以便于點(diǎn)樣；溶劑沸點(diǎn)過低則進(jìn)樣體積易變

10、，過高則會改變展開劑組成；對樣品溶解度過高會使樣點(diǎn)發(fā)生空心現(xiàn)象；常用的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮。經(jīng)典TLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑3mm點(diǎn)間距1-2cm 底邊距1.5cm；HPLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑1mm點(diǎn)間距5mm 底邊距1cm。 2、展開劑的選擇 TLC與HPLC相比，一個(gè)突出的優(yōu)點(diǎn)就是流動相的選擇具有更大的靈活性。流動相的選擇的目的是使絕大部分樣品的RF值位于0.1-0.7之間并達(dá)到較好的分離，與此對應(yīng)的是流動相要有適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度和組成。流動相強(qiáng)度越大，溶質(zhì)RF值越大，但很可能降低分離能力；另外單一溶劑很難分離較復(fù)雜的混合物，根據(jù)相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。一般展開劑體系選擇如下：根據(jù)分離樣品

11、性質(zhì)、薄層色譜板性質(zhì)選擇一個(gè)二元溶劑體系，通過調(diào)節(jié)溶劑比例以尋求適合RF值，適合的RF值找到后，再尋求極性參數(shù)相同的二元溶劑體系兩個(gè)，以這三個(gè)組成為三點(diǎn)組成一個(gè)三角形，則可看到：三角形頂點(diǎn)是二元體系，邊是三元體系，三角形內(nèi)是四元體系，并且極性一致，可根據(jù)幾何原理得出任一點(diǎn)組成。這種方法較為直觀，也較簡單。 3、TLC的通用顯色方法 理想的顯色希望靈敏度高、斑點(diǎn)顏色穩(wěn)定、斑點(diǎn)與背景間的對比度好、斑點(diǎn)的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比。在樣品組成并不完全已知的情況下，通用顯色方法顯得成尤為重要。通用顯色法主要有： （1）、紫外照射法：方便，不破壞樣品； （2）、碘蒸氣法：通用性強(qiáng)，與紫外法結(jié)合靈敏

12、度高于該兩法單獨(dú)使用； （3）、熒光試劑：制造熒光背景，使原來紫外下無熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì)更明顯； （4）、硫酸溶液：對絕大多數(shù)有機(jī)物有效，但有破壞性。 展開劑 PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年來我用這四種體系,沒有出現(xiàn)過什么問題.我一直在用的是乙酸乙酯：環(huán)已烷，不斷調(diào)節(jié)比例，直到有滿意的Rf值，有拖尾時(shí)可能要加酸或堿，我一般乙酸和三乙胺。我用了好幾年了，都還好。不妨一試！極性小的用+/系統(tǒng)極性較大的用甲醇：氯仿系統(tǒng)極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統(tǒng)拖尾可以加入少量氨水或冰醋

13、酸甲醇：氯仿對于胺類比較好 氯仿：甲醇9：1是比較常用的方法我常用的展開劑有：氯仿/甲醇；環(huán)已烷/丙酮；醋酸乙酯/石油醚；甲醇/吡啶/水酸用BTOH：HAc：H2O=2：1：1 很好用的。二氯甲烷：甲醇，調(diào)節(jié)不同的配比基本解決大多數(shù)問題根據(jù)化合物的極性選擇合適的展開劑，極性大的可滴加少量水，酸堿化合物會拖尾，酸性化合物可在展開劑中加少量乙酸，堿性的加少量三乙胺，會減少拖尾。前面的一些帖子中提到在分離堿性化合物時(shí)可以在展開劑中加入少量三乙胺，這樣確實(shí)會達(dá)到分離效果，但在柱層析時(shí)需要注意，當(dāng)你的洗脫劑含有二氯甲烷或氯仿時(shí)經(jīng)常會分到三乙胺的鹽酸鹽，因?yàn)橐话愕亩燃淄榛蚵确轮卸己猩倭康柠}酸，三乙胺的鹽酸鹽為無色針狀結(jié)晶，很漂亮，經(jīng)常會誤以為是分到的單體。切忌！9教學(xué)d